Ao de la Consolidacin del Mar de Grau

Ingeniera de Industrias Alimentarias

DOCENTE:
TATIANA BUSTAMANTE VILCHEZ
INTEGRANTES:
AGUILAR VEGA RUTH SOCORRO
CASTRO PANAYCO CRISTHIAN DANIEL
FARFN GIRON LUZ CLARITA
HERRERA GAVILN GRECIA XIOMARA
NOLE QUINTANA DERYCK LEANDRO
SAAVEDRA GUTIERREZ JHOAAM ALEXIS
VALDIVIEZO MEDINA LIZBETH MARLLORIE
YANGUA NIO NADIA TALIA
CURSO:
MICROBIOLOGIA DE LOS ALIMENTOS
TEMA:
INFORME DEL LABORATORIO 2

2016

MATERIALES DE LABORATORIO
Materiales
03 tubos de ensayo.- En cada tubo de ensayo contiene 9 ml de solucin salina
fisiolgica, para luego ser agregado 1 ml de la muestra.
04 placas Petri de vidrio.- Utilizadas para el cultivo de bacterias, con un
contenido de 15 ml de AGAR PCA (plate count agar).
04 pipetas de 1ml.- Para la realizacin de la prctica con un grado de exactitud
ms confiable.
02 matraces de 250ml.- El primer matraz contiene la muestra de chicha
morada, y el segundo 90 ml de solucin salina fisiolgica.
01 probeta de 500ml.- Se utiliz para el traslado de la solucin salina fisiolgica
hacia el matraz de Erlenmeyer de 250 ml.
01 gradilla metlica.- Para ubicar cada tubo de ensayo.
01 mecheros.- Permite esterilizar tubos de ensayo, matraz, placas Petri, etc. al
momento del cultivo.
1 piceta con agua destilada.- Para lavar determinados materiales.
Papel toalla.- Con el propsito de mantener limpio el ambiente de trabajo, para
la prctica de laboratorio.
Algodn.- Utilizados para proteger los tubos de ensayo de los microorganismos
del ambiente.

Equipos
Bao mara.- El Agar PCA estaba en estado slido, y es necesario
calentarlo para volverlo lquido y llevar a cabo la prctica.
Estufa de secado.- Utilizado para cultivar las bacterias.

METODOLOGA

En la prctica de preparacin de diluciones se tom como muestra una

bebida de maz morado que se distribuye de manera ambulante en los
exteriores de la Universidad Nacional de Frontera, la cual se sospech, que; la
falta de higiene en su elaboracin podra poner en riesgo la salud de los
consumidores.
Para determinar si la bebida contiene microrganismos patgenos se realiz el
siguiente procedimiento.

Preparacin de dilucin:

1. Se procedi a tomar la botella con la respectiva muestra debidamente

cerrada.
2. Se encendi el mechero bunsen con la finalidad de crear un ambiente
asptico.
3. Con ayuda de una pipeta se procedi a extraer 10ml de muestra hacia
un matraz rotulado con una dilucin 10 -1 que contena 90ml de solucin
salina homogenizando la muestra.
4. Luego, se prepararon tres tubos de ensayo con 9ml de solucin salina
cada uno marcados 10-2 10-3 10-4
5. Al primer tubo 10-2 se le agrego 1ml de dilucin del matraz 10 -1. Se
repetir el mismo procedimiento con el segundo y tercer tubo de ensayo
de ensayo rotulados con diluciones de 10-3 y 10-4.

Siembra:

6. Despus de haber preparado las diluciones, se marcan 4 placas Petri

con los factores dimensionales antes mencionados. A cada placa se le
aadi 1ml de disolucin de cada tubo.
7. Como medio de cultivo se utiliz plate count agar (PCA) que se nos
proporcion en el laboratorio, para diluirlo utilizamos bao mara
mantenindolo a una temperatura de 47 C.
8. Se agreg aproximadamente 15 a 20 ml del medio agar PCA a cada
placa con el diluyente,
9. Se agito circularmente movindolo sobre la superficie de la mesa
consiguiendo as mezclar el inoculo con el agar, dejndolo solidificar a
temperatura ambiente, por 25 a 30 minutos.
10. Finalmente solidificado, se llevaron las placas a incubar de forma
invertida por 24h a temperatura de 37 C.

Recuento de las colonias formadoras de bacterias

11.

Terminado el tiempo de incubacin se contaron las colonias

desarrolladas en cada placa aplicando el mtodo de cuarteo y se debi
elegir la placa que contena un nmero de 30 a 300 UFC.

