Hidrobiolgica2013,23(1):87-96

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Coliformes como indicadores de patgenos

La sensibilidad del grupo coliforme como indicador de la presencia de enterobacterias

patgenas en cuatro cuerpos acuticos de Mxico
The coliform group sensitivity as indicator of the enteropathogenic bacteria presence in four
water bodies from Mexico
Guadalupe Barrera-Escorcia,1 Carlos Leopoldo Fernndez-Rendn,1 Irma Wong-Chang2 y Patricia Ramrez Romero1
1 Laboratorio

de Ecotoxicologa, Departamento de Hidrobiologa, Div. CBS, Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa, Mxico,

D. F. A.P. 55-535. Mxico
2 Laboratorio de Contaminacin Marina, Instituto de Ciencias del Mar y Limnologa, Universidad Nacional Autnoma de Mxico,
Mxico, D.F., A.P. 70-305. Mxico
e-mail: gube@xanum.uam.mx

Barrera-Escorcia G., C. L. Fernndez-Rendn, I. Wong-Chang y P. Ramrez Romero. 2013. La sensibilidad del grupo coliforme como indicador de la presencia de
enterobacterias patgenas en cuatro cuerpos acuticos de Mxico. Hidrobiolgica 23 (1): 87-96.

RESUMEN
La contaminacin microbiolgica en los cuerpos acuticos se caracteriza a travs de la deteccin de organismos
indicadores como las bacterias coliformes totales (CT) y fecales (CF). El objetivo de este trabajo fue determinar la sensibilidad de estos indicadores para predecir la presencia de enterobacterias patgenas en cuatro cuerpos acuticos
mexicanos. Dos con mayor influencia humana: lago de Ptzcuaro, Mich. y ecosistema lacustre de Xochimilco, D. F y
dos con menor: la laguna de Metztitln, Hgo. y el lago Zirahun, Mich. Se cuantificaron coliformes totales y coliformes
fecales en agua y sedimento por la tcnica del Nmero Ms Probable y se aislaron bacterias entricas del agua mediante el uso de medios de cultivo selectivos. Se evaluaron: el ndice de sensibilidad, el riesgo atribuible y la presenciaausencia de indicadores y patgenos. Ptzcuaro y Xochimilco mostraron alta contaminacin bacteriana. El sedimento
present mayor concentracin de CT y CF que el agua. Los CF mostraron ser indicadores ms confiables para predecir
la presencia de Salmonella y Shigella, con una sensibilidad para cada gnero de 60 y 75% y un riesgo atribuible del 58 y
67%. Los CF mostraron una relacin presencia-ausencia con un porcentaje de casos verdaderos del 82 a 88%. En contraste, los CT mostraron un riesgo atribuible bajo (inferior a 27%) y un alto porcentaje de falsos positivos (65%), lo que
impidi considerarlo como un buen indicador. Es conveniente evaluar la presencia de indicadores y patgenos simultneamente para determinar el riesgo sanitario al caracterizar la calidad microbiolgica en ecosistemas acuticos.
Palabras clave: Calidad sanitaria, coliformes fecales, embalses mexicanos, patgenos.

ABSTRACT
Microbiological pollution in water bodies is characterized through the detection of indicator organisms like total coliform (TC) and fecal coliform (FC) bacteria. The objective of the present paper was to determine the sensibility of these
indicators of the presence of pathogenic enterobacteria in four Mexican aquatic systems. Two with major anthropogenic influence: Patzcuaro Lake and Xochimilco Lake ecosystem; and two with less: Metztitlan Lagoon and Zirahuen
Lake. TC and FC were quantified with the Most Probable Number technique in water and sediment and enteric bacteria
were isolated in water using selective culture media.The sensibility index, the risk attributable, and the presenceabsence of indicators and pathogens were evaluated. Patzcuaro and Xochimilco showed high bacterial pollution. The
sediment presented higher concentrations of total and fecal coliforms than water. FC were the most reliable indicators
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Barrera-Escorcia G. et al.

to predict the presence of Salmonella and Shigella, with a sensitivity of 60 and 75%, an attributable risk of 58 and 67%
for each genus. FC showed a presence-absence relationship with a percentage of true cases of 82 to 88%. In contrast,
TC showed a low attributable risk, inferior to 27% and a high percentage of false positives (65%), which impede to
consider it a good indicator. It is convenient to evaluate the presence of indicators and pathogens simultaneously to
determine the sanitary risk when characterizing microbial water quality in aquatic ecosystems.
Key words: Fecal coliform, mexican water bodies, pathogens, sanitary quality.

