25/08/2011

Glucoproteinas y Proteoglicanos

Glucosilacin de protenas

Glucoproteinas

Proteoglicanos

Protenas
conjugadas a
azcares sin unidad
repetitiva
Protenas
conjugadas a
polisacridos con
unidades repetidas
en serie

Proteina >> carbohidrato

Carbohidrato >> protena

Unidades Repetidas

Glucosaminoglicanos
Mucopolisacridos

Glucoprotenas

Un nmero alto de protenas se encuentran unidas

covalentemente a uno o ms carbohidratos, formando
glicoprotenas
Abarca un amplio espectro de protenas con diferentes
funciones: enzimas, protenas de transporte,
receptores, hormonas , protenas estructurales.
El contenido de carbohidratos es variable, desde 1
hasta 90% del peso de la protena.
Los carbohidratos pueden estar distribuidos
uniformemente en la estructura proteica o estar
concentrados en una regin particular de la protena.

La mayor parte de las protenas que son

secretadas o unidas a la membrana plasmtica

se encuentran glucosiladas.
En las membranas los oligosacridos se
asocian covalentemente a protenas formando
glucoprotenas, y en menor proporcin a
lpidos formando glucolpidos.

Glucoprotenas

Glucoprotenas

La parte modificada en las protenas de

La cadena glucdica unida a las glicoprotenas

membrana es la porcin extracelular.

Las protenas intracelulares se encuentran
menos frecuentemente modificadas por
glcidos, sin embargo esta modificacin
les confiere a las protenas intracelulares
caractersticas muy particulares.

generalmente tiene menos de 15 residuos de

azcar y en algunos casos slo 1.
La diferencia entre proteoglicanos y
glucoprotenas reside en el tipo y nivel de
modificacin por carbohidratos.
En el caso de las glucoprotenas la
modificacin por los carbohidratos es
raramente compleja
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Los azcares predominantes en las

glucoprotenas son
Glucosa
(Glc)
Galactosa
(Gal)
Manosa
(Man)
Fucosa
(Fuc)

Acido silico o N-acetil neuramnico

N-acetil glucosamina
(GlcNAc)

NANA o Neu5Ac
Es un monosacrido cido
Deriva del cido
neuramnico (de 9C)
mediante acetilacin
Se sintetiza por
epimerizacin de la UDP-Nacetilglucosamina y
reaccin con el PEP
Es transferido unido a CMP

N-acetil galactosamina
(GalNAc)
cido N-acetilneuramnico
cido silico
(Neu5Ac o NANA).
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Tipo de enlaces

Enlace N-glucosdico

Los carbohidratos se unen a la protena

La unin N-glucosdica es con el N del grupo

mediante enlaces

amida de la asparagina.

N-glucosdicos (Asn)
O-glucosdicos (Ser, Thr, OH-Lys)

En los enlaces N-glucosdicos el glcido es GlcNAc.

Enlace N-glucosdico con GlcNAc

10

Enlace N-glucosdico

Glucoprotenas con enlace N-glucosdico

El enlace predominante en las glucoprotenas de

Contienen una regin

clulas de mamfero es el N-glucosdico.

El sitio de unin de los carbohidratos a las
protenas se encuentra dentro de una secuencia
consenso de aminocidos
Asn-X-Ser/Thr,
donde X es cualquier aminocido excepto prolina.

Aproximadamente el 65% de todas las protenas

central (core) comn

de carbohidratos
unidos a la cadena
polipeptdica.

Esta regin consiste

en 2 residuos GlcNAc
y 3 de manosa.

contienen por lo menos una secuencia consenso de

este tipo.
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N-glucosidico

Una variedad de otros azcares estn unidos a

este centro y comprenden a 3 familias principales

Alta manosa

contienen manosa en torno a la parte central en

cantidades variables.

Hbrido

Complejos

contienen diferentes azcares y amino azcares,

pero no cido silico

es similar al tipo hbrido, pero adems contienen

cido silico en cantidad variable.

Complejo

Hbrido

Alta manosa

13

Enlace O-glucosdico

14

Enlace O-glucosdico

El enlace O-glucosdico es con el O del

La unin de carbohidratos a hidroxilisina se

encuentra fundamentalmente en el colgeno.

grupo hidroxilo de serina, treonina o

hidroxilisina.

Unidos a 5-OH Lys se pueden encontrar tanto el

monosacrido galactosa como el disacrido
lactosa.