Clculos
Numero de UFC/ml = nmero de colonias X factor de dilucin

RESULTADOS
En la prctica se debi tomar una muestra que contenga entre 30 y 300
Colonias para determinar en nmero de UFC/ml.
Sin embargo en nuestras placas se observ que los nmeros de colonias
excedan de ese rango.
Concluyendo que en la prctica se debi de realizar ms de 3 diluciones

OBSERVACIN

En la primera placa Petri 10 podemos

observar claramente el tamao de las
colonias de las bacterias, algunas eran
grandes y otras pequeas pero visibles
al ojo humano.
Es una muestra que es contable.

En la segunda placa Petri 10

podemos observar que las colonias
de las bacterias tienen un tamao
muy
reducido y lo cual dificulta
poderlas contar.
Es una muestra incontable.

En la tercera placa Petri 103 podemos

observar claramente el tamao de las
colonias de las bacterias, la mayora de
colonias eran muy pequeas y algunas
eran grandes.
Es una muestra incontable.

En la cuarta placa Petri 104 podemos

observar que la muestra no solidifico,
ocurri un error, haber podido ser el
tiempo en que se emple no fue lo
suficiente para que solidificara.
Adems una muestra incontable.

DISCUSIN

La clave para la realizacin de dilucin, siembra y recuento total de BAMV, es;

que se debe hacerse ms de 3 diluciones, con el hecho de poder encontrar el
rango entre [30-300 UFC/ml] y as ser ms confiable la prctica y llegar con el
resultado adecuado.

Por otro lado existe la probabilidad, que nuestro orificio bucal contiene
microrganismos patgenos y al momento de realizar el pipeteo, se ha
producido la transferencia de microorganismo a travs de nuestra saliva.
Como segundo punto se tiene que tomar en consideracin el producto la falta
de concientizacin por parte de las personas. La poca informacin que tienen,
por lo cual no saben que el agua sin hervir es fuente de un sin fin de
enfermedades parasitarias.

Talvez a nosotros no nos haga ni un tipo de reaccin notoria consumir este tipo
de alimentos pero que pasara si lo consume un nio, que talvez sus defensas
no estn tan desarrolladas. Este nio puede ser afectado por algn tipo de
parasito patgeno; ya que el agua potable sin hervir es fuente clave de miles de
parasito y de basura microscpicas que talvez no se ven a simple vista pero
estn presente. La solucin debida, es capacitar a pobladores que tienen sus
negocios con el fin de incentivar la precaucin debida de los alimentos que se
consumen diariamente.

Conclusiones

 Los resultados obtenidos demuestran que se logr el resultado esperado, se

pudo adquirir el conocimiento de la temtica de diluciones por parte de los
miembros de grupo, adems se comprendi y a la misma vez se llev a la
prctica la metodologa requerida para la siembra de microorganismos en
placas Petri.
Las observaciones efectuadas en el laboratorio nos permitieron identificar
unidades formadoras de colonias (UFC) en las diferentes placas Petri (4) en las
que se realiz la siembra de la muestra.
A razn de que el nmero de colonias excedan del rango establecido, no se
pudo escoger ninguna de las placas, pues en la prctica se deba realizar ms
de tres diluciones y por lo tanto no se procedi a la ejecucin de los clculos.
Es de suma importancia que una vez culminado el proceso de siembra, se
debe esperar a que el agar haya tomado una forma slida consistente, sino las
UFC no podrn desarrollarse con normalidad.
Por lo observado en las diferentes placas, se puede concluir que las bebidas
escogidas para ser analizadas revelan presencia de microorganismos,
representando un factor de riesgo para la salud de los consumidores.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

https://www.tplaboratorioquimico.com/laboratorio-quimico/materiales-einstrumentos-de-un-laboratorio-quimico.html

ANEXOS

Materiales necesarios para la elaboracin de nuestra practica de laboratorio

Se agrega en el matraz 90 ml de solucin salina y 10 ml de la muestra a observar

(chicha morada)

Con la ayuda de la pipeta

agregamos a cada tubo
de ensayo 9ml de solucin salina. La combinacin de la muestra y la solucin salina que se
encuentra en el matraz se agrega al primer tubo de ensayo 1ml de la muestra

Con la ayuda del mechero

Petri y vertimos el lquido
matraz y tambin los que
ensayo.

esterilizamos las placas

que se encuentra en el
estn en los tubos de

El agar que se encuentra en el matraz lo ponemos en el bao mara y posteriormente se saca y

se deja enfriar para agregar15ml de agar en las placas Petri.

Una vez

agregado el agar en las placas se deja solidificar las 4 muestras por 20 minutos

La muestra ya
con papel para colocarlo
incubadora de

solidificada se envuelve
posteriormente en la
laboratorio de 35C o
37C por 24 horas

Transcurridas las 24 horas podemos obtener los siguientes resultados