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QIQ

I: OBJETIVO.
Utilizar unas sencillas tcnicas para poder extraer el ADN de un tejido
Animal y por el aspecto que presenta , confirmar su estructura fibrilar .
A partir de la longitud enorme de las fibras tanbien se confirma que el
nucle. El ADN se encuentra replegado.

II: FUNDAMENTO TEORICO.

ADN es la abreviatura del cido desoxirribonucleico (en ingls, DNA). Constituye


el material gentico de los organismos. Es el componente qumico primario de
los cromosomas y el material del que los genes estn formados.
El ADN constituye el material hereditario de un individuo. En l estn escritas
las instrucciones que deben seguir las clulas para construir un organismo y
mantenerlo vivo. Todas las clulas que forman un individuo contienen una copia
idntica de ADN. Cada una de ellas, sin embargo, lee una parte de estas
instrucciones y por eso hay clulas con diferentes formas yfunciones.
Est formado por desoxirribonucleotidos (A, G, C, T). Que a su vez estn
formados -D desoxirribosa y un ion fosfato.
La proporcin y secuencia de las bases nitrogenadas diferencia a los poli
nucletidos.
El ADN presenta dos niveles de plegamiento que dan lugar a:
Estructura primaria:
Los polinucletidos se forman entre las bases nitrogenadas de adenia, guanina,
citosina y timina por enlaces covalentes de tipo fosfodiester. As se forma un
esqueleto de polidesoxiribosa-fosfato, de forma que queda un extremo con -OH
3 libre y un extremo 5 con un grupo fosfato libre.
Estructura secundaria:
Tiene un empaquetamiento espacial pero no se altera.
Dentro de la estructura secundaria hay 3 modelos:
El modelo de la estructura secundaria del ADN en forma de doble hlice
dextrgira (forma B). Las dos hebras son anti paralelas es decir si una presenta
la direccin 5->3, la otra posee la direccin 3->5.
El conjunto se pliega sobre s mismo obligado por los puentes
de hidrgeno entre diferentes regiones de la molcula, hasta adoptar la
conformacin ms estable, que es la de doble hlice. Este enrollamiento entre
las 2 hebras de la doble hlice es dextrgiro es decir gira a derechas y de tipo
plectonmico, como si estuvieran trenzadas.

Las secuencias de bases son complementarias, pues hay una correspondencia


entre las bases de ambas cadenas .La adenina slo puede estar frente a la
timina y la guanina frente a la citosina. As las bases pricas estn enfrentadas a
las bases pirimidnicas y la unin se realiza por puentes de hidrgeno en los
pares A=T y tres en los pares G-C
La correspondencia entre las bases es la causa de que las dos cadenas de la
doble hlice de ADN posean secuencias complementarias.
Adems los pares de bases estn horizontales y el eje los atraviesa por el
centro.
Modelo hlice A: En este modelo los pares de bases nitrogenadas estn
inclinados hacia el exterior pero la hlice al igual que la del ADN B es dextrgiro
Modelo hlice z: En este modelo las cadenas de ADN no se enrollan en forma de
doble hlice sino en forma de zig-zag.
ADN es la abreviatura del cido desoxirribonucleico (en ingls, DNA).
Constituye el material gentico de los organismos. El ADN es una molcula que
se encuentra en todas las clulas de los seres vivos y se encarga de codificar
todo lo que nosotros formamos o somos, desde nuestro color del pelo hasta las
protenas que tenemos en nuestra sangre. El ADN es una molcula cargada
que est asociada a protenas y en el caso de los organismos eucariontes est
encerrado dentro de un ncleo.
El ADN est presente en los indicios biolgicos como sangre, semen, saliva,
hueso, pelo, etc.
Es muy importante conocer las condiciones para remisin adecuada de la
muestras.
El Salting- out es uno de los mtodos de extraccin de ADN mas utilizados por
su fcil implementacin, baja toxicidad de los reactivos y permite la visualizacin
del ADN.
-Factores que afectan el rendimiento, calidad y pureza del ADN:
Cantidad de material de partida
Nmero de copias de las molculas de AN
Cantidad de tejido.

Condiciones en las que se encuentra el material de inicio(fresco, congelado,


fijado)
Contaminantes e interferentes en el material biolgico

III) MATERIALES E INSUMOS.


3.1 materiales, reactivos, equipos e instrumentos.

Hgado de pollo
Varilla de vidrio
Mortero
Vaso precipitado
Pipeta
Probeta
Alcohol de 96
Cloruro sdico
2m
Sds detergente .
Arena
Gasa para filtrar

IV) PARTE EXPERIMENTAL.