15

Enlace O-glucosdico

16

Enlace O-glucosdico

Formando parte de enlaces O-glucosdicos con Ser

y Thr se encuentra GalNAc.

La unin de carbohidratos a las protenas

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citoslicas y/o nucleares se produce mediante

enlace O-glucosdico de GalNAc a residuos de
Ser o Thr.
La unin es catalizada por la enzima O-GalNAc
transferasa, OGT.
Varios factores de transcripcin y la RNA
polimerasa II se encuentran modificadas por
O-GalNAc.
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Mecanismo de asociacin de
Carbohidratos a Protenas

Sntesis

El componente proteico de todas las

Los azcares empleados para la sntesis de las

glucoprotenas es sintetizado a nivel de

polisomas del retculo endoplsmico (RE)
Para las N-glucoproteinas la adicin de los
gupos glucosdicos es cotraduccional en la luz
del RE y contina en el complejo de Golgi.
La unin de azcares en enlace O-glucosdico
ocurre a nivel post-traduccional en el Golgi.

glucoprotenas se activan mediante la unin a

nucletidos.

Glucosa y GlcNAc se unen a UDP

Manosa se une a GDP.
Acido silico a CMP

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Sntesis del enlace O-glucosdico

Sntesis del enlace O-glucosdico

La sntesis del enlace O-glucosdico se produce va la

adicin paso a paso de los azcares activados

mediante la adicin de nucletidos directamente a la
cadena polipeptdica.
Los azcares activados por unin a nucletidos se
encuentran unidos a UDP (Glc, GlnNAc), GDP
(manosa) o CMP (NANA).

La unin del azcar es catalizada por

glucosiltransfereasas (OGT) especficas.

Las evidencias indican que cada tipo especfico
de unin de carbohidrato en glucoprotenas
con enlace O-glucosdico es el resultado de
diferentes OGT.

21

Sntesis del enlace N-glucosdico

Dolicol

Como vimos antes las tres clases principales de

22

Los dolicoles son poliisoprenoides (C80-C100)

que contienen de 17 a 21 unidades de
isopreno, en las cuales la unidad terminal se
encuentra saturada.

glucoprotenas con enlace N-glucosdico son alta

manosa, hbridos y complejos.
La caracterstica principal que distingue la clase
compleja es la presencia de cido silico,
mientras que la clase hbidos no contiene cido
silico.
En la adicin de los azcares mediante enlace Nglucosdico se requiere un intermediario lipdico,
el dolicol fosfato.

El parntesis encierra una unidad de isopreno.

El fosfato en el dolicol fosfato se encuentra unido al grupo
hidroxilo.

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Glc3Man9GlcNAc2-P-P-dolicol

Glucolpidos con enlace N-glucosdico

La formacin del enlace GlcNAc-Asn en las protenas

se produce en el RE por la adicin cotraduccional de

una estructura pre ensamblada de carbohidratos que
ingresa como un intermediario carbohidrato-dolicol.
El pre ensamblaje de la estructura central de
carbohidratos comprende 3 residuos de glucosa
unidos a un grupo ramificado de 9 residuos de
manosa que a su vez se encuentran unidos a 2
residuos de GlcNAc unidos a dolicolpirofosfato
(Glc3Man9GlcNAc2-P-P-dolicol)

Esta estructura comunmente se refiere como

oligosacrido asociado a lpido, mientras que la
estructura glucdica se conoce como bloque de
oligosacrido.
En clulas de mamfero la importancia del residuo de
glucosa terminal es evidente por el hecho de que la
transferencia de Man9GlcNAc2-P-P-dolichol es unas 25
veces menos eficiente que la de la estructura
completa. Adems, estructuras que contienen tres
residuos de glucosa terminal, pero no la estructura
completa Man9GlcNAc2, son transferidas
efectivamente por la oligosacaril transferasa.

Dolicol-PP
25

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N-glucosdico

Sintesis del dolicol-P-P-oligosacarido

La sntesis del bloque de

oligosacrido comienza sobre
la cara citoplasmtica de la
membrana del RE, donde se
agregan las 2 GlcNAc (ingresan
como UDP-GlcNAc) y 5 Man
(GDP-Man).
Luego la estructura pasa al lado
luminal de la membrana del RE,
donde se agregan 4 resduos
de Man y 3 de Glc unidos a
dolicol-P.

Entonces el
oligosacrido es
transferido del
dolicol que acta
como
tranportador a un
residuo Asn de la
protena que
est siendo
sintetizada por
los polisomas del
RE.

