TPH (Hidrocarburos Totales de Petrleo)

Mtodo 10050
Alcance y aplicacin: Para el suelo y el agua.
1 Esta prueba es semi- cuantitativa. Los resultados se muestran como ms o menos que el valor
umbral utilizado.
Preparacin de la prueba
Instrumento informacin especfica

La Tabla 1 muestra todos los instrumentos que se pueden utilizar para esta prueba. La tabla
tambin muestra requisitos de adaptador para los instrumentos que los utilizan.
Para utilizar la tabla, seleccione un instrumento, a continuacin, leer a travs de encontrar el
correspondiente informacin para esta prueba.
Informacin especfica del instrumento

Instrumento
DR
DR
DR
DR
DR

6000
5000
3900
1900
3800, DR 2800,DR 2700

Adaptador
A23618
LZV846 (A)
9609800 O 9609900 (A)
LZV583

Antes de empezar

Este mtodo analiza para TPH en muestras de suelo o agua. Para el anlisis del suelo, hacer el
procedimiento de extraccin del suelo antes del Procedimiento de inmunoensayo. Para el anlisis
de agua, comenzar con el procedimiento de inmunoensayo. La prueba requiere aproximadamente
20 a 30 minutos para el anlisis completo. Un mximo de 10 pruebas se puede preparar al mismo
tiempo.
Antes de que el procedimiento se inicia, lea el procedimiento completo. Identificar y preparar todos
los reactivos necesarios, las cubetas y otros aparatos, a continuacin, iniciar el procedimiento
El tiempo es muy importante en este procedimiento. Siga cuidadosamente las instrucciones.

Es muy importante utilizar una tcnica consistente para mezclar la solucin en las cubetas.
Consulte Uso de la 1 cm Microcubeta bastidor en la pgina 7. Si las cubetas se mezclan de forma
individual, los resultados pueden ser menos consistentes.

Tenga cuidado con las cubetas. Un rasguo en las superficies cubetas interiores o exteriores puede
causar resultados incorrectos. Limpie cuidadosamente las superficies exteriores con un pao
limpio, absorbente o tejidos antes de su uso.
Cubetas de anticuerpos y conjugado enzimtico se realizan en lotes emparejados. No mezclar
lotes de reactivos.
Mantenga la solucin de desarrollo de color de la luz solar directa para evitar el deterioro.
El rack cubeta se puede invertir con las cubetas en el bastidor. Esto permite al usuario preparar
muchas muestras al mismo tiempo. Las cubetas permanecen en el bastidor hasta que los
resultados se leen en el instrumento.
La temperatura recomendada para el almacenamiento de reactivos es de 4 C (39.2 F). Deje que
el aumento de la temperatura del reactivo a la habitacin temperatura antes del anlisis.
El suelo Extractante contiene alcohol metlico, que es venenoso e inflamable. Revise las hojas de
seguridad (MSDS / SDS) de los productos qumicos que se utilizan. Utilice el equipo de proteccin
personal recomendad.
Cada juego de reactivos tiene 20 cubetas de anticuerpos. Utilice una cubeta de anticuerpo para
cada calibrador y cada muestra. Cubetas no son Reutilizable.
Use guantes de proteccin de nitrilo para este procedimiento.
Revise las Hojas de Datos de Seguridad (FDS / FDS) para las sustancias qumicas que se utilizan.
Utilice la proteccin personal recomendada equipo.
Deseche las soluciones reaccionado de acuerdo a las regulaciones locales, estatales y federales.
Consulte las Fichas de Datos de Seguridad para la eliminacin informacin para los reactivos no
utilizados. Consulte el, personal de salud y seguridad ambiental para su instalacin y / o local
reguladora agencias para obtener ms informacin sobre cmo desechar.

Artculos para recoger

Descripcin

Cantidad

TPH Reactivo Set

Caps , flip cao

Cilindro, graduada de 10 mL

Marker, laboratorio

Pipeta , TenSette , 0,1-1,0 ml

Puntas de pipeta , para pipeta TenSette , 0,11,0 ml

Rack , para Cubetas Micro de 1 cm

Cuchara, 5g

Kit de extraccin del suelo

Varios

Agua desionizada
Toallitas desechables

Varios
1

Wiretrol pipeta

Consulte consumibles y artculos de reemplazo en la pgina 10 para informacin de la orden

Recogida y almacenamiento de la muestra

Analizar las muestras tan pronto como sea posible para obtener los mejores resultados.

