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TEMA:
Ensayo de Micronucleos con el Pez Cebra
PROFESOR:
Blgo. Flix Alvarez Alvarez
FECHA:
07 de Noviembre
INTEGRANTES:
I.
INTRODUCCION
II.
OBJETIVO
Conocer el ncleo de los glbulos rojos del Pez Cebra Danio rerio y microncleos en
sus diferentes tipos afectados por xenobioticos.
III.
MARCO TEORICO
a. TOXICOLOGIA ACUATICA
Una gran cantidad de compuestos txicos, como los de origen natural y antrpico,
llegan a los ecosistemas acuticos, donde son absorbidos acumulados,
biotransformados por procesos biolgico y/ o qumicos. Estos compuestos disueltos o
dispersos en el agua, ingresan a los organismo, estas sustancias toxicas interactan en
diversos procesos fisiolgicos y rutas metablicas.
Se pueden definir dos tipos de contaminacin:
I.
Contaminacin puntual o localizada donde los contaminantes ingresan de
forma directa a los cursos acuticos (tpica de efluentes urbanos e
industriales).
II.
Contaminantes difusa o no localizada, donde no existe un punto claro de
ingreso al curso de aguas (tpicamente la producida por actividades agrcolas).
En el primer caso, las fuentes son fciles de identificar, monitorear y regular, pero
producen un alto impacto sobre el sitio inmediato que recibe la descarga.
El segundo caso los contaminantes (pesticidas fertilizante y otros qumicos)
generalmente son arrastrados por lixiviados y escorrenta, del medio terrestre al
medio acutico.
b. GENOTOXICIDAD
Dentro de los contaminantes que pueden ingresar a los ecosistemas, se encuentran los
agentes genotoxicos. Dicho agentes actan indirectamente sobre el material gentico y
producen efectos detectables.
c. ENSAYO DE MICRONUCLEOS
La contaminacin por alcoholes produce cambios a nivel de micro ncleos (MN) son
indicadores de dao cromosmico que se originan durante la divisin celular, tanto
por los fragmentos acntricos o cromosomas que no se incorporan en los ncleos
hijos. Esto se debe a la ocurrencia de eventos clastogenicos (perdida de unos
fragmentos cromosmicos acntricos) o aneurogenico (perdida de cromosomas
completos) ocurridos en algn momento del ciclo celular provocados por la accin de
agentes genotpicos.
IV.
REACTIVOS.
EQUIPOS:
MATERIALES.
MUESTRA BIOLGICA:
V.
PROCEDIMIENTO
2. Se sacrifican realizando un corte en la parte anterior del mismo, entre el oprculo y las
aletas
pectorales,
con
la
finalidad
de
obtener
la
sangre
perifrica.
5. Se sumergen las muestras en etanol absoluto frio por 15 minutos. Luego se procede a
retirarlas y dejarlas secar por 15 minutos a temperatura ambiente.
8. Se lava con agua destilada para retirar el exceso de colorante y dejar secar a temperatura
ambiente.
VI.
RESULTADOS
Como resultado luego de la evaluacin de clulas sanguneas del Pez Cebra (Danio
rerio) se pudo observar eritrocitos con ncleo en posicin central de forma elptica de
contornos definidos, esto corresponderan a eritrocitos normales. Sin embargo tambin
se pudo notar la existencia de eritrocitos con alteraciones en la morfologa nuclear,
esto correspondera a una anomala por generacin espontanea, ya que no se haba
inducido ningn tipo de xenobitico antes del experimento a la muestra en anlisis.
La principal caracterstica de estas anormalidades radica en que los eritrocitos
presentan Nuclear buds (brotes nucleares) como se puede ver en la Imagen.
VII.
DISCUSION DE RESULTADOS
Este anlisis se desarrollo en ausencia de un agente xenobitico, sin embargo si
contrastamos un caso en el que se aplico Dicromato de Potasio como xenobitico a
eritrocitos de sangre perifrica de oreochromis niloticus (tilapia) se observo que los
resultados son distintos. Esta variacin podra sustentarse en el hecho de que se tratan
de especies de muestra distinta, sin embargo buscamos demostrar que la mayora de
estas anormalidades se deben a la presencia y naturaleza del xenobitico.
El dao gentico producido por el Cr(VI) de K2 C2 rO7 se observ por un incremento
de microncleos y nuclear buds en los eritrocitos de sangre perifrica de O. niloticus.
La regresin estimada entre las concentraciones utilizadas y los valores de MN y
nuclear buds demuestran un efecto dosis dependiente durante la exposicin a los tres
das con K2 C2 rO7 . De acuerdo a los trabajos realizados en diferentes especies y con
diferentes genotxicos, se observa que durante los primeros das de exposicin existen
incrementos progresivos de microncleos y despus de esos das los valores
disminuyen. Zulita Prieto (2008).
VIII.
CONCLUSIONES
IX.
BIBLIOGRAFIA