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Hydrolab Microbiologica. c/ Blanco 38. 08028 Barcelona. Telf. 93 411 09 40. c.e:
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2
Dep. Biologia Animal, Facultat de Biologia, UB. Avda. Diagonal 645. 08028 Barcelona. c.e.:
hsalvado@ub.edu
RESUMEN
Conocer las comunidades de los microorganismos presentes en los sistemas de
depuracin por fangos activos es importante debido a su utilizacin como
bioindicadores del proceso de depuracin, constituyendo una herramienta muy
importante para el control y la gestin de estos procesos de depuracin.
El principal objetivo de este proyecto es el de caracterizar la microfauna de una serie de
estaciones depuradoras de aguas residuales urbanas, as como estudiar las relaciones que
se establecen entre las especies o grupos de microorganismos y los parmetros
fisicoqumicos y operacionales del proceso de depuracin.
En total se analizaron 106 muestras correspondientes a 20 depuradoras urbanas, de las
cuales 10 tienen un tratamiento convencional de fangos activos y las otras 10, un
tratamiento de eliminacin de nutrientes, ya que abocan las aguas a zonas sensibles a la
eutrofizacin.
La caracterizacin de las comunidades de microorganismos se realiz a partir de anlisis
de bioindicacin, en los cuales se identificaron y se realiz el recuento de los diversos
tipos de microorganismos presentes en los fangos activos, adems, se analiz el estado
del fango.
Por ultimo, tambin se analizaron los microorganismos que suelen producir los
principales problemas presentes en las plantas depuradoras, y que suelen provocar que
la calidad del efluente disminuya notablemente, llegando incluso a no cumplir con los
lmites de la Directiva 91/271/CEE.
A partir de los resultados obtenidos con este estudio se han podido determinar algunas
diferencias entre las depuradoras con tratamiento convencional y las depuradoras con
tratamiento de eliminacin de nutrientes. Se ha comprobado que la mayora de las
depuradoras estudiadas cumplan con los valores lmite establecidos por la Directiva
europea 91/271. Adems, tambin se han determinado las especies o grupos de
microorganismos ms frecuentes y abundantes en estas depuradoras, as como los
principales causantes de los problemas que tienen.
NDICE
1. INTRODUCCIN ..................................................................................................7
1.1. DEPURACIN BIOLGICA DE LAS AGUAS RESIDUALES...................7
1.2. SISTEMA DE DEPURACIN MEDIANTE FANGOS ACTIVOS ...............7
1.2.1. Tratamiento de eliminacin de nutrientes...............................................7
1.2.2. Parmetros operacionales y de control ...................................................8
1.2.2.1. Carga orgnica .........................................................................8
1.2.2.2. Concentracin de biomasa .......................................................8
1.2.2.3. Carga msica (F/M) .................................................................9
1.2.2.4. Edad del fango o tiempo medio de retencin celular...............9
1.2.2.5. ndice volumtrico de fangos (IVF).........................................9
1.2.3. Fundamento del proceso .........................................................................9
1.2.4. Formacin del flculos ...........................................................................10
1.3. LOS MICROORGANISMOS DE LOS SISTEMAS BIOLGICAS DE
DEPURACIN........................................................................................................13
1.3.1 Bacterias ..................................................................................................13
1.3.2. Protozoos ................................................................................................15
1.3.3. Metazoos.................................................................................................17
1.4. RELACIONES TRFICAS ENTRE LOS MICROORGANISMOS ..............18
1.5. SUCESIN TEMPORAL ................................................................................18
1.6. UTILIZACIN DE LA MICROFAUNA COMO BIOINDICADOR
DEL PROCESO.......................................................................................................19
1.7. PROBLEMAS DE SEPARACIN LQUIDO/SLIDO EN EL
TRATAMIENTO DE FANGOS ACTIVOS ..........................................................20
1.7.1. Pin-point floc o pin-floc..........................................................................20
1.7.2. Bulking viscoso.......................................................................................21
1.7.3. Ascensin de los fangos..........................................................................22
1.7.4. Bulking filamentoso ................................................................................23
1.7.5. Foaming..................................................................................................24
2. OBJETIVOS ...........................................................................................................25
3. MATERIALES Y MTODOS ..............................................................................26
3.1. DESCRIPCIN DE LAS ESTACIONES DEPURADORAS DE AGUAS
RESIDUALES .........................................................................................................26
3.2. RECOGIDA DE LAS MUESTRAS.................................................................27
3.3. OBSERVACIN MICROSCPICA ...............................................................27
3.4. DETERMINACIN DEL ESTADO MORFOLGICO Y ESTRUCTURAL
DEL FANGO...........................................................................................................28
3.4.1 Tamao ....................................................................................................28
3.4.2. Estructura................................................................................................28
3.4.3. Grado de cobertura (concentracin) .......................................................28
3.4.4. Otras observaciones ...............................................................................29
3.5. DETERMINACIN DE LOS PARMETROS BIOLGICOS..........................29
3.5.1. Identificacin de los microorganismos ...................................................29
3.5.1.1. Tcnicas de tincin ..................................................................29
3.5.2. Determinacin de los microorganismos .................................................31
3.5.3. Cuantificacin de los microorganismos..................................................32
3.5.3.1. Protozoos, gimnamebas medianas y grandes y metazoos........32
3.5.3.2. Protozoos flagelados y gimnamebas de tamao pequeo........33
3.5.3.3. Recuento de microorganismos filamentosos ...........................34
3.5.4. Determinacin del ndice de diversidad .................................................34
3.6. ANLISIS ESTADSTICOS ................................................................................35
4. RESULTADOS Y DISCUSIN ............................................................................35
4.1. EL AFLUENTEE ..................................................................................................35
4.1.1. Caracterizacin del afluente ...................................................................36
4.1.2. Relaciones entre los parmetros fsico-qumicos ...................................36
4.1.3. Biodegradabilidad del agua del afluente.................................................37
4.2. EL EFLUENTE .....................................................................................................39
4.2.1. Caracterizacin del efluente ...................................................................39
4.2.2. Relaciones entre los parmetros fsico-qumicos ...................................41
4.2.3. Rendimiento operacional de las depuradoras estudiadas........................42
4.3. CARACTERIZACIN DEL FANGO..................................................................43
4.3.1. Tamao ...................................................................................................43
4.3.2. Estructura................................................................................................45
4.3.3. Grado de cobertura (concentracin) .......................................................46
4.3.4. Otras observaciones ................................................................................47
4.3.4.1. Bacterias dispersas ...................................................................47
4.3.4.2. Bacterias helicoidales...............................................................48
4.3.4.3. Bacterias PAO y GAO .............................................................49
4.3.4.4. Zoogloea ..................................................................................50
4.4. COMUNIDADES DE MICROORGANISMOS FILAMENTOSOS ...................51
4.4.1. Clasificacin de los microorganismos filamentosos...............................51
4.4.2. Porcentajes de aparicin de los filamentos dominantes y secundarios...52
4.4.3. Relaciones entre los microorganismos filamentosos y los
parmetros fsico-qumicos...............................................................................53
4.4.4. Microorganismos filamentosos ms relevantes ......................................56
4.4.4.1. Microthrix parvicella ...............................................................56
4.4.4.2. Actinomicetos nocardioformes ................................................57
4.4.4.3. Tipo 021N ................................................................................58
5
1. INTRODUCCIN
1.1. DEPURACIN BIOLGICA DE LAS AGUAS RESIDUALES
La depuracin biolgica de las aguas residuales consiste en la coagulacin y
eliminacin de los slidos coloidales no sedimentables y la estabilizacin de la materia
orgnica presente en el agua mediante la accin de los microorganismos (Metcalf y
Eddy, 1995). As mismo, este conjunto de microorganismos es capaz de eliminar
compuestos nitrogenados, fosfatos y otras sustancias txicas. Durante este proceso,
transforman los contaminantes presentes en las aguas residuales en nueva biomasa,
dixido de carbono y otros productos finales, que dependern de la naturaleza de los
contaminantes y de la distribucin de los microorganismos (Irvine et al, 1988).
Hay muchos tipos de procesos biolgicos aplicados al tratamiento de les aguas
residuales, ya que pueden tratarse de procesos aerbicos, anaerbicos, anxicos,
procesos combinados y sistemas de lagunaje. A la vez, estos procesos es poden dividir
segn si el tratamiento se lleva a cabo en un sistema de cultivo en suspensin, fijo o si
resulta una combinacin de los dos (Metcalf y Eddy, 1995).
1.2. SISTEMA DE DEPURACIN MEDIANTE FANGOS ACTIVO
La depuracin mediante fangos activos consta de un sistema biolgico de tratamiento
aerobio de cultivo en suspensin. Este proceso es basa en el cultivo suspendido de
forma continua, mediante aeracin o agitacin, de una masa de microorganismos
encargados de degradar los residuos del agua por va aerbica (Henze et al., 1995). Esta
suspensin se denomina licor mezcla.
Este sistema de depuracin fue desarrollado por Arden y Lockett (Rius, 2003) al
introducir la recirculacin de la suspensin formada por biomasa activa que se haba
formado durante el perodo de aeracin del agua residual.
1.2.1. Tratamiento de eliminacin de nutrientes
Junto con la eliminacin de la materia orgnica, en las zonas calificadas como sensibles
segn la Directiva 91/271/CEE, las depuradoras tienen que eliminar nitrgeno y/o
fsforo, para evitar la eutrofizacin del medio receptor.
Donde:
Q DBO5
VX
x =
Donde:
VX
Qw X w + (Qe Qw ) X e
Donde:
V30 1000
X
11
La correcta formacin de los flculos determina la calidad de los fangos activos, puesto
que est relacionada con la sedimentabilidad, el esponjamiento y el espesamiento del
fango, y con la calidad final del efluente. Una completa observacin del fango,
incluyendo el anlisis microscpico para examinar las caractersticas tpicas del flculo
cmo pueden ser el tamao, la forma, la estructura, la consistencia, etc., es necesaria
para evitar problemas indeseados en la sedimentacin.
12
13
Por otra parte, las bacterias tambin se pueden clasificar segn sus propiedades
metablicas y el tipo de sustrato del que son capaces de alimentarse (Wanner, 1994),
distinguindose los siguientes grupos:
a) Bacterias aerbicas hetertrofas: corresponden a la mayora de las bacterias presentes
en los fangos activos. Son bacterias capaces de metabolizar la materia orgnica
biodegradable presente en el agua residual.
b) Bacterias nitrificantes: son bacterias auttrofas y aerbicas estrictas. Los gneros ms
importantes en fangos activos son Nitrosomonas y Nitrobacter, que son responsables,
respectivamente, de la oxidacin del amonaco a nitrito y posteriormente a nitrato (Ros,
2003).
c) Bacterias desnitrificantes: son bacterias anaerbicas facultativas capaces de utilizar el
nitrato como aceptor final de electrones, convirtiendo el nitrato en nitrgeno
atmosfrico (Henze et. al., 1995).
d) Bacterias fermentativas: estas bacterias pueden realizar reacciones que tienen lugar
en ausencia de oxgeno y nitrgeno. Slo son abundantes en fangos activos si se
produce un mal funcionamiento del sistema o en la zona anaerobia en sistemas con
procesos biolgicos de eliminacin de fsforo.
e) Bacterias acumuladoras de polifosfatos (PAO): incluyen todas aquellas bacterias
capaces de acumular grandes cantidades de fosfatos en forma de grnulos de
polifosfatos. Este fosfato es utilizado por las bacterias como reserva de energa y, en
condiciones anaerbias, para asimilar el carbono orgnico y almacenarlo en forma de
grnulos de poli-hidroxibutirato (grnulos de PHB) (Beccari y Ramadori, 1994). En este
estudio no se han diferenciado de las bacterias acumuladoras de glicgeno (GAO) dado
que son morfolgicamente iguales. Por esta razn en este estudio se habla de bacterias
PAO/GAO.
f) Bacterias sulfato-reductoras: son bacterias anaerobias estrictas que pueden utilizar los
sulfatos como aceptor de electrones, reducindolos a sulfuros.
g) Bacterias sulfuroxidantes: son capaces de oxidar las formas reducidas de azufre hasta
azufre elemental, forma que estas bacterias pueden acumular como reservas
intracelulares (grnulos refulgentes, visibles con el microscopio ptico con contraste de
fases). Estas reservas pueden ser metabolizadas en condiciones aerobias con carencia de
14
sustrato externo. En fangos activos son importantes las bacterias filamentosas Thiothrix
y Beggiatoa, entre otros (Wanner, 1994).
1.3.2. Protozoos
Los protozoos son organismos unicelulares eucariotas, no tan abundantes como las
bacterias, pero con un papel muy importante en la clarificacin del agua residual puesto
que se alimentan de las bacterias libres presentes en los sistemas de fangos activos.
Adems, segregan enzimas que estimulan la floculacin de las bacterias (Curds, 1963).
Dentro de los protozoos que podemos encontrar en los fangos activos diferenciamos tres
grandes grupos segn su morfologa y movilidad: flagelados, amebas y ciliados.