INTRODUCCIN
Existen diversos embalses que reciben agua residual sin tratamiento, que introduce microorganismos (virus, bacterias y protozoarios) en ellos. Esto deteriora su calidad, los inhabilita para
diferentes usos y representa riesgos a la salud humana (Barrel
et al., 2000). Conocer la calidad sanitaria del agua es bsico para
establecer su uso, sta se puede determinar a travs de indicadores, los cuales son diferentes en cada pas, por ejemplo, en la
Unin Europea se utilizan las concentraciones de Escherichia
coli (Migula, 1895) y enterococos intestinales segn la Directiva
2006/7/CE (DOUE, 2006). En Mxico, se establece con base en las
concentraciones de bacterias coliformes fecales en muestras de
agua (SEMARNAP, 1998; CONAGUA, 2009), sin embargo, la deteccin de patgenos tambin es importante. Si bien, las bacterias pueden identificarse por tcnicas rpidas y precisas como
la Reaccin en Cadena de la Polimerasa, las normas mexicanas
consideran hasta el momento los mtodos convencionales de
cultivo. Tanto los microorganismos indicadores como los patgenos pueden sobrevivir en el sedimento, desde el cual pueden ser
suspendidos a la columna de agua (Davies et al., 1995; Haller et
al., 2009), sin embargo, su presencia en sedimento no se considera en la legislacin.
Las caractersticas ideales de un buen indicador sanitario
incluyen: a) estar limitados al hbitat intestinal; b) ser detectados
en la muestra cuando los patgenos fecales estn presentes; c)
mostrar mayor resistencia que los patgenos frente a desinfectantes y condiciones adversas en el ambiente; d) ser incapaces
de multiplicarse en el ambiente; e) de deteccin fcil, rpida y
con mtodos econmicos; y f) la densidad del indicador debe correlacionarse con el grado de contaminacin fecal o con el riesgo
a la salud (Leclerc et al., 2001; Barrera-Escorcia & Wong-Chang,
2005; Savichtcheva & Okabe, 2006).
Las bacterias coliformes son indicadoras de contaminacin
fecal y por lo tanto, de la posible presencia de otros patgenos
como virus, bacterias, protozoos y fases enquistadas de metazoarios (Harwood et al., 2005; Savichtcheva & Okabe, 2006). Se
asume que los indicadores y las bacterias patgenas pueden
encontrarse juntos o estar relacionados, aunque no siempre se
observa relacin con la presencia de patgenos (Goyal et al.,
1977; Moriigo et al., 1990; Efstratiou et al., 1998; Polo et al., 1998;
Lemarchand & Lebaron, 2003; Gabutti et al., 2004). De acuerdo con
Ashbolt et al. (2001), es recomendable seleccionar el indicador

ms adecuado a las condiciones locales, pero en Mxico no se

ha evaluado recientemente la eficacia de estos indicadores. De
manera que se plante como objetivo conocer la eficiencia de las
bacterias coliformes para indicar la presencia de enterobacterias
patgenas como Salmonella y Shigella, para esto se analizaron
los resultados obtenidos en cuatro cuerpos acuticos mexicanos.

MATERIALES Y MTODOS
rea de estudio. Se analizaron dos ambientes con mayor influencia de actividades humanas (Ptzcuaro y Xochimilco) y dos con
menor (Metztitln y Zirahun).
I. Lago de Ptzcuaro. Este tiene una extensin de 90 km2 y una
profundidad media de 4.0 m, se localiza en los 1937 de Latitud N y
los 10137 de Longitud W, en el estado de Michoacn. El agua llega al lago mediante corrientes subterrneas y superficiales. Recibe sedimentos, nutrientes y contaminantes por la deforestacin y
el proceso erosivo del suelo, residuos producto de la elaboracin
de artesanas, adems de aguas negras, fertilizantes y biocidas,
que al no tener salida se acumulan, por lo que actualmente se
cataloga como eutrfico (Rosas et al., 1993). Los asentamientos
humanos en Ptzcuaro se establecieron desde hace ms de dos
mil aos. Actualmente las poblaciones de Ptzcuaro, Quiroga y
Erongarcuaro se asientan en la ribera de este lago (Fisher et al.,
2003; Orbe-Mendoza & Acevedo, 2002).
II. Lago de Zirahun. Se localiza en el estado de Michoacn (19
25 N y 101 45 W), posee una superficie de 10.48 km2 y alcanza
una profundidad mxima de 43 m, tiene menor impacto de actividades humanas y est clasificado como oligotrfico (Chacn &
Rosas-Monge, 1998). Recibe aportes de arroyos y manantiales. En
poca de lluvias ingresan sedimentos desde bosques y de zonas
agrcolas, que han incrementado la turbidez del agua y ocasionan la prdida de la cuenca lacustre. Se ha observado que existe
efecto potencial de contaminantes en especies nativas por lo
que algunas de ellas estn amenazadas y en peligro de extincin
(Bernal, 1995; Madrigal et al., 2004).
III. Ecosistema lacustre de Xochimilco. Se localiza en la zona
sur de la Ciudad de Mxico (19 16N y 99 05W), y est constituido por un sistema de canales con agua, que son remanentes
del lago original. Es un lugar turstico importante y su agua es
usada para riego de plantas ornamentales y hortalizas. El agua
Hidrobiolgica

