UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIA E INGENIERA EN

ALIMENTOS
INFORME DE PRCTICA DE LABORATORIO
DATOS INFORMATIVOS:
Carrera: Ingeniera Bioqumica
Ciclo Acadmico: Abril Agosto 2016
Asignatura: Microbiologa II
Nombre; Christian Gavilnez, Thala Moreno, Morelia Sampedro,
Benjamn Garcs, Carlos Asimbaya, Luis Moreta
Nivel: Cuarto
Profesor: Carlos Rodrguez PhD
Prctica de Laboratorio N: 5
Fecha de Realizacin: (dd/ mm/ aaaa): 29/08/2016
Fecha de Presentacin: (dd/ mm/ aaaa): 09/08/2016
TEMA: Gira de Observacin al Tena Monocotiledneas
1.

PROCEDIMIENTO
Esterilizar todos materiales.
Preparar agar PDA.
Verter agar en las cajas Petri.
Recolectar muestras de plantas monocotiledneas
Codificar cada planta y fotografiar
Esterilizar el medio y todos los materiales del laboratorio en
este caso, porttil.
Preparar una solucin de cloro al 10% y otra de alcohol
industrial al 90%.
Verter una solucin de alcohol, agua destilada, cloro, agua
destilada(x3) en un recipiente en el cual la muestra a analizar
quepa perfectamente.
Cortar un fragmento de hoja y tallo para esterilizar.
Pasar la muestra por el alcohol, sumergindola completamente
por un minuto.
Posteriormente pasar la misma muestra por el segundo
recipiente que contenga agua destilada.
Sumergir la misma muestra en cloro al 10% por un minuto.
Repetir el mismo procedimiento con los tres recipientes
restantes de agua destilada por un intervalo de tiempo igual a
un minuto cada uno.
Rotular la caja con fecha, tipo de planta, de donde se tom la
muestra, cdigo y nombre.
Una vez esterilizada la planta recortar dos pequeas muestras

ya sea de la parte baja, media o alta de la misma.

Introducir las muestras en la caja Petri con agar una en el
extremo superior y la segunda en el extremo inferior, sin tocar
la pared de la caja.
Empaquetar correctamente cada caja.
Incubar a 24C
Repetir el procedimiento para todas las muestras.
Una vez evidenciado el crecimiento del hongo, preparar dos
replicas ms del hongo elegido.
Rotular el segundo medio de cultivo con fecha, tipo de planta,
nombre, nmero de rplica, firma
Tomar una pequea muestra con un haza de laboratorio
previamente esterilizada, de la parte exterior del hongo junto
con una pequea cantidad de agar.
Implantar la muestra en el centro del nuevo medio de cultivo.
Empaquetar las cajas e incubar a 24C.
Tener un control de la evolucin del hongo, registrar datos
importantes y fotografas.

Datos obtenidos
Tabla N0 1. Recoleccin de plantas monocotiledneas en Ro Verde, Tena- Hostera las
Heliconias, Sacha Kawsay.
cdigo
fotografa
descripcin

RV01
Ro Verde

RV02

Muestra recolectada el 28 de Julio

del 2016 en Baos- Ro Verde, la
hoja recolectada y codificada
como
RV01
es
una
monocotilednea con hojas muy
alargadas, la misma que se
caracteriza por la presencia de un
solo cotiledn.

Muestra recolectada el 28 de Julio

del 2016 en Baos- Ro Verde, la
presente muestra se la codifico
como RV02, perteneciente a una
monocotilednea de hojas largas,
sin flor, perteneciente a una
herbcea por sus caractersticas.

TE01

Muestra recolectada el 29 de Julio

del 2016 en la Hostera las
HeliconiasTena,
la
hoja
recolectada pertenece a una
monocotilednea,
que
se
caracteriza por ser una herbcea
de tallo semi-grueso.

Tena,
Hostera las
Heliconias

TE02

TE03

KS02

Muestra recolectada el 29 de Julio

del 2016 en la Hostera las
HeliconiasTena,
la
hoja
recolectada pertenece a una
monocotilednea, la misma se
caracteriza por ser una trmera, sus
piezas florales se encuentran
distribuidas en piezas de tres.

Muestra recolectada el 29 de Julio

del 2016 en la Hostera las
Heliconias- Tena, la planta
recolectada pertenece a una
monocotilednea,
la
misma
presenta tejido vascular formado
por haces dispersos en el tallo.