Hgado y detergente

Triturar medio
hgado de pollo en
un mortero.

Aadir arena, la cual nos


ayudara a romper las
membranas y para
observar que queden los
ncleos sueltos.

Aadir al triturado , 50
centimetros cubicos de agua .
remover hasta hacer una
especie de papillas

Filtraremos varias veces


con la ayuda de una gasa ,
para separar los restos del
tejido que hayan quedado
por romper.

Luego se procede a
medir en una probeta el
volumen filtrado

Aadir el filtrado un
volumen , es igual de
cloruro de sodio 2m
esto conseguiremos
producir el estallido
de los nucleos para
que queden libres las
fibras cromaticas

Procederemos aadir 1 centimetro cubico


de detergente la cual observaremos que se
presenta una especie de gomita eso ser el
adn

Con una pipeta procederemos aadir


50ccc de alcohol de 96 se realizara
este procedimiento de forma que el
alcohol resresbale por las predes
del vaso y se forma 2 capas . la cual
la interface se precipite el adn

Luego procederemos a
separar la muestras
obtenidas .

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Cebolla

Procederemos a
picar la cebolla en
pequeas cortes .

Procederemos a licuar y
agregar un poco de cloruro
de sodio y procederemos a
medir la muestra .

Procederemos a filtrar la
muestra con la ayuda de una
gasa.

Procederemos a colocar con una


pipeta 50cc de alcohol de 96 .
se proceder a realizar este
procedimiento con el fin que el
alcohol resbale por las paredes
del vaso y se formara dos capas.

papaya

Procederemos a triturar
la papaya con ayuda de
un tenedor

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Luego procederemos a
filtrar la muestra
obtenida

Procederemos a colocar con una


pipeta 50cc de alcohol de 96 .
se proceder a realizar este
procedimiento con el fin que el
alcohol resbale por las paredes
del vaso y se formara dos capas.

Procederemos a tomar una


muestra de las fibras que se van
depositando sobre la varilla de
vidrio y depositados en un frasco
anbar .

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V: RESULTADOS.

La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas. En


primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana
plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula. A
continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para
dejar libre el ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas
que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite
en alcohol.
La solucin de lavavajillas y sal ayudada por la accin de la
licuadora es capaz de romper la pared celular y las membranas
plasmtica y nuclear.
Los zumos de pia y papaya contienen un enzima, la papana, que
contribuye a eliminar las protenas que puedan contaminar el ADN.
El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua
pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en
la interfase entre el alcohol y el agua.
El ADN se precipita en el alcohol fuera de la solucin, donde puede ser visto. Adems de permitirnos ver el
ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solucin
acuosa.
El proceso de extraccin de ADN desde una clula es el primer paso para
muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios de biotecnologa.
Los cientficos deben ser capaces de separar suavemente el ADN de sustancias no deseadas que se
encuentran en las clulas, evitando que el ADN se desnature (que se rompa).
El material que se necesita para ello es fcil de encontrar y el procedimiento es sencillo .Cada uno de los
ingredientes tiene su propia funcin. La solucin de sal y jabn sirve para romper la membrana plasmtica y
nuclear e incluso la pared celular. El lquido de lentillas elimina las protenas que degradan el ADN. El
alcohol etlico sirve para precipitar el ADN

Leer
ms: http://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-adn/informeexperimento-extraccion-adn.shtml#ixzz44PxJxesF

Al realizar el procedimiento adecuadamente, resulta que las fibrillas de ADN comenzaron a salir, de un color
blanco precipitado por sobre el alcohol (mezcla Heterognea). Con un alambre doblas y obtenemos y
sacamos del tubo de ensayo el ADN. Si quieres conservar el ADN puede dejarse secar sobre un papel de
filtro.

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En caso de que el ADN de la Muestra Vegetal no se pueda apreciar muy claramente. Tenemos que agitar el
tubo un poco para poderlo apreciarlo mejor.
Si se tiene problemas con el filtro, que no est bien hecho y que no filtra bien, por lo tanto hay que hacer
otro. Tambin puede haber complicaciones con la forma de poner el alcohol de manera que cayera por las
paredes del tubo de ensayo.
Con esto podemos saber cmo es el procedimiento del extracto del ADN, as como si estructura de una
forma fcil y sencilla

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VII:BIBLIOGRAFIA.

http://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimentoextraccion-adn/informe-experimento-extraccionadn.shtml#ixzz44Pxn7VLS

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