Flagelados: los protozoos flagelados poseen uno o ms flagelos que utilizan para el
desplazamiento y/o la alimentacin. Se distinguen dos grupos, los fitoflagelados y los
zooflagelados (Levine et. al., 1980). Entre los primeros se encuentran aquellos gneros
que presentan plastos y que normalmente no son abundantes en los sistemas de fangos
activos debido a que la turbidez del agua no permite el paso de la luz. Los zooflagelados
son hetertrofos y son frecuentes en los fangos activos, su abundancia puede variar de
pocos centenares de clulas por mililitro a millones de clulas por mililitro (Salvad et
al, 1997). Pueden alimentarse de materia orgnica soluble o de bacterias (Wanner,
1997). Los flagelados, en concreto los de pequeo tamao (< 20 m), aparecen
principalmente en las fases de inicio de la colonizacin de los fangos activos o bien
asociados a un mal funcionamiento del proceso, como por ejemplo una baja
concentracin de oxgeno disuelto o un exceso de carga orgnica (Madoni, 1991). Son
ejemplos comunes de flagelados presentes en sistemas de depuracin biolgicos los
gneros Bodo, Peranema, Entosiphon, etc.
Rizpodos o amebas: este tipo de microorganismos se desplazan mediante la emisin de
seudpodos (extensiones del propio cuerpo). Se alimentan de materia orgnica
particulada, bacterias y otros protozoos mediante fagocitosis. Se distinguen dos grupos
segn la presencia o ausencia de teca: las gimnamebas o amebas desnudas, con el
cuerpo sin forma definida, y las tecamebas, que presentan una estructura de proteccin
denominada teca que recubre la clula. Al igual que los flagelados, las gimnamebas de
pequeo tamao (< 20 m) suelen asociarse a bruscos incrementos en la carga orgnica
del afluente, apareciendo sobre todo en las primeras etapas de colonizacin de un fango
(Sangesa et al., 2007). Contrariamente, las de tamao grande (> 50 m) suelen
15
16
17
Figura 1.1. Esquema de las relaciones trficas entre los grupos de microorganismos que forman la
comunidad bitica del proceso de fangos activos (Salvad, 2006b).
18
sistema, las cuales acaban llevando a una situacin de estabilidad dinmica dentro del
reactor aerobio (Madoni, 1994). La modificacin de alguna variable que altere las
interrelaciones puede alterar gravemente el correcto funcionamiento del sistema.
En las primeras etapas de puesta en marcha de una planta o en edades del fango bajas
hay muchos nutrientes disponibles respecto la cantidad de microorganismos presentes,
siendo la carga msica muy elevada (superior a 1 Kg DBO5/kg SSVLM). En estos
ambientes los primeros microorganismos que aparecen son las bacterias libres, que
tienen una tasa de divisin muy elevada. Estas van retirando materia orgnica del
sistema permitiendo que otros microorganismos colonicen el medio. A medida que va
incrementando la edad del fango, van apareciendo diferentes tipos de protozoos:
primero los flagelados de pequeo tamao y pequeos ciliados libre-nadadores, despus
otros ciliados nadadores as como reptantes y, posteriormente, ciliados ssiles y
metazoos. Las bacterias dispersas van desapareciendo, siendo sustituidas por bacterias
floculantes y filamentosas, y los flculos van compactndose y aumentando de tamao.
Esta evolucin temporal en la sucesin nos indica una mejora de la calidad del proceso
de depuracin y, en consecuencia, del agua de salida de la planta. Si esta sucesin
sucediera a la inversa, indicara que las condiciones del sistema estn empeorando y,
por lo tanto, la calidad del efluente tambin disminuira.
1.6. UTILITZACIN DE LA MICROFAUNA COMO BIOINDICADOR DEL
PROCESO
La bioindicacin se puede definir como un mtodo de trabajo en el cual, a travs de la
observacin microscpica de un fango activo, podemos saber como est funcionando el
proceso y como modificar los parmetros operacionales para obtener un rendimiento
ptimo.
Los microorganismos que se utilizan en la bioindicacin son, principalmente, los
protozoos y los metazoos. La abundancia y diversidad de sus comunidades son
fundamentales para evaluar el grado de funcionamiento de los sistemas y la calidad del
efluente. Las comunidades, pero, van cambiando a medida que varan las diferentes
variables de funcionamiento de los reactores aerobios, por lo tanto, no se pueden hacer
generalizaciones. As y todo, existen grupos de microorganismos que toleran rangos
muy estrechos de ciertas condiciones ambientales, y su presencia en un sistema indicar
condiciones determinadas del medio.
19
PROBLEMAS
DE
SEPARACIN
LQUIDO/SLIDO
EN
EL
Jessica Vasco
Figura 1.2. Microfotografa en contraste de fases que muestra la apariencia de los flculos en una
situacin de pin-point floc. (100x aumentos).
Los factores que pueden interrumpir la formacin de los flculos y producir pin-point
floc son: una edad del fango muy baja o una excesiva edad del fango, turbulencias
excesivas en el reactor aerobio, presencia de txicos o surfactantes y deficiencia de
oxgeno (Martnez, 2006).
1.7.2. Bulking viscoso
Este problema, tambin conocido como bulking no filamentoso, se produce por una
produccin excesiva de polmeros extracelulares, normalmente asociada al crecimiento
de las bacterias floculantes como Zoogloea o bacterias PAO/GAO (Figura 1.3). Esta
produccin excesiva de exopolmeros puede dar una consistencia gelatinosa al fango
activo, provocando una reduccin de la velocidad de sedimentacin y de la
compactacin del fango (Jenkins et. al., 1993), as como disminuir su rendimiento de
deshidratacin. Frecuentemente tambin se producen espumas producidas por los
exopolmers que generan el bulking viscoso.
La excesiva presencia de los polmeros extracelulares se puede poner de manifiesto
microscpicamente con tinta china (Jenkins et. al., 1993). Se deposita una gota de tinta
china junto al cubreobjetos con la muestra y se deja que penetre por el cubreobjetos. Si
hay una excesiva cantidad de exopolmeros la tinta no penetrar dentro de los flculos.
Los principales factores que producen bulking viscoso son la deficiencia de nutrientes,
la deficiencia de oxgeno y cargas msicas elevadas (Richard, 2003).
21
a)
Jessica Vasco
b)
Jessica Vasco
Figura 1.3. Microfotografas en contraste de fases de las bacterias que pueden producir bulking viscoso:
a) bacterias PAO/GAO; b) bacteria Zoogloea. (1000x aumentos).
22
natans, Thiothrix I y II o el Tipo 021N originan puentes interfloculares (Jenkins et. al.,
2003).
Para determinar episodios de esponjamiento del fango generalmente se utiliza como
referencia el ndice volumtrico del fango (IVF). As, la probabilidad de producirse
problemas por bulking filamentoso es importante cuando el IVF toma valores superiores
a los 150-200 ml/g. Microscpicamente, se habla de susceptibilidad de producirse un
episodio de bulking filamentoso cuando la concentracin total de microorganismos
filamentosos supera los 200 m/ml (Salvad, 1990).
Jessica Vasco
Jessica Vasco
Figura 1.4. Microfotografias en contraste de fases de los efectos de los microorganismos filamentosos en
la morfologia de los flculos: (a) puentes interfloculares (100x); (b) estructura flocular difusa. (400x).
23
Las principales causas que provocan bulking filamentoso son aquellas que producen un
crecimiento masivo de los microorganismos filamentosos, y en general son:
concentraciones bajas de oxgeno disuelto, cargas msicas bajas, septicidad
(concentracin de sulfuros), deficiencia de nutrientes, pH bajos y presencia de grasas
y/o aceites (Jenkins et. al., 2003). No todos los microorganismos proliferan con las
mismas condiciones, por eso es importante una correcta identificacin microscpica de
los microorganismos filamentosos. En la tabla 1.1. se muestran las principales posibles
causas y los microorganismos filamentosos relacionados con estas causas.
Tabla 1.1. Resumen de las condiciones asociadas con el crecimiento de los microorganismos
filamentosos en los sistemas de fangos activos (adaptado a partir de Jenkins et al., 2003).
Causas
Concentracin de oxgeno disuelto
baja
Septicidad
Deficiencia de nutrientes
Carga msica baja
Aceites y/o grasas
pH bajo
Microorganismos filamentosos
1.7.5. Foaming
El foaming o espumas es otro problema relacionado con la abundancia elevada de
algunos microorganismos filamentosos especficos que provoca la aparicin de
flotantes, tambin denominados natas, en la superficie tanto del reactor aerobio como
del decantador secundario. Tambin existen otros tipos de espumas como las originadas
por surfactantes biodegradables y no biodegradables, que suelen aparecer en puestas en
marcha de procesos (EMASESA, 1997).
Los microorganismos filamentosos o grupos de microorganismos filamentosos que
pueden provocar espumas son principalmente tres: los actinomicetos nocardioformes y
Microthrix parvicella (los dos ms comunes) y el Tipo 1863 (pocas veces). Adems de
estos tres, hay otros microorganismos filamentosos que tambin se han encontrado en la
observacin de espumas, lo que podra indicar que tambin provocan espumas. Estos
24
otros microorganismos son: el Tipo 0041, el Tipo 0675, el Tipo 0092 y Nostocoida
2. OBJECTIVOS
El principal objetivo de este proyecto ha sido el de estudiar el proceso de depuracin de
una serie de depuradoras biolgicas de fangos activos, con tratamiento convencional y
tratamiento de eliminacin de nutrientes (nitrgeno y fsforo), y caracterizar las
comunidad de microorganismos presentes en estos sistemas.
25
Ampliar los conocimientos sobre el proceso de depuracin por fangos activos y las
comunidades de microorganismos tiene como objetivo mejorar la gestin de los
procesos de depuracin para reducir el impacto ambiental provocado por los vertidos de
las aguas depuradas al medio receptor.
Como objetivos ms concretos nos hemos propuesto:
1.- Analizar el proceso de depuracin de las depuradoras estudiadas a travs de los
parmetros fsico-qumicos, tanto del afluente como del efluente, y operacionales del
proceso.
2.- Estudiar las diferencias existentes, en cuanto a la eficiencia del tratamiento, entre los
sistemas de tratamiento convencionales y lo de eliminacin de nutrientes.
3.- Caracterizar la estructura flocular del fango.
4.- Determinar las comunidades de los microorganismos que se desarrollan en los
sistemas de depuracin mediante fangos activos convencionales y con eliminacin de
nutrientes.
5.- Estudiar las relaciones que se establecen entre las especies o grupos de
microorganismos y los parmetros fsico-qumicos y operacionales del proceso de
depuracin.
6.- Analizar los efectos de los microorganismos filamentosos sobre los fangos activos y
estudiar los principales problemas de separacin lquido-slido que producen.
3. MATERIALES Y MTODOS
3.1. DESCRIPCIN DE LAS ESTACIONES DEPURADORAS DE AGUAS
RESIDUALES
Para realizar este estudio se han identificado las poblaciones de microorganismos y las
estructuras floculares en dos grupos diferenciados de muestras:
106 muestras correspondientes a 20 EDARs urbanas (EDARU) de la comarca de
Lrida, comprendidas en el periodo de 2005 a 2007.
De estas 20 depuradoras, la mitad corresponden a depuradoras con tratamiento
convencional, representando un total de 55 muestras, y la otra mitad a depuradoras con
tratamiento de eliminacin de nutrientes, constituyendo 51 muestras.
26
27
3.4.2. Estructura
Tambin se observ el grado de compactacin del flculo. Se determin observando
tambin entre 10 y 20 flculos (EMASESA, 1997), distinguiendo entre:
-
28
Baja: los flculos cubren menos del 10 % de la superficie del campo visual.
Muy elevada: los flculos cubren ms del 90 % de la superficie del campo visual.
29
30
31
Microorganismos filamentosos
La determinacin de los microorganismos filamentosos se realiz preferentemente a
1000x aumentos mediante observaciones en vivo con microscopa de contraste de fases
y con la utilizacin de un objetivo de inmersin. En algunas ocasiones, cuando no se
poda identificar el filamento con este estudio, se utilizaron las tinciones mencionadas
anteriormente (Gram, Neisser, PHB, tincin de vaina y test de azufre), la observacin de
las cuales se realiz mediante microscopa de campo claro a 1000x aumentos. La
determinacin se realiz atendiendo a una serie de caractersticas morfolgicas y
estructurales segn Jenkins et. al. (1993). Algunos microorganismos filamentosos se
encuentran caracterizados a nivel taxonmico, recibiendo su denominacin de gnero y
especie, otros slo estn determinados como integrantes de un gnero e incluso la
mayora reciben una identificacin alfanumrica atendiendo a caracteres morfolgicos.
3.5.3. Cuantificacin de los microorganismos
El recuento de los diferentes tipos de microorganismos se ha realizado mediante la
observacin en vivo, con un microscopio NIKON, modelo Eclipse 50i, utilizando la
iluminacin de contraste de fases.
Para realizar el recuento se agita suavemente la muestra para homogeneizarla totalmente
pero sin llegar a afectar a la estructura flocular. Los recuentos se realizan a partir de 1 a
4 submuestras de 25 l dosificadas con una micropipeta. A continuacin se deposita la
gota sobre un portaobjetos y se tapa con un cubreobjetos de 20 x 20 mm de superficie.
Las abundancias de organismos del licor mezcla se dan en individuos por mililitro
(ind/ml), a excepcin de los recuentos de los microorganismos filamentosos, que se dan
en metros por mililitro (m/ml).
