Sei sulla pagina 1di 74

Famlia Enterobacteriaceae

(Enterobactrias)

Bactrias Gram negativas

Cocos
Neisseria
meningitidis,
N. gonorrhoeae

Vbrios

Campylobacter jejuni,
Vibrio cholerae

Cocobacilos

Bacilos

Haemophylus
influenza , Pasteurella,
Brucella, Bordetella
pertussis.

Enterobactrias

Lactose +

Lactose -

Oxidase -

Oxidase -

Rapidos fermentadores
da lactose
Klebsiella, E. coli,
Enterobacter

Fermentam lactose
lentamente
Citrobacter, Serratia,
outros

Shigella, Salmonella,
Proteus, Yersinia e
outros

Oxidase +
Pseudomonas,
Acinetobacter.

Famlia Enterobacteriaceae
(mais de 25 gneros, centenas de espcies e subespcies e
milhares de sorotipos)
(Propriedades bioqumicas, estruturas antignicas e hibridizao e
sequenciamento de cidos nuclicos)

Patgenos primrios
Organismos capazes de causar
doenas sempre

Shigella

Patgenos oportunistas
Organismos que podem causar doenas
em determinadas condies ou em
alguns hospedeiros
Providencia

Escherichia coli

Salmonella

Klebsiella pneumoniae

Yersinia

Morganella
Proteus

Enterobacter
Serratia

DIFERENCIAO BIOQUMICA DE ENTEROBACTRIAS


Escherichia
coli

Salmonella

Shigella
dysenteriae

Shigella
sonnei

Klebsiella
pneumoniae

Klebsiella
rhinoscleromatis

Enterobacter
cloacae

Enterobacter
aerogenes

Hafnia
spp.

Serratia
marcescens

Proteus
vulgaris

Proteus
mirabilis

GLICOSE GS

ARABINOSE

LACTOSE

+*

(+)

MALTOSE

+-

+-

MANITOL

SORBITOL

SACAROSE

-x

(+)

TREALOSE

(+)

CITRATO

+-

+(+)

MALONATO

+-

VERMELHO DE METILA

VOGES-PROSKAUER

REDUO DE NITRATO

HIDRLISE DE GELATINA

(d)

(d)

(+)

((+))

PRODUO H2S

INDOL

LISINA

UREASE

(d)

(d)

FENILALANINA

+-

TESTES\ESPCIES

MOTILIDADE

D = diferentes reaes em diferentes espcies de um gnero


d = diferentes reaes em diferentes isolados
(d) = diferentes reaes em diferentes isolados tardiamente
X = reaes tardias e irregularmente positivas (mutantes)
(+) = reaes tardias, mas sempre positivas
((+)) = liquefao muito lenta

(+)

Fonte: Manual BERGEY 8 edio)

Enterobacteriaceae
Maior (mais variada) coleo de
bacilos Gram negativos

Mais frequentemente associado a microbiologia


clnica ( 20 espcies 95% das infeces)
cerca de 35% das septicemias, 70% das ITUs, muitas
infeces gastrintestinais, meningite.
Habitat: So ubiquitrios (solo, gua, vegetao,
microbiota do trato intestinal de animais e homem)
(coliformes termotolerantes)

Stios de infeces com membros da famlia


listados em ordem de prevalncia

Enterobacteriaceae
Origem das doenas por Enterobactrias
-Reservatrio animal (Salmonella, Yersinia)
-Carreador humano (Shigella, Salmonella Typhi)
-Transmisso endgena (E. coli) (ou veiculada)
Doenas tanto em animais de produo
como de companhia
Desde sepses, diarrias e meningites em recm
nascidos at processos como mastites, abortos,
infeces urogenitais.

Enterobacteriaceae
Patogenicidade x Metabolizao da lactose
Lac (-) Geralmente patognicas (Salmonella,
Yersinia, Shigella)
Lac (+) Geralmente no patognicas (E. coli,
Serratia, Enterobacter)

Lactose +

Lactose -

Escherichia

Shigella

Klebsiella

Salmonella

Enterobacter

Proteus

Serratia

Providncia

Morganella

Caractersticas Gerais
Bacilos Gram negativos (0,3 a 1 x 1 a 6 m)

Escherichia coli. (Ann C. Smith, University of


Maryland, College Park, MD)

No esporulados

Klebsiella pneumoniae (Ann C. Smith,


University of Maryland, College Park, MD)

Caractersticas Gerais
Maioria possui flagelo (peritrquios)
(exees Klebsiella, Shigella, Yersinia e
alguns sorotipos de salmonelas
(Salmonella Gallinarum e S. Pullorum)
???
Todas reduzem nitratos a nitritos
O teste revelado
atravs da adio de 3
gotas do reativo de
Griess A com 3 gotas do
reativo de Griss B no
caldo nitrato

Caractersticas Gerais
So oxidase negativas

?
Escherichia coli. (Ann C. Smith, University

Pseudomonas aeruginosa (Ann C. Smith,

of Maryland, College Park, MD)

University of Maryland, College Park, MD)

Oxidao do Citocromo C pelo O2


Para fenilenodiamina oxidado pela enzima
adquirindo cor vermelha
Pseudomonas (+) Enterobactrias (-)