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Glicoprotenas con enlace N-glucosdico

Glucosidasas remueven algunos azcares, en

particular la Glc necesaria para la sntesis
En el aparato de Golgi contina el agregado de

otros azcares como GlcNAc, Gal, Fuc y NANA

por accin de glucosiltransferasas especficas
En algunas N-glucoprotenas el proceso es
extenso formando oligosacridos grandes con
varios tipos de residuos glucdicos, mientras
que en otras es corto, generando gran
diversidad de productos finales.

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Funcin de las glucoprotenas

Las glucoproteinas sobre la superficie celular son

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importantes para la comunicacin inter celular, para

mantener la estructura celular y para el auto- y
hetero-reconocimiento por el sistema inmune
Por tanto alteraciones a nivel de las glucoprotenas de
la superficie celular puede producir efectos
fisiolgicos profundos

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Enzimas con destino lisosomal

Glucoprotenas y grupos sanguneos

Las enzimas destinadas al lisosoma son dirigida al

Los antgenos de los

organelo por una modificacin especfica.

Durante su trnsito por el aparato de Golgi se
modifica por residuos de manosa fosforilada en la
posicin 6: Man-6-P-proteina.
Un receptor especfico de Man-6-P (MPR) est
presente en la membrana del aparato de Golgi que
dirige las protenas con Man-6-P al lisosoma.

grupos sanguneos ABO

son molculas de
carbohidratos de
glucolpidos de la
superficie de clulas y los
carbohidratos de
glucoprotenas
plasmticas.

Cuadrado blanco = GlcNAc,

diamante blanco = Gal,
cuadrado negro = Fuc,
diamante negro = cido sialico (NANA)
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Glicoprotenas y grupos sanguneos

Cuando se encuentran en la superficie de las clulas los

carbohidratos ABO se encuentran unidos a esfingolpidos y
son por tanto glicoesfingolpidos.
Cuando los carbohidratos ABO se asocian a protenas
formando glicoprotenas se encuentran en el suero y se
denominan forma secretada.
Algunos individuos producen la forma glicoproteica de los
antgenos ABO mientras que otros no.
Esta propiedad distingue secretores de no secretores, una
propiedad que tiene importancia forense, por ejemplo en el
caso de violacin.

33

Varios virus (HIV entre otros), bacterias y

parasitos han explotado la presencia de
carbohidratos en la superficie celular para su
beneficio, principalmente empleandolos como
portales para ingresar a las clulas.

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Diversas patologas se relacionan con errores

congnitos en las enzimas encargadas de la
degradacin de glicoprotenas

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Proteoglicanos
Los proteoglicanos son una gran familia de
glucoprotenas formadas por un ncleo proteico al que
se encuentran unidos covalentemente un tipo especial
de polisacridos denominados glucosilaminoglicanos
(GAG).
Los GAGs son los heteropolisacridos ms abundantes
del cuerpo.
Se encuentran unidos a la membrana celular en contacto
con la matriz extracelular.
Actan como moduladores de seales en procesos de
comunicacin entre la clula y su entorno

Proteoglicanos

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Glucosaminoglicanos

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Glucosaminoglicanos

Son polisacridos largos sin ramificaciones

Estn formados por repeticiones de una unidad
de disacridos.
Las unidades de disacridos contienen,
N-acetilgalactosamina (GaINAc)
N-acetilglucosamina (GlcNAc) y
un cido urnico como el glucurnico
idurnico.
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Son polisacridos largos sin ramificaciones

Estn formados por repeticiones de una unidad
de disacridos.
Las unidades de disacridos contienen,
N-acetilgalactosamina (GaINAc)
N-acetilglucosamina (GlcNAc) y
un cido urnico como el glucurnico
idurnico.
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Glucosaminoglicanos
Los GAGs estn principalmente ubicados en la
superficie de las clulas o en la matriz
extracelular (MEC).
Junto con la viscosidad que brindan los GAGs
tambin se observa una compresibilidad baja la
cual hace que estas molculas sean ideales como
lquido lubricante de las articulaciones.
Al mismo tiempo, su rigidez brinda integridad
estructural a las clulas y provee vas entre las
clulas, permitiendo la migracin celular.

Poseen grupos carboxilo (COO-) y grupos

sulfatos (SO3-), cuyas cargas negativas
permiten una fuerte y abundante
asociacin con molculas de agua,
aportando una gran hidratacin a la matriz
extracelular.