Si el almacenamiento de la muestra es necesario, recoger las muestras en recipientes de

vidrio o Teflon. Limpie los recipientes con agua y jabn, luego enjuague los contenedores
con metanol.Tapas de Uso Teflon - forrado para los contenedores. Si las tapas de tefln
forrado no estn disponibles, el uso papel de aluminio como revestimiento tapa sustituto.
Enjuague el papel de aluminio con metanol antes usar.
Para las muestras de agua, llenar completamente el contenedor (sin espacios vacos) e
inmediatamente apriete la tapa.
Mantenga las muestras de suelo en el almacenamiento a 6 C (43 F) durante un mximo
de 14 das.
Mantenga las muestras de agua en el almacenamiento durante un mximo de 24 horas.
Ponga la muestra en un hielo bao o un refrigerador para limitar la prdida de compuestos
voltiles.

El uso de la pipeta Wiretrol

El Wiretrol Pipet mide con precisin pequeas cantidades de lquidos. El Wiretrol Pipet tiene dos
partes: una de Teflon -tipped mbolo y un tubo capilar calibrado. El mbolo puede ser usado
muchas veces. Deseche los tubos capilares despus de un uso.

1. Asegrese de que el punta del mbolo es mojado con el lquido. Introduzca con cuidado el
punta del mbolo en el extremo de el tubo capilar con el banda de color .
2. Empuje la punta del mbolo de el otro extremo del capilar tubo. Pare cuando el mbolo
punta apenas se extiende ms all el extremo del tubo capilar.

3. Inserte el tubo capilar por debajo de la superficie de la lquido. Poco a poco y sin
problemas, tire del mbolo hasta el parte inferior de la punta del mbolo llega a la aplicable
lnea de volumen. Toque final del tubo para el lado de la recipiente para liberar gotas que
permanecer en el tubo capilar Consejo.
4. Para liberar el lquido, inserte la punta del capilar tubo debajo de la superficie de la solucin
de recepcin, y empujar el mbolo hacia abajo con un movimiento suave.Cambiar tubos
capilares para cada calibrador y la muestra.
Procedimiento de extraccin del suelo

1. Pesar 10 g de suelo en el barco de pesada de plstico.

2. Vierta con cuidado el suelo en un vial de extraccin.
3. Utilice la primicia 5 gramos de aadir una cucharada de sodio sulfato al vial de extraccin.
4. Utilice el graduado cilindro para agregar 10 ml de suelo Extractante en la extraccin vial.

5. Ponga la tapa en el vial de extraccin con fuerza. Shake vigorosamente durante 1 minuto.
6. Deje que las partculas se conforman con un mnimo de 1 minuto. Abra cuidadosamente la
vial de extraccin.
7.

Use la pipeta desechable para eliminar 1,0 a 1,5 ml desde la parte superior del lquido
capa. Agregue el eliminado lquido a la barril filtracin. No utilice ms de 1,5 ml . La pipeta
puede medir en 0,25 mL incrementos.
8. Ponga el mbolo de filtracin en el barril filtracin. Set el conjunto de filtracin en un mesa
o superficie plana. Empujar firmemente en el mbolo hasta el extracto de la muestra es

forzada hacia arriba en el centro de la mbolo. Utilice el filtrado resultante para el inmuno
ensayo procedimiento.
Procedimiento de inmunoensayo

1. Empuje SOLA LONGITUD DE ONDA > OPCIONES, luego la tecla . Introduzca 450 nm y
empuje en Aceptar. Consulte el instrumento documentacin para orientacin.
2.

Marcas puso en el cubetas para identificar el muestras y calibradores.

3.

Inserte las cubetas en el estante. Asegrese de que el cubetas son seguras. No usar la
fuerza para ponerlas en posicin, porque el cubetas pueden derraman o pueden ser
difciles de eliminar.

4. Las muestras de suelo: Utilice un pipeta para agregar 0,5 ml de Diluyente de solucin en
cada calibrador y muestra cubeta. La misma pipeta punta puede ser utilizado para este
paso. Las muestras de agua: Utilice una pipeta aadir 0,5 ml de cada agua la muestra en
una muestra cubeta. Utilice una nueva pipeta para cada muestra.

5. Utilice la pipeta Wiretrol a aadir 50l de cada calibrador al aplicable cubeta calibrador.
mezclar el cubetas despus de cada adicin. Utilice un capilar separada tubo para cada
solucin. Tener la necesaria aparato listo para esto paso y los cuatro siguientes pasos. No
espere -estos pasos rpidamente.
6.

