CROMATOGRAFIA EN COLUMNA

(Muestra problema 10)

GRUPO 9
Freddy H. Guerra G. fhguerrag@unal.edu.co Brian A. Daz B.
badiazb@unal.edu.co
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA

RESUMEN
El laboratorio de esta sesin est
orientado a realizar el procedimiento de
cromatografa en columna, con el fin de
comprobar los resultados obtenidos de la
prctica anterior. Realizando nuevamente
una cromatografa en capa fina para
verificar que los componentes separados
por este mtodo son los mismos que en
columna. Se usara la muestra problema
del grupo 10, puesto que esta tuvo
separacin de componentes a partir del
uso de Tolueno.
PALABRAS CLAVE:

Tolueno, Factor Rf y hRf, Fase Mvil,

Fase Estacionaria.
I.

INTRODUCCIN

En esta experiencia vamos a comprobar la

existencia de los componentes contenidos
en una muestra problema del grupo 10,
para ello se utilizara el mtodo de
cromatografa en columna; usaremos
Tolueno como fase mvil, con esto se
har un primer anlisis del arrastre de este
solvente sobre la muestra. Luego se har
una cromatografa en capa fina usando
tolueno y los patrones contenidos en la
muestra (segn los resultados del

laboratorio del grupo 10 de la prctica

anterior) para verificar que a travs del
mtodo de la cromatografa en columna
tambin se separan los componentes.
MARCO TEORICO
CROMATOGRAFIA:
Es un mtodo de separacin para la
caracterizacin de mezclas complejas,
empleada para la purificacin y tambin
su identificacin. Ciertas sustancias
slidas,
qumicamente
inertes
(adsorbentes) como la almina (oxido de
aluminio) y del de silicio (silica gel) en
forma de polvo muy fino, de gran
superficie especifica tienen la propiedad
de adsorber una gran variedad de
compuestos.
CROMATOGRAFIA EN COLUMNA:
Est basada en el principio de adsorcin y
desorcin. Si la fase estacionaria es un
slido y la fase mvil un lquido que
fluye por gravedad. Se realiza dentro de
un tubo de vidrio el cual se empaca con el
sorbete que es un slido activo (silicagel).
Que se escoge teniendo en cuenta la
naturaleza de la separacin que se desea
hacer y de la mezcla a separar, la mezcla
se aplica en lo alto de la columna donde

es adsorbida inicialmente, enseguida se

eluye con un solvente el cual transportara
los componentes de la mezcla de acuerdo
con el poder selectivo de adsorcin de la
fase estacionaria; entre mas dbilmente
sea adsorbido un compuesto, ser eluido
mas rpidamente y viceversa.

Procedimiento experimental:
Empacar la Columna

Poner la muestra en la
parte superior de la
columna

CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA:

Fase estacionaria est formada por capas
hasta de 30 mm de espesor. Cuando las
capas son ms gruesas se habla de
cromatografa preparativa en capa. La
fase mvil es un lquido. La
cromatografa de capa fina tambin se
denomina cromatografa en columna
abierta y est basada en el principio de
adsorcin, aunque en menor grado se
presentan tambin fenmenos de particin
cuando las placas contienen cierta
cantidad de agua, fenmenos de
intercambio inico.

Agregar solvente para

acelerar la separacion
Retirar los
componentes
separados
Concentrar los
componentes en la
vitrina de extraccion
Hacer cromatografia
en capa fina

Hacer calculos Rf y hRf

FASE MOVIL:
III.

RESULTADOS

Es el disolvente usado para arrastrar los

componentes qumicos.

DATOS:

FASE ESTACIONARIA:

PLACA TOLUENO:

Es el medio por el cual la fase mvil

arrastrara los componentes contenidos en
la placa.

ds1 frente solvente

dM
dP1

5.0 cm
2.5 cm
2.8 cm

Convenciones a usar:

II.

MONTAJE EXPERIMENTAL

CONVENCION

NOMBRE

FRACCION RECUPERADA

P1

SUDAN IV

Calculo de factor Rf
Componentes

Rf

M
P1

0.56
0.50

Adems el hSt, de la (M1) y (P1) en el

solvente Tolueno nos dio:
hSt =

IV.

ANALISIS DE RESULTADOS

Segn el grupo 10, el tolueno arrastro:

O-nitrofenol y Sudan IV
En la prctica de esta sesin, el O-nitrofenol
fue una fraccin no recuperada, puesto que
posiblemente estaba en una mnima
proporcin, ya que cuando inicio la
separacin en la columna se vio una leve
coloracin amarilla correspondiente al onitrofenol, sin embargo se diluyo en la
columna que no fue posible recuperarla, a
pesar de que se hicieron intentos de
concentrar lo expulsado por la columna.
Dejando as solo para analizar el Sudan IV
que si fue posible recuperar, comprobando en
la cromatografa de capa fina que se estaba en
lo correcto al considerar que esto era Sudan
IV. Adems al grupo 10 el Rf del Sudan IV le
dio muy cercano al valor obtenido en nuestra
prctica, el cual fue: Rf = 0.475, Segn los
resultados podemos decir que el O-nitrofenol
fue adsorbido dbilmente lo cual indica que
es apolar, por el contrario el Sudan IV es
menos apolar, y estaba en mayor proporcin
en la muestra 10.

hRf ( M )
=0.90
hRf ( P1)

Esto nos indica que fueron arrastrados

aproximadamente la misma proporcin.
El error para que no sea exactamente (1)
pudo ser causado por el posible grado de
inclinacin al introducir la placa en la
cmara cromatografica.
V.

CONCLUSIONES

La cromatografa en columna es un
mtodo de separacin muy eficiente, que
depender de cmo haya quedado
empacada la columna, puesto que si no
queda bien uniforme los componentes se
irn por otros caminos.
Se comprobaron las diferencias en usar la
cromatografa en columna y en capa fina.
Como la Cromatografa en capa fina nos
puede caracterizar con ms facilidad una
sustancia, luego en la cromatografa de
columna es ms fcil la separacin de los
componentes.
BIBLIOGRAFIA

Principios de qumica Orgnica,

Guas de laboratorio. Carlos A.
Guerrero, Wilson P. Barreto.

Curso de fundamentos de qumica

orgnica. . Carlos A. Guerrero,
Wilson P. Barreto. Laura M. Moreno