Coliformes como indicadores de patgenos

presenta grandes cantidades de bacterias coliformes debido a

la existencia de descargas de asentamientos irregulares, fugas
del sistema de drenaje, as como fuentes dispersas por fecalismo
a cielo abierto. Recibe agua residual parcialmente tratada que
se utiliza para recuperar el volumen y llevar a cabo el riego de
hortalizas (Jurez-Figueroa et al., 2003; Soto-Castor & EsquivelHerrera, 2003).
IV. Laguna de Metztitln. Este cuerpo acutico (20 41 N y 98
52 W) se encuentra en el estado de Hidalgo, es una cuenca endorreica, cuyo espejo de agua es muy cambiante ao con ao,
su profundidad promedio es de 3 m, aunque ocasionalmente ha
llegado a secarse por completo. Es un cuerpo acutico polimctico eutrfico, con poca visibilidad, apenas 25 cm, en l se practica la pesca local de especies introducidas. El rea que rodea la
laguna es hbitat de especies vegetales importantes, por lo que
se ha catalogado como Reserva de la Biosfera. Recibe aportes
de agua provenientes de zonas agrcolas y poblados ubicados
en sus mrgenes, por lo que se ha incrementado la presencia de
contaminantes del tipo de los plaguicidas, materia orgnica y microorganismos (Fernndez et al., 2007).
Trabajo de campo. Los muestreos de agua y sedimento se realizaron durante las pocas de estiaje y lluvia. En Ptzcuaro se tomaron muestras en tres localidades en febrero y cuatro en junio de
2005. En Zirahun se colect en un sitio en junio del mismo ao.
En Metztitln se muestrearon cinco localidades en diciembre de
2007 y seis en mayo de 2008. En Xochimilco se tomaron diez muestras por triplicado en un punto durante los meses de abril-mayo
y agosto-septiembre de 2008 (Fig. 1). En total se procesaron 49
muestras de agua y 49 de sedimento.

89
El agua se colect 10 cm por debajo de la superficie con
frascos estriles de 100 mL de capacidad para cuantificar el
Nmero Ms Probable (NMP) de bacterias coliformes totales y
fecales. Tambin se tom un litro de agua en botellas estriles
para el aislamiento de bacterias entricas. Para la determinacin
del NMP en el sedimento, ste se colect con una draga tipo van
Veen y de la capa superficial se extrajo la muestra con una jeringa despuntada estril de 20 mL (Wright et al., 1996). Todas las
muestras fueron colocadas en hielo y transportadas a 4 C para
su procesamiento en el laboratorio antes de transcurrir 24 h.
Determinacin de bacterias coliformes. El recuento de coliformes
en agua y sedimento se determin por la tcnica de tubos mltiples para obtener el Nmero Ms Probable (NMP) de acuerdo a
la PROY-NMX-AA-042/1-SCFI-2008 (DOF, 2008). Las muestras de
agua se sembraron directamente y se realizaron diluciones para
sembrar hasta 10-7, las muestras de sedimento se diluyeron hasta
10-8. Para el enriquecimiento se utiliz caldo lactosado (incubado
a 37 0.5 C durante 24 y 48 h), los tubos positivos se resembraron
en caldo bilis verde brillante al 2% (incubado a 37 0.5 C por 24
y 48 h) para la confirmacin de coliformes totales (CT), y en caldo
Escherichia coli (EC) (incubado a 44.5 0.5 C durante 24 y 48 h)
para la confirmacin de coliformes fecales (CF). Se estableci la
calidad sanitaria de las muestras de agua de acuerdo a la legislacin mexicana vigente (SEMARNAP, 1998; CONAGUA, 2009).
Identificacin de bacterias entricas. Se filtr un litro de agua
con una membrana de poro de 0.45 m, sta se incub en agua
peptonada a 35 C durante 24 h, y despus se resembr en caldo tetrationato y caldo selenito cistina (ambos incubados a 35 C
durante 18 a 20 h). De cada uno se sembr por estra en medios