Las muestras de suelo: Utilice un Wiretrol pipeta para aadir 50 l del extracto filtrado de la
extraccin del suelo procedimiento. Consulte el suelo procedimiento de extraccin en la
pgina 3. Utilice un separada tubo capilar para cada solucin. Mezclar el contenido de las
cubetas despus de cada Adems. Las muestras de agua : Use un Wiretrol pipeta para
aadir 50 l de metanol en cada la cubeta de anlisis . mezclar el contenido de las cubetas
despus de cada adicin.

7.

Utilizar inmediatamente una pipeta aadir 0,5 ml de TPH Conjugado enzimtico en cada
calibrador y la muestra cubeta. La misma pipeta punta puede ser utilizado para este paso.

8. Inicie el instrumento temporizador. El tiempo de reaccin comienza.

9. Mezclar inmediatamente el cubetas durante 30 segundos. Consulte Uso de la 1 cm

estante microcubeta en la pgina 7 para la correcta Procedimiento de mezcla.
10. Despus de 5 minutos, mezcle el contenido de la cremallera una segunda vez durante 30
segundos.
11. Al final de la Perodo de reaccin de 10 minutos, deseche el contenido de todos las
cubetas en un desperdicio recipiente para su eliminacin.
12. Enjuague completamente cada cubeta con agua desionizada cuatro veces. Deseche los
contenidos en el recipiente de residuos para disposicin. Gire las cubetas y acumular boca
abajo sobre una toalla de papel para secar. Cuidadosamente aprovechar las cubetas en la
toalla para eliminar el lquido.

13. Desarrollo de color de principio: El engranaje de distribucin es muy importante. Asegrese

que el cuvettes es todava en la posicin en el estante. Use la pipeta para aadir 0.5 mL de
Color que Desarrolla la Solucin en cada Anticuerpo Cuvette. Use una nueva punta de
pipeta para cada cuvette.
14. Comience el temporizador de instrumento. Las ventajas de tiempo de reaccin.
15. Inmediatamente mezcle el cuvettes durante 30 segundos.
16. Despus de 5 minutos, mezcle el contenido del estante un segunda vez durante 30
segundos.

17. Cuando el temporizador expira, el empleo una pipeta para aadir 0.5 mL de Solucin de
Parada en cada cuvette con la misma punta de pipeta. La tcnica constante es muy
importante. Aada la solucin en la misma secuencia que fue usada para el Color que
Desarrolla la adicin de Solucin.
18. Deslice el estante hacia adelante y hacia atrs durante 20 segundos. El color de solucin
azul se cambia a amarillo.
19. Ponga una seal cuvette que pone a cero para identificarlo como el en blanco. Llene el
cuvette del agua de deionized.
20. Limpie todo el cuvettes.

21. Insertar el en blanco en el titular de clula.

22. Empuje CERO. La demostracin muestra 0.000 Abs.
23. Insertar el primer calibrador en el titular de clula.
24. Empuje LEDO. Los resultados muestran en Abs. Registre el resultado.

25. Leer los valores de absorbance de los calibradores restantes y muestras. Registre los
resultados. Refirase para Hacer de intrprete y hacer un informe los resultados en la
pgina 8.
Interferencias
Sustancia entrometida

Nivel de interferencia

El cloro (el agua prueba slo)

Interfiere encima de 2 ppm. Para quitar el

cloro de la muestra, aada 1 gota de 0.1
sodio de N thiosulfate por 100 mL de
muestra.

Empleo de 1 cm MicroCuvette estante

Use el estante de MicroCuvette para conseguir resultados exactos y exactos para el
procedimiento immunoassay durante el anlisis de varias muestras a la vez. Refirase a la
Figura 1.
Inserte el cuvettes en el estante- -Use el estante de MicroCuvette para bien sostener
cuvettes que es puesto en el estante. Antes de las ventajas de procedimiento, identifique
cada cuvette con una muestra o un nmero de calibrador. Correctamente inserte el
cuvettes en el estante. No fuerce el cuvettes en el estante porque la muestra puede
derramarse o el cuvettes puede ser difcil de quitar. El cuvettes debe quedarse en la
posicin si el estante es invertido y con cuidado dado un toque.
Mezcle la muestra-Ponga el estante sobre una superficie difcil, plana que es al menos dos
veces la longitud del estante. Refirase a la Figura 1. Sostenga un final del estante,
entonces enrgicamente deslice el estante hacia adelante y hacia atrs a lo largo de su eje
durante 30 segundos. El estante se mueve por una distancia igual a su propia longitud en
cada direccin.
La figura 1 MicroCuvette estante

Haga de intrprete y relate los resultados

Hay una relacin inversa entre la concentracin de TPH y la lectura de absorbance. En
otras palabras, el ms alto la lectura, el ms abajo la concentracin de TPH. Refirase a la
Tabla 2.
Tabla 2 concentracin Relativa TPH
Si la muestra absorbance la lectura es...
Entonces la concentracin de la muestra
es...

