FITOQUMICOS

Tema1.Introduccin.Definiciones.Procedimientosgeneralesdeaislamientoy
caracterizacindefitoqumicos.
Tema2.Polisacridos.
Tema3.Terpenosyesteroides.
Tema4.Fenolessimples.
Tema5.Polifenoles.
Tema6.Curcuminoides.
Tema7.Taninos.
Tema8.Lignanos yantraquinonas.
Tema9.Alcaloides
T.GirbesyP.Jimnez

Tema1.Introduccin.Definiciones.Procedimientosgeneralesdeaislamientoy
caracterizacindefitoqumicos.
1.Mtodosdeseparacin(cromatogrficos).
2.Mtodosdeelucidacinestructural(espectrofotomtricos,electroforticos,etc.).
3.Mtodosfarmacolgicos(actividadmicrobiana,insecticida,
parasiticida,antitumoral,antiviral,inmunoestimulante,etc.;
Planta
benchtopassays).
Extracto
OPERACIONESPRELIMINARES

Separacingrosera

Identificacinbotnicadelmaterial(muchasvariedades)

Separacinfina

Seleccindelapartedelvegetalaextraer(partetil)

Caracterizacin

Inactivacindelossistemasenzimticosdelvegetal
sisetrabajaconmaterialfresco

Propiedades

Desecacindelosvegetalesbajocondicionescontroladas
paraevitartransformacionesqumicasdeloscomponentes
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Farmacolgicasy/o
saludables

Compuestos
qumicos

estroma
Planta

molturacinpara
destruirelestroma

FACILITARla
liberacin
delosprincipios

Extraccinde
losprincipios
activos
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Compuestos
qumicos

estroma
Planta

molturacinpara
destruirelestroma

FACILITARla
liberacin
delosprincipios

Extraccinde
losprincipios
activos
T.GirbesyP.Jimnez

Cultivodecallosvegetalesde
unaplantaseleccionada(ej.
libredevirus)

Cultivodeplantitasderivadas
decallosvegetalesdeuna
plantaseleccionada(ej.libre
devirus)

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ADN
RTasa

mRNA

FragmentosdeADN

cADN
Insercinen
plsmidos
(ej.fagolambda

(Agrobacterium spp.)

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paclitaxel

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EXTRACCIN
Tratamientodelaplantacondisolventesparafacilitarlainteraccinfitoqumicodisolvente.
Extraccinsimpleomaceracin(encalientesedenominainfusin)

Extraccincontinuaopercolacin (seutilizaparalaextraccindeperfumesmuyvaliosos)

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EXTRACCIN
Tratamientodelaplantacondisolventesparafacilitarlainteraccinfitoqumicodisolvente.
Extraccinsimpleomaceracin

Extraccincontinuaopercolacin

Extraccinencontinuoareflujo(Soxhlet)(prcticasdeATA)

T.GirbesyP.Jimnez

T.GirbesyP.Jimnez

EXTRACCIN
Tratamientodelaplantacondisolventesparafacilitarlainteraccinfitoqumicodisolvente.
Extraccinsimpleomaceracin

Extraccincontinuaopercolacin

Extraccinencontinuoareflujo(Soxhlet)

Extraccinconfluidossupercrticos(EFS)
ConCO2 supercrtico:aceitesesencialesdeplantasaromticas,lpulo,aromasy
sabores,cafytsincafena.

T.GirbesyP.Jimnez

Extraccinconfluidossupercrticos(EFS)
ConCO2 supercrtico:aceitesesencialesdeplantasaromticas,lpulo,aromasy
sabores,cafytsincafena.
Estadointermedioentregasy
lquido.
Granaumentodelacapacidad
disolvente.
Presin
Pc

Fluido
supercrtico

slido
lquido

Punto
crtico
gas

Temperatura

Variacindelacapacidad
disolventeporvariacindePy
Tambosporencimadelpunto
crtico.
Laviscosidadesmuchoms
bajaqueladeloslquidos.

