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11/11/2014

Lic. T.M. Pilar Alva Betalleluz


Profesor Asociado
Departamento de Microbiologa Mdica

11/11/2014

Realizar e interpretar pruebas


inmunocromatogrficas aplicadas a diversas
situaciones clnicas.
Realizar la lectura e interpretacin de
pruebas inmunocromatogrficas para
diagnstico de malaria (PATH,ICT,OPTIMAL),
infeccin por VIH,embarazo, drogas ,
hepatitis,etc.

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Cassettes de pruebas inmnucromatogrficas


para deteccin de Antgeno de superficie del
Virus de la Hepatitis B, metabolitos de
cocana, marihuana e infeciin por VIH.
Tiras o cassettes de pruebas
inmunocromatogrficas para diagnstico de
embarazo (HCG).
Pipetas automticas
Muestras problema
Pruebas inmunocromatogrficas reveladas.

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Procedimiento:
Colocar 30 uL. de
muestra (suero) en
el pocillo S.
Agregar 100 uL. De
diluyente de
muestra.
Incubar 10 minutos
Leer

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NEGATIVO
Se observa una lnea
coloreada en la zona
control
POSITIVO
Se observa dos lneas
coloreadas, una en la
zona control y otra en la
zona de prueba o Test.

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Verificar que aparezca la lnea control.

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Colocar 10 uL. De
muestra de orina en el
pocillo S.
Agregar 100 uL. de
diluyente de muestra.
Incubar 10 minutos.
Leer

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NEGATIVO

POSITIVO

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Pueden realizarse en cassettes o tiras.

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Colocar la tira en
contacto con la
muestra de orina por
unos 30 segundos.
Dejar secar en
posicin horizontal.
Leer

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POSITIVO:
2 lneas coloreadas

NEGATIVO
1 lnea coloreada

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PRUEBA
COMERCIAL

ANTIGENO
DETECTADO

PATH
Para Sight F
ICT Malaria Pf
ICT Malaria
Pf/Pv

Protena II rica en
histidina (PfHRP-2)

OptiMAL

Lactato
deshidrogenasa
(pLDH)

PARASITO
DETECTADO

P. falciparum
P. falciparum
P. falciparum
P. falciparum y
otros
Plasmodium
P. falciparum y
otros

Plasmodium

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(-)

(+)

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P. falciparum antgeno
especfico

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Tira inmunocromatogrfica (IC)


Buffer
Muestra
Gradilla
Pipeta automtica
Puntas
Guantes

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Sacar y marcar la tira IC con el


cdigo de identificacin del
paciente

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Colocar el tubo de reaccin en la gradilla y


agregar 4 gotas del buffer

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Transferir 5 L de
la muestra de
sangre sobre la tira,
debajo de las
flechas azules

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Colocar la tira en el
tubo de ensayo.
Espere hasta que la
sangre se haya
aclarado (aprox. 15
minutos)

Agregar 1 mL de
buffer aclaratorio.
Tapar el tubo de
prueba e invertir
varias veces.

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POSITIVO NEGATIVO INVALIDO

POSITIVO: P.
falciparum

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P. falciparum specific
monoclonal antibody

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Rotular

Escriba el cdigo del


paciente y la fecha

Aadir buffer

Una gota al pocillo


1 y 4 gotas al
pocillo 2

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Aadir la muestra

Mezclar la sangre y
buffer

10 L de sangre al
pocillo 1

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Separar ambos
dispositivos

Colocar la tira en el
pocillo 1

Tira y estuche

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Trasladar la tira al
pocillo 2

Cubrir los pocillos 1


y2

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