Muestra recolectada el 30 de Julio del

2016 en Sacha Kawsay- Tena, la
planta recolectada pertenece a una
monocotilednea, la misma tienen un
solo cotiledn largo

Tena- Sacha
Kawsay KS03

KS04

Muestra recolectada el 30 de Julio del

2016 en Sacha Kawsay- Tena, la
planta recolectada pertenece a una
monocotilednea, la misma tiene
haces dispersos en el tallo y ausencia
de crecimiento secundario.

Muestra recolectada el 30 de Julio

del 2016 en Sacha Kawsay- Tena,
la presenta planta presenta las
siguientes caractersticas: Las piezas
florales se encuentran dispuestas
en grupos; pertenecen al grupo de las
monocotiledneas.

KS05

Muestra recolectada el 30 de Julio

del 2016 en Sacha Kawsay- Tena,
la planta recolectada pertenece a
una monocotilednea, la misma
tiene haces largos dispersos en el
tallo

Fuente: laboratorio de Microbiologa II

Tabla N0 2. Siembra y Crecimiento de Hongos endfitos, muestras recolectadas en la

Hostera las Heliconias- Tena y Sacha Kawsay- Tena.
cdigo
Fotografa
descripcin

KS05

KS03

TS01

TE03

TS09

Siembra de hongos internos

(endfitos), tomado de la parte
media de las hojas codificadas
como KS05, y transferidos el
medio de cultivo para su
crecimiento
el
30/07/16.
o
Incubada a 24 C.
Crecimiento
de
hongos
endfitos de la parte alta de las
hojas codificadas como KS03
tomadas de Sacha KawsayTena y sembradas el 30/07/16.
Incubada a 24 oC.
Crecimiento de hongos internos
tomadas de la parte alta de la
hoja codificada con TS01,
muestra tomada de
Sacha
Kawsay- Tena y sembradas el
02/08/16 e incubada a 24 oC.
Siembra de hongos endfitos,
muestra tomada de la hostera
las Heliconias-Tena, codificada
como TE03 y trasferida la parte
media de la misma el 29/07/16.
Incubada a 24 oC.
Crecimiento de hongos internos,
tomadas de la parte alta de las
hojas codificadas como TS09
muestradas en Sacha KawsayTena y trasferidas al cultivo el
02/08/16 e incubada a 24 oC.

RV02

Siembra de hongos endfitos,

muestra tomada en la hostera
las Heliconias- Tena, codificada
como RV02 y transferida al
medio de cultivo el 29/07/16
para su respectivo crecimiento.
Incubada a 24 oC.

Fuente: laboratorio de Microbiologa II

Discusin
Las plantas recolectadas a travs del muestreo fueron monocotiledneas. Estas se
caracterizan por el punto de nacimiento de su hoja, que va directamente desde el tallo de
la planta sin pasar por ramificaciones, sin embargo la caracterstica principal de este tipo
de plantas es la forma de su fruto. Hojas alternas, simples. pecioladas; flores bisexuales,
epiginas, con cliz tubular, 3- lobulado, con estivacin valvada y a veces iguales entre
s; estambres 6-10, libres o adnatos al estilo o al estigma; ovario 3 6 locular. vulos
numerosos, dispuestos horizontalmente, estigmas en igual nmero que los lculos del
ovario; y fruto seco o suculento, 3-6 locular, con numerosas semillas, las cuales poseen
un embrin pequeo. E (Gonzles, 1999).
Se utiliz agar PDA para el cultivo de las muestras obtenidas. Este agar es comnmente
utilizado para el cultivo de levaduras y hongos. Se tomaron hojas a diferente altura de la
planta, para la inoculacin se proces la hoja de manera que se esterilice todo el exterior
de esta y se sustraiga limpiamente la base de la hoja. Haber tomado las hoajs de
diferentes alturas present poca o ninguna diferencia en la cantidad de crecimiento de
endfitos. Estas bacterias son encontradas principalmente en los espacios intercelulares
de los tejidos y, con menor frecuencia, intracelularmente y en tejidos vasculares, sin
causar sntomas de enfermedad (HUREK et al., 1994; BELL et al., 1995). Cabe resaltar
que La densidad poblacional de bacterias endfitas es menor que la de patognicas y,
por lo menos algunas de ellas, no inducen respuesta de hipersensibilidad y por eso no
son reconocidas por la planta (HALLMMAN et al., 1997).
Todas las muestras presentaron crecimiento regular tras ser incubadas a 24C pasados 2
das de su procesamiento e inoculacin. La morfologa de las colonias es muy variada.
Se presentan de diferentes colores y formas. Por ejemplo, la muestra KS05 present
esporulacin tras el tercer da de incubacin, su micelio es de color amarillo y su
crecimiento es masivo a travs de la placa. La muestra KS03 presenta una colonia de
color amarillo, su crecimiento es mucho ms lento que el de la muestra mencionada
anteriormente, no presenta esporulacin. Las muestras TS01, TE03, TS09 y RV02
presentan micelio de color blanco. El crecimiento ms notable de estas 4 muestras
mencionadas es el de RV02, siendo la nica que tras el mismo periodo de tiempo ha
presentado ya esporulacin. Se puede apreciar tambin 2 tipos diferentes de micelio.
Los hongos endfitos son un grupo muy diverso y polifiltico que habitan en diversas