Tc

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Muybajatensinsuperficial
quepermiteunaalta
penetrabilidadatravsde
slidos
Mayordifusividad queen
lquidos

Propiedadescrticasdevariossolventes
Solvente

Pesomolecular T crtica PresincrticaDensidadcrtica

g/molKatmg/cm3

CO2

44,01

72,8

0,469

H2O

18,02 647,3218,3

0,348

Etileno

28,05

282,4

49,7

0,215

Propileno

42,08

364,9

45,4

0,232

512,679,8

0,272

Etanol

46,07 513,960,6

0,276

Acetona

58,08 508,146,4

0,278

Metanol32,04

304,1

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Propiedadescrticasdevariossolventes
Solvente

Pesomolecular T crtica PresincrticaDensidadcrtica

g/molKatmg/cm3

CO2

44,01

72,8

0,469

H2O

18,02 647,3218,3

0,348

Etileno

28,05

282,4

49,7

0,215

Propileno

42,08

364,9

45,4

0,232

512,679,8

0,272

Etanol

46,07 513,960,6

0,276

Acetona

58,08 508,146,4

0,278

Metanol32,04

304,1

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Ventajasdelaextraccinconfluidossupercrticos(reducenlosriesgosde
degradacindeprincipiosporlamanipulacin).
Flexibilidad
Selectividad
Bajocosto
Nodegradacindelosextractos
Fcilacoplamientoacromatgrafo degasesyaequipodeHPLC

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ExtraccinliquidoliquidoenSoxhlet condisolventesde
polaridadcreciente.
Losdistintosdisolventespermitenla
extraccindecompuestosdedistinta
polaridadsintenerquecalentaren
exceso.

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Extraccinlquidoliquido.
Esunaetapapreviaalaextraccincondiversosdisolventes.
Seutilizandosdisolventesinmisciblesqueseagitanconlamuestraduranteuncierto
tiempo.
Loscompuestosvanacadadisolventesegnsusolubilidadyafinidad.Sedenomina
tambindereparto.
Alfinalcadaunodelosdisolventesestenriquecidoendeterminadossolutosyno
enotros.Seutilizanfrascosdedecantacin.
Seutilizanlaspropiedadesacidobasedeloscompuestos,
jugandoconlospHdelosdisolventesdeextraccin.
Esteprocedimientoseutilizamuchoparaelaislamiento
dealcaloides.
Losalcaloidessuelentenernitrgenossecundarioso
terciariosquesonlosquelesconfierenlaspropiedadesde
alcaloide.
Enmediocidoformansalessolublesenagua.
Enmedioalcalinoformanlabaselibreinsolubleenagua
perosolubleendisolventesorgnicoscomoeletil acetato.
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Faseapolar

Concentracinde
compuestosapolares

Fasepolar

Concentracinde
compuestospolares

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Extraccinlquidoliquido.
Esunaetapapreviaalaextraccincondiversosdisolventes.
Seutilizandosdisolventesinmisciblesqueseagitanconlamuestraduranteuncierto
tiempo.
Loscompuestosvanacadadisolventesegnsusolubilidad.Sedenominatambin
dereparto.
Alfinalcadaunodelosdisolventesestenriquecidoendeterminadossolutosyno
enotros.Seutilizanfrascosdedecantacin.
Seutilizanlaspropiedadesacidobasedeloscompuestos,
jugandoconlospHdelosdisolventesdeextraccin.
Esteprocedimientoseutilizamuchoparaelaislamiento
dealcaloides.
Losalcaloidessuelentenernitrgenossecundarioso
terciariosquesonlosquelesconfierenlaspropiedadesde
alcaloide.
Enmediocidoformansalessolublesenagua.
Enmedioalcalinoformanlabaselibreinsolubleenagua
T.GirbesyP.Jimnez
perosolubleendisolventesorgnicoscomoeletil
acetato.