Figura 1. Ubicacin de las localidades y sitios de muestreo. a) Lago de Ptzcuaro: 1) Frente a Quiroga, 2) Isla de Janitzio, 3) Muelle de Ptzcuaro, 4) Dren Guan; b) Lago Zirahun: 5) Muelle; c) Ecosistema lacustre de Xochimilco: 6) Embarcadero Nativitas; d)
Laguna de Metztitln: 7) Sur, 8) Oeste, 9) Noroeste, 10) Noreste, 11) Centro y 12) Rio Venados.
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Barrera-Escorcia G. et al.

de cultivos slidos: Salmonella-Shigella, eosina-azul de metileno, verde brillante, sulfito de bismuto, xilosa-lisina-desoxicolato,
MacConkey y Hektoen; todos se incubaron a 35 C durante 24 h.
Para la identificacin de las colonias se aplicaron las siguientes
pruebas bioqumicas: agar de triple azcar y hierro, agar lisina y
hierro, agar citrato de Simmons y las pruebas de movilidad-indol-ornitina, adems de rojo de metilo y Voges-Proskauer, y caldo rojo fenol-glucosa. Todos fueron incubados a 35 C durante
24 h y en algunos casos hasta 48 h, tambin se aplic la tcnica
de la tincin de Gram. La lectura e interpretacin de las pruebas
bioqumicas se realizaron con base en el manual de MacFaddin
(2004).
Anlisis de datos. El anlisis estadstico se realiz con los programas NCSS 2000 y STATISTICA (StatSoft Ser ,1997). Para determinar las diferencias existentes entre las concentraciones de
coliformes de los cuatro lagos, se utilizaron las pruebas no-paramtricas de Kruskal-Wallis y de U de Mann-Whitney (p = 0.05)
(Marques de Cant, 1991).
La sensibilidad de las bacterias coliformes como indicadoras
de la presencia de bacterias entricas patgenas, se determin
con base en el ndice de Sensibilidad (Gabutti et al., 2004):

ndice de sensibilidad =

LM VPL OP * 100
N VPL + FNL Q

VPL = Verdaderos Positivos, nmero de muestras con NMP

de CF superiores al lmite aceptable y presencia de patgenos.
FNL = Falsos Negativos, nmero de muestras con NMP de CF
inferiores al lmite aceptable y con presencia de patgenos.
El riesgo de que se encuentre algn patgeno al detectar el
indicador, se determin a travs del modelo de riesgo atribuible
(RA) de Mirn-Canelo & Alonso-Sardn (2008):

RA =

VP
FN
F
I F
I
H Total de muestras K - H Total de muestras K

VP = Muestras con la presencia de los indicadores y los patgenos.

FN = Muestras sin la presencia de indicadores, pero con
presencia de patgenos.
Tambin se hizo un anlisis de la presencia-ausencia de los
indicadores y los patgenos, en el cual, adems de los VP y FN se
incluyeron en el anlisis los Verdaderos Negativos (VN), es decir,
las muestras en las que no se registr la presencia de bacterias,
y los Falsos Positivos (FP), que fueron los casos en que las muestras presentaron nicamente los indicadores, pero no los patgenos (Harwood et al., 2005).
Finalmente, se determin la relacin de CT/CF como un ndice auxiliar del origen de las bacterias por fuentes fecales y no
fecales (Goyal et al., 1977).