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Proteoglicanos

Estructura

En principio los proteoglicanos poseen una heterogeneidad

potencial casi ilimitada.
Cada protena central vara mucho en cuanto al nmero y al
tipo de cadenas de glucosaminoglicanos que se une a ellas.
Adems en cada glucosaminoglicano el patrn repetitivo de
los disacridos puede ser modificado por una compleja
distribucin de grupos sulfatos .
Son un grupo muy diverso de glicoprotenas muy
glicosiladas cuyas funciones dependen tanto de su protena
central como de sus cadenas de glucosaminoglicanos.
Salvo el cido hialurnico los dems glucosaminoglucanos
estn unidos covalentemente a una protena formando
proteoglicanos.

La mayora de los GAGs estn unidos a protenas

centrales y as forman proteoglicanos.
Estos GAGs se extienden perpendicularmente
desde el centro como una estructura tipo cepillo.
La unin de los GAGs a la protena central
involucra un trisacrido especfico compuesto de
2 residuos de galactosa y un residuo de xilosa
(GAGGalGalXylOCH2proteina).

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Estructura
El trisacrido de unin est acoplado a la
protena central a travs de una unin Oglucosdica a un residuo de Ser en la protena.
Algunas formas de queratan sulfatos estn
unidos a la protena central a travs de una
unin N-glucosdica a Asn.
Las protenas centrales de los proteoglicanos
son ricas en residuos S y T lo cual permite la
adhesin de mltiples GAG.
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Los proteoglicanos se pueden

clasificar por el tamao

Enlaces gluco proteicos

CH2 OH

O
O

HN

NH2
CH2

CH

COOH

Asn

Glc

OH

H
O H

OH
H

Tipo I

OH

CH2

CH

O H
HN

NAc

CH2 OH

COOH

Ser

OH
H

CH3

NH2
O

Glc

Enlace N-Glicosdico con Asn

CH2 OH
H

HN

NH2
O

H
OH

NAc

Tipo II Enlace O-Glicosdico con Ser(Thr)

CH

CH2

OH

CH3

Glc

OH

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CH2

H2 N

CH

CH2

HOLys
COOH

Agrecan, el principal proteoglicano en el

cartlago, pertenece al grupo de los
proteoglicanos grandes.
Veriscan, que se encuentra presente en
diferentes tejidos como vasos y piel, tambin
es de gran tamao.
Existen proteoglicanos pequeos entre los que
se incluyen decorin, biglican, fibromodulina y
lumican.

Tipo III O-Glicosdico con 5-HOLys

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Clasificacin segn el tipo de GAG

Glucosaminoglicanos
Los GAGs de significancia fisiolgica son

Todos estn formados por repeticiones de

disacridos:
Proteoglicanos tipo heparn sulfato

N-acetilglucosamina y cido glucurnico unidos

mediante un enlace 14.

Proteoglicanos tipo condroitn sulfato

condroitin sulfato
dermatan sulfato
queratan sulfato
Heparina y heparan sulfato
el cido hialurnico

A pesar de que cada GAG tiene un componente

disacrido que predomina , existe una
heterogeneidad entre los azcares que forman
parte de cualquier clase de GAG.

Ac. Glucurnico y GlcNAc (13)

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Condroitina 4 y 6sulfatos
Compuesto de D-glucoronato y GalNAc-4- o 6sulfato unin tipo (1, 3)

cartlago, hueso, vlvulas cardiacas

Es el GAG ms abundante
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Dermatan sulfatos

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Queratan sulfatos
Compuestos de galactosa + GlcNAc-6-sulfato
unin tipo (1, 4)

Compuestos de L-iduronato (muchos

contienen sulfato) + GalNAc-4-sulfato
unin tipo (1, 3)

Crnea, hueso, cartlago agregado con condroitin

sulfatos

Piel, vasos sanguneos, vlvulas cardiacas

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Heparina y Heparan Sulfatos:

Hialuronatos

Compuesto de iduronato-2-sulfato (D-glucuronato-2-sulfato)

y N-sulfo-D-glucosamina-6-sulfato
unin tipo (1, 4)
(heparan tienen menos sulfato que las heparinas)

Compuestos de D-glucoronato + GlcNAc

unin tipo (1, 3)

Heparn: Membranas basales, componentes de las superficies

celulares
Componente de los grnulos intracelulares de los mastocitos
que recubren las arterias de los pulmones, hgado y piel

El cido hialurnico es nico entre los

GAGs ya que no contiene ningn sulfato y
no se encuentra unido de manera
covalente a ninguna protena como un
proteoglicano.
Sin embargo, si es parte de los complejos
que se forman de manera no covalente
con proteoglicanos en la LEC.
Los polmeros de cido hialurnico son
de gran tamao (con pesos moleculares
entre 100.00010.000.000) y pueden
desplazar un gran volumen de agua. Esta
propiedad les permite actuar como
lubricantes y absorbentes de golpes.

