DETERMINACION DE ESPECTRO DE MAXIMA

ABSORCION POR ESPECTROFOTOMETRIA UV

VIS
MICHAEL GONZALEZ, ALEJANDRA PAI, VIVIAN PINEDA, LUIS

WALTEROS.

662078
Qumica Aplicada a la Industria, SENA- CTB
Bogot D.C

RESUMEN
El objetivo principal de esta
prctica fue determinar la longitud
de onda de mxima absorcin
para diferentes compuestos por
medio de espectrofotometra UV
Vis.
En donde se comenz con la
preparacin del CuSO4 (sulfato de
cobre) 0,1M para toda la ficha. Se
pesaron 1,60g de CuSO4 y se
llevaron a un baln aforado, en
donde se llevo a su respectivo
aforo con agua destilada. Luego se
preparo el NH3 (amoniaco), esta
fue preparada para toda la ficha.
Luego con una pipeta se tomaron
5ml de CuSO4 y se agregaron 2ml
de NH3; se necesitaba que esta
solucin llegara a un volumen de
25ml, as que se aadieron 18ml
de agua destilada para completar
dicha solucin.
Se preparo un blanco que contena
2ml de NH3 y 25ml de agua
destilada. Se llevo esto al
espectrofotmetro y se obtuvo una

absorbancia de 0,022 y un % de
transmitancia de 95,1%.
El procedimiento fue llevar la celda
con el blanco preparado al
espectrofotmetro. Este se
configura para que siempre su
valor de absorbancia sea de 0,000
y aqu de inmediato se toma una
pequea cantidad de analito
correspondiente a CuSO4 que
llegue al ras de la celda y se
introduce en el espectrofotmetro
comenzando a medir la
absorbancia de esta sustancia
desde 400nm hasta 700nm. La
medicin se realiza cada 10nm
cuando llega a 560nm, luego cada
5nm hasta llegar a 640nm y por
ultimo contina cada 10nm hasta
llegar a 700nm. Mediante el
proceso es importante introducir
primero el blanco antes de cada
medicin en cada nm.
Por ltimo se procede a graficar
los datos obtenidos.
ABSTRACT
The main objective of this practice
was to determine the wavelength

of maximum absorbance for

different compounds by UV Vis
spectrophotometry.
Where he started with the
preparation of CuSO4 (copper
sulfate) 0.1M for the whole tab.
They were weighed 1,60g of
CuSO4 and taken to a volumetric
flask where their respective mark
with distilled water I took. Then
prepare the NH3 (ammonia), this
was prepared for the whole tab.
Then pipette 5ml were taken
CuSO4 and added 2ml of NH3; This
solution was needed to reach a
volume of 25ml and 18ml added to
distilled water to complete the
solution.
A white NH3 containing 2ml and
25ml of distilled water was
prepared. I took this
spectrophotometer and an
absorbance of 0.022 and a%
transmittance of 95.1% was
obtained.
The procedure was to take the cell
with the prepared blank
spectrophotometer. This is
configured to always absorbance
value of 0.000 and this is
immediately a small amount of
analyte corresponding to CuSO4
arrives flush with the cell is taken
and placed in the
spectrophotometer starting to
measure the absorbance of this
substance from 400nm to 700nm.
The measurement is performed
when each 10nm 560nm reached,
then every 5 nm up to 640nm and
finally continues every 10nm up to
700nm. Through the process it is
important to introduce the first
blank before each measurement in
each nm.
Finally we proceed to plot the data.

PALABRAS CLAVE:
Espectrofotmetro, sulfato de
cobre, amoniaco, blanco,
absorbancia, longitud de onda,
transicin electrnica.
KEY WORDS: Spectrophotometer,
copper sulfate, ammonia, white,
absorbance, wavelength,
electronic transition.

INTRODUCCION
En este laboratorio utilizaremos el
mtodo de la espectrofotometra
con la cual analizaremos la
concentracin de analito de una
muestra mediante una serie de
pasos Para ello, se puede utilizar
el mtodo instrumental de
anlisis, como es la
espectrofotometra para medir la
absorcin de radiacin ultravioleta
y visible que interacta con la
materia (tomos y molculas), la
misma es considerada una tcnica
cuali y cuantitativa basndose en
la medicin del color o de la
longitud de onda de una radiacin
e intensidad de la misma.
Desde hace muchos aos se ha
usado el color como ayuda para
reconocer las sustancias qumicas;

al reemplazar el ojo humano por

otros detectores de radiacin se
puede estudiar la absorcin de
sustancias, no solamente en la
zona del espectro visible, sino
tambin en ultravioleta e
infrarrojo. Se denomina
espectrofotometra a la medicin
de la cantidad de energa radiante
que absorbe un sistema qumico
en funcin de la longitud de onda
de la radiacin, y a las mediciones
a una determinada longitud de
onda. La teora ondulatoria de la
luz propone la idea de que un haz
de luz es un flujo de cuantos de
energa llamados fotones; la luz de
una cierta longitud de onda est
asociada con los fotones, cada uno
de los cuales posee una cantidad
definida de energa.
Si hacemos incidir un haz de luz
blanca (que contiene todas las
longitudes de onda) sobre un
objeto, ste absorber ciertas
longitudes de onda y reflejar
otras, siendo stas ltimas las
responsables del color. Se dice que
este color (observado) es
complementario del que se
percibira si la luz absorbida se
pudiera detectar
MARCO TEORICO.
En la prctica se usaron los
reactivos que a continuacin
especificaremos su composicin y
funcionalidad.

SULFATO DE COBRE
(CuSO4)
Es un compuesto qumico
derivado del cobre que
forma cristales azules,
solubles en agua y metanol
y ligeramente solubles en
alcohol y glicerina. Su forma

anhdrida (CuSO4) es un
polvo verde o gris-blanco
plido, mientras que la
forma hidratada
(CuSO45H2O) es azul
brillante como lo
observamos en la prctica.
Tiene numerosas
aplicaciones: como alguicida
en el tratamiento de aguas,
fabricacin de concentrados
alimenticios para animales,
abonos, pesticidas,
mordientes textiles,
industria del cuero,
pigmentos, bateras
elctricas, recubrimiento
galvanizados
(recubrimientos de cobre
cido por
electrodeposicin), sales de
cobre, medicina,
preservantes de la madera,
procesos de grabado y
litografa, reactivo para la
flotacin de menas que
contienen zinc, industria del
petrleo, caucho sinttico,
industria del acero,
tratamiento del asfalto
natural, colorante cermico,
y preparados medicinales
como el agua de alibour.
Txico por ingestin, induce
el vmito. Irritante en
contacto prolongado con la
piel, en este caso lavar la
zona afectada con agua
abundante. En contacto con
los ojos lavar como mnimo
durante 15 minutos; en caso
de inhalacin accidental,
llevar a la persona afectada
a un espacio libre, donde
pueda proporcionarse de
aire fresco.
Reacciona violentamente
con hidroxilamina, causando

peligro de incendio.
Reacciona con magnesio,
formando gas
inflamable/explosivo
(hidrgeno - vase ICSC
0001)
Ataca el hierro y el zinc en
presencia de agua.

AMONIACO. (NH3)
Es un compuesto qumico
en estado natural gaseoso,
ampliamente utilizado en la
industria qumica y como
refrigerante. Se disuelve
con facilidad en agua
formando el agua
amoniacal. Es una sustancia
muy corrosiva y txica por
lo que su manejo requiere
medidas de seguridad para
evitar daos a la salud e
incluso la muerte.
El amonaco es encontrado
en pequeas cantidades en
la atmsfera, siendo
producido por la
putrefaccin de la materia
nitrogenada proveniente de
plantas y animales. El
amonaco y sales de amonio
tambin se encuentran en
pequeas cantidades en el
agua de lluvia, donde el
cloruro de amonio y sulfato
de amonio se encuentran en
zonas volcnicas.
Entre las principales
funciones y usos del
amonaco se encuentran:
a Produccin de pulpa
y papel.
b Productos de
limpieza: suele ser
utilizado como
disolvente.
c Fertilizante agrcola:
es comnmente

f
g

usado como
fertilizante en forma
de
amonaco anhidro y
como abono.
Mantener las
fbricas/sectores de
produccin de
amonaco cerrados.
Mantener los
recipientes de
depsito alejados del
calor directo.
Cimentar todos los
equipos.
Mantener alejado
todos los materiales
incompatibles como
agentes oxidantes,
agentes reductores,
metales y cidos.
Mantener a los nios
alejados del depsito
de amonaco y del
equipo de manipuleo.

De acuerdo al espectrofotmetro
existen varios mtodos de anlisis
que estn basados en la medida
de la radiacin electromagntica
ya sea absorbida o emitida por
una sustancia. Estas funciones se
clasifican en:
METODOS DE ABSORCION:
estos se basan en la disminucin
de la potencia de un haz de
radiacin electromagntica al
interaccionar con una sustancia.
METODOS DE EMISION: se
basan en la radiacin que emite
una sustancia cuando es excitada
previamente por medio de otro
tipo de energa (trmica,
elctrica).

METODOLOGIA

Preparar una sln

de 100 ml 0,1 M

Tomar con una

Sulfato de cobre
5ml de la sln
anterior + 2
de NH3 + 25
de agua

Sulfato de cobre
Sulfato de cobre
PREPARAR UN

2ml de
Amoniaco +
25ml de agua
Medir
absorbancia de
400 a 700 nm

RESULTADOS

nm
400
410
420
430
440
450
460
470
480
490
500
510
520
530
540

Absorbanci
a
0,002
0,002
0,007
0,002
0,004
0,009
0,017
0,027
0,042
0,061
0,084
0,107
0,137
0,171
0,203

PREPARAR UN

550
560

0,232
0,254

nm
650
660
670
680
690
700

Absorbanc
ia
0,267
0,256
0,24
0,227
0,211
0,195

nm
565
570
575
580
585
590
595
600
605
610
615
620
625
630
635
640

Absorban
cia
0,264
0,274
0,283
0,29
0,296
0,301
0,304
0,305
0,304
0,303
0,301
0,299
0,296
0,293
0,288
0,283

ANALISIS DE RESULTADOS

Curva de absorcion
0.350
0.300
0.250
0.200
Absorbancia 0.150
0.100
0.050
0.000
200 400 600 800
Longitud de onda

Con esta grafica podemos observar que se tuvo una absorbancia mxima de
0,305 en una longitud de onda de 600nm aqu es donde la configuracin

electrnica del metal se demuestra ya que es en este momento que el color

del complejo absorbe la luz UV-visible esta energa hace que se excite y el
Cu2+ pase de nivel demostrando la absorbancia

El sulfato de cobre al principio es un color azul claro a veces es como azul

verdoso pero al combinarse con el amoniaco se vuelve de un color azul rey,
al volverse un complejo deja los pares de electrones con un espacio libre
esto hace que se puedan diferenciar energticamente

y al hacer esto podemos hacer que el Cu 2+ pase de nivel y lograr saber su

absorbancia mxima, segn esta imagen se muestra la transicin e - del Cu2+
cuando sube de nivel:

El amoniaco es un auxocromo ya que es un grupo amino por lo tanto es un

sustituyente del cromforo que tiene enlaces diazo N=N, por eso el sulfato
de cobre se mezcl con el amoniaco para que al volverse complejo pudiera
absorber la longitud de onda necesaria para que el Cu 2+ tuviera el cambio de
nivel y as poder lograr ver la absorbancia mxima.

GRAFICA (FUNDAMENTO Y FUNCIONAMIENTO)

El espectro de absorcin es una representacin grfica que indica cantidad
de luz absorbida () a diferentes valores de . A partir de una solucin
diluida de un compuesto, cuya absorbancia mxima entra dentro del rango
de medida del espectrofotmetro, se ver el valor de absorbancia a

diferentes longitudes de onda frente a un blanco que contenga el disolvente

de la solucin de la muestra a caracterizar. A partir del espectro de
absorcin se obtendr el valor de al que el compuesto presenta la mayor
absorbancia (max). Dicho se utilizar a la hora de hacer determinaciones
cualitativas y cuantitativas del compuesto. El espectro de absorcin de un
cromforo depende, fundamentalmente, de la estructura qumica de la
molcula.
No obstante, hay una gran cantidad de factores que originan variaciones en
los valores de max y M, entre los que se incluye el pH, la polaridad del
solvente o molculas vecinas y la orientacin de los cromforos vecinos; y
cada uno afecta de forma particular. Por ejemplo, variaciones originadas por
cambios de pH son debidas al efecto de ste sobre la ionizacin del
compuesto. A continuacin se muestran como ejemplo los espectros de
absorcin de HNTS (un reactivo empleado para la determinacin de
especies oxidantes) y comprobndose que por espectrotometra se puede
seguir el efecto que ejercen el pH y los oxidantes.
Curvas de calibracin
Para obtener una curva de calibrado de un compuesto se preparan
soluciones de diferentes concentraciones del mismo, determinndose para
cada una de ellas el valor de absorbancia a max. Estos valores de
absorbancia se representan en el eje de abscisas (eje de x) y los de
concentracin en el eje de ordenadas (eje de y). Se observar que, a bajas
concentraciones, el aumento de concentracin se corresponde con un
incremento lineal en la absorbancia (zona de cumplimiento de la ley de
Lambert-Beer). A concentraciones altas la linealidad se pierde y se observa
que la lnea se aplana, por lo que las medidas son poco fiables. La
representacin de Lambert-Beer, A = cl, nos permitir calcular el valor del
coeficiente de extincin molar, que corresponde a la pendiente de la recta.
TOMADO DE : http://www.uco.es/dptos/bioquimica-biolmol/pdfs/08_ESPECTROFOTOMETR%C3%8DA.pdf

Datos obtenidos en el laboratorio en el cual hallamos la

absorbancia mxima que puede llegar a tener un jugo al
determinar la concentracin de colorantes que esta
presenta en su composicin.

nm
400
410
420
430
440
450
460
470
480
490
500
510
520
530
540

A
0,088
0,085
0,083
0,084
0,079
0,077
0,091
0,080
0,106
0,093
0,099
0,08
0,078
0,077
0,078
550
560
570
580
590
600
GRAFICA 1
610
620
630
640
650
660
670
680
680
700