Faseapolar,
msligera

Fasepolar,
mspesada

T.GirbesyP.Jimnez

Alcaloidesbase/medioalc.
Carotenos,licopenos
Aceitesesenciales
Aromas
Polisacridossolubles
Polifenoles glucosilados
Vitaminashidrosolubles
Curcumina

morfina

Faseapolar,
msligera

Fasepolar,
mspesada

T.GirbesyP.Jimnez

Alcaloidesbase/medioalc.
Carotenos,licopenos
Aceitesesenciales
Aromas
(Curcumina)
Polisacridossolubles
Polifenoles glucosilados
Vitaminashidrosolubles
(Curcumina)

morfina
acetilo

Alcaloidesbase/medioalc.
Carotenos,licopenos
Faseapolar,
Papaver somniferum
Aceitesesenciales
msligera
(adormidera;contiene
Aromas

distintosalcaloides
Fasepolar,
mspesada

T.GirbesyP.Jimnez

Polisacridossolubles
Polifenoles glucosilados
Vitaminashidrosolubles
Curcumina

metoxi

morfina
acetilo

acetilo

Alcaloidesbase/medioalc.
Carotenos,licopenos
Faseapolar,
Papaver somniferum
Aceitesesenciales
msligera
(adormidera;contiene
Aromas

distintosalcaloides
Fasepolar,
mspesada

Polisacridossolubles
Polifenoles glucosilados
Vitaminashidrosolubles
Curcumina

Metoximorfina:codena
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Diacetilmorfina:herona

Morfinano decodena
ymorfina
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CODENA:RESTRICCIONESDEUSOCOMOANALGSICOENPEDIATRA
Fechadepublicacin:17dejuniode2013
Trasconocersecasosgraves,algunosdeellosmortales,asociadosalaadministracinde
codenaenniosparaeltratamientosintomticodeldolor,serecomiendanlassiguientes
restricciones:
Lacodenaestindicadanicamenteparaeltratamientodeldoloragudomoderadoennios
mayoresde12aosparalosquenoseconsidereadecuadoelusodeibuprofenooparacetamol
comonicoanalgsico.
Lacodenaesunopioideque,entreotrasindicaciones,seencuentraautorizadocomoanalgsico,
biencomomonofrmaco oencombinacinconotrosprincipiosactivos(paracetamol,ibuprofeno
ocidoacetilsaliclico).
Elefectofarmacolgicodelacodenasedebeasutransformacinenmorfinaatravsde
laenzimaCYP2D6delcitocromoP450.Existendiferenciasgenticasencuantoala
expresindeestaenzimaquedeterminanelgradodeestametabolizacin.
AslaspersonascondeficienciaenlaenzimaCYP2D6obtendrnunmenorefectoanalgsico
mientrasqueaquellasquetenganmsdedoscopiasdelgenquelacodifica
(metabolizadores ultrarpidos)transformarnlacodenaenmorfinamsrpidamentey
portantotendrnmsposibilidadesdepresentarreaccionesadversasderivadasdela
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intoxicacinpormorfina.

ARRASTREDEVAPOR
Unprocedimientosencilloquepermiteel
aislamientodesubstanciasvoltilesdelas
plantaeselarrastredevapor.
Elvapordeaguaextraelassubstancias
vaporizables quesecondensan
posteriormenteenmatracesjuntoconle
agua.Comonormalmentesoninmiscibles
conelaguaseformandoscapas
fcilmenteseparablespordecantacin.
Seutilizaparaelaislamientodeaceites
esencialesyaromasdeespeciasyplantas
aromticasqueposteriormentese
aadenalosalimentosylospreparados
farmacuticos.

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ARRASTREDEVAPOR
Unprocedimientosencilloquepermiteel
aislamientodesubstanciasvoltilesdelas
plantaeselarrastredevapor.
Elvapordeaguaextraelassubstancias
vaporizables quesecondensan
posteriormenteenmatracesjuntoconle
agua.Comonormalmentesoninmiscibles
conelaguaseformandoscapas
fcilmenteseparablespordecantacin.
Seutilizaparaelaislamientodeaceites
esencialesyaromasdeespeciasyplantas
aromticasqueposteriormentese
aadenalosalimentosylospreparados
farmacuticos.