Catalase positivas

Caractersticas Gerais
Todas fermentam glicose (dextrose)
Ferm. cido mista:(Vermelho metila - VM+)
cido pirvicocidos succnico, ltico
e frmico (em alguns casos CO2 + H2)

Ferm. Butilenogliclica:(Voges Proskauer-VP+)


cido pirvico Butilenoglicol

Caractersticas Gerais
Fermentao cido mista (Shigella, E. coli)

No
inoculado

Caractersticas Gerais
Fermentao butilenogliclica (Klebsiella,
Enterobacter sp)

No
inoculado

Caractersticas Gerais
Quimio-organotrficos Fermentaco
Respiraco aerbia
(Facultativos)
Respiraco anaerbia
Enterobactrias no resistem a luz solar,
dessecao, pasteurizao e desinfetantes
comuns
Morfologia da colnia no Agar Sangue de
pouco valor, pois so colnias parecidas
(exceto Klebsiella-Mucide)

Meios diferenciais e seletivos so usados para


avaliao inicial de colnia (MacConkey, XLD
(XILOSE LISINA DESOXICOLATO), Hoektoen
Entrico (HE)
Klebsiella pneumoniae
Agar Sangue

E. coli

Agar Sangue e MacConkey

Obs. Todos os meios para isolamento de enterobactrias


permitem a identificao de Salmonella, Shigella ou ambas.
(Porm normalmente utiliza-se de meios de
Lactose (-)
enriquecimento)
HardyCHROM SS, First and Only
Chromogenic Media for both Salmonella
and Shigella

(Meio Cromognico)
(E. coli/coliformes em alimentos e
gua)
Lactose (-)

gar Hoektoen (HE)

E. coli
(Eosin Methilen Blue - EMB)

E. coli

Salmonella Enteritidis

Meio de Salmonella-Shigella ( SS)

Meio de XLD
Salmonella

(XILOSE LISINA DESOXICOLATO)

Proteus sp

Estrutura antignica das Enterobactrias


100 tipos

85 tipos

>170 tipos

Fimbria

(Polissacardeo O)

Polissacardeo

(Core)

Lipdeo A
(Parte txica)
Peptideoglicano
Bacilo Gram
negativo

Membrana externa com


lipopolissacardeo (LPS)
(Endotoxina-Fator de Virulncia
das Gram negativas)

Composio de uma unidade de LPS

Responsvel por muitas manifestaes sistmicas das infeces por bactrias


Gram negativas, que ativa o complemento, causa liberao de citocinas,
leucocitose, trombocitopenia, coagulao intravascular disseminada, febre,
diminuio da circulao perifrica, choque e morte.

Fatores de Virulncia
-Lipopolissacardeo (LPS) Responsvel pela produo de febre
(resposta pirognica) e alteraes vasculares e ao direta sobre os
mecanismo das reaes de hipersensibilidade no especfica.

Fatores de Virulncia
Genes do fatores de virulncia Localizados em plasmdeos
ou cromossomos (ilhas de patogenicidade)

-Fmbrias (Adesinas): Tipos mais variados (Tipo 1 a mais


comum) e com especificidades para algumas clulas
hospedeiras.
E.coli K88-Leites, K99-Bezerros, CFAI e CFAII-Humanos)

Fatores de Virulncia
-Sistemas de secreo de enzimas hidrolticas e protenas de
patogenicidade (T1SS, T2SS, T3SS, T4SS, T5SS e T6SS)
(Yersinia, Salmonella, Shigella, EPEC)

Obs: So 6 tipos
Os tipos I e IV
Bactrias G(+) e G(-)
Os tipos II, III, V e VI Bactrias G(-)
Na ausncia do T3SS
a bactria perde sua
virulncia

A. Esquema do sistema de secreo tipo III, aqui apresentado com dois anis atravessando a membrana e a agulha
surgindo da superficie da bactria. As proteinas efetoras e translocadoras esto estocadas. B. Esquema do SSTT
em operao. As proteinas translocadoras formam um poro na membrana da clula alvo e as proteinas efetoras so
translocadas para o citosol da clula alvo. C. Microscopia eletrnica da superficie de bactria com agulhas do
SSTT. Baseado, com modificaes, em Troisfontaines P. and Cornelis G. R., Physiology, 20:326-339, 2005

Fatores de Virulncia
-Siderforos (ex. enterobactina e aerobactina) e Hemolisinas

Enterobactina de E. coli

Hemolisinas ( e )

Fatores de Virulncia
-Variao de fase antignica: A expresso dos antgenos

capsulares K e flagelares H esto sob controle gentico do


micro-organismo. Cada um desses antgenos pode ser
alternadamente expresso ou no (variao de fase), uma
caracterstica que protege a bactria da morte mediada
pelo anticorpo.

-Produo de bacteriocinas Colicinas, Marcescina.

Fatores de Virulncia
-Exotoxinas:
Exemplos: Enterotoxina (LT) de um sorotipo de E.coli
(ETEC):
AMPc
secreo de gua e cloretos e inibe
reabsoro de sdio.
A luz intestinal fica distendia por lquidos e gases
hipermotilidade explosiva e diