VIII Escuela de Verano RMN

Jaca
16-junio-2009

Gradientes de Campo Magntico

en experimentos de RMN
Teodor Parella
SeRMN UAB

Secuencia de pulsos, Espectro y Estructura

Espectro de RMN

Experimento RMN:
Secuencia de pulsos

Informacin
Qumica

Elementos de una secuencia de pulsos

A. Periodos de tiempo:
Tiempo de repeticin (d1)
Evolucin de , J

B. Pulsos de Radiofrecuencia:
ngulo (90 y 180): duracin y potencia
Fase (1). Ciclo de fases
Frecuencia: Canales de rf

C. Adquisicin:
Ncleo detectado
Fase (Frec) (ciclo de fases)
Desacoplamiento

D. Gradientes:
Posicin
Duracin
Intensidad

Camino de Transferencia
de coherencia

Gradientes de Campo Magntico

Lo que siempre quisiste saber pero nunca te atreviste a preguntar
sobre un GRADIENTE DE CAMPO MAGNETICO
Qu es?
Para qu sirve?
Donde se ponen?
Cuando se utilizan?
Cmo se optimizan?
Son opcionales?
Seleccin vs purga

Caractersticas de un gradiente:
Duracin
Intensidad
Forma
Tiempo de recuperacin
Linealidad
Direccin (x,y,z)
Ventajas:
Seleccin CTC
Espectros ms limpios
Adquisicin ms rpida
Inconvenientes:
Demasiado selectivo
Posicin en la secuencia
Espectros en modo magnitud vs sensible a la fase

Experimento de RMN: Punto de Partida

Bo

Campo Magntico
Esttico y permanente

Una molcula gira a su

frecuencia de Larmor (o)
independiente de su posicin z

Gradientes de Campo Magntico: Definicin

Un gradiente de campo magntico (G) es un espacio de tiempo
(del orden de ms) donde el campo magntico se hace espacialmente
no homogneo.

Bo B(z)
Durante G, una molcula gira a
una frecuencia de Larmor
(o+) en funcin de su
posicin z

Matemticamente:

(r, ) = sBg (r ) p j j
j

Bg (r) = Gz

s: forma del gradiente

Bg(r): Intensidad del Gradiente
: Duracin del gradiente
p: Orden de Coherencia
: Constante Giromagntica

Campo Magntico: Homogeneidad

Shims: Proceso de
homogeneizacin de la
muestra

Gradientes de Campo Magntico: Reenfoque

Secuencia
bsica

Gradient Echo

Gradient Spin
Echo

Gradientes: Condicin de Reenfoque

En un experimento donde se utilicen gradientes, slo se detectarn aquellos caminos de
coherencia que sean reenfocados justo antes de empezar la adquisicin. Aquellos caminos
que hayan adquirido una fase neta diferente de cero, no se observarn.

(r, ) = sBg (r ) p j j
j

s G ( p
i

i =1

i i

ij

ij

)=0

j
n

G ( p
i =1

ij

ij

)=0

Orden de Coherencia (p): Operadores I+ y I-

I = I x + iI y

I = I x iI y

1 +
Ix = ( I + I )
2
1 +
Iy = (I I )
2i

El rden de coherencia es la suma de operadores de desplazamiento transversales

(I+ y I-) que se encuentran dentro del producto de operadores analizado. As:
Iz es coherencia cero (p=0)
I+ y I- son coherencias single-cuanta (p=+1 y p=-1, respectivamente)
I+I+ y I-I- representan coherencia doble quanta (p=+2 y p=-2, respectivamente)
I+I- y I-I+ representan coherencias cero.quanta (p=0).

Orden de Coherencia (p) vs Velocidad de desfase ()

I z ( p = 0) 0
I ( p = +1) + I
+

(r, ) = sBg (r ) p j j

I ( p = 1) I
I1+ I 2 z ( p = +1) + I
I1+ I 2+ ( p = +2) +2 I
I1+ I 2 ( p = 0) 0

I1x I 2 y = ( I1+ + I1 )( I 2+ I 2 ) = I1+ I 2+ I1+ I 2 + I1 I 2+ I1 I 2

Caso heteronuclear:

I z S ( pI = 0; pS = 1) S
I + S ( pI = +1; pS = 1) + I S

I z S z ( pI = 0; pS = 0) 0

Anlisis de una secuencia de pulsos: Diseo del CTC

3/ 2
S / N N excited det
ected Bo / kT

Regla 1: El punto de
partida es siempre p=0
(Iz)

CTC

Regla 2: El punto final es p=-1 para el ncleo

detectado y p=0 para los no detectados
tI

I
z I cos ( t ) + I sin ( t ) =
I x
x
I
y
I

1 + iI t
I e
+ I eiI t )
(
2

Anlisis de una secuencia de pulsos: Diseo del CTC

Regla 3: Los rdenes de coherencia (p) slo
cambian por el efecto de los pulsos

Efecto del desplazamiento qumico

tI

I
z I p cos ( p t ) iI p sin ( p t )
I p
I
I

Efecto del acoplamiento J

Jt 2 I S

z z I cos ( Jt ) m 2iI S sin ( Jt )

I
z

Jt 2 I S

z z 2 I S cos ( Jt ) m iI sin ( Jt )
2 I S z
z

Regla 4: Un pulso cualquiera slo afecta al orden de coherencia

del ncleo en cuestin.