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METODOSGENERALESDESEPARACIN.
Sublimacin(cafena)
Destilacin(productosvoltilesseparablesporelpuntodeebullicin;aceites
esenciales)
Liberacinfraccionada(solubilizacin acuosadesalesdealcaloidesenmezclas
complejasinsolublesenagua)
Cristalizacinfraccionada(seaprovechalasolubilidaddependientedetemperaturaen
diferentesdisolventes;ej.sacarosa)
Tcnicascromatogrficas.Sebasanenlaspropiedadesde:
adsorcindesorcin(columnaycapafina)
repartooparticin
exclusinmolecular(columna)
inicas(intercambioinico;columna)
afinidad(columna)
Electroforsis
Papelyderivadosdecelulosa
Gelesdepoliacrilamida(protenas;analtica)
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Capilar(analticaypreparativa)

Cromatografadeadsorcindesorcin.
Soporteslidomicroporoso (slice,almina,tierrade
diatomeas,caoln,carbonatoclcico,etc.)alquese
adsorbenloscompuestosdisueltosenundisolvente.
Loscompuestosadsorbidosseeluyen conelmismo
disolventeoconotrodiferente.
Laadsorcindependedefactoresdecargayde
polaridad.Losdisolventesjueganunpapel
importantealprovocarladesorcinselectivadecada
compuesto.

Ladeteccinserealizapor
Tincinoporvisualizacin
conlmparaUV.
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Cromatografadeintercambioinico
Cromatografadeafinidad(afinidadligandoreceptor)
Cromatografadeexclusinmolecular(masamolecularesrelativas)
Cromatografadepapel(aminocidosyalgunosproductonaturales)
Cromatografaencapafina
versatilidad
adsorbentesdesilica gel,celulosa,xidodealuminio,poliamida,
hidrxidoclcico
velocidad
sensibilidad
disolventesmscomunes:cloroformo,teretlico,etil acetato,ysusmezclas
Rf:distanciarecorrida/distanciadelfrente;hayqueintroducirpatronespuros
comoreferencias
Deteccin:serealizamediantepulverizacinconreactivosquedanproductos
coloreadosvisiblesdirectamenteomedianteluzultravioleta(ondacorta254nm
yondalarga365nm).Enalgunoscasossepuedeutilizartambindirectamente
laluzUV.
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Capafinapreparativa:seaplicalamuestraenunalneacontinua.

Cromatografadeintercambioinico
Cromatografadeafinidad(afinidadligandoreceptor)
Cromatografadeexclusinmolecular(masamolecularesrelativas)
Cromatografadepapel(aminocidosyalgunosproductonaturales)
Cromatografaencapafina
versatilidad
adsorbentesdesilica gel,celulosa,xidodealuminio,poliamida,
hidrxidoclcico
velocidad
sensibilidad
disolventesmscomunes:cloroformo,teretlico,etil acetato,ysusmezclas
Rf:distanciarecorrida/distanciadelfrente;hayqueintroducirpatronespuros
comoreferencias
Deteccin:serealizamediantepulverizacinconreactivosquedanproductos
coloreadosvisiblesdirectamenteomedianteluzultravioleta(ondacorta254nm
yondalarga365nm).Enalgunoscasossepuedeutilizartambindirectamente
laluzUV.
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Capafinapreparativa:seaplicalamuestraenunalneacontinua.

T.GirbesyP.Jimnez

Cromatografadegases

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T.GirbesyP.Jimnez

Cromatografalquidadealtaeficacia(HPLC)

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Cromatografalquidadealtaeficacia(HPLC)

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T.GirbesyP.Jimnez

ESPECTROMETRADEMASAS
Fragmentacinyseparacindelos
ionespositivosporrelacin
masa/carga.

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Espectrometrademasasdelectinas deS.ebulus
Jimenez ycols.(2013)Food Chemistry (136:79480)

SELfd
Lectina deltipoBBdefrutosdelsaco
enano(Sambucus ebulus)

Ebulina f
protenainactivadora deribosomasdel
tipoABdefrutosdelsacoenano
(Sambucus ebulus)

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Espectrometrademasasdelectinas deS.ebulus
Jimenez ycols.(2013)Food Chemistry (enprensa)

Pptidostrpticosde
SELfd

Pptidostrpticosde
ebulina f

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