0,112

0,067
0,071
0,055
0,097
0,074
0,081
0,072
0,058
0,075
0,068
0,059
0,063
0,068
0,059
0,045

Graficacion de los colores observados en la absorcin del

GRAFICA 2

Graficacion de los colores observados en la absorcin del

TABLA 1

Haciendo una comparacin con la grfica (2) que obtuvimos y la tabla (1)

Podemos evidenciar que en el jugo hit tiene 3 tipos de colorantes que son:
rojo5; azul1 y negro brillante. Los cuales son los que van a darle su
respectiva tonalidad a la bebida, al ver los picos que nos muestra la grfica
gracias a las absorbancia de cada color podemos determinar que colores
tiene alguna bebida y analizar si son buenos para el consumo humano.
Esta determinacin se hizo basndonos en la tabla (1) donde nos da a
conocer las longitudes que podemos ver de cada color y lo que se hizo fue
asociarla a la grfica y determinar los colores que esta nos proporcionaba.
De esta forma analizamos si estos colorantes son fabricados naturalmente,
sintetizados o son artificiales y as ver si son dainos para el cuerpo como
podemos verlo en la Figura (1), estos colorantes son pigmentos muy fuertes
que dejan un color a las partes que estuvieron en contacto con dicho
colorante.

En la tabla (2) tenemos unas cantidades aproximadas del uso mximo que
se puede utilizar de cada colorante en algn producto ya que estas no
pueden superar un rango especfico porque serian de gran riesgo para el
consumo humano.

Como en gran nmero de pases algunos de estos colorantes no son

permitidos para su venta al pblico son restringidos ya sea porque son
txicos o tienen gran cantidad de metales.
4. ACIDO BETA-APO-8'-CAROTENOICO Y SUS ESTERES METILICO Y ETILICO:
Son los colorantes para alimentos que corresponden a la frmula qumica
del cido beta-apo-8'-carotenico y sus steres metlico y etlico.
Especificaciones:
Pureza 96-101% - Prdida por secado 0.2% - Cenizas (mximo) 0.2% Contenido mximo de: Arsnico como As 3 mg/kg - Plomo como Pb 10 mg/kg
COLORANTES ARTIFICIALES O SINTETICOS (tabla 2)
1.Amarillos
Amarillo
de
quilena
-Amarillo ocasio FCF o FD y C
Amarillo
No.
6
-Tartrazina o FD y C Amarillo
No.5

Color

Index

Color

Index

Color

Index

47005

cantidad
50 mg/kg

15985

200mg/kg

19140

100mg/kg

42090

100 mg/kg

73015

100 mg/kg

2.Azules
Azul brillante FCF y C Azul
No.
1
-ndigo Carmn, Indigotina o
FD
y
C
Azul
No.
2

Color

Index

Color

Index

Color

Index

28440

300 mg/kg

Color
Color
Color
Color
Color

Index
Index
Index
Index
Index

16185
14720
45430
16035
16255

300mg/kg
300mg/kg
300mg/kg
BPM
200MG/KG

Color

Index

42053

100mg/kg

3.Negros
Negro-brillante-BN
4.Rojos
-Amaranto o FD y C Rojo No.
2
-Azorrubina o Carmoisina
-Eritrosina o FD y C Rojo No.
3
-Rojo Altura o FD y C Rojo
No.46
-Rojo Cochinilla A o Punz
4R
5.Verdes
-Verde rpido FCF o FD y C
Verd

FIGURA 1

CONCLUSIONES
*Los mtodos espectroscpicos de
anlisis se basan en la medicin
de la radiacin electromagntica
que es absorbida o emitida por
una sustancia.
*Nuestro conocimiento se
enriquece cada vez ms cuando
realizamos las prcticas en el
laboratorio ya que estas pueden
ser repetitivas pero daca una tiene
u valor agregado que hace que
conozcamos ms de cmo se
maneja el espectrofotmetro o que
otras aplicaciones tiene.
*Sabemos con certeza que existen
mtodos de absorcin donde se
basa en la disminucin de la
potencia de un haz de radiacin
electromagntica al interaccionar
con una sustancia; y los mtodos
de emisin donde esta emite una

sustancia cuando es excitada

previamente por medio de otro
tipo de energa.

BIBLIOGRAFIA.
http://www.formulacionquimica.co
m/CuSO4/
http://www.icv.csic.es/prevencion/
Documentos/productos/sulfatocobr
e0751.pdf
http://www.ecured.cu/index.php/A
mon%C3%ADaco
http://www.formulacionquimica.co
m/NH3/
http://www.icbf.gov.co/cargues/ava
nce/docs/resolucion_minsalud_r10
59385.htm
Gua elaborada por el instructor
Alejandro Patarroyo.