biotecnologa

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mayo-junio 2005

SISTEMA DE INMERSIN TEMPORAL EN BIORREACTORES

Nueva tecnologa en micropropagaci

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a micropropagacin convencional
es un sistema adecuado para masificar la produccin de plantas en
un corto perodo y acelerar la introduccin
de variedades o clones que necesitan someterse a cuarentena por razones fitosanitarias. A pesar de las ventajas indicadas,
el sistema presenta una gran limitante: el
alto costo de la planta, que en algunos
casos puede llegar a ms de US$1 por
planta (alrededor de $580 a la fecha de
publicacin del artculo). Ello se debe principalmente a que las etapas de produccin
se realizan en forma manual. Por lo tanto,
esta tecnologa se aplica slo en aquellas
especies que se propagan vegetativamente
y que tienen un alto retorno econmico.
De ah la importancia de identificar, desarrollar y transferir tecnologas que permitan
reducir los costos de produccin de las
plantas producidas.

Sistema de inmersin
temporal
Una alternativa a la micropropagacin
convencional es el desarrollo e implementacin del sistema de inmersin temporal
(SIT) en biorreactores. El SIT bsicamente
consiste en colocar los explantes (segmentos nodales) en un contenedor, y el medio
de cultivo lquido en otro envase. El medio
lquido es transferido en forma automtica
hacia el contenedor con las plantas, con
una determinada frecuencia y tiempo.

Ventajas
La principal ventaja del SIT es incorporar un mayor grado de automatizacin
de los procesos de multiplicacin (proliferacin), elongacin y enraizamiento del
cultivo in vitro, dependiendo de la especie.
En algunas especies tropicales, como pltano y pia, el SIT ha demostrado ser altamente eficiente, ya que ha permitido reducir

Mario Paredes C.
Ingeniero Agrnomo, Ph.D.
mparedes@quilamapu.inia.cl
INIA Quilamapu

Sistema de micropropagacin convencional.

en 30 a 40% el uso de mano de obra,

reactivos, material fungible, niveles de
contaminacin, manipulacin de explantes,
y el tiempo de produccin de plantas, dependiendo de la especie. Por otro lado, el
sistema ha permitido aumentar la tasa de
multiplicacin, el porcentaje de enraizamiento, la sobrevivencia de plantas en la
etapa de aclimatacin en porcentajes que
pueden variar entre un 40 y un 50%, dependiendo del tipo de cultivo y de la produccin de plantas por m2 instalado de
laboratorio. Todo ello ha permitido una
disminucin de los costos de produccin
de hasta un 50%, en comparacin con el
sistema de micropropagacin convencional.
El SIT podra ser aplicado tambin en
multiplicacin de plantas a travs de embriognesis somtica, produccin comercial
de semillas artificiales, y seleccin y multiplicacin de plantas transgnicas.

Proyectos en ejecucin
Actualmente, en el Laboratorio de
Biotecnologa de INIA Quilamapu se estn
desarrollando dos proyectos financiados
por INIA, la Fundacin para la Innovacin
Agraria (FIA) y Hortifrut S.A. que utilizan
esta tecnologa en papa (Solanum tuberosum), arndano (Vaccinium spp) y vid (Vitis
vinifera). Asimismo con financiamiento
de INIA, INNOVA Bo Bo, FIA, Bioforest
S.A. y la Cooperativa de Mejoramiento

Micropropagacin en
el sistema de inmersin Temporal (SIT).

Produccin de plantas de arndano en SIT.

Gentico Forestal (CMGF), se est trabajando en dos especies de eucalipto.

El objetivo general de ambos proyectos
es determinar la factibilidad de implementar
comercialmente la produccin de plantas
mediante el SIT en biorreactores en cinco
especies modelos. Los objetivos especficos
de los proyectos son:
Conocer los factores que influyen sobre
la multiplicacin y elongacin in vitro en
SIT.
Establecer las condiciones ptimas para
la tuberizacin de papa en SIT.
Evaluar el efecto de macro y micronutrientes sobre el enraizamiento y aclimatacin en eucalipto.
Determinar la estabilidad gentica de
las plantas propagadas a travs del SIT.