Ms pequeo que la lectura de calibrador

Ms grande que la lectura de calibrador

Ms grande que la lectura de calibrador

Ms pequeo que la lectura de calibrador

Por ejemplo, si las lecturas son:

TPH Calibrador 1 (20 ppm como gasleo): 0.480 Abs
TPH Calibrador 2 (50 ppm como gasleo): 0.360 Abs
Prueban 1: 0.200 Abs
Prueban 2: 0.400 Abs
Prueban 3: 0.550 Abs
La interpretacin para una muestra de suelo:

Prueban 1: La lectura de muestra es ms pequea que las lecturas para ambos

calibradores. La concentracin de la muestra de TPH es ms grande que 50
gasleo ppm.
Prueban 2: La lectura de muestra est entre las lecturas para los calibradores. La
concentracin de la muestra de TPH est entre 20 ppm y 50 gasleo ppm.
Prueban 3: La lectura de muestra es ms grande que las lecturas para ambos
calibradores. La concentracin de la muestra de TPH es ms pequea que 20
gasleo ppm.

La interpretacin para una muestra de agua:

Prueban 1: La lectura de muestra es ms pequea que las lecturas para ambos

calibradores. La concentracin de la muestra de en la muestra es ms grande que
5 gasleo ppm.
Prueban 2: La lectura de muestra est entre las lecturas para los calibradores. La
concentracin de la muestra de TPH est entre 2 y 5 gasleo ppm.
Prueban 3: La lectura de muestra es ms grande que las lecturas para ambos
calibradores. La concentracin de la muestra de TPH es ms pequea que 2
gasleo ppm.

Almacenaje de reactivo y manejo

1. Siempre lleve guantes y gafas para la proteccin.
2. Para el almacenaje a largo plazo, asegrese que los reactivo no estn en la luz solar
directa. Guarde el juego de reactivo en 4 C (39.2 F) cuando no en el empleo. Caliente los
reactivo a la temperatura ambiente antes del empleo.
3. Cuando no en el empleo, selle la bolsa de hoja de metal que contiene el anticuerpo
cuvettes.
4. Si la Solucin de Parada est en el contacto con los ojos, el aclarado totalmente durante
15 minutos con el agua fra y conseguir la ayuda inmediata mdica.
Sensibilidad
Los anticuerpos usados en el Equipo de Prueba de TPH reaccionan con una variedad de
compuestos encontrados en combustibles de petrleo. Cada calibrador TPH es formulado para
mostrar una concentracin sabida de gasleo. Refirase a la Mesa 3 y la Mesa 4 para usar
calibradores para otros compuestos de TPH. Por ejemplo, para usar los calibradores TPH para
la gasolina, encuentre "la Gasolina" en la columna de mesa correcta. Entonces, lea a travs de
la fila para encontrar el ppm de aquel hidrocarburo para cada calibrador. Para gasolina, TPH
calibrador 1 = 15 ppm, TPH calibrador 2 = 35 ppm, etc.

La Tabla 3 TPH compone en el suelo

Compuesto
Gasleo
Gasolina
Queroseno
Benceno
Tolueno
El etilbenceno

TPH calibrador
1 (ppm)
20
15
35
20
15
5

TPH calibrador
2 (ppm)
50
35
75
45
30
15

TPH calibrador
3 (ppm)
100
70
140
85
50
35

TPH calibrador
4 (ppm)
200
140
250
160
90
75

9
10
3
5

20
20
5
15

35
40
9
25

70
80
16
45

m-xileno
o-xileno
p-xileno
BTEX
Compuesto
Gasleo
Gasolina
Queroseno
Benceno
Tolueno
El etilbenceno

Tabla 4 TPH compone en el agua

TPH calibrador
TPH calibrador
TPH calibrador
1 (ppm)
2 (ppm)
3 (ppm)
2
5
10
1.5
3.5
4
3.5
7.5
14
2
4.5
8.5
1.5
3
5
0.5
1.5
3.5

m-xileno
o-xileno
p-xileno
BTEX

0.9
1
0.3
0.5

2
2
0.5
1.5

3.5
4
0.9
2.5

TPH calibrador
4 (ppm)
20
14
24
16
9
7.5
7
8
16
4.5

Diluya una muestra de agua

Para los niveles ms altos de TPH en el agua que aquellos mostrados en la Mesa 4 en la
pgina 9, diluya la muestra con el agua de deionized. Para diluir una muestra, refirase a la
Mesa 5, luego agregue que el volumen de la muestra a un cilindro graduado y diluido a 50 mL
con deionized bebe. Haga la prueba. Refirase a la Mesa 4 en la pgina 9 otra vez para
multiplicar los niveles de calibrador por el multiplicador de dilucin. Por ejemplo, si una 0.5
muestra de agua de mL es diluida a 50 mL, los niveles de calibrador en la Mesa 4 en la pgina
9 para el gasleo son aproximadamente 200, 500, 1000 y 2000 ppm.
Tabla 5 Multiplicadores de dilucin
mL muestra
0.5
1.0
2.0
5.0
10.0
25.0
Resumen de mtodo

