UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MEXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA CELULAR Y DE LOS

TEJIDOS I

ALUMNOS:
Alba Hernndez Jos Guadalupe
Daz Martnez Anglica Guadalupe
Guerrero Ibarra Ricardo
Sordo Ramrez Alberto Alfredo

GRUPO: 2452 EQUIPO: 3

ASESOR: Rosalba Cervantes

*ANLISIS DE LPIDOS EN LA YEMA DE

HUEVO
*CROMATOGRAFA DE LPIDOS

Objetivos:

Analizar las propiedades de los lpidos.

Extraer los lpidos de la yema de huevo.
Cuantificar fosfatos de lpidos fosforilados y no fosforilados.
Analizar la importancia biolgica de los lpidos presentes en la yema de
huevo.

RESULTADOS
Tabla1. Concentracin de fosforo contenida en cada muestra
Matraz
1
2
3
4
5
6 (Lpidos no
fosforilados)
7 (Lpidos
fosforilados)

Volumen de
patrn (ml)
0.2
0.6
1.0
2.0
3.0
_

Absorbancia
0.007
0.045
0.053
0.124
0.144
0

Masa de fosforo
(g)
2
6
10
20
30
0

0.10

18.81

Curva estndar para la determinacin de fosfato en la yema de huevo.

0.16
0.14
0.12
0.1
Absorbancia

0.08
0.06
0.04
0.02
0
0

10

15

20

Masa de fosforo (g)

25

30

35

Clculos18.81 g/ 5mL = (3.762 g/mL) (50)= 188.81 g/ mL = 0.18881 g/mL

Se pesaron 0.4394 g de fosfato mono potsico para realizar la curva lo cual
equivale a 0.1 g de fosforo ya que
136g KPO4

31 g P

04394g KPO4 0.1 g P

Se obtuvo casi el doble de lpidos fosforilados con respecto al valor terico en
la yema de huevo analizada, esto puede ser debido a un error en la
preparacin de las muestras principalmente en la digestin para eliminar
materia orgnica o la concentracin en fosforo de la yema de huevo es muy
elevada.

Para el trabajo de anlisis de rutina, diez o ms muestras se pueden aplicar a una placa de 20 x
20 cm y luego la cantidad de lpidos presentes pueden ser cuantificados por carbonizacindensitometra, que consiste en pulverizar la placa con un oxidante y calefaccin para carbonizar
los lpidos. Antes de usarlo, se recomienda que las placas se activen con el calor a una
temperatura de 110 F por una hora. Los lpidos migran a lo largo de la placa formando manchas
nicas e independientes en la placa. Entonces, para la deteccin de puntos despus de una
carrera, en la que el disolvente elegido en frente es capaz de migrar hasta la mitad de la placa
(aproximadamente 30 minutos) las placas se secan en el aire en una campana de qumicos a
temperatura ambiente durante 20 minutos. Todos los lpidos pueden ser fcilmente visualizados
con un solo medio de contraste soluble en agua.

Reactivo con yodo: Esta imagen muestra el revelado

con yodo en el cual se aprecia todo los tipos de lpidos
contenidos en la yema de huevo separados
uniformemente sobre toda la placa y de un tono tojo
amarillo.

Reactivo con bismuto: En esta imagen se puede apreciar la diferenciacin de los

diferentes tipos de colinas que preexisten en la yema de huevo como la
fosfatidilcolina de color naranja algunos cidos grasos esparcidos en la toda placa
pero en general las manchas muestran los diferentes tipos de colinas que existen en
la yema.

Reactivo con Molibdato: Esta imagen nos

muestra el revelado con molibdato en este nos
muestra todo los lpidos fosforilados presentes
en la yema de huevo divididos en toda la placa
de color azul y con algunas manchas
transparentes de cidos grasos.

Reactivo de ninhidrina: Se muestra lpidos que contienen

aminocidos,
tiles
para
la
identificacin
de
la
fosfatidiletanolamina y la fosfatidilserina de un tono rojo
ladrillo.

CONCLUSION
Se logr cuantificar los lpidos fosforilados de la yema de huevo, as como su
identificacin en una cromatografa en capa fina usando como reveladores
yodo, bismuto, molibdato y ninhdirina para identificar lpidos fosforilados,
lpidos totales, lpidos con aminocidos, colinas.

Cuestionario: 1
1.

Menciona 5 funciones de los lpidos en los organismos vivos:

Regulacin hormonal
Aislante elctrico
Proteccin mecnica
Reserva de energa
Identificacin celular

2. Explica el fundamento del mtodo de Kjeldahl:

Separacin del nitrgeno contenido en las protenas y cuantificarlo
directamente.
3. Justifica el uso de disolventes como cloroformo-metanol
El uso de estos disolventes se justifica por que la polaridad media de la mezcla
extrae de manera adecuada los lpidos fosforilados y no fosforilados.
4. Indica en que consiste el mtodo de cuantificacin de fosfatos
Consiste en cuantificar el fosforo contenido en los lpidos de la muestra
formando un complejo de fosfomolibdato de amonio de color azul.

Cuestionario 2
1.

2.

Cules son los mtodos que se utilizaron en el anlisis de lpidos?

Mtodo de Kjeldahl
Fiske Subbarow
Cules el mtodo de la cromatografa en capa fina?

Mtodo de identificacin que se fundamenta en la diferencia de polaridades

entre los eluyentes y el eluato. Es decir la fase mvil que es la mezcla de
disolventes y los lpidos a determinar.
3. El reactivo de bismuto, ninhidrina y molibdato par que tipo de
fosfolpidos son cada uno y que coloracin se observ.
Ninhidrina: se utiliza para amino fosfolpidos.

Molibdato: se utiliza para lpidos fosforilados

Bismuto: se utiliza para lpidos que contienen colina.

4. Qu clase de lpidos se encuentran en la yema de huevo y en qu

proporcin?
Lpidos fosforilados
Lpidos no fosforilados