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cin de plantas en Chile

papa se est utilizando la variedad Desire
(consumo fresco) y Shepody (uso industrial); en vid la variedad Sultanina (uva de
mesa) y Cabernet Sauvignon (produccin
de vino); en arndano, Duke, Elliot y ONeil,
con diferente adaptacin regional; y en
eucalipto, Eucalyptus globulus y E. nitens
(clones con diferente capacidad de enraizamiento).
Produccin de microtubrculos en SIT.

Resultado del proyecto

Produccin de plantas de vid en SIT.

Realizar un anlisis econmico del sistema de propagacin in vitro convencional

versus SIT.
Transferir los resultados obtenidos a los
usuarios: programas de mejoramiento
en especies de propagacin vegetativa,
empresas productoras de variedades
que necesiten multiplicar vegetativamente su material gentico, acelerar la multiplicacin de material gentico vegetativo introducido al pas con o sin
requisitos de cuarentenas, viveristas.

Especies, variedades y clones

Por tratarse de un trabajo pionero en
el pas, se seleccionaron varias especies,
ya indicadas, representantes de plantas
leosas, semileosas y anuales. Dentro
de cada gnero se seleccion un par de
variedades o clones representativos para
determinar respuestas especficas. En

PARTICIPANTES EN LOS PROYECTOS

Los proyectos cuentan con un equipo interdisciplinario formado por
investigadores de diferentes instituciones: Mario Paredes, Viviana Becerra,
Rodrigo Avils, Carmen Rojo, Uberlinda Luengo (INIA Quilamapu); Jos
Santos Rojas, Patricia Cataln, Claudia Baeza (INIA Remehue); Marcela
Ziga, Corina Rosales (Hortifrut Viveros); Claudio Balocchi, Maritza
Obando, Vernica Prado (Bioforest S.A.), Fernando Droppelmann (Cooperativa de Mejoramiento Gentico Forestal) y dos asesores internacionales,
Dagoberto Castro (Colombia), Edson Higashi (Brasil).

Los resultados obtenidos a la fecha

permiten indicar que el SIT es una tecnologa ms eficiente que el sistema convencional para micropropagar eucalipto, vid,
arndano y papa. Se comprob que existen
especies con una mayor sensibilidad a la
multiplicacin en medios lquidos, como
es el caso de la vid y los eucaliptos se
debe investigar en cada caso la sensibilidad
de la planta al medio lquido y determinar
la frecuencia y tiempo de inmersin especfica, y que existe una respuesta varietal
y clonal dentro de cada especie, por lo cual
es muy importante determinar la frecuencia,
tiempos y volmenes que ocupa el medio
lquido en el contenedor donde se multiplican las plantas en forma especfica.

por INIA (papa, vid y E. nitens), Hortifrut

(arndano) y Bioforest (E. globulus).
Los principales resultados o ventajas
de este sistema de operacin conjunta
INIAempresas son:
Utilizacin inmediata del material gentico generado por las empresas.
Adaptacin de las condiciones de investigacindesarrollo del SIT a sus facilidades de trabajo e infraestructura.
Disponibilidad inmediata de los resultados.
Entrenamiento del personal tcnico.
Aporte financiero compartido para incorporar una nueva tecnologa al proceso
productivo.
Difusin de los resultados obtenidos a
otras empresas del rubro.

Interaccin INIAempresas
Desde el punto de vista operacional,
los proyectos son desarrollados conjuntamente por INIA y las empresas. En tal
sentido, en el laboratorio de INIA Quilamapu
se est trabajando en papa, vid y en las
dos especies de eucalipto (E. globulus y E.
nitens). En el laboratorio de Hortifrut, en
tanto, se trabaja en arndano, y en el
laboratorio de Bioforest S.A. se trabaja en
clones de E. globulus y E. nitens. En cada
laboratorio se han realizado las instalaciones adecuadas para trabajar en SIT. Los
protocolos de micropropagacin utilizados
en los proyectos han sido proporcionados

Aplicacin de la tecnologa
a otras especies
Hasta el ao 2001 la investigacindesarrollo y uso de esta tecnologa
no exista en el pas. Por lo tanto, la informacin generada en estos proyectos servir de base para mejorar el proceso de
micropropagacin in vitro de plantas en
otras especies de inters econmico. Ya
existen algunos laboratorios privados que
estn empezando a aplicar o estn interesados en usar esta tecnologa en la
multiplicacin de diferentes especies, por
ejemplo, flores.

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