INFORME DE LABORATORIO BIOQUMICA III SEMESTRE

LA ENZIMA CATALASA Y SU ACCION EN TEJIDOS ANIMALES Y

VEGETALES
I.

INTRODUCCION:

Las enzimas son el producto de expresin de genes; por lo tanto, su

actividad
puede verse modulada por el genotipo del individuo. El estudio de la actividad
enzimtica tiene importancia en ciencia bsica, bioqumica y biotecnologa.
As mismo, la presencia de distintas enzimas y su actividad enzimtica diferencial
puede ser empleada como marcador bioqumico de enfermedades
Las enzimas son protenas (con la excepcin de los RNA) producidos por los seres
vivos que catalizan con gran eficacia las reacciones biolgicas, actuando de forma
especfica y regulada. Las anteriores propiedades hacen que las enzimas se puedan
aplicar, de forma muy eficaz, a procesos industriales tales como la obtencin de
frmacos, procesado de alimentos y en analtica. La cintica enzimtica es la parte de
la enzimologa que estudia la velocidad de las reacciones catalizadas
enzimticamente y el efecto que diferentes factores fsico-qumicos sobre dicha
velocidad.
II.

OBJETIVOS:
Comprobar la presencia de la catalasa en los tejidos animales y
vegetales.

III.

REVISIN BIBLIOGRFICA
III.1
Catalasa:
En algunas regiones que no cuentan con sistemas de refrigeracin adecuado
para el almacenamiento y transporte de la leche. Se utiliza el perxido de
hidrgeno como conservador temporal, en un proceso comnmente llamado
"pasteurizacin en fro"; se aaden de 1 a 2 mL de H,O, al 33% por litro y
as! la leche se mantiene en buenas condiciones hasta que llega a la planta
procesadora. Antes de consumirla se debe eliminar el perxido residual que
contiene; esto es de gran importancia, sobre todo para la leche que ser
utilizada en la fabricacin de quesos. ya que de otra manera el H,02 puede
inhibir el crecimiento de los cultivos iniciadores. La "pasteurizacin en fro"
tambin se aplica a la clara de huevo con el mismo fin.
La catalasa (EC 1.11.1.6) cataliza la reaccin 2H,O, ---2H,O +O2 por lo que
se emplea precisamente para destruir el perxido de hidrgeno, por ejemplo
el que la glucosa oxidasa produce durante la transformacin de la glucosa en
cido glunico. La catalasa est presente en gran cantidad de tejidos
animales (como el hgado de bovino) y vegetales, as como en
microorganismos, pero se produce a nivel industrial a partir de Aspergillius
niger.
La catalasa se utiliza como parmetro para estimar la contaminacin
microbiana de diversos alimentos y es indicador de mastitis en las vacas.
Esta enzima est presente en algunas bacterias aerbicas (u gr. BaciUus

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spp .Pseudomonas spp. y enterobacterias), y su concentracin en el medio

(actividad) es proporcional al nmero de microorganismos, por lo que la
medicin de la catalasa refleja de forma indirecta la poblacin microbiana de
algunos productos, como es el caso de los derivados crnicos (Dergal, 2012)
III.2
PROPIEDADES DE LA CATALASA Y EL PEROXIDO
La catalasa es una enzima que protege a las clulas frente al perxido de
hidrogeno producido en el metabolismo del oxgeno. La actividad catalasa se
detecta aadiendo un poco de perxido de hidrogeno. El perxido de
hidrogeno se forma como uno de los productos finales del metabolismo
oxidativo de los hidratos de carbono. La rpida aparicin y produccin
sostenida de burbujas de gas o efervescencia, indica la presencia de catalasa.
La temperatura es otro factor importante en la actividad enzimtica Se
puede decir que a mayor temperatura aumenta la velocidad de la reaccin
hasta que llegar un punto en el que la velocidad disminuye con el aumento
en el calor. (choco, 2013)
III.3
CATALASA ANALISIS BIOQUIMICO
Es una de las enzimas ms abundantes en la naturaleza y se encuentra
ampliamente distribuida en el organismo humano, aunque su actividad vara
en dependencia del tejido; sta resulta ms elevada en el hgado y en los
riones, ms baja en el tejido conectivo y los epitelios, y prcticamente nula
en el tejido nervioso. A nivel celular se localiza en la mitocondrias y los
peroxisomas, excepto en los eritrocitos, donde se encuentra en el citosol.
Esta enzima es una mtalo protena tetramtrica, cuyo peso molecular se
encuentra en el rango de 210- 280 KD. Consta de 4 subunidades idnticas
que se mantienen unidas por interaccin no covalentes. Cada subunidad
protohmico y el Hierro representa un 1,1% y 0,09% respectivamente del
peso molecular de la enzima.
La catalasa es una enzima antioxidante presenta en la mayora de los
organismos aerobios. Cataliza la dismutacin del perxido de hidrgeno
(H2O2) en agua y oxgeno.
La mayora de estas enzimas son homotetrmeros con un grupo Hemo en
cada subunidad. Se ha determinado la estructura cristalogrfica de nueve
catalasas. Algunas catalasas tienen subunidades pequeas (masa molecular =
60KDa) y otras grandes (Masa molculas >80 KDa). Entre stos dos grupos
de catalasas existen diferencias estructurales importantes. Las catalasas
pequeas son menos resistentes a la desnaturalizacin, unen NADPH, tienen
hemo b y se inhiben e inactivan por sustrato. En cambio, las catalasas
grandes tienen un dominio extra en el C- terminal que es semejante a la
flavodoxina, son muy resistentes a la desnaturalizacin, tienen hemo d,
presentan enlaces covalentes inusuales cercanos al sitio activo y son
resistentes a concentraciones molares de H2O2.
En algunas especies de enzimas se contiene molculas nicotinamn adenn
dinucletido fosfatado en su forma reducida (NADPH) ligadas