3.5.3.1. Protozoos, gimnamebas medianas y grandes y metazoos
El recuento de metazoos y protozoos mayores de 20 m, donde se incluyen los
flagelados grandes, las gimnamebas medianas (entre 20 y 50 m) y grandes (mayores
de 50 m) y los ciliados, se realiza a partir de la observacin en vivo a 100x aumentos y
en contraste de fases mediante el mtodo de las submuestras (Madoni, 1984). En
principio se analizan dos gotas, pero si el nmero total de individuos por gota es inferior
a 50 se ampla el nmero de gotas hasta un total de cuatro.
32
Se coloca un extremo del cubreobjetos en el campo visual del microscopio (Figura 3.1)
y, observando tambin el lquido que puede haber quedado por fuera del cubreobjetos,
se va desplazando la muestra, por ejemplo verticalmente, hasta llegar al extremo
opuesto. Una vez en este extremo se desplaza la muestra hacia la derecha, hasta que
aparece un nuevo campo visual que no se solapa con el anterior, y a continuacin se
desplaza de nuevo la muestra en direccin vertical. Se cuentan todos los protozoos
flagelados mayores de 20 m y ciliados, gimnamebas medianas y grandes y metazoos
que se van encontrando con el rastreo al nivel taxonmico ms especfico posible.
inicio
final
Figura 3.1. Esquema del procedimiento para el recuento al microscopio de la microfauna. Los crculos
indican el campo visual del microscopio.
Individuos / ml =
Donde:
Ni A
r 2 Vm
33
= 3,1416
R = radio del campo visual
3.5.3.3. Recuento de microorganismos filamentosos
Para realizar el recuento de los microorganismos filamentosos se utiliz el mtodo de
Salvad (1990b). Esta tcnica se basa en encontrar la relacin existente entre la
circunferencia que conforma el ocular del microscopio y el nmero medio de
intersecciones que se obtienen al cruzar los microorganismos filamentosos con esta
circunferencia. El procedimiento consiste en contabilizar el nmero de intersecciones
existentes entre los filamentos y la circunferencia que traza el campo visual. Se realiza a
400x aumentos y en contraste de fases, observando 15 campos visuales distribuidos al
azar por todo el cubreobjetos, observando como mnimo dos gotas.
Para obtener el resultado en unidades de m/ml es necesario aplicar la ecuacin:
Ni A
H Vm
Donde:
Ni = nmero de intersecciones / nmero de campos observados
A = rea ocupada por la muestra (dimensiones del cubreobjetos), (m2).
H = longitud del segmento dibujado por el ocular multiplicado seno medio de @ =
(L)x(2/), (m).
seno @ = media del seno de 0 a 360 = 0,63662 =2/
@ = ngulo entre L (longitud del segmento dibujado por el ocular) y los filamentos.
Vm = volumen de la muestra (ml).
3.5.4. Determinacin del ndice de diversidad
Una vez determinadas las especies y las abundancias relativas de los protozoos ciliados
presentes en las muestras se calcul el ndice de diversidad de Shannon-Weaver
(Shannon y Weaver, 1949). Este valor indica la relacin entre el nmero de individuos
de una especie respecto el nmero total de individuos de la muestra y se expresa en bits
por individuo.
n
H'=
i =1
Ni
N
log 2 i
N
N
34
Donde:
4. RESULTADOS Y DISCUSSIN
4.1. EL AFLUENTE
35
En primer lugar se han calculado las medianas, desviaciones estndar y los valores
mximos y mnimos de los afluentes. No se han diferenciado segn el tipo de tratamiento,
convencional o de eliminacin de nutrientes, puesto que prcticamente no haba
diferencias entre los parmetros (Tabla 4.1.).
Tabla 4.1. Resultados de los parmetros fsico-qumicos del afluente de las plantas estudiadas, donde X:
media, Des. std: desviacin estndar y n: nmero de muestras.
Conductividad (mS/cm)
pH
SSLM (mg/l)
STLM (mg/l)
SVLM (mg/l)
Aceites y grasas (mg/l)
Detergentes (mg/l)
DBO5 soluble (mg O2/l)
DBO5 (mg O2/l)
DQO soluble (mg O2/l)
DQO (mg O2/l)
Mat. Voltiles (%)
MES (mg/l)
Cloruros (mg/l)
Fsforo total (mg/l)
N (NO2-+NO3-) (mg/l)
N Kjeldahl (mg/l)
N amoniacal (mg/l)
N total (mg/l)
Sulfatos (mg/l)
X
0,96
7,29
1941,68
2533,05
76,12
14,08
1,31
58,46
192,32
104,83
376,13
93,03
223,15
108,74
7,34
0,13
35,78
21,96
35,26
175,72
Des. std
0,50
0,32
897,16
825,76
7,53
10,78
1,03
51,44
158,49
80,97
396,37
10,71
328,05
76,34
12,23
0,25
31,46
12,02
31,73
158,63
n
86
86
19
19
19
40
21
47
89
47
89
47
89
19
89
86
89
61
86
19
Mximo
3,54
8,05
3952
4212
84,8
46
3,55
263
943
365
3162
99,9
2819
380
104
1,84
264
52,4
264
727
Mnimo
0,2
6,4
756
1184
53,8
5
0,05
14
14,7
15
38
38,3
11
49
1,17
0,005
5,9
5,16
6
71,7
Si se comparan estos valores con la composicin tpica del agua residual urbana expuesta
en Metcalf y Eddy (1995), se puede considerar que en general el agua residual de las
depuradoras estudiadas presenta una concentracin media para la gran mayora de los
valores, aunque en la mayora de parmetros se puede observar una desviacin estndar
muy grande, lo cual indica la gran variacin de composicin que presentan las aguas
residuales de entrada a las plantas depuradoras estudiadas.
4.1.2. Relaciones entre los parmetros fsico-qumicos
relaciones entre los diferentes parmetros fsico-qumicos del agua de entrada a partir de
los coeficientes de correlacin de Spearman.
Entre los coeficientes de correlacin obtenidos (Tabla 4.3.) se pueden destacar los
coeficientes de correlacin positivos entre la conductividad y la concentracin de varios
iones presentes en el agua residual como el amonio, los sulfatos y los cloruros. Como era
de esperar, tambin hay una correlacin positiva entre la DQO y la DBO5.
4.1.3. Biodegradabilidad del agua del afluente
Media
Desviacin estndar
n
Mximo
Mnimo
Cociente DBO5/DQO
0,54320635
0,14273718
89
1,03773585
0,13975155
37
Tabla 4.3. Coeficientes de correlacin de Spearman (p<0,05) entre los parmetros fsico-qumicos del
afluente. El primer valor corresponde al coeficiente de correlacin, el segundo a la probabilidad, y el tercero
al nmero de casos. En negrita se muestran los coeficientes de correlacin con p<0,01. Las casillas en blanco
0,56720 0,464928
0,01132 0,000006
19
86
-0,87831
0,00410
8
0,56034
0,04639
13
0,68334
0,01002
13
-0,755
0,030
8
0,60556
0,02828
13
SVLM
0,89445 0,872236
0,00003 0,000101
13
13
DBO5
0,854210 0,820299
0,000001 0,000001
86
61
DQO total
0,844398 0,702915
0,000001 0,000001
86
61
0,76700 0,794275
0,000001 0,000001
89
89
0,89445
0,00003
13
Mat. voltiles
MES
0,781874 0,606181
0,000001 0,000001
86
61
Fsforo total
0,855252 0,695433
0,000001 0,000001
86
61
0,816931
0,000001
89
0,637
0,003
19
Cloruros
Nitratos y
nitritos
-0,244
0,023
86
0,6759
0,0007
21
SSLM
N amoniacal
Aceites y
grasas
pH
N Kjeldahl
Detergentes
DBO5
DQO total
MES
Fsforo total
Cloruros
Sulfatos
N amoniacal
N total
0,999849 0,852354
0,000001 0,000001
86
61
0,845398
0,000001
58
38
4.2. EL EFLUENTE
Con los datos de los parmetros fsico-qumicos y operacionales del efluente se han
calculado las medias, desviaciones estndar y los valores mximos y mnimos (Tabla 4.4.).
Tabla 4.4. Resultados de los parmetros fsico-qumicos del efluente de las plantas estudiadas, donde X:
media, Des. std: desviacin estndar y n: nmero de muestras.
Conductividad (mS/cm)
pH
DBO5 (mg O2/l)
DQO (mg O2/l)
MES (mg/l)
Fsforo total (mg/l)
N (NO2-+NO3-) (mg/l)
N Kjeldahl (mg/l)
N amoniacal (mg/l)
N total (mg/l)
% DBO eliminada
% DQO eliminada
% N eliminado
% P eliminado
X
1,05
7,58
11,04
39,78
14,14
2,04
5,34
6,52
5,84
11,52
93,58
85,74
43,99
55,33
Des. std
0,52
0,38
8,99
30,63
20,47
1,35
5,53
7,67
7,30
7,93
6,15
12,64
37,98
28,86
n
47
57
39
89
98
89
99
94
64
99
32
78
50
87
Mximo
3,72
8,25
48,7
219
168
6,07
36,1
36,8
32,7
40,3
99,40
99,68
93,06
98,68
Mnimo
0,21
6,55
5,1
10
1
0,28
0,08
0,3
0,11
1,77
68,78
36,84
-70,70
-57,39
Al igual que con los datos del afluente, tambin se comprob, mediante el test de
Kolmogorov-Smirnov, que los datos no seguan una distribucin normal. Los nicos datos
del efluente que seguan una distribucin normal eran el pH y el fsforo total.
Como la mayora de variables no seguan una distribucin normal se realiz la prueba de
Kruskal-Wallis para determinar si los parmetros fsico-qumicos y operacionales
estudiados presentaban diferencias significativas segn el tipo de tratamiento de las
depuradoras, tratamiento convencional o tratamiento de eliminacin de nutrientes. Los
datos que presentaron diferencias significativas segn el tipo de tratamiento de las
depuradoras fueron el fsforo total, los nitratos y nitritos, el nitrgeno Kjeldahl y el total, el
39
Fsforo total
Nitratos y nitritos
N Kjeldahl
N total
% Eliminacin DQO
% Eliminacin N
H
7,05
6,80
5,22
11,81
7,589
7,41
g.l.
1
1
1
1
1
1
p
0,01
0,01
0,02
0,001
0,006
0,01
Como se puede observar en la Tabla 4.6. el rango promedio del porcentaje de eliminacin
de nitrgeno, es, como era de esperar, ms elevado en el caso de las depuradoras con
tratamiento de eliminacin de nutrientes. Adems, tanto el fsforo, como las diversas
formas del nitrgeno, presentan rangos promedios ms elevados en el caso de las
depuradoras con tratamiento convencional, puesto que al no estar diseadas para eliminar
nutrientes tendrn concentraciones de salida de estos nutrientes ms elevadas que las
diseadas para eliminarlos.
Tabla 4.6. Resultados de la prueba de Kruskal Wallis con los rangos promedios para cada variable, donde n:
nmero de casos.
Parmetro
Tratamiento
Eliminacin de nutrientes
Fsforo total
Convencional
Eliminacin de nutrientes
Nitratos y nitritos
Convencional
Eliminacin de nutrientes
N Kjeldahl
Convencional
Eliminacin de nutrientes
N total
Convencional
Eliminacin de nutrientes
% Eliminacin DQO
Convencional
Eliminacin de nutrientes
% Eliminacin N
Convencional
N
44
45
50
49
50
49
50
49
43
45
14
36
Rango promedio
37,64
52,18
42,55
57,60
43,47
56,66
40,18
60,02
52,17
37,17
34,5
22
40
Conductividad
0,2988
0,0413
47
DQO
MES
pH
DQO
MES
0,3694
0,0016
70
0,5354
0,000001
99
0,4053
0,0001
89
0,6854
0,000001
98
0,5643
0,000001
99
0,4399
0,0001
70
0,5944
0,000001
99
0,5013
0,000001
89
0,6932
0,000001
98
0,4275
0,000011
98
0,2873
0,0063
89
0,3310
0,0009
98
0,2953
0,0220
60
0,4186
0,000045
89
0,3490
0,0004
99
-0,4377
0,0002
70
-0,3613
0,0002
99
N Kjeldahl
0,6141
0,000001
99
0,8840
0,000001
70
N amoniacal
0,5314
0,000002
70
Nitratos y nitritos
0,4765
0,0007
47
0,4596
0,000002
99
0,6239
0,000001
89
Fsforo total
Fsforo
total
N Kjeldahl
0,3185
0,0291
47
0,2952
0,0464
46
0,2984
0,0394
48
pH
DBO5
N
amoniacal
N total
0,6762
0,000001
99
41
Segn la Directiva 91/271/CEE, que regula los vertidos al cauce pblico, hay una serie de
parmetros con un lmite mximo de vertido. Estos parmetros corresponden a la DBO5,
DQO y Slidos en suspensin totales. En el caso de las depuradoras que abocan las aguas
depuradas a una zona sensible propensa a la eutrofizacin tambin hay lmite de vertido
para el nitrgeno total y el fsforo total, que ser diferente segn el nmero de habitantes
equivalentes.