RESULTADOS
Las concentraciones de bacterias en agua, indicaron mayor
contaminacin microbiolgica en Ptzcuaro y Xochimilco. Estos
cuerpos acuticos presentaron medias geomtricas superiores
a 10,000 NMP/100mL de CT y 3,800 NMP/100mL de CF. Ms del
71% de las muestras rebasaron el nivel permisible para servicios
al pblico con contacto directo en lagos recreativos que es de
240 NMP/100mL de CF, y ms del 43% los lmites como fuente de
abastecimiento para uso pblico urbano, riego agrcola y proteccin de la vida acutica en agua dulce (incluyendo humedales),
as como servicios al pblico con contacto indirecto u ocasional
en lagos no recreativos que es de 1000 NMP/100mL de CF (SEMAR
NAP, 1998; CONAGUA, 2009), tal como se observa en la Tabla 1.
La calidad del agua del Lago de Ptzcuaro rebas los niveles
permisibles en la zona sur, incluso en el punto 4 donde descarga
el dren Guan se alcanzaron concentraciones de coliformes fecales similares a las encontradas en agua residual. Sin embargo, en
el cuerpo lagunar los nmeros disminuyeron, y cerca de la Isla de
Janitzio (punto 2), no se rebasaron los lmites.
En Xochimilco, los lmites establecidos para servicios al pblico con contacto directo fueron rebasados en todas las muestras. La Laguna de Metztitln mostr altas concentraciones de
CT, pero no se registraron CF en el cuerpo lagunar, sin embargo,
la calidad sanitaria del agua fue mala en el punto 12, ubicado en
el Ro Venados, el cual descarga a la laguna. En el lago Zirahun
no se detect la presencia de indicadores.
Es posible observar un patrn similar en el contenido de bacterias en agua y en sedimento. Sin embargo, las concentraciones
de coliformes fueron mayores en sedimento que en agua; en Ptz
cuaro la diferencia fue de un orden de magnitud, en Xochimilco
de dos rdenes de magnitud, con diferencias significativas (U de
Mann Whitney p < 0.01 en CT y CF), y en Metztitln, fue de dos
rdenes de magnitud en CT, pero no se encontraron diferencias
significativas (Tabla 1, Fig. 2).
Los valores bajos de la relacin CT/CF indican que el aporte de bacterias de origen fecal es considerable en Ptzcuaro y
Xochimilco (Tabla 1). En contraste, la laguna de Metztitln present valores altos de la relacin CT/CF (30.5 y 651.3 en agua y
sedimento, respectivamente), lo que indica mayor presencia de
coliformes de origen ambiental.
La prueba de Kruskal-Wallis indic diferencias significativas entre las concentraciones de bacterias registradas en estos
cuerpos acuticos (p < 0.01). La Tabla 2, compara los resultados
de un cuerpo acutico respecto a otro, a travs de la prueba de
U de Mann Whitney. sta evidenci que Ptzcuaro y Xochimilco
se encuentran en condiciones similares, mientras que Metztitln
mostr concentraciones significativamente inferiores. El anlisis
estadstico no incluy a Zirahun debido al escaso nmero de
datos. Respecto a las pocas climticas no se registraron difeHidrobiolgica

91

Coliformes como indicadores de patgenos

Tabla 1. Concentracin de bacterias indicadoras en agua y sedimento en los cuatro cuerpos acuticos continentales de Mxico.
Coliformes totales
Lago

Coliformes fecales

Media
geomtrica

Intervalo de NMP

Media
geomtrica

Intervalo de NMP

2.9 104

7.5 101 a 7.5 106

3.8 103

4 a 7.5 106

Muestras que rebasan el

Relacin

Lmite 1 (%) Lmite 2 (%)

CT/CF

Agua (NMP/100mL)
Ptzcuaro
Zirahun

71

43

7.7

<3

<3

<3

<3

Xochimilco

1.0 104

1.1 103 a 1.1 105

3.8 103

3.6 102 a 4.6 104

100

90

2.7

Metztitln

6.1 101

<3 a 1.1 105

<3 a 4.0 102

30.5

1.6 105

9.3 103 a 9.3 107

1.3 104

<3 a 9.3 107

Sedimento (NMP/100g)
Ptzcuaro
Zirahun

12.2

<3

<3

<3

<3

Xochimilco

1.2 106

7.3 104 a 2.4 107

4.4 105

3.6 104 a 4.6 106

2.8

Metztitln

3.9 103

<3 a 2.8 106

<3 3.0 105

651.3

NMP= Nmero Ms Probable. Lmite 1. 240 CF/100 mL, lmite para servicios al pblico con contacto directo en lagos recreativos (SEMARNAP, 1998). Lmite
2. 1000 CF/100mL, lmite para abastecimiento para uso pblico urbano, proteccin de la vida acutica (agua dulce: incluye humedales) y riego (CONAGUA,
2009) as como, servicios al pblico con contacto indirecto u ocasional en lagos no recreativos (SEMARNAP, 1998).

Tabla 2. Anlisis estadstico de los contenidos de bacterias indicadoras en los

cuerpos acuticos continentales de Mxico (U de Mann-Whitney).
Agua

Sedimento

CT

CF

CT

CF

Ptzcuaro-Xochimilco

Z = 0.80
p = 0.42

Z = 0.92
p = 0.36

Z = 1.77
p = 0.08

Z = 1.75
p = 0.08

Ptzcuaro-Metztitln

Z = 2.80
p = < 0.01*

Z = 3.63
p = < 0.01*

Z = 0.47
p = 0.64

Z = 2.62
p = < 0.01*

Xochimilco-Metztitln

Z = 4.04
p = < 0.01*

Z = 4.89
p = < 0.01*

Z = 4.33
p = < 0.01*

Z = 4.70
p = < 0.01*

CT= Coliformes Totales; CF= Coliformes Fecales; * Diferencias significativas; Z= valor estadstico de la curva normal, valores superiores a 1.95 implican diferencias significativas.