Multiplicador de dilucin
100
50
25
10
5
2

Este mtodo es la seleccin semicuantitativa para TPH basado en umbrales como el gasleo
en las concentraciones que siguen:
El Suelo 20, 50, 100, 200 ppm como el gasleo.
Agua 2, 5, 10, 20 ppm como el gasleo
Immunoassay prueba reacciones de antiinformacin/anticuerpo de empleo para descubrir
compuestos especficos orgnicos en el agua y el suelo. Las paredes de plstico cuvettes son
acodadas con los anticuerpos que son especficos para TPH. Los anticuerpos con criterio selectivo
quitan TPH de la muestra compleja matrices. Una muestra lista y un reactivo con molculas
conjugadas de enzima (molculas de analito conectadas a las molculas de una enzima) son
aadidos al Anticuerpo Cuvettes. Durante la incubacin, molculas conjugadas de enzima y TPH
compiten por atar sitios sobre los anticuerpos. Las muestras con los niveles ms altos de analito
tienen ms sitios de anticuerpo ocupados por el analito y menos sitios de anticuerpo ocupados por
las molculas conjugadas de enzima.
Despus de la incubacin, la enzima de la muestra y desatada conjugado es aclarada del cuvette y
un reactivo de desarrollo en color es aadido. La enzima en el conjugado cataliza el desarrollo de
color. As, hay una relacin inversa entre la intensidad en color y la cantidad de TPH en la muestra.
El color de pasar entonces es comparado con un calibrador para determinar si la concentracin de
analito en la muestra es ms grande o ms pequea que los niveles de umbral. La concentracin
TPH est a la inversa proporcional al desarrollo en color - con ms ligereza el color, ms alto la
concentracin TPH. Los resultados de prueba son medidos en 450 nm.
Bienes consumibles y artculos de reemplazo
Reactivo requeridos
Descripcin
Equipo de Extraccin
de Suelo
TPH Set de Reactivo
Agua desionizada

Cantidad/Prueba
1
1
varios

Unidad
C/U
20 Cuvettes
50 ml

No Articulo
2775100
2774300
27248

Aparato requerido
Descripcin
Balanza porttil, 300
capacidad de g
Gorras, flip cao (por
500 ml botella de agua
desionizada )

Cantidad/Prueba
1

Unidad
C/U

No Articulo
2796900

2/PAQ

2581802

Marker, laboratorio

C/U

2092000

Guantes , nitrilo ,
mediano

100/PAQ

2550502

Pipeta , TenSette ,
0,1-1,0 ml

C/U

1970001

Pipetas Tipos, para

50/PAQ

2185696

TenSette Pipet , 0,11,0 ml

Pipeta , Wiretrol ,
10-50 ul

C/U

2852200

Pipeta, Wiretrol, 50
1000 ul
Rack , para Cubetas
Micro de 1 cm

C/U

2568905

C/U

4879900

Gafas ajustadas de
seguridad ventilados

C/U

2550700

Primicia del Suelo, 5 g

, 4,25 cc

20/PAQ

2657205

Tiempo
Toallitas desechables

1
1

C/U
280/PAQ

2764400
2097000

Kit de recarga de la
extraccin del suelo ,
de 2775100 , incluye:

C/U

2775200

Cuentagotas , LDPE,
0,5 y 1,0 ml

20/PAQ

2124720

Aparato requerido (continuacin)

Descripcin
Filtro y el barril de
montaje

Cantidad/Prueba
1

Unidad
20/PAQ

No Articulo
2567620

El sulfato de sodio ,
anhidro

250G

709929

Solucin de extraccin
del suelo

200 ML

2567729

Soil recipiente de la
muestra

20/PAQ

2592920

Barco de pesaje , de
8,9 cm cuadrados

20/PAQ

217920

Esptula, desechable

2/PAQ

2569320

Reactivos y aparatos opcionales

Descripcin
Cilindro graduado , 10 ml

Unidad
C/U

No Articulo
108138

Sodio solucin de tiosulfato

, 0,1 N

100 ML MDB

32332