En el caso del parmetro de la DQO, este lmite mximo es de 125 mg O2/l. Como se
puede observar en la tabla 4.4., el valor mximo obtenido por este parmetro en las
muestras analizadas es de 219 mg O2/l. Solamente en dos casos se ha superado este valor
lmite establecido, los cuales podran ser debidos a un escape de slidos debido a la
proliferacin de espumas.
El valor mximo observado para el parmetro DBO5 es de 48,7 mg O2/l, el cual tambin
supera el valor lmite de 25 mg O2/l establecido por la Directiva 91/271/CEE. Tambin se
ha superado este valor slo en dos de las muestras analizadas, que, como era de esperar,
son las mismas que superaban el valor lmite para la DQO.
Respecto a las materias o slidos en suspensin, el valor lmite establecido por esta
Directiva corresponde a 35 mg/l. Este valor ha sido superado en cinco de las muestras
analizadas, probablemente debido tambin a un escape de slidos producido por una
sedimentacin deficiente del fango.
Para el caso del nitrgeno y del fsforo slo se han estudiado los datos de las depuradoras
diseadas para eliminar estos nutrientes, lo que corresponde a un total de 10 depuradoras y
51 muestras. Se puede observar que todas las depuradoras estudiadas presentan un lmite
de vertido de 2 mg/l de fsforo total y 15 mg/l de nitrgeno total, puesto que estn
diseadas para una poblacin de 10.000 a 100.000 habitantes equivalentes. Por lo tanto,
para el caso del fsforo, hay 10 muestras que no cumplen este valor lmite; y en el caso del
nitrgeno, hay 8 muestras que no cumplen el valor lmite de 15 mg/l. Por tanto, se
42
concluye que entre las depuradoras estudiadas diseadas para eliminar nutrientes, una parte
no cumplen los niveles lmites de vertido establecidos por la normativa, especialmente
para el caso del fsforo total.
4.3. CARACTERIZACIN DEL FANGO
El tamao de los flculos puede afectar a la calidad de los fangos activos, puesto que est
relacionado, principalmente, con la sedimentabilidad del fango durante la fase de
clarificacin del licor mezcla, y por lo tanto, con la calidad final del efluente. Los flculos
se pueden clasificar en tres categoras segn su tamao (Jenkins et. al., 1993; EMASESA,
1997).
Los flculos pequeos (< 150 m) tienen, en general, una forma redonda y una estructura
compacta, y no presentan microorganismos filamentosos o en una abundancia muy baja.
Estos flculos pueden producir el fenmeno denominado pin-point floc, con el que se
obtiene un bajo IVF y un efluente de elevada turbidez debido a que decantan con dificultad
y muchos slidos se quedan en suspensin. Tambin pueden producirse flculos pequeos
debido a una elevada concentracin de microorganismos filamentosos que crecen dentro
de los flculos, disgregndolos y rompindolos. En nuestro caso casi el 20 % de las
muestras han presentado flculos de pequeo tamao de los cuales un 35 % son debidos a
pin-point floc y el 65 % restante, a una elevada concentracin de filamentos. De los datos
relacionados con el tamao de los flculos solamente se ha podido observar la abundancia
de filamentos, la cual es bastante elevada, 273,5 m/ml de media, debido a que, como ya se
ha comentado, la mayora de muestras con flculos de tamao pequeo eran debidas a una
estructura disgregada y no a pin-point floc.
Los flculos de tamao mediano (entre 150 y 500 m) se caracterizan por un crecimiento
equilibrado de las bacterias floculantes y de los microorganismos filamentosos. En general
se obtiene un IVF inferior a 150 ml/g, y un sobrenadante bien clarificado. Casi la mitad de
las muestras han presentado flculos de tamao mediano, pero el valor medio de la
43
700
600
500
400
300
200
100
0
Figura 4.1. Abundancia media de microorganismos filamentosos en m/ml segn el tamao medio de los
flculos.
Variable
n Rango promedio
20
43,725
50
49,41
36
64,6111111
Por tanto, como solamente existen diferencias significativas entre los flculos de tamao
grande y los otros tamaos, se podra decir que el tamao de los flculos no depende
44
La estructura de los flculos tambin afecta a la calidad final del efluente. As los flculos
de estructura compacta sedimentarn correctamente y en general el fango tiene un IVF
medio menor de 150 ml/g, produciendo un efluente bien clarificado con pocos slidos en
suspensin (EMASESA, 1997). En este caso un 23,6% de las muestras han presentado una
estructura moderadamente abierta y un 26,4 % una estructura compacta.
En cambio, los flculos de estructura abierta, generalmente por una abundancia muy
elevada de microorganismos filamentosos que crecen en el interior de los flculos,
presentarn un IVF elevado puesto que estos flculos no sedimentan bien (EMASESA,
1997). La mitad de las muestras observadas han presentado flculos de estructura abierta.
En este estudio no hemos podido comprobar si la estructura de los flculos est
relacionada con la sedimentabilidad del fango al no disponer de datos de IVF. Por lo tanto,
se ha vuelto a observar la abundancia total de filamentos, que est relacionada, al menos
indirectamente, con la sedimentabilidad del fango.
700
600
500
400
300
200
100
0
M oderadamente
Compacta
abierta
Categorias de la estructura de los flculos
Abierta
Figura 4.2. Abundancia media de microorganismos filamentosos en m/ml segn la estructura media de
los flculos.
45
Variable
Estructura flocular
Abierta
Abundancia de filamentos
Moderada
Compacta
n Rango promedio
53
60,21
25
43,74
28
49,5
Tabla 4.10. Resultados de la prueba de Kruskal-Wallis, n=nmero de casos, H=estadstico de KruskalWallis, g.l.=grados de libertad y p=probabilidad.
H
g.l.
p
Abundancia de filamentos
5,523
2
0,0631
El grado de cobertura flocular o concentracin de flculos corresponde al parmetro fsicoqumico de los slidos en suspensin (SSLM). En este caso, una concentracin baja puede
indicar una carga msica demasiado baja que no permite que los flculos se desarrollen, o
bien puede responder a una purga de fangos excesiva. Por el contrario, una concentracin
elevada a muy elevada de flculos puede empeorar las condiciones de sedimentacin del
fango, y normalmente acostumbra a ser causa de un caudal de purga insuficiente.
3500
3000
SSLM (mg/l)
2500
2000
1500
1000
500
0
Elevada
Muy elevada
Baja
Moderada
Categoras de concentracin flocular
Figura 4.3. Abundancia media de los slidos en suspensin del licor mezcla (mg/l) en las diferentes
categoras de concentracin flocular de las muestras.
46
47
poda esperar en un principio, ya que los resultados estadsticos muestran que la materia en
suspensin no es ms elevada cuando mayor es la concentracin de bacterias dispersas.
De las muestras con una concentracin moderada de bacterias dispersas se ha observado
que el 44,4 % presentaban problemas de bulking filamentoso y/o espumas, posiblemente es
por esta razn que estas muestras presentaban una concentracin bastante elevada de
materias en suspensin.
Tabla 4.11. Resultados de los parmetros fsico-qumicos del efluente; siendo X=media y Desv.
std=desviacin estndar.
MES (mg/l)
Elevada
15%
Baja
6%
Moderada
9%
Ausencia
47%
Moderada
25%
Baja
13%
Ausencia
85%
Figura 4.4. Resultados obtenidos de los rangos de abundancia de las bacterias helicoidales en las
muestras analizadas en: a) espiroquetas y b) espirilos.
48
49
aguas residuales industriales, que a diferencia de las urbanas, se caracterizan por presentar
un ratio bajo de nutrientes respecto la DQO (De Lucas, et al,. 2007).
La composicin del agua residual urbana, por el contrario, suele presentar una
composicin, resultado de una mezcla de compuestos tanto de origen urbano como
industrial y/o productos de la ganadera y de la agricultura, que hace que las
concentraciones de nutrientes presenten la proporcin adecuada de 100:5:1 de carbono
(como DBO5), nitrgeno (como nitrgeno total Kjeldahl) y fsforo (como fsforo total)
respectivamente (Jenkins, 2003), necesaria para mantener un crecimiento equilibrado de
las bacterias GAOs y/o PAOs. A partir de la tabla 4.12., se puede observar que esta
relacin, para las muestras observadas, ha sido siempre superada tanto por el nitrgeno
como por el fsforo.
Tabla 4.12. Valores de la relacin DBO5/N/P de las muestras observadas. Los valores de N y P estn
expresados considerando una DBO5 de 100.
4.3.4.4. Zoogloea
Se trata de bacterias en forma de bacilo que aparecen constituyendo masas de bacterias
unidas por una matriz gelatinosa formada por un exopolmero. Suelen aparecer como
ndulos que sobresalen de los flculos con formas irregulares o presentar extensiones
digitiformes o ramificadas (EMASESA, 1997).
Un crecimiento masivo de Zoogloea spp. puede ser debido a una elevada carga msica y
baja edad del fango, condiciones que se dan normalmente en puestas en marcha, o a una
deficiencia de nutrientes (especialmente deficiencia de nitrgeno o fsforo) (Richard,
2003; Martnez 2005). Como el exopolmero retiene mucha agua puede dar lugar a un
aumento del IVF y al fenmeno denominado bulking viscoso (Jenkins et. al., 1993).
No se ha observado de forma masiva la bacteria Zoogloea spp. en ninguna muestra de las
observadas. Esto puede ser debido a que, como ya se ha estudiado en el apartado anterior,
50
52
Actinomicetos nocardioformes
Beggiatoa
Hongos
Haliscomenobacter hydrossis
Microthrix parvicella
Nostocoida limicola II
Nostocoida limicola III
Sphaerotilus natans
Streptococcus
Thiothrix Y
Thiothrix II
Tipo 0041
Tipo 0092
Tipo 021N
Tipo 0581
Tipo 0675
Tipo 0803
Tipo 0914
Tipo 0961
Tipo 1701
Tipo 1851
Tipo 1852
Tipo 1863
X
51,46
0,27
0,59
4,84
80,50
1,33
0,33
1,54
0,40
0,11
0,61
9,13
22,15
47,03
1,38
5,55
0,05
0,06
7,21
0,16
57,52
0,20
0,07
Desv. std.
77,39
0,94
2,72
17,22
203,95
6,37
0,98
5,40
3,21
0,63
2,99
19,43
70,36
93,20
8,16
11,26
0,37
0,50
30,27
0,81
93,92
1,27
0,40
% % dominante % secundario
89,62
18,87
25,23
11,32
0
0,90
6,60
0
1,80
48,11
0
2,70
48,11
16,04
9,91
14,15
0
0,90
15,09
0
0
13,21
0
2,70
2,83
0
0,90
3,77
0
0
7,55
0
0,90
71,70
3,77
8,11
25,47
4,72
8,11
65,09
21,70
14,41
2,83
1,89
0
45,28
0
7,21
1,89
0
0
1,89
0
0
20,75
2,83
6,31
5,66
0
0
77,36
30,19
9,91
4,72
0
0
3,77
0
0
Se han determinado las relaciones existentes entre los diversos tipos de microorganismos
filamentosos y los parmetros fsico-qumicos y operacionales del proceso, utilizando el
coeficiente de correlacin de Spearman. Slo se han considerado los microorganismos
filamentosos que han presentado una frecuencia superior al 10% del total, lo cual ha
reducido el estudio a 13 tipos de microorganismos filamentosos.
Al estudiar las correlaciones entre los microorganismos filamentosos y los parmetros
fsico-qumicos y operacionales del proceso destacan los coeficientes positivos obtenidos
entre el filamento Beggiatoa y la DBO5 y la DQO del efluente y el coeficiente negativo
con el porcentaje de eliminacin de DQO, indicando que este filamento podra estar
relacionado con efluentes de calidad deficiente (tabla 4.14).
53
Tambin se puede destacar la correlacin positiva entre los microorganismos del grupo de
los actinomicetos nocardioformes con los slidos en suspensin del efluente y los
porcentajes de eliminacin de DBO5 y de nitrgeno. Hace falta a decir que los
actinomicetos nocardioformes producen problemas de espumas que pueden llegar a ser
muy graves, generando escapes de slidos con el agua de salida, por esto es coherente que
se correlacione positivamente su abundancia con el incremento de slidos en suspensin
del agua de salida.
Por ltimo, se puede destacar los coeficientes de correlacin negativos entre el
microorganismo filamentoso Tipo 0092 y los parmetros indicadores de la calidad del
efluente como la DBO5, la DQO, los slidos en suspensin y el nitrgeno total, cosa que
indica que este filamento puede estar relacionado cono una buena calidad del efluente.
54
DBO5 e
0,217
0,030
99
DQO e
0,204
0,042
99
MES e
0,207
0,040
98
0,254
0,016
89
0,276
0,020
70
-0,363
0,0002
98
-0,303
0,003
89
-0,347
0,0008
89
-0,342
0,0005
99
-0,202
0,044
99
-0,387
0,00007
99
-0,495
0,000001
99
T1851
T0961
T0092
T0041
T021N
-0,214
0,033
99
-0,226
0,024
99
-0,348 -0,404
0,462
0,0004 0,00003 0,000001
99
99
99
0,201
0,046
98
0,254 -0,229
0,011 0,023
98
98
0,367
0,0003
89
0,258
0,014
89
0,324
0,006
70
N total e
0,319
0,001
99
0,269
0,011
88
% DQO elim.