Figura 2a-b. NMP de las bacterias coliformes totales (CT) y coliformes fecales (CF) en agua (a) y sedimento (b) de cuatro lagos
de Mxico: Ptzcuaro (P), Zirahun (Z), Xochimilco (X) y Metztitln (M).
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Barrera-Escorcia G. et al.

rencias significativas entre las colectas de estiaje contra las de

lluvia.
Las bacterias entricas identificadas en agua se presentan
en la Tabla 3. Escherichia coli, Klebsiella spp. y Enterobacter spp.
se aislaron en todos los cuerpos acuticos. Bacterias del gnero Salmonella se encontraron en Ptzcuaro (en las localidades
ubicadas en la zona sur), tambin se aislaron en Xochimilco y
Zirahun. Bacterias del gnero Shigella se presentaron en todas
las localidades de Ptzcuaro.
El ndice de sensibilidad mostr que en los lagos de Ptzcuaro y Xochimilco, las concentraciones elevadas de CF se asociaron a la presencia de cepas de Salmonella (60%). En el caso
de Shigella sonnei, que fue aislada nicamente en Ptzcuaro, la
sensibilidad a la presencia de esta bacteria fue de 75%. El anlisis
global (Tabla 4), indic que la sensibilidad de los CF a la presencia
de ambos patgenos es mayor al considerar el lmite ms exigente.
El riesgo atribuible (RA) de que se encuentre el patgeno al
detectar el indicador, dio valores ms elevados con CF; para Salmonella (58%), y para Shigella (67%), mientras que el RA con CT
gener valores inferiores, e incluso negativos (Tabla 4).
Los CF tuvieron una proporcin elevada de muestras que
pudieron clasificarse como verdaderos positivos (VP), es decir,
aquellas en las que la presencia del grupo indicador y el patgeno es simultnea, y de verdaderos negativos (VN), en las cuales
ambos estn ausentes. Entre el 82 y 88% de las muestras cumplieron con estas dos premisas que seran las respuestas esperadas
para las bacterias indicadoras. En contraste, los CT presentaron
una alta proporcin (65%) de falsos positivos (FP), en las que estuvo presente el indicador pero no el patgeno (Fig. 3).

luado su eficacia como indicadores de la presencia de bacterias

patgenas en los ambientes acuticos mexicanos. En el presente
estudio se analiz dicha eficiencia y sin hacer la descripcin detallada de cada cuerpo acutico.
La mala calidad bacteriolgica del agua que se registr en
Ptzcuaro y Xochimilco, indica que existe un riesgo sanitario
relacionado con las actividades que se realizan en ellos, como
los paseos recreativos en lanchas o trajineras, que involucran
contacto directo ocasional, y la pesca en el Lago de Ptzcuaro.
Ambos cuerpos acuticos son ejemplos del deterioro constante,
el incremento de conflictos relacionados con la disponibilidad de
agua y el aporte de agua residual (Orbe-Mendoza & Acevedo,
2002; Fisher et al., 2003; Jurez-Figueroa et al., 2003; Soto-Castor
& Esquivel-Herrera, 2003).
En contraste, los lagos de Metztitln y Zirahun presentaron
mejores condiciones sanitarias. En stos el aporte de agua residual es menor, lo que permite que se realicen otras actividades,
como la pesca en el Lago de Metztitln.
Las concentraciones de bacterias registradas en sedimento, uno o dos rdenes de magnitud por arriba del agua, pueden
relacionarse con el hecho de que stas sobreviven por mayor

Tabla 4. Valores del ndice de sensibilidad y el riesgo atribuible (RA)

para determinar la asociacin entre los indicadores y los patgenos.
Patgeno
ndice de
Sensibilidad
Riesgo Atribuible
(RA)

DISCUSIN
Esta investigacin integr la informacin de tres proyectos en los
que se aplic el mismo mtodo de anlisis para la cuantificacin
y deteccin de bacterias indicadoras y patgenas.
Las normas mexicanas exigen la determinacin de los coliformes con miras a la proteccin ambiental, pero no se ha eva-

Salmonella Shigella
Lm 1 para CF (%)

60

75

Lm 2 para CF (%)

40

50

Con CT

-23

27

Con CF

58

67

Lm 1. 240 CF/100 mL, lmite para servicios al pblico con contacto directo
en lagos recreativos (SEMARNAP, 1998).
Lm 2. 1000 CF/100mL, lmite para abastecimiento para uso pblico urbano, proteccin de la vida acutica (agua dulce: incluye humedales) y riego
(CONAGUA, 2009) as como, servicios al pblico con contacto indirecto u
ocasional en lagos no recreativos (SEMARNAP, 1998).

Tabla 3. Enterobacterias aisladas en los cuatro cuerpos acuticos continentales de Mxico.

Ptzcuaro

Zirahun

Xochimilco

Citrobacter spp.
Enterobacter spp.
Escherichia coli
Klebsiella spp.
Salmonella spp.
Shigella sonnei

Enterobacter spp.
Escherichia coli
Klebsiella spp.
Salmonella spp.