partes de las plantas. La mayora pertenecen al phylum Ascomycota, aunque tambin se

han encontrado en los Basidiomycota, Zygomycota y Oomycota (Snchez, Sandovalespinosa-2013).
Las plantas recolectadas presentaron poco o ningn tipo de dao como manchas de
color oscuro o agujeros en las hojas, especialmente en la zona utilizada para la
inoculacin la cual en todos los casos fue encontrada intacta. Esto indica que la relacin
de los microorganismos cultivados.
Las bacterias estn indisolublemente asociadas a las plantas como patognicas, epifitas,
endfitas, simbiticas y antagnicas. Muchas forman asociaciones ntimas con las
plantas y forman grupos diversos filogenticamente representados por especies
pertenecientes a los principales taxones. Las bacterias asociadas a las plantas
tpicamente intercambian seales con su hospedero y poseen diversos mecanismos para
adaptacin y colonizacin (PRESTON et al., 1998)
Segn Snchez (2013): La relacin entre los hongos endfitos y su planta hospedera
puede ir desde el mutualismo hasta la patognesis. En estas relaciones ambos
organismos producen metabolitos secundarios potencialmente txicos. El hongo
endfito produce factores de virulencia, como exoenzimas y metabolitos fitotxicos,
mientras que la planta produce defensas, tanto mecnicas como bioqumicas. En
consecuencia, para que ambos organismos coexistan se establece entre ellos una
relacin de antagonismo balanceado, que depende de la virulencia del hongo y de las
defensas de la planta, las cuales varan y son influenciadas por los factores ambientales
y por la etapa de desarrollo de ambos organismos. Cuando los factores de virulencia del
hongo y las defensas de la planta estn en equilibrio se establece una relacin endoftica
y, por el contrario, cuando se presenta la senescencia del hospedero o se encuentra bajo
estrs, el balance se torna a favor del hongo y ste se expresa como patgeno,
presentndose los sntomas de enfermedad.
Bibliografa:
Gonzles, F. (1999). BOTNICA MONOCOTILEDONEAS y
DICOTILEDONEAS: UN SISTEMA DE CLASIFICACIN QUE ACABA.

HALLMANN,J.,QUADT-HALLMANN,
A.,
MAHAFFEE,
W.F.
KLOEPPER,J.W.1997. Bacterial endophytes in agricultural crops. Canadian
Journal Microbiology. v.43, p.895-914.

HUREK, T. REINHOLD-HUREK, B., VAN M., KELLENBERGER, E. 1994.

Root colonization and systemic spreading of Azoarcus sp. Strain BH72 in
grasses. Journal of Bacteriology. v.176, p.1913-1923.

PRESTON, G.; HAUBOLD, B.; RAINEY, P. 1998. Bacterial genomics and

adaptation to life plants: implications for the evolution of pathogenicity and
symbioses. Current Opinion in Microbiology, v. 1, p. 589-597.

Snchez-fernndez, R. E., Snchez-ortiz, B. L., Sandoval-espinosa, Y. K. M.,

Ulloa-bentez, ., Armendriz-guilln, B., Claudia, M., & Martha, G. (2013).
Hongos endfitos: fuente potencial de metabolitos secundarios bioactivos con

utilidad en agricultura y medicina, 16(2), 132146. Pp- 133