% Elim. N
S. natans
0,238
0,017
99
Nitratos y nitritos e
% DBO5 elim.
N.limicola III
-0,250
0,012
99
Fsforo total e
N amoniacal e
N. limicola II
H. hydrossis
Beggiatoa
Actinomicetos
nocardioformes
Total filamentos
falta de correlacin.
0,293
0,005
88
-0,249
0,019
88
0,304
0,031
50
-0,255
0,527
0,010 0,000001
99
99
-0,303
0,003
88
0,244
0,021
88
0,256
0,015
88
0,459
0,0007
50
0,422
0,002
50
55
A continuacin se detallan las condiciones en las que suelen aparecer los microorganismos
filamentosos ms abundantes de las muestras analizadas respeto los parmetros fsicoqumicos ms relevantes con los que estn relacionados.
4.4.4.1. Microthrix parvicella
Microthrix parvicella produce frecuentemente problemas de bulking en sistemas
convencionales de fangos activos. Este microorganismo filamentoso aparece en sistemas
con cargas msicas bajas, bajas concentraciones de oxgeno disuelto, afluentes con elevado
contenido en grasas y/o aceites (Eikelboom, 2000), especialmente cido oleico (Andreasen
te al, 2000) e incluso en bajas temperaturas (Eikelboom, 2000). Su crecimiento puede
verse favorecido con la presencia de procesos incompletos de nitrificacin y/o
desnitrificacin ya que puede utilizar los nitratos y nitritos como aceptor de electrones
(Salvad, 2006), por tanto, las condiciones de las depuradoras con sistema de eliminacin
de nutrientes le son muy favorables (Eikelboom, 2000). Tambin se ha descrito que slo
puede crecer con pH>7, siendo su desarrollo ptimo a pH 8 (EMASESA, 1997).
Aunque no se ha encontrado una correlacin entre Microthrix parvicella y la concentracin
de aceites y grasas del afluente, se ha estudiado su frecuencia de aparicin segn diferentes
rangos de concentracin de aceites y grasas, puesto que como se ha comentado, suele
aparecer en sistemas con afluentes con elevado contenido en grasas y/o aceites.
Tabla 4.15. Frecuencias de aparicin del filamento Microthrix parvicella con diferentes abundancias segn
diversos rangos de concentracin de aceites y grasas del afluente.
1
1
1
1
1
40-50
8
10-20
0-10
1
4
1
1
1
30-40
20-30
56
57
Tabla 4.16. Frecuencias de aparicin del microorganismo filamentoso del grupo de los actinomicetos
nocardioformes con diferentes abundancias segn diversos rangos de concentracin de aceites y grasas del
afluente.
1
1
3
6
9
40-50
1
30-40
2
20-30
10-20
0-10
58
Tabla 4.17. Resultados del anlisis de Kruskal-Wallis, donde H: estadstico de Kruskal-Wallis, g.l.: grados de
libertad y p: probabilidad.
H g.l.
p
Tipo 021N 11,68 1 0,00062
Tabla 4.18. Resultados de la prueba de Kruskal Wallis con los rangos promedios para cada variable, donde n:
nmero de casos.
Tipo 021N
Tipo de tratamiento
Eliminacin de
nutrientes
Convencional
Rango
promedio
51
55
43,12
63,11
0,8-1
13
2
6
30
0,4-0,8
0-0,2
0,2-0,4
400-500
300-400
200-300
100-200
0-100
Cociente DBO5/DQO
4.4.4.4. Tipo 1851
El filamento Tipo 1851 se observa regularmente en depuradoras de baja carga, pero
normalmente no domina nunca en sistemas de tratamiento de aguas residuales urbanas
(Eikelboom, 2000). Las condicionas que le favorecen son las bajas cargas msicas y
compuestos de bajo peso molecular (Eikelboom, 2000), as como elevadas edades del
fango (Jenkins et. al 1993).
59
1
1
1
3
2
500-1000
3
300-400
200-300
3
8
400-500
1
1
7
22
100-200
2
2
3
12
0-100
Debido a la dificultad que supone clasificar los protozoos flagelados en vivo y sin hacer
cultivos especficos, en este trabajo se han clasificado fundamentalmente en base a su
tamao: flagelados pequeos (menores de 20 m) y flagelados grandes (mayores de 20
m). Dentro de cada rango de tamao, en los casos que ha sido posible y, debido
fundamentalmente a su valor como bioindicadores, algunos grupos de flagelados se han
diferenciado del resto y clasificado en base a la clasificacin taxonmica Systema Naturae
60
2000 (Brands, propuesta por la Society of Protozoologist (Lee, J.J., Leedale, G.F. y
Bardbury, P, 2000) (ver clasificacin en el anejo).
Se ha determinado la abundancia de flagelados de tamao pequeo (inferior a 20 m),
expresada en ind/ml, a partir del mtodo descrito por Salvad (1990a), mientras que la
cuantificacin de los flagelados de tamao superior a 20 m se ha determinado mediante el
mtodo de submuestras (Madoni, 1984), expresando los resultados tambin en ind/ml.
Se ha calculado la media y la desviacin estndar de las abundancias, as como la
frecuencia de aparicin de los diferentes grupos y/o gneros estudiados (tabla 4.21)
Tabla 4.21. Abundancias, expresadas en ind/ml, y porcentajes de aparicin de los protozoos flagelados
encontrados en las muestras, donde X: media, Desv. std: desviacin estndar y %: frecuencia de aparicin.
Flagelados < 20 m
Flagelados < 20 m (bodnidos)
Flagelados < 20 m (coanoflagelados)
Flagelados < 20 m (coloniales)
Flagelados < 20 m (Bicosoeca sp.)
Flagelados < 20 m (Hexamita sp.)
Flagelados < 20 m (Trepomonas sp.)
Flagelados > 20 m (Entosiphon sp.)
Flagelados > 20 m (Peranema sp.)
Flagelados > 20 m (Petalomonas sp.)
X
120656,01
44167,64
5046,95
2329,36
3948,86
64,71
1488,21
86,79
31,32
10,94
Desv. std
201755,54
100757,65
17609,55
23982,21
37980,77
666,20
13353,37
312,12
86,06
60,86
%
86,79
30,19
17,92
0,94
4,72
0,94
3,77
16,98
27,36
5,66
Entre los flagelados de tamao pequeo destaca la elevada abundancia y frecuencia de los
flagelados de tamao pequeo en general, que bsicamente estn formatos por el grupo de
los bodnidos. Por lo tanto, si atendemos a grupos ms concretos, los ms abundantes y
frecuentes serian el grupo de los bodnidos, seguidos por el grupo de los coanoflagelados.
Los flagelados en general de tamao pequeo (< 20 m), entre ellos el gnero Bodo,
aparecen principalmente en las fases de inicio de la colonizacin de los fangos activos o
bien asociados a un mal funcionamiento del proceso, como por ejemplo una baja
concentracin de oxgeno disuelto o un exceso de carga orgnica (Madoni, 1991).
Dentro de los flagelados de tamao grande, el ms abundante ha sido el gnero
Entosiphon, que generalmente se asocia a elevadas concentraciones de oxgeno disuelto
(Rius, 2003); mientras que el ms frecuente corresponde al gnero Peranema, la
proliferacin del cual se asocia, en general, a edades del fango elevadas (Salvad, 1994).
61
Se han determinado las relaciones existentes entre los diversos grupos y/o gneros de
flagelados y los parmetros fsico-qumicos del efluente, utilizando los coeficientes de
correlacin de Spearman. Slo se ha trabajado con los protozoos flagelados que han
presentado una frecuencia superior al 10% del total.
De las correlacionas obtenidas se pueden destacar los coeficientes de correlacin positivos
entre los flagelados del grupo de los bodnidos y algunos parmetros indicadores de la
calidad del efluente, especialmente la DQO y la materia en suspensin, as como el fsforo
y el nitrgeno Kjeldahl y total (tabla 4.22.). Estos flagelados han sido asociados a un mal
funcionamiento del proceso, como por ejemplo una baja concentracin de oxgeno disuelto
o un exceso de carga orgnica (Madoni, 1991), por lo tanto, se podra decir que son
indicadores de una calidad del efluente deficiente.
Tabla 4.22. Coeficientes de correlacin de Spearman (p<0,05) entre le abundancia de los diversos grupos
de protozoos flagelados y los parmetros fsico-qumicos del efluente. El primer valor corresponde al
coeficiente de correlacin, el segundo a la probabilidad, y el tercero al nmero de casos. En negrita se
Bodnidos
Peranema sp.
N total
N
Kjeldahl
Nitratos
y nitritos
Fsforo
total
MES
DQO
pH
muestran los coeficientes de correlacin con p<0,01. Las casillas en blanco indican falta de correlacin.
0,2993 0,3997
0,0028 0,00005
98
98
0,2150
0,0326
99
62
1
1
2
4
5
90-95
95-100
1
1
85-90
Coanoflagelados
(ind/ml)
40000-100000
30000-40000
20000-30000
10000-20000
0-10000
% de eliminacin de DBO5
4.6. COMUNITADES DE PROTOZOOS AMEBOIDEOS
Las amebas, al igual que los protozoos flagelados, son microorganismos muy comunes en
los sistemas de depuracin por fangos activos. Tambin contribuyen a la clarificacin del
efluente mediante la ingestin de bacterias dispersas, aunque hay amebas, especialmente
dentro de las amebas de tamao grande, que pueden ser depredadoras de otros protozoos e
incluso de metazoos.
4.6.1. Clasificacin de los protozoos ameboideos
Se han considerado las gimnamebas (o amebas desnudas) y las tecamebas como dos
grandes grupos separados dada su diferenciacin morfolgica. Las gimnamebas se han
clasificado, a su vez, en tres grupos diferentes atendiendo a su tamao, puesto que es muy
difcil diferenciarlas taxonmicamente en vivo y sin realizar cultivos especficos; adems,
los taxones de gimnamebas no suelen estar asociados a un valor bioindicador. En cambio,
las tecamebas se han clasificado a nivel genrico atendiendo a la morfologa de la teca en
63
base a la clasificacin taxonmica Systema Naturae 2000 (Lee te al, 2000) (ver
clasificacin en el anejo).
Al igual que en el caso de los protozoos flagelados, se ha cuantificado la abundancia de
amebas (tanto de gimnamebas como de tecamebas) de tamao pequeo (inferior a 20 m)
utilizando la tcnica descrita por Salvad (1990a), expresando los resultados en ind/ml. La
abundancia de gimnamebas medianas (entre 20 y 50 m), gimnamebas grandes (> 50 m)
y tecamebas de tamao grande (> 20 m) se ha realizado mediante el mtodo de las
submuestras (Madoni, 1984), expresndose los resultados en ind/ml.
Se ha calculado la media y desviacin estndar de las abundancias, y la frecuencia de
aparicin de los grupos estudiados (tabla 4.24).
Tabla 4.24. Abundancias, expresadas en ind/ml, y porcentajes de aparicin de los protozoos ameboideos
encontrados en las muestras, donde X: media, Desv. std: desviacin estndar y %: frecuencia de aparicin.
X
Desv. std
Gimnamebas < 20 m
51468,45 153399,94
Gimnamebas entre 20 y 50 m
933,21
2031,80
Gimnamebas > 50 m
314,72
638,33
Tecamebas < 20 m (Cryptodifflugia sp.) 1013,71 3443,16
Tecamebas > 20 m (Arcella sp.)
244,53
907,98
Tecamebas > 20 m (Centropyxis sp.)
18,87
159,64
Tecamebas > 20 m (Euglypha sp.)
247,92
427,28
Tecamebas > 20 m (Trinema sp.)
11,32
66,65
%
73,58
79,25
58,49
9,43
33,96
6,60
56,60
6,60
En el caso de las gimnamebas se puede observar que las ms frecuentes han sido las de
tamao mediano y pequeo. Las gimnamebas de tamao pequeo suelen asociarse a
bruscos incrementos en la carga orgnica del afluente, apareciendo sobre todo en las
primeras etapas de colonizacin de un fango (Ferrer et. al., 2007). A medida que se va
estabilizando el proceso, las amebas pequeas son sustituidas por gimnamebas de tamao
mediano y estas finalmente por amebas de tamao grande, las cuales son indicadoras de
ambientes ms estables.
En el caso de las tecamebas de tamao grande las ms frecuentes y tambin abundantes
han sido Euglypha sp. y Arcella sp.
4.6.2. Relaciones entre los protozoos ameboideos y los parmetros fsico-qumicos
Para estudiar las relaciones entre los diversos grupos y/o gneros de amebas y los
parmetros fsico-qumicos del efluente, se han utilizado los coeficientes de correlacin de
64
Spearman. Slo se ha trabajado con los protozoos ameboideos que han presentado una
frecuencia superior al 10% del total.
En la tabla 4.25., se pueden observar las correlacionas negativas entre el gnero Euglypha
y los indicadores de la calidad del efluente DBO5 y DQO, as como con los rendimientos
de eliminacin de materia orgnica. Esto indicara que Euglypha sp., estara relacionada
con una buena calidad del efluente. Adems, tambin se observa una correlacin negativa
con el amonio del efluente, cosa que indica la relacin de esta tecameba con la presencia
de procesos de nitrificacin.
Si consideramos los tres grupos de gimnamebas estudiados (pequeas, medianas y
grandes) vemos que estn relacionados positivamente con la DQO y con el amonio del
efluente y, por lo tanto, estn relacionados con una calidad del efluente ms deficiente.
Tabla 4.25. Coeficientes de correlacin de Spearman (p<0,05) entre la abundancia de los diversos grupos
de protozoos ameboideos y los parmetros fsico-qumicos del efluente. El primer valor corresponde al
coeficiente de correlacin, el segundo a la probabilidad, y el tercero al nmero de casos. En negrita se
-0,2608 -0,38192
-0,46934 -0,49836
Euglypha sp. 0,0091
0,0001
0,000003 0,000001
99
99
89
99
0,265762 0,293543
Arcella sp.
0,007844 0,003351
99
98
0,2432
Gimnamebas
0,0153
medianas
99
0,2639
Gimnamebas
0,0083
pequeas
99
0,2045
Gimnamebas
0,0423
grandes
99
% DQO
eliminada
% DBO
eliminada
N total
N
amoniacal
N Kjeldahl
Fsforo
total
MES
DQO
DBO5
muestran los coeficientes de correlacin con p<0,01. Las casillas en blanco indican falta de correlacin.
Tal y como se ha realizado con los flagelados, nicamente se ha estudiado con ms detalle
las amebas con un papel bioindicador ms relevante. En este caso han sido las tecamebas y
en particular el gnero Euglypha.
65
4.6.3.1. Euglypha
Este gnero de tecamebas est asociado a cargas msicas de moderadas a bajas y edades
del fango elevadas, indicando tambin presencia de procesos de nitrificacin en el sistema
(Canler te al, 1999).
En este estudio, este gnero de tecameba ha presentado diferencias significativas entre los
sistemas de tratamiento convencionales y los sistemas de eliminacin de nutrientes segn
el anlisis de Kruskal-Wallis (tabla 4.26). Ha sido ms abundante en los sistemas de
eliminacin de nutrientes (tabla 4.27.), puesto que como ya se ha comentado, est asociada
a procesos de nitrificacin.
Tabla 4.26. Resultados del anlisis de Kruskal-Wallis, donde H: estadstico de Kruskal-Wallis, g.l.: grados de
libertad y p: probabilidad.
Euglypha sp.
H
9,94
g.l.
p
0,0016
Tabla 4.27. Resultados de la prueba de Kruskal Wallis con los rangos promedio para los dos tipos de
tratamiento, donde n: nmero de casos.
Tratamiento
Eliminacin de nutrientes
Euglypha sp.
Convencional
N
51
55
Rango
promedio
62,86
44,81
66
Tabla 4.28. Frecuencias de aparicin del total de tecamebas de tamao grande con diferentes abundancias
segn diversos rangos de concentracin de nitrgeno amoniacal del efluente.
3
10-15
5-10
15-20
4
29
0-5
4000-5000
3000-4000
2000-3000
1000-2000
0-1000
Los protozoos ciliados son muy importantes en los sistemas de depuracin por fangos
activos puesto que contribuyen a la clarificacin del efluente mediante la depredacin y
induciendo la floculacin (Curds et. al., 1968 y Curds, 1992). Adems, ha sido uno de los
grupos ms estudiados dentro de este hbitat y ms utilizado como indicadores del
funcionamiento del proceso de depuracin.
4.7.1. Clasificacin de los protozoos ciliados
En total se han identificado 58 especies de protozoos ciliados que han sido clasificadas
segn la clasificacin taxonmica propuesta por Lynn y Small (2000) (ver clasificacin en
el anejo).
Se ha calculado la abundancia media, en individuos/ml, y la desviacin estndar, as como
la frecuencia de aparicin (tabla 4.29.) de las diferentes especies de protozoos ciliados
encontrados. En esta tabla slo se muestran aquellas especies que han tenido una
frecuencia de aparicin superior al 10%. La tabla completa con los resultados se encuentra
en el anejo.
Como se puede observar en la tabla 4.29 las especies ms abundantes han sido Aspidisca
cicada y Vorticella aquadulcis, seguidas de Carchesium polypinum, Vorticella
convallaria, Acineria uncinata y Trochilia minuta. Si miramos las especies que han
aparecido en un mayor nmero de muestras vemos que la mayora coinciden con las ms
67
Acineria uncinata
Acineta tuberosa
Aspidisca cicada
Aspidisca lynceus
Calyptotricha lanuginosa
Carchesium polypinum
Cinetochilum margaritaceum
Coleps hirtus
Epistylis coronata
Epistylis entzii
Epistylis plicatilis
Epistylis sp
Euplotes affinis
Litonotus lamella
Litonotus varsaviensis
Opercularia articulata
Plagiocampa rouxi
Pseudochilodonopsis fluviatilis
Thigmogaster oppositevacuolatus
Thuricola kellicottiana
Tokophrya quadripartita
Trochilia minuta
Uronema nigricans
Vorticella aquadulcis
Vorticella convallaria
Libre depredador
Libre bactervoro
Reptante depredador
Reptante bactervoro
Ssil depredador
Ssil bactervoro
Parsito
X
428,68
24,15
2034,34
293,58
21,13
536,75
44,15
49,81
99,25
295,85
192,74
183,77
170,19
78,87
6,04
304,53
76,60
48,68
256,23
96,60
7,92
379,62
18,49
1065,28
504,57
215,85
75,09
428,68
3416,23
48,68
3362,45
2,64
Desv. std
1024,91
64,83
5155,43
1969,82
97,87
1617,67
627,59
522,41
878,42
3140,92
925,59
1842,42
812,88
612,58
27,50
4872,69
501,64
195,84
1570,93
564,53
30,72
1811,60
252,09
2033,12
1551,13
463,91
292,52
886,40
5346,18
67,16
3729,76
16,81
%
66,04
25,47
71,70
23,58
16,98
41,51
12,26
13,21
15,09
15,09
19,81
13,21
33,02
21,70
10,38
14,15
23,58
27,36
35,85
16,04
12,26
31,13
11,32
74,53
52,83
56,60
27,36
66,04
90,57
51,89
98,11
3,77
Para poder evaluar el papel ecolgico de los protozoos ciliados dentro los sistemas de
depuracin urbanos e industriales se han agrupado las diferentes especies estudiadas segn
68
Con las especies de protozoos ciliados que han presentado una frecuencia superior al 10%
y los grupos ecolgicos, se han determinado las relaciones existentes con los parmetros
fsico-qumicos y operacionales del proceso, utilizando el coeficiente de correlacin de
Spearman.
De las correlacionas obtenidas se puede destacar la correlacin positiva entre la especie
Opercularia articulata y la eliminacin de nitrgeno, coincidiendo con la asociacin de
esta especie con procesos de nitrificacin por algunos autores (Foissner y Berger, 1996).
Tambin se han observado correlaciones positivas entre la especie Litonotus varsaviensis
y los parmetros indicadores de la calidad del efluente como la DBO5, la DQO y la materia
en suspensin, indicando que este especie est asociada a una calidad del efluente
deficiente.
La especie Cinetochilum margaritaceum ha presentado correlacin positiva con los
nitratos y nitritos del efluente as como negativa con la eliminacin de nitrgeno, cosa que
podra indicar que esta especie no est relacionada con la presencia de procesos de
nitrificacin, en contra de lo expuesto en la bibliografa, ya que esta especie se asocia a
procesos de nitrificacin (Isac et. al., 2005).
69
Tabla 4.30. Coeficientes de correlacin de Spearman (p<0,05) entre las especies y grupos ecolgicos de
protozoos ciliados y los parmetros fsico-qumicos del efluente. En negrita se muestran los coeficientes
Acineria
uncinata
Aspidisca
cicada
Aspidisca
lynceus
Carchesium
polypinum
Cinetochilum
margaritaceum
Coleps
hirtus
Epistylis
Plicatilis
Euplotes
affinis
Litonotus
lamella
Litonotus
varsaviensis
Opercularia
articulata
Pseudochilodonopsis
fluviatilis
Thigmogaster
oppositevacuolatus
Uronema
nigricans
Vorticella
aquadulcis
Vorticella
convallaria
Total
Diversidad
Libre
depredadores
Libre
bactervoros
Reptante
depredadores
Reptante
bactervoros
Ssil
depredadores
Ssil
bactervoros
0,210
% DQO eliminada
% DBO5 eliminada
% Eliminacin N
N total
N amoniacal
Nitratos y nitritos
Fsforo
MES
DQO
DBO5
pH
Conductividad
0,242
-0,199
0,234
0,220
-0,222
0,237
0,305
-0,419
-0,266
0,395
0,226
0,388
0,394
0,216
0,278 0,200
0,264
0,292
-0,256
0,367
0,255
0,256
0,212
0,291
0,266 0,219
0,287 0,257
0,283
0,322
0,236
0,345 0,315
-0,258
-0,253
0,209
0,411
0,302
0,218
0,383
0,210
0,242
-0,192
-0,255
0,232 0,286
0,219
-0,271
0,405 0,218
70
En este apartado se relacionan las especies de protozoos ciliados con un valor bioindicador
ms importante con aquellos parmetros con los que estn asociados segn la bibliografa
aunque no se hayan encontrado correlaciones. Por lo tanto, algunas especies como
Acineria uncinata y Aspidisca cicada, aunque han sido de las especies ms abundantes y
frecuentes, no se comentan debido a que aparecen en amplios rangos de calidades del
efluente (Poole, 1984), siendo muy frecuentes en sistemas de depuracin (Curds y
Cockburn, 1970), y encontrndose tanto en aguas urbanas como industriales, por lo tanto,
no se consideran buenas indicadoras del proceso de depuracin.
4.7.4.1. Opercularia articulata
El gnero Opercularia generalmente est asociado a fangos de calidad deficiente, a la
presencia de vertidos industriales y a bajas concentraciones de oxgeno disuelto (Isac et. al.
2005., y Sangesa et. al., 2007). Dentro de este gnero algunos autores diferencian la
especie Opercularia articulata de otras especies de Opercularia de tamao pequeo,
asociadas a estas condiciones, y la asocian a calidades del efluente elevadas, a bajas cargas
msicas y a presencia de procesos de nitrificacin (Foissner y Berger, 1996).
En nuestro estudio se ha correlacionado positivamente con el rendimiento de eliminacin
de nitrgeno. Adems, mediante la prueba de Kruskal Wallis se ha determinado que
Opercularia articulata presenta diferencias significativas respecto su aparicin en plantas
depuradoras convencionales frente a plantas diseadas para eliminar nutrientes (tabla
4.31). En la tabla 4.32. se puede observar que el rango promedio de esta especie de
protozoo ciliado ha sido ms elevado en las depuradoras con tratamiento de eliminacin de
nutrientes.
Tabla 4.31. Resultados del anlisis de Kruskal-Wallis, donde H: estadstico de Kruskal-Wallis, g.l.: grados de
libertad y p: probabilidad.
Opercularia articulata
g.l.
3,909
0,048
71
Tabla 4.32. Resultados de la prueba de Kruskal Wallis con los rangos promedio para cada variable, donde n:
nmero de casos.
Tratamiento
n Rango promedio
Eliminacin de nutrientes 51
57,21
Opercularia articulata
Convencional
55
50,05
4.7.4.2. Vorticella aquadulcis-complejo
Es una especie ssil, adherida a los flculos mediante el pednculo contrctil, y se alimenta
de bacterias dispersas (Foissner y Berger, 1996).
Con respecto a su papel bioindicador, es caracterstica de sistemas que operan con cargas
msicas de moderadas a bajas, as como en edades de fango elevadas. Tambin es
indicadora de buena calidad del efluente. Aunque no se ha obtenido una correlacin
positiva entre esta especie y la eliminacin de DBO5, se ha estudiado su frecuencia de
aparicin por rangos a ver si existe alguna relacin con la calidad del efluente. En la tabla
4.33. se puede observar que la frecuencia de aparicin ms elevada de esta especie se da
cuando el porcentaje de eliminacin de DBO5 es del 95 al 100%. Adems, tambin se
observa que las mayores abundancias tambin aparecen con elevados rendimientos de
eliminacin de materia orgnica.
Tabla 4.33. Frecuencias de aparicin de la especie Vorticella aquadulcis a partir de diversas abundancias y
diferentes rangos del porcentaje de eliminacin de DBO5.
1
1
1
1
2
1
2
10
26
90-95
95-100
5
4
4
85-90
1
80-85
1
75-80
70-75
% Eliminacin DBO5
72
1
1
2
90-95
3
85-90
80-85
75-80
1
8
3
3
22
95-100
70-75
65-70
% Eliminacin de DBO5
4.7.5. Diversidad especfica de los protozoos ciliados
73
En este estudio han predominado las muestras cono una diversidad de ciliados entre
moderada y elevada (tabla 4.35), cosa que indica un funcionamiento bastante bueno del
sistema y, por lo tanto, que se encuentra ms estructurado, presentando una mayor
capacidad de asumir cambios en las condiciones del sistema.
