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CURSO
: MICROBIOLOGA ANIMAL
PROFESOR
ALUMNO
CICLO
: 2015- II
Objetivos:
El presente trabajo practico tiene por objetivo brindar al alumno
herramientas bsicas en laconfeccin y el manejo de extendidos y la
tincin de los mismos de acuerdo a la observacin que se desee
realizar.
El alumno aprender y aplicar las tcnicas bsicas de tincin ms
frecuentes.
2.2.-TINCIN DE BACTERIAS
La clula bacteriana intacta se tie fcilmente con colorantes bsica
como el cristal, azul de metileno y fucsina bsica, pero relativamente mal
con colorantes cidos como la eosina.
Un colorante bsico es aquel constituido por un agrupamiento de tomos
orgnicos con carga positiva que ser la parte activa del colorante ya
que tendr afinidad por los cidos nucleicos. Un colorante cido es aquel
que se encuentra constituido por tomos orgnicos con carga neta
negativa por lo cual tiene afinidad por el citoplasma.
2.3.- Tinciones
2.4.2.-
Tincin
RODAMINA-AURAMINA
Los cidos miclicos de las paredes celulares de las mico bacterias poseen
afinidad para los fluorocromos auramina y rodamina. Estos colorantes se fijan a
las bacterias, que aparecen de color amarillo o naranja brillante contra un fondo
verdoso. El permanganato de potasio, empleado como contraste, evita la
fluorescencia
inespecfica.
Todos
los
microorganismos
cido-alcohol
coccdeos
como Cryptosporidium se
caracterizan
por
sus
propiedades de cido-alcohol resistencia. La coloracin clsica de ZiehlNeelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared
bacteriana que contiene ceras.
Se ha desarrollado una coloracin de cido-alcohol resistencia modificada que
diferencia las especies de Nocardia (bacterias ramificadas filamentosas cuyas
paredes celulares contienen cidos-grasos de unos 50 tomos de carbono), de
los actinomiceos (muy semejantes pero no cido-alcohol resistentes). Nocardia
spp son decoloradas por la mezcla cido-alcohol estndar pero no por un
tratamiento ms suave con cido sulfrico 0,5 a 1%. Estos microorganismos se
denominan cido-alcohol resistentes parciales o dbiles.
El frotis se tie durante unos 5 min con Carbolfucsina aplicando calor suave.
Lavar con agua. Decolorar con alcohol etlico 95% con un 3% de ClH
concentrado. Lavar y teir durante 30-60 seg con Azul de Metileno (color de
contraste). Lavar y secar
BLANCO DE CALCOFLOR
Las paredes celulares de los hongos fijan el colorante blanco de calcoflor
aumentando considerablemente su visibilidad en los tejidos y otras muestras.
Segn fue descrito por Hageage y Harrington, este colorante se emplea en
lugar de KOH al 10% para el examen inicial de los materiales clnicos. Tambin
se emplea para aumentar la visualizacin de los elementos morfolgicos de los
cultivos puros de los hongos. En algunos laboratoros ha suplantado al azul de
lactofenol en muchas aplicaciones. Los organismos fluorescen con luz blancoazulada o verde manzana, segn la fuente luminosa que se utilice.
2 portaobjetos
Asa bacteriolgica
Aceite de inmersin
Microscopio
Mechero
Azul de metileno de Leffler
Cepa de staphylacocos
Cepa de streptococos
Agua estril
Guates
3.3.- Metodologa
La metodologa que utiliz el profesor fue terico y prctico, en lo terico realizo
una amplia explicacin de los diferentes tinciones y basndonos ala tincin
simple y que bacterias debemos utilizar y como lo debemos de utilizaren el
transcurso de la prctica de los resultados explicaremos con detalle cmo se
realiza.
IV.- RESULTADOS.
V.- DISCUSIN
VI.- CONCLUSIN
general de
esta
tincin
es
destacar
por
completo
el
VII.- BIBLIOGRAFA
Venezuela.
https://es.scribd.com/doc/80998594/Tincion-Simple
Pelczar and Chan. 1977.Laboratory Exercises in Microbiology. Fourth