Regla 5: El pulso de 90(I) aplicado sobre Iz crea iguales cantidades

de I+ y Iz

i +
I z
I y = ( I I )
2
1
90( y )
I z
Ix = ( I + + I )
2
90( x )

90x
y

y
x

Regla 6: Cualquier pulso de 180 nicamente cambia el signo de +p a -p

180( x )
I z
I z
180( y )
I
Im

Regla 7: Un pulso de 90 aplicado a un operador I+ o I- puede Generar,

en principio, cualquier orden de coherencia

1 +
I + I ) iI z
(
2
90( y ) 1
I
( I + I m ) Iz
2
90( x )
I

R1
R2

R5

R6

R7

Ciclo de fases y espectroscopia diferencia

Ciclo de fases vs Gradientes

Ciclo de fases: Se adquieren N
seales que al sumarse/restarse
seleccionan las componentes
deseadas.

opcional

Seleccin con gradientes: La

seal es seleccionada justo antes
de empezar el periodo de
adquisicin (una sola adquisicin).

Eco con gradientes

p1G1 + p2G2 = 0
G1=G2

Eco con gradientes: Excitacin selectiva y supresin disolvente

100ms
20 ms

Experimentos
selectivos

Supresin de
disolvente

Experimento COSY: Modo magnitud

p1G1 + p2G2 = 0
G1=G2; selecciona p1=+1 (lnea continua,
datos eco)
G1=-G2; selecciona p1=-1 (lnea discontinua,
datos anti-eco)

G1 p1 + G2 p2 G3 = 0

Experimento COSY-MQF

Experimento COSY-MQF sensible a la fase

Magnitude-Mode
Low-Resolution

Magnitude-Mode
High-Resolution

Phase-sensitive
High-Resolution

Experimento NOESY sensible a la fase

p1G1=0
Ejemplo de gradiente de purga

Experimento HMQC

G ( p
i =1

ij ij

)=0

( p1, H H + p1, X X )G1 + ( p2, H H + p2, X X )G2 + ( p3, H H + p3, X X )G3 = 0

( H + p1, X X )G1 + ( H + p2, X X )G2 + ( H )G3 = 0
( H + C )G1 + ( H + C )G2 + ( H )G3 = 0
5G1 3G2 4G3 = 0

Una relacin entre los gradientes

G1:G2:G3 de 2:2:1 selecciona dicho CTC,
mientras una relacin 2:2:-1 seleccionara
el CTC marcado con lneas
discontinuas (datos anti-eco: p1,X=p2,X=-1).

Experimento difusin

Pulsed Field Gradient

Spin-Echo (PFGSE)

Gradiente
de desfase

Gradiente
de reenfoque

Experimento difusin
Adquisicin:Repetir n veces el experimento
variando la intensidad del gradiente.
Acumular n espectros diferentes de 1H.

Ecuacin de StokesEinstein

k BT
D=
6 rH
Determinacin
aproximada de radios
hidrodinmicos (rH)

I = I 0e

D 2 g 2 2 ( / 3)

ln( I / I 0 ) = D 2 g 2 2 ( / 3)

D es el coeficiente de Difusin
es la constante magnetogrica
g es la intensidad del gradiente
es la duracin del gradiente
es el tiempo de difusin

Experimento difusin: Representacin DOSY

ppm
-8.2
Alpha-Cyclodextrin
-8.1
-8.0
Omeprazol
-7.9
-7.8
-7.7
-7.6
-7.5
Methanol
-7.4
-7.3

HDO

-7.2
8.0

7.5

7.0

6.5

6.0

5.5

5.0

4.5

4.0

3.5

3.0

2.5

2.0

ppm

Coeficientes de
Difusin

Tamao
Molecular

Estados de oligomerizacin
Estados de agregacin, plegamiento en biomolculas
Interacciones intermoleculares:
Complejos supramoleculares host-guest
Complejos biomoleculares, screening NMR .
Intercambio soluto-disolvente: Intercambio qumico, solvatacin
Anlisis de mezclas sin necesidad de separacin qumica
Crudos y deteccin de impurezas
Extractos naturales
Qumica combinatoria
Extractos tejidos, celulares
Biofludos
Compuestos Inorgnicos y organometlicos
Tamao
Interaccin inica
Estudio de propiedades en disolucin

Gradientes de campo magntico:

Ventajas
- Mtodo de seleccin de seales deseadas o de eliminacin
de seales no deseadas.
- Alternativa al ciclo de fases y no es necesario la
espectroscopia diferencia. Se pueden combinar las dos
aproximaciones.
- Adquisiciones ms rpidas cuando la sensibilidad no es un
problema.
- Espectros ms ntidos (ms calidad).
- Diseo de experimentos ms verstiles, ms robustos, ms
fiables : Experimentos de Rutina.
- Experimentos de difusin, fast-NMR, imagen (MRI)