Tabla 4.35. Diversidades medias, expresadas en bits/ind, y frecuencias de aparicin de los rangos de
diversidad de los protozoos ciliados, donde n: nmero de muestras, X: media, Desv. std: desviacin estndar
y %: frecuencia de aparicin.
Diversidad
Baja (0-1 bits/ind)
Moderada (1-2 bits/ind)
Elevada (2-3 bits/ind)
Muy elevada (>3 bits/ind)
n
8
44
53
1
X
0,72
1,54
2,38
3,17
Desv. std
0,265
0,292
0,276
---
%
7,547
41,50
50
0,943
% Eliminacin de DBO5
1
3-4
39
3
1
2-3
32
5
1
1-2
4
2
0-1
90-100
80-90
70-80
60-70
74
En este estudio todos los tipos de metazoos encontrados se determinaron a nivel de filum.
La clasificacin taxonmica utilizada ha sido la de Brusca y Brusca (1990) (ver
clasificacin en el anejo).
Como se observa en la tabla 4.37, el grupo de metazoos ms abundante y ms frecuente ha
sido el de los rotferos, y el siguiente grupo de metazoos tanto en abundancia como en
frecuencia ha sido el de los nematodos, coincidiendo con la bibliografa. Tambin se
observaron gastrotricos y tardgrados en las muestras analizadas, pero en una abundancia,
y sobre todo frecuencia, bastante baja.
Tabla 4.37. Abundancias, expresadas en ind /ml, y porcentajes de aparicin de los diferentes grupos de
metazoos encontrados en las muestras, donde X: media, Desv. std: desviacin estndar y %: frecuencia de
aparicin.
Gastrotricos
Nematodos
Rotferos
Tardgrados
X
3,40
14,72
181,70
12,83
Des std
34,97
27,78
319,07
59,08
%
0,94
27,36
66,98
8,49
4.8.2. Relaciones entre los metazoos y los parmetros operacionales del proceso
Se han determinado las relaciones existentes entre los diversos grupos de metazoos y los
parmetros fsico-qumicos y operacionales del proceso, utilizando el coeficiente de
correlacin de Spearman.
En cuanto a los coeficientes encontrados se puede destacar el coeficiente de correlacin
positivo entre los rotferos y el rendimiento de eliminacin de DBO5 (tabla 4.38.), cosa que
coincide con otros autores, que describen la presencia de rotferos en sistemas altamente
estabilizados y con eficiencias de eliminacin de DBO5 superiores al 93-95% (Mc Kinney,
1967; Klimowicz, 1970).
75
Tabla 4.38. Coeficientes de correlacin de Spearman (p<0,05) entre los parmetros fsico-qumicos del
afluente y los diversos grupos de metazoos. El primer valor corresponde al coeficiente de correlacin, el
segundo a la probabilidad, y el tercero al nmero de casos. En negrita se muestran los coeficientes de
% Eliminacin N
% DBO5 eliminada
Nitratos y nitritos
DQO
Conductividad
Rotferos
4.8.3.1. Rotferos
Los rotferos son organismos muy frecuentes en sistemas de depuracin de aguas
residuales, lo que coincide con los resultados obtenidos. Los gneros ms comunes son
Lecane, que puede fragmentar los flculos y alimentarse de las bacterias floculantes, y
Philodina, que se alimenta filtrando las bacterias dispersas y/o de materia orgnica
particulada (Doohan, 1975). El mucus contenido en sus excreciones tambin contribuye a
la formacin de flculos (Calaway, 1968).
Como los protozoos, son organismos aerobios estrictos, y en general se asocian a edades
del fango elevadas. Su presencia generalmente indica fangos establos y cantidades de
oxgeno disuelto elevadas (Martnez, 2006).
Se ha analizado la frecuencia de aparicin de los rotferos con el rendimiento de
eliminacin de DBO5, puesto que, como se ha comentado, en la bibliografa se describe
que estn asociados a sistemas altamente estabilizados y con eficiencias de eliminacin de
DBO5 elevadas y en este estudio, se confirma la correlacin positiva existente entre estos
metazoos y este parmetro.
76
De los resultados obtenidos, se puede destacar que la gran mayora de los rotferos han
aparecido con porcentajes de eliminacin de materia orgnica elevados (del 95 al 100%),
aunque la mayor frecuencia haya sido con abundancias bajas (tabla 4.39.).
As y todo, las abundancias encontradas ms elevadas han sido tambin con los porcentajes
de eliminacin de materia orgnica ms elevados.
Tabla 4.39. Frecuencias de aparicin de los metazoos del grupo de los rotferos con diferentes abundancias
segn diversos rangos de eliminacin de DBO5.
Rotferos (ind/ml)
1600-2000
1200-1600
800-1200
400-800
0-400
2
1
5
34
95-100
85-90
90-95
2
1
2
80-85
1
1
7
% eliminacin DBO5
77
observar que los microorganismos filamentosos con mayor porcentaje de generar bulking
filamentoso, con casi un 26 %, han sido Microthrix parvicella y el Tipo 1851. Recordemos
que el microorganismo filamentoso M. parvicella ha sido el ms abundante en las muestras
estudiadas y el Tipo 1851, el segundo ms abundante y frecuente.
Tabla 4.40. Porcentajes de aparicin de los microorganismos que han producido problemas de bulking
filamentoso y espumas en les muestras estudiadas.
Microorganismo filamentoso
Actinomicetos nocardioformes
Microthrix parvicella
Tipo 0092
Tipo 021N
Tipo 0961
Tipo 1851
Bulking
17,24
25,86
5,17
24,13
1,72
25,86
Espumas
61,82
27,27
10,91
-------
DBO5
DQO
MES
H
1,636
1
0,2007
g.l.
0,229
1
0,632
p
0,058
1
0,808
Se han analizado las frecuencias de aparicin de la suma total de filamentos por rangos de
abundancias y rangos de concentracin de materias en suspensin del efluente (Tabla
4.42.). Como se puede observar, de las muestras que superan los 35 mg/l permitidos por la
Directiva 91/271/CEE, slo dos han presentado una concentracin de microorganismos
filamentosos superior a 200 m/ml. La gran mayora de muestras, aunque tenan una
elevada abundancia de filamentos, cumplan con el valor de la Directiva (tabla 4.42.), cosa
que se atribuye a qu las medidas que se toman en los decantadores secundarios para evitar
el escape de slidos y los sistemas para eliminar flotantes funcionan incluso cuando la
78
1
1
150-200
100-150
2
50-100
1
35-50
0-35
1400-1600
1200-1400
1000-1200
800-1000
600-800
400-600
200-400
0-200
MES (mg/l)
4.9.2. Foaming
79
filamento en estas muestras fue de 143,0 m/ml, 146,2 m/ml, 144,0 m/ml y 460,0 m/ml y
478,0 m/ml; por lo tanto, se podra considerar que el microorganismo filamentoso Tipo
0092 es susceptible de producir espumas cuando se encuentra en concentraciones a partir
de aproximadamente 150 m/ml.
Casi en la mitad de las muestras, exactamente en un 42 %, los microorganismos
filamentosos presentes eran susceptibles de generar espumas en el sistema. De estas
muestras, ms de la mitad, casi un 62 %, eran producidas por el grupo de los actinomicetos
nocardioformes (tabla 4.40). Este resultado coincide con el encontrado por Jenkins et. al.
(1993), dnde este microorganismo filamentoso es el ms observado en sistemas con
espumas en los Estados Unidos. Adems, hay siete muestras dnde las espumas eran
producidas por este filamento juntamente con Microthrix parvicella, el cual ha presentado
abundancias susceptibles de generar espumas en el 27 % de las muestras de sistemas con
problemas de flotantes.
Como ocurre con el problema del esponjamiento del fango, no se han observado
diferencias significativas en los parmetros indicadores de la calidad del efluente entre las
muestras que presentaban una abundancia de actinomicetos nocardioformes superior a 50
m/ml y las que presentaban una abundancia inferior a 50 m/ml (tabla 4.43). Esto se
atribuye a qu los sistemas estudiados estn preparados para evitar el escape de slidos
causados por la formacin de espumas biolgicas (placas deflectoras, sistemas de
eliminacin de flotantes, etc.).
Tabla 4.43. Resultados del anlisis Kruskal-Wallis, donde H: estadstico de Kruskal-Wallis, g.l.: grados de
libertad y p: probabilidad.
DBO5
DQO
MES
H
0,049
1
0,825
g.l.
0,644
1
0,422
p
0,496
1
0,481
80
5. CONCLUSIONES
-
Los valores de DBO5, DQO y MES del efluente han sido mayoritariamente
inferiores a los lmites de vertido establecidos por la Directiva 91/271/CEE.
Los valores de nitrgeno y fsforo del efluente para las depuradoras con tratamiento
de eliminacin de nutrientes han sido, mayoritariamente, inferiores a los lmites de
la Directiva 91/271/CEE, aunque se han observado bastantes muestras que no los
cumplan.
Casi la mitad de las muestras presentaron flculos de tamao mediano pero con una
abundancia de microorganismos filamentosos muy elevada. Adems, se determin
que el tamao de los flculos no dependen nicamente de la abundancia de
microorganismos filamentosos.
81
Los flagelados de tamao pequeo del grupo de los bodnidos se pueden asociar a
un efluente de mala calidad, mientras que el grupo de los coanoflagelados, tal y
como indica la bibliografa, a buenas calidades del efluente, observndose en
nuestras caso, cierta relacin con la eliminacin de DBO5.
Han predominado las muestras con una diversidad de ciliados entre moderada y
elevada. Adems, se ha observado que la mayora de muestras con diversidades
entre 1 a 3 corresponden a rendimientos de eliminacin de DBO5 elevados.
Casi la mitad de las muestras han sido susceptibles de tener problemas de bulking
filamentoso y/o espumas.
A partir de los datos observados, se ha establecido que el Tipo 0092 podra producir
espumas a partir de abundancias de 150-200 m/ml.
De las tres muestras que no cumplan con los valores establecidos por la Directiva
europea, se pudo comprobar, gracias al anlisis de la estructura del fango, que eran
debidas a que el fango presentaba problemas de pin-point floc.
83
6. BIBLIOGRAFA
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Volume 34, Issue 5, Pags 1559-1569 (2000).
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84
85
86
87
ANEJO I
Clasificacin de los microorganismos
Dominio Eucariota
Reino Protista (Goldfuss, 1818) R. Owen, 1858
Flagelados pequeos (<20 m)
Filum Euglenozoa Cavalier-Smith, 1981
Clase Kinetoplastida (Honigberg, 1963) Margulis, 1974
Orden Kinetoplastea Honigberg, 1963
Suborden Bodonida Hollande, 1952
Familia Bodonidae Btschli, 1887
Filum Neomonada Cavalier-Smith, 1997
Classe Choanoflagellata Kent, 1880
Filum Opalozoa Cavalier-Smith, 1991
Orden Bicosoecales Grass, 1926
Familia Bicosoecaceae Stein, 1878
Bicosoeca
Filum Metamonada Cavalier-Smith, 1981
Clase Trepomonadea Cavalier-Smith, 1993
Orden Distomatida Klebs, 1892
Familia Hexamitidae
Hexamita Dujardin, 1838
Trepomonas Dujardin, 1841
Flagelados grandes (>20 m)
Filum Euglenozoa Cavalier-Smith, 1981
Clase Euglenoidea Btschli, 1884
Orden Peranemida Btschli, 1884
Peranema sp Dujardin, 1841
Entosiphon sp Stein, 1878
Orden Petalomonadida Cavalier-Smith, 1993
Petalomonas Stein, 1859
Gimnamebas
Gimnamebas de tamao pequeo (< 20 m)
Gimnamebas de tamao mediano (20-50 m)
Gimnamebas de tamao grande (>50 m)
Tescamebas
Filum Cercozoa Cavalier-Smith, 1998
Clase Imbricatea Cavalier-Smith i Chao, 2003
Orden Euglyphida Copeland, 1956
Familia Euglyphidae Wallich, 1864
Euglypha Dujardin, 1841
Familia Trinematidae Hoogenraad & de Groot, 1940
Trinema Dujardin, 1841
Filum Amoebozoa Corlis, 1984
Clase Tubulinea Smirnov et al., 2005
Orden Arcellinida (Kent, 1880)
Familia Arcellidae Ehrenberg, 1843
Arcella Ehrenberg, 1832
1859)
ANEJO II
Protocolos de las tinciones
Coloraciones vitales
Reactivos:
Solucin I:
A: 2 g de cristal violeta + 20 ml de etanol 95%
B: 0,8 g de oxalato de amonio + 80 ml de oxalato amnico
Las soluciones A y B se tienen que mezclar en el momento de su utilizacin y se han de
tirar a las 24 horas de su preparacin.
Solucin II:
1 g de iodo
2 g de ioduro potsico
300 ml de agua destilada
Solucin III:
10 ml de safranina al 2,5% en etanol 95%
100 ml de agua destilada
Procedimiento:
Se extienden una o dos gotas de la muestra en un portaobjetos y se dejan secar al aire. Un
vez seca la muestra se tie con la solucin I durante un minuto. Se lava con agua destilada
y despus se tie con la solucin II durante un minuto. Se lava de nuevo con agua destilada
y seguidamente se decolora con etanol 95% gota a gota durante 25 segundos.