55

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Sntesis

Caractersticas de los GAGs

GAG

Localizacin

Caractersticas y funcin

Hialuronato

Lquido sinovial, humor vtreo,

MEC del tejido conectivo laxo

Polmeros grandes,
absorben golpes

Condroitin sulfato

cartlago, hueso, vlvulas cardiacas GAG ms abundante

Heparan sulfato

Membranas basales, componentes Contiene ms glucosamina

de las superficies celulares
acetilada que la heparina

Heparina

Componente de los grnulos

intracelulares de los mastocitos
que recubren las arterias de los
pulmones, hgado y piel

Dermatan sulfato

Piel, vasos sanguneos, vlvulas

cardiacas

Keratan sulfato

Crnea, hueso, cartlago agregado

con condroitin sulfatos

Contienen ms sulfato que

los heparan sulfatos

La cadena de protena es sintetizada en

ribosomas unido a la membrana
acumulndose en la luz del retculo
endoplsmico.
La unin del glucosaminoglucanos a la
protena tiene lugar en el Golgi.

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Funcin

En la matriz extracelular

Dada su diversidad estructural los

proteoglucanos tambin tienen una diversidad
de funciones tanto en la matriz extracelular
como en la clula.

Mantienen hidratada la matriz extracelular

Las cadenas de GAG pueden generar geles con poros de
diferente tamao, por lo que pueden intervenir como filtro
selectivo en la regulacin del trfico de molculas y de
clulas, seleccionndolas en funcin de su tamao, su carga
o ambas cosas.
Los glucosaminoglucanos y proteoglucanos se asocian
formando enormes complejos polimericos y tambin se
asocian con otros elementos de la matriz extracelular como
el colgeno y con redes proteicas de la lmina basal
formado estructuras muy complejas.
El agrecan rodea el cartlago y la ayuda a soportar las
fuerzas de compresin

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En la membrana plasmtica
Las cadenas de polisacridos son muy rgidas e
hidroflicas por lo que tienden a ocupar grandes
volmenes en relacin a su masa formado geles
su elevada carga negativa hace que atraigan
cationes, sobre todo Na+, que debido a su
capacidad osmtica hace que se retengan
grandes cantidades de agua en la matriz
extracelular, produciendo una presin de
turgencia que capacita a la matriz a oponerse a
fuerzas de compresin.

Algunos proteoglucanos son componentes integrales de

las membranas plasmticas.
Pueden actuar como correceptores de la superficie
celular, interviniendo tanto en la unin celular a la matriz
extracelular como iniciando las respuestas de las clulas
a algunas protenas de sealizacin.
Los proteoglucanos desempean un papel importante
en la sealizacin celular ya que unen diversa molculas
de sealizacin.
Tambin se unen y regulan las actividades de otros tipos
de protenas de secrecin, como enzimas proteolticas y
sus inhibidores.
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Importancia Clnica (algunos ej.)

Importancia Clnica

La heparina abunda en los grnulos de los

mastocitos que recubren los vasos sanguneos. La
liberacin de heparina de estos grnulos en
respuesta a una lesin y su ingreso al suero
conlleva a la inhibicin de la coagulacin
sangunea:

Varias enfermedades genticas, por ejemplo la

enfermedad del almacenamiento lisosomal,
resultan de defectos en las enzimas lisosomales
responsables del metabolismo de los GAGs
asociados a la membrana. Estas enfermedades,
conocidas como mucopolisacaridosis resultan en
una acumulacin de GAGs dentro de los
lisosomas de las clulas afectadas.
Existen al menos 14 tipos de enfermedades
asociadas al almacenamiento lisosomal que
afectan al catabolismo de los GAG..

La heparina libre activa a la antitrombina III, la cual

inhibe todas las proteasas de serina de la cascada de
coagulacin.
La heparina inyectable se emplea en las terapias anticoagulantes.
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