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estrechamente a la enzima, as se ha demostrado que la CAT humana entre

algunas y la de res estn ligadas a molculas de NADPH, 1 en cada
subunidad y que no existe interaccin directa entre el grupo hemo y
NADPH.
El NADPH
el

III.4

se une a las catalasas con un plegamiento nico entre las

oxidoreductasas. Los aminocidos de la cavidad que une
NADPH estn muy conservados en las catalasas
que unen ese dinucletido (4,9). El anillo de la
adenina del NADPH est en una pequea
cavidad conformada por varios aminocidos
hidrofbicos (lle177, Leu428 y Leu429 en
PMC). El grupo 2 fosfato de la adenina ribosa
interacta con la cadena lateral de una arginina
conservada (Arg182 en PMC). Una histidina
(His284 en PMC) interacta con el grupo
pirofosfato y la nicotidamina. (ALBER, 2009)

La catalasa en las frutas y carnes

Si bien todas las frutas contienen catalasa, algunas tienen ms que otras.
Los kiwis, los duraznos, las cerezas, los damascos, las bananas, el meln
y el anan tienen grandes cantidades de catalasa, mientras que las
manzanas y las uvas tienen menos cantidad. Aunque la catalasa es una de
las enzimas ms resistentes al calor, la coccin disminuye su actividad,
por lo que consumir las frutas crudas brinda mayores cantidades de esta
sustancia. (planetholiday, 2016)
IV.

MATERIALE Y METODOS:
4.1 Materia prima
Hgado de pollo
Pltano
Papa
Manzana
Pera
4.2 Materiales

Tubos de ensayo
Gradilla
Cuchillos
Morteros
Pipetas
Vaso precipitado
Pizeta
Manta calefactora
Termmetro

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Mechero
4.3 Reactivo

Perxido de hidrogeno
Agua
cido ctrico
Bicarbonato de sodio

4.4 Metodologa
EXPERIMENTO 1 (Por influencia de temperatura)
1) Alistar los instrumentos de laboratorio para realizar la experimentacin
2) Preparar las muestras de (Pera, papa, pltano, manzana y hgado de pollo), tanto
como en el rotulado de los vasos precipitados a utilizar en total 5.

3) En un vaso precipitado calentar agua en una manta calefactora a una temperatura

de 85 C con la ayuda de un termmetro.

4) Picar unos cuantos trozos de cada muestra y poner en un vaso precipitado por
muestra.
5) En cada vaso precipitado con muestra echar el agua calentada hasta que tape la
muestra.

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6) Cada muestra en sus respectivos vasos precipitados poner en la manta

calefactora por 30 segundos y sacar.

7) Por cada alimento escoger una cierta cantidad de muestra, para poder meterlas
en los tubos de ensayo.
8) En una probeta de 50 ml alistar Perxido de Hidrogeno hasta el tope (aforo),
para poder despus echar aproximadamente 5 ml en cada tubo de ensayo,
observar y anotar.