Enterobacter spp.
Escherichia coli
Klebsiella spp.
Salmonella spp.

Metztitln
Citrobacter spp.
Enterobacter spp.
Escherichia coli
Klebsiella spp.
Proteus spp.
Providencia spp.
Serratia spp.
Yersinia spp.
Hidrobiolgica

Coliformes como indicadores de patgenos

93

Figura 3a-b. Relacin de la presencia-ausencia de indicadores y patgenos coliformes totales (a) y coliformes fecales (b),
muestras con presencia simultnea (VP), ausencia de ambos (VN), con indicador pero sin patgenos (FP) y con patgenos sin
el indicador (FN).

tiempo en el sedimento, que es un ambiente con partculas que

les proporcionan proteccin (Davies et al., 1995; Anderson et al.,
2005; Haller et al., 2009). Los niveles altos de coliformes fecales
en el sedimento indican riesgo sanitario, asociado a la posible
resuspensin de las bacterias hacia la columna de agua (Burton
et al., 1987; Craig et al., 2004). La resuspensin del sedimento es
frecuente en cuerpos acuticos someros, como es el caso de
Xochimilco. La presencia de las bacterias coliformes en agua se
interpreta como contaminacin reciente, debido a que el tiempo
de sobrevivencia de las bacterias es menor, mientras que en el
sedimento puede indicar una contaminacin previa (Obiri-Danso
& Jones, 2000).
El origen de las bacterias coliformes puede ser fecal o ambiental (a travs de insectos, plantas y suelo) (Goyal et al., 1977;
Leclerc et al., 2001). Ellas responden a factores ecolgicos diversos, que influyen en su permanencia y sobrevivencia (Gonzalez et
al., 2010). Las bacterias CF estn adaptadas para vivir en el tracto
gastrointestinal, considerado como su hbitat primario, aunque
pueden sobrevivir en el agua residual y cuerpos acuticos receptores, que son considerados hbitats secundarios (Gordon et al.,
2002; Anderson et al., 2005). La relacin CT/CF obtenida en Ptzcuaro y Xochimilco confirma la contaminacin de origen fecal. En
contraste, en Metztitln es posible que las bacterias coliformes
provengan principalmente de las escorrentas asociadas a la extensa superficie agrcola adyacente a la laguna.
Las bacterias entricas que pueden encontrarse frecuentemente en ambientes acuticos como resultado de la contaminacin fecal, incluyen a E. coli, bacteria aislada en todos los
lagos analizados, la cual es un componente natural y esencial de
la flora intestinal de humanos y animales. Si bien, la mayora de
las cepas de E. coli no son patgenas, ciertos serotipos tienen
un importante rol en enfermedades intestinales y no intestinales.
Las especies de Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Proteus,
Providencia y Serratia tambin son componentes de la flora intestinal y es posible encontrarlas en agua, agua residual y suelo.
Vol. 23 No. 1 2013

Organismos pertenecientes a los gneros Serratia y Klebsiella

tambin se han aislado en plantas. Asimismo, algunas especies
de Yersinia han sido aisladas de muestras ambientales y fecales
provenientes de humanos y mamferos. La presencia de estos gneros en el ambiente puede involucrar un riesgo, ya que incluyen
especies que pueden ser patgenas y cuentan con pocos estudios. En contraste, los gneros, Salmonella y Shigella han sido
ampliamente estudiados, no son miembros comunes de la flora
intestinal, aunque pueden existir individuos portadores de stos.
El gnero Salmonella incluye serovariedades que son causantes
de enfermedades severas en humanos que se agrupan con el
nombre de salmonelosis e incluyen la fiebre tifoidea y la paratifoidea. Por otro lado, existen cepas de Shigella que provocan enfermedades diarreicas leves y severas (Ryan, 2004). La presencia de
Salmonella en Ptzcuaro, Xochimilco y Zirahun tiene relevancia
sanitaria, incluso en este ltimo, que no present contaminacin
con base en los indicadores. El riesgo sanitario se corrobora por
el aislamiento de Shigella en Ptzcuaro. Por estos motivos, la relacin de indicadores y patgenos se realiz con organismos de
estos dos gneros.
La asociacin entre la presencia simultnea de patgenos y
los indicadores, debe establecerse ya que el riesgo sanitario se
determina a travs de los indicadores, varios autores han intentado asociarlos con resultados diversos (Goyal et al., 1977; Moriigo
et al., 1990; Efstratiou et al., 1998; Polo et al., 1998; Lemarchand &
Lebaron, 2003; Gabutti et al., 2004; Harwood et al., 2005; Gonzalez
et al., 2010). En este estudio, el ndice de sensibilidad de los CF a
la presencia de Salmonella y Shigella calculado con el lmite ms
estricto (240 CF/100mL), mostr valores similares a los reportados
por Gabutti et al. (2004) que fueron del 60% y 75%, respectivamente. Sin embargo, la sensibilidad de los CF depende en gran medida
del criterio de calidad al cual se relaciona, ya que sta fue menor
al utilizar el lmite alto (1000 CF/100mL), 40% y 50%, respectivamente. Esto implica que el ndice de sensibilidad es ms efectivo
al aplicarlo con las normas ms exigentes.