Seguidamente se lava con agua destilada y se aade la solucin III, dejndola actuar
durante un minuto. Finalmente se lava con agua destilada y se deja secar al aire o
suavemente con un papel de filtro.
La muestra teida se observa al microscopio con campo claro, aceite de inmersin
directamente sobre la muestra teida y a 1000x aumentos. Los filamentos Gram positivos
se observaran de color azul y los Gram negativos de color rojo-rosa.
Reactivos:
Solucin I:
A: 0,1 g de azul de metileno + 5 ml de cido actico glacial + 5 ml de etanol 95% +
100 ml de agua destilada
B: 3,3 ml de cristal violeta 10% en etanol 95% + 6,7 ml de etanol 95% + 100 ml de
agua destilada
Se mezclan dos partes de la solucin A con una parte de la solucin B. Esta solucin tiene
que prepararse mensualmente.
Solucin II:
33,3 ml de Bismark Brown (1 g de Bismark Brown en 100 ml de agua destilada).
66,7 ml de agua destilada.
Procedimiento:
Se extienden una o dos gotas de la muestra en un portaobjetos y se dejan secar al aire. Un
vez seca la muestra se tie con la solucin I durante 30 segundos. Se lava con agua
destilada y despus se tie con la solucin II durante un minuto. Se lava de nuevo con agua
destilada y se deja secar al aire o se seca suavemente con un papel de filtro.
La muestra teida se observa al microscopio con campo claro, aceite de inmersin
directamente sobre la muestra teida y a 1000x aumentos. Los filamentos Neisser positivos
se observaran de color azul-lila y los Neisser negativos de color marrn o amarillento. Si el
tricoma es marrn y presenta grnulos de color lila, el filamento ser Neisser negativo con
presencia de grnulos Neisser positivos.
Reactivos:
Solucin I:
0.33 % (p/v) de Negro de Sudan B (IV) en etanol al 60%.
Solucin II:
Reactivos:
0,1 g de cristal violeta en 100 ml de agua destilada.
Procedimiento:
Se mezcla una gota de muestra de fango activo con una gota de la solucin de cristal de
violeta en un portaobjetos. A continuacin se coloca un cubreobjetos y se examina al
microscopio en campo claro a 1000x aumentos y con aceite de inmersin. Las clulas sin
vaina se tien intensamente de color violeta, mientras que las vainas aparecen de color rosa
claro.
Reactivos:
1 g de tiosulfato sdico (Na2S2O3) en 100 ml de agua destilada.
Procedimiento:
Se deja decantar la muestra de fangos activos y se traspasan 20 ml del sobrenadante a un
matraz Erlenmeyer de 100 ml. Se aaden entre 1 o 2 ml de fango activo al matraz. A
continuacin se aade 1 ml de la solucin de tiosulfato sdico y se deja agitando durante
12 horas a temperatura ambiente y con homogenizacin constante de la mezcla.
Transcurridas las 12 horas se coge una gota de la muestra y se observa al microscopio,
bajo un cubreobjetos, en contraste de fases a 1000x aumentos y con aceite de inmersin. Si
el resultado es positivo se observan grnulos de azufre, es decir, grnulos intracelulares
muy brillantes que hacen iridiscencias amarillentas-rosadas-azulosas.
ANEJO III
Resultados de los anlisis
Tabla con los resultados de las abundancias medias en m/ml (X), desviaciones standards (Desv. std.) i frecuencias de aparicin de los microorganismos filamentosos para las
depuradoras con tratamiento de eliminacin de nutrientes y convencional, y para el conjunto total de muestras.
Tratamiento convencional
X
Desv. std
%
41,41
71,18
85,45
0,31
1,03
12,73
0,60
2,66
7,27
2,81
4,30
49,09
80,40
236,94
43,64
1,69
8,19
14,55
0,17
0,65
7,27
1,85
6,38
16,36
0,17
0,94
3,64
0,02
0,16
1,82
0,28
1,95
3,64
4,48
6,87
67,27
3,48
20,05
7,27
52,39
83,48
81,82
0
0
0
3,87
10,29
40
0
0
0
0,03
0,24
1,82
13,52
41,17
30,91
0,16
0,87
5,45
50,37
88,42
83,64
0,31
1,70
5,45
0
0
0
X
51,46
0,27
0,59
4,84
80,50
1,33
0,33
1,54
0,40
0,11
0,61
9,13
22,15
47,03
1,38
5,55
0,05
0,06
7,21
0,16
57,52
0,20
0,07
Total
Desv. std
77,39
0,94
2,72
17,22
203,95
6,37
0,98
5,40
3,21
0,63
2,99
19,43
70,36
93,20
8,16
11,26
0,37
0,50
30,27
0,81
93,92
1,27
0,40
%
89,62
11,32
6,60
48,11
48,11
14,15
15,09
13,21
2,83
3,77
7,55
71,70
25,47
65,09
2,83
45,28
1,89
1,89
20,75
5,66
77,36
4,72
3,77
Tabla con los resultados de las abundancias medias en ind/ml (X), desviaciones standards (Desv. std.) i frecuencias de aparicin de las especies de protozoos flagelados para
las depuradoras con tratamiento de eliminacin de nutrientes y convencional, y para el conjunto total de muestras.
Protozoos flagelados
Flagelados < 20 m
Flagelados < 20 m (bodnidos)
Flagelados < 20 m (coanoflagelados)
Flagelados < 20 m (coloniales)
Flagelados < 20 m (Bicosoeca)
Flagelados < 20 m (Hexamita)
Flagelados < 20 m (Trepomonas)
Flagelados > 20 m (Entosiphon)
Flagelados > 20 m (Peranema)
Flagelados > 20 m (Petalomonas)
Tabla con los resultados de las abundancias medias en ind/ml (X), desviaciones standards (Desv. std.) i frecuencias de aparicin de las especies de protozoos ameboideos para
las depuradoras con tratamiento de eliminacin de nutrientes y convencional, y para el conjunto total de muestras.
Total
Desv. std
153399,94
2031,80
638,33
3443,16
907,98
159,64
427,28
66,65
%
73,58
79,25
58,49
9,43
33,96
6,60
56,60
6,60
Tabla con los resultados de las abundancias medias en ind/ml (X), desviaciones standards (Desv. std.) i frecuencias de aparicin de las especies de protozoos ciliados para las
depuradoras con tratamiento de eliminacin de nutrientes y convencional, y para el conjunto total de muestras.
Protozoos ciliados
Acineria uncinata
Acineta tuberosa
Aspidisca cicada
Aspidisca lynceus
Aspidisca lynceus var. turrita
Blepharisma undulans
Calyptotricha lanuginosa
Carchesium polypinum
Chaetospira muelleri
Chilodonella uncinata
Cinetochilum margaritaceum
Coleps hirtus
Cothurnia annulata
Cyclidium glaucoma
Cyclidium heptatrichum
Dexiostoma campylum
Drepanomonas revoluta
Endosphaera sp
Epistylis chrysemydis
Epistylis coronata
Epistylis entzii
Epistylis plicatilis
Epistylis sp
Euplotes affinis
Holophrya discolor
Litonotus lamella
Litonotus varsaviensis
Tratamiento convencional
X
Desv. std.
%
256,73
369,80
63,64
24,73
56,83
21,82
2258,18
5658,21
67,27
290,18
966,34
21,82
102,55
755,02
3,64
1,45
10,79
1,82
18,91
47,98
18,18
524,36
1221,77
40
1,45
7,56
3,64
0,73
5,39
1,82
24,73
79,81
16,36
37,09
264,31
3,64
0
0
0
0,73
5,39
1,82
0
0
0
0
0
0
16,73
100,28
3,64
0,73
5,39
1,82
59,82
210,93
9,09
121,45
529,15
12,73
194,91
772,95
10,91
295,09
717,79
27,27
334,55
1089,87
21,82
187,64
642,12
32,73
2,18
9,17
5,45
81,45
263,53
29,09
9,45
25,49
14,55
X
428,68
24,15
2034,34
293,58
91,70
0,75
21,13
536,75
0,75
1,13
44,15
49,81
1,13
6,42
2,26
0,38
10,57
2,64
35,19
99,25
295,85
192,74
183,77
170,19
2,64
78,87
6,04
Total
Desv. std.
886,40
52,57
4542,44
1081,12
628,05
7,77
61,28
1217,17
5,47
8,65
243,09
224,16
8,65
39,09
23,31
3,89
73,92
16,81
159,21
407,63
1380,71
561,22
802,70
522,76
12,67
318,26
19,75
%
66,04
25,47
71,70
23,58
4,72
0,94
16,98
41,51
1,89
1,89
12,26
13,21
1,89
4,72
0,94
0,94
3,77
3,77
5,66
15,09
15,09
19,81
13,21
33,02
4,72
21,70
10,38
continuacin
Metacineta mystacina
Metacystis sp
Microthorax costatus
Microthorax pusillus
Opercularia articulata
Opercularia asymetrica
Paramecium putrinum
Plagiocampa rouxi
Podophrya sp
Pseudochilodonopsis fluviatilis
Pseudochilodonopsis piscatoris
Spathidium sp
Stentor sp
Suctor
Thigmogaster oppositevacuolatus
Thigmogaster potamophilus
Thuricola kellicottiana
Tokophrya infusionum
Tokophrya lemnarum
Tokophrya quadripartita
Trithigmostoma cucullulus
Trithigmostoma steini
Trochilia minuta
Trochiliopsis opaca
Uronema nigricans
Vorticella aquadulcis
Vorticella campanula
Vorticella convallaria
Vorticella infusionum
Vorticella microstoma
Vorticella octava
0
0,78
0
64,31
121,57
0,78
5,49
58,04
2,35
46,27
3,92
0
1,57
2,35
413,33
30,59
14,90
2,35
3,92
8,63
4,71
10,20
565,49
0
0,78
872,94
0
624,39
0
3,14
8,63
0
5,60
0
365,56
433,03
5,60
39,21
174,41
9,51
147,38
28,01
0
11,20
12,42
1335,20
218,44
55,40
9,51
12,01
25,69
33,61
47,22
1531,72
0
5,60
1181,85
0
1446,10
0
15,68
56,18
0
1,96
0
13,73
21,57
1,96
1,96
27,45
5,88
25,49
1,96
0
1,96
3,92
49,02
1,96
7,84
5,88
9,80
11,76
1,96
5,88
35,29
0
1,96
74,51
0
58,82
0
3,92
3,92
7,27
2,18
2,91
0
474,18
8,73
0
93,82
1,45
50,91
0
3,63
0
0
110,55
2,91
172,36
8,73
4,36
7,27
98,91
33,45
207,27
7,27
34,91
1243,64
1,45
393,45
18,91
0
2,91
25,64
16,18
15,11
0
2650,56
41,95
0
346,94
7,56
110,07
0
19,27
0
0
475,28
21,57
418,74
33,28
18,33
21,90
669,81
171,06
579,10
44,28
132,68
2317,63
10,79
966,61
114,40
0
16,96
9,09
1,82
3,64
0
7,27
5,45
0
20
3,64
29,09
0
3,63
0
0
23,64
1,82
23,64
9,09
7,27
12,73
7,27
12,73
27,27
3,64
20
74,55
1,82
47,27
5,45
0
3,64
3,77
1,51
1,51
30,94
304,53
4,91
2,64
76,60
1,89
48,68
1,89
1,89
0,75
1,13
256,23
16,23
96,60
5,66
4,15
7,92
53,58
22,26
379,62
3,77
18,49
1065,28
0,75
504,57
9,81
1,51
5,66
18,74
12,25
10,94
254,32
1932,28
30,59
27,20
276,97
8,52
128,76
19,43
13,95
7,77
8,65
994,09
152,17
312,87
24,96
15,55
23,69
483,22
127,46
1149,80
31,97
96,75
1860,70
7,77
1220,56
82,59
10,94
40,73
4,72
1,89
1,89
6,60
14,15
3,77
0,94
23,58
4,72
27,36
0,94
1,89
0,94
1,89
35,85
1,89
16,04
7,55
8,49
12,26
4,72
9,43
31,13
1,89
11,32
74,53
0,94
52,83
2,83
1,89
3,77
Tabla con los resultados de las abundancias medias en ind/ml (X), desviaciones standards (Desv. std.) i frecuencias de aparicin de los grupos de metazoos para las
depuradoras con tratamiento de eliminacin de nutrientes y convencional, y para el conjunto total de muestras.
Metazoos
Gastrotricos
Nematodos
Rotferos
Tardgrados
Tratamiento convencional
X
Desv. std
%
6,55
48,54
1,82
11,64
21,32
25,45
141,09
231,95
65,45
21,09
79,20
12,73
X
3,40
14,72
181,70
12,83
Total
Desv. std
34,97
27,78
319,07
59,08
%
0,94
27,36
66,98
8,49
ANEJO IV
Fotografas de los microorganismos
Fotografa 14. Metazoo del grupo de los rotferos del gnero Philodina, (contraste de
fases, 400x).
Jessica Vasco
Jessica Vasco
Jessica Vasco
Jessica Vasco
Jessica Vasco
Jessica Vasco
Jessica Vasco
Jessica Vasco
10
Jessica Vasco
Jessica Vasco
11
Jessica Vasco
12
Jessica Vasco
Jessica Vasco
14
Jessica Vasco
13
13