*Repetir los pasos a temperatura de 60 C y a temperatura ambiente, pero viendo

algunas restricciones con el hgado de pollo.
En la segunda prueba, el hgado de pollo: cuando este en el vaso precipitado en la
manta calefactora dejarlo coccionar a un tiempo determinado.

EXPERIMENTO 2 (Por influencia del Ph)

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1) Alistar los instrumentos de laboratorio para realizar la experimentacin.

2) Preparar la solucin de Bicarbonato de sodio ( al 0.1%) a un (PH 9), cido
ctrico a un (Ph 3) y agua oxigenada.(cada solucin con sus respectivo ph).

100mL
X

100%
0.1%

X= 0.1gr
3) Despus de preparar las soluciones tanto como Bicarbonato de sodio, cido
ctrico y agua oxigenada, alistar trozos de cada producto (Pera, papa, pltano,
manzana y hgado de pollo), echar las soluciones segn el grafico de abajo por
cada muestra.

4) Poner de cada alimento unas pequeas muestras en cada tubo de ensayo y echar
5 ml de perxido de hidrgeno, observar y anotar

V.

RESULTADOS Y DISCUSIONES

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TEJIDO

HIGADO

TEMPERATURA(C)
60
Temperatur
a ambiente
+++
++++
+++++

ACTIVIDAD
DE LA
CATALASA
SI

PERA

++

+++

++++

SI

PAPA
PLATANO
MANZAN
A

+
0
0

++
+
+

++
++
++

REGULAR
POCO
POCO

85

OBSERVACIONES

Bastante presencia de catalasa.

Hay presencia de gas, no se ha
desactivado la enzima, lo que
significa que se debe poner ha mayor
temperatura y mayor tiempo, para
inactivar la enzima.
Presencia de gas
Se necesita mas temperatura para
desactivar la catalasa
Poca presencia de gas
Poca presencia de gas
Cuando se somete a mayor
temperatura la enzima se desactiva.

EFECTO DE LA TEMPERATURA

TABLA N 1. Fuente: Elaboracion propia

Nota:
+++++: Bastante presencia de catalasa
+++: Mucha presencia de catalaza
++: Presencia de catalasa
+: Poco presencia de catalasa
0: No hay catalasa

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INFLUENCIA DEL pH
TEJIDO

pH
3

HIGADO

++

+++

+++++

ACTIVIDAD
DE LA
CATALASA
SI

PERA

++

++++

SI

PAPA

+++

POCO

MANZANA

++

POCO

PLATANO

++

POCO

OBSERVACIONES

El hgado contiene alta cantidad de enzimas es por ello

que al someterlo a un pH acido la enzima no se desactiva
sigue reaccionando y descomponiendo el H2O2;sin
embargo, si est a Ph alcalino la catalasa se activa
demasiado.
Se observa que esta fruta contiene una gran cantidad de
enzimas a diferencia de otras; ya que, al someterlo a un pH
acido sus enzimas siguen activas.
La papa necesita un pH alcalino para que se activen las
enzimas y se descompongan el perxido de hidrogeno. Lo
que significa que el cido ctrico a desactivado algunas
enzimas y no hay suficiente sustrato
Es una fruta que tiene muy pocas enzimas, a Ph acido sus
enzimas se desactivan.
El cido ctrico a desactivado las enzimas del pltano, ya
que, no se descompuso el perxido de hidrogeno.
TABLA N2 Fuente: Elaboracion propia.

Nota:
+++++: Bastante presencia de catalasa
+++: Mucha presencia de catalaza
++: Presencia de catalasa
+: Poco presencia de catalasa
0: No hay catalasa
VI.

CONCLUSIONES
Se pudo comprobar la presencia de la catalasa en los tejidos
animales y vegetales empleando dos pruebas uno utilizando la
temperatura para poder inactivar las enzimas presentes en el alimento
otro con la intervencin del Ph de las misma manera en su forma
acida.

VII. BIBLIOGRAFA
- ALBER, L. (2009). Bioquimica de las enzimas. scrib, 23.
-

choco, M. (2013). Actividad de la catalasa. Scrib, 5.

Dergal, S. V. (2012). Quimica de los alimentos. Mxico: Pearson Educacion de

Mexico.

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planetholiday. (2016). planetholiday. Obtenido de

http://www.planetholiday.net/vegetales-y-frutas-fuentes-de-catalasa/