94
A diferencia del ndice de sensibilidad, el riesgo atribuible
(RA) a la presencia de patgenos simultnea al indicador, no requiere apoyarse en la legislacin. Esta medida de riesgo relaciona los VP con los FN, y puede aplicarse a indicadores como los
CT, no incluidos en la legislacin mexicana, y podra proporcionar
una evaluacin ms realista, ya que considera el nmero total de
muestras. El anlisis de RA permiti comparar el uso de las bacterias CT y CF respecto a la presencia de los patgenos, e indic
que los CF mostraron mayor capacidad predictiva que los CT en
los cuerpos acuticos analizados.
El modelo de RA no incorpora las respuestas de FP y VN,
pero en el anlisis de presencia-ausencia stos se incluyeron.
Un buen indicador debe tener un alto porcentaje de respuestas
verdaderas (VP y VN) y un bajo porcentaje de respuestas falsas
(FP y FN). Los FP son indeseables porque representan falsas alarmas, mientras que los FN no detectan un posible riesgo (Harwood
et al., 2005). El anlisis de presencia-ausencia mostr que los CF
fueron indicadores confiables de la presencia de patgenos, ya
que en los cuerpos acuticos contaminados se present una alta
proporcin de VP y en lagos menos contaminados hubo una alta
proporcin de VN.
El uso de CT como indicador de calidad sanitaria del agua,
ha sido cuestionado porque no en todos los casos las bacterias
coliformes tienen un origen fecal comprobable. Aunque algunos
autores asocian los CT con la presencia de patgenos (Efstratiou
et al., 1998), en los casos en que stas bacterias tienen un origen
ambiental su presencia puede dar lugar a FP, tal como se observ
en el presente estudio. Los resultados indicaron que la capacidad de los CT para predecir la presencia de patgenos fue pobre,
lo que coincide con lo que plantearon Harwood et al. (2005). En
contraste, el grupo de CF fue un indicador ms confiable de la
presencia de Salmonella y Shigella, ya que tuvo una proporcin
elevada de respuestas verdaderas (entre el 82 y 88%, respectivamente). De hecho, cuando se detectan CF y hay ausencia de patgenos, no se descarta un posible riesgo, debido a que se detecta
contaminacin de origen fecal (Goyal et al., 1977) y por otro lado,
las bacterias CF son el indicador reconocido por la legislacin en
Mxico.
Tanto los patgenos entricos, incluyendo Salmonella, como
los CF, tienen un origen fecal, por lo cual se esperara una relacin
entre la cantidad de CF y la presencia de Salmonella, sin embargo, no siempre se presentan portadores de Salmonella (Gabutti et
al., 2004). El aislamiento de un patgeno sin registrar la presencia
del indicador, tal como fue el caso de Zirahun, donde se aisl
Salmonella, pudiera estar relacionado con el mayor tiempo de sobrevivencia de este patgeno con respecto al del indicador, como
lo han planteado algunos autores (Polo et al., 1998; Gabutti et al.,
2004). Por otro lado, debe considerarse que se requiere un mayor
volumen de muestra para el anlisis de patgenos, en comparacin con el volumen que se utiliza para el conteo de indicadores

Barrera-Escorcia G. et al.

(Polo et al., 1998), lo cual aumenta la posibilidad de encontrar al

patgeno.
A pesar de que se demostr la mayor sensibilidad de los CF
como indicador de la presencia de patgenos entricos respecto
a los CT, la determinacin de estas bacterias no fue suficiente para establecer el riesgo sanitario y es necesario evaluar tambin
las bacterias patgenas entricas de importancia como es el caso de Salmonella y Shigella para caracterizar la calidad sanitaria
de un cuerpo de agua.

AGRADECIMIENTOS
Esta investigacin se llev a cabo con el apoyo de la Universidad
Autnoma Metropolitana a travs de los proyectos: Estudios
ecotoxicolgicos en ambientes acuticos y Determinacin de
riesgo ecolgico de un ambiente acutico e Indicadores de Integridad Ecolgica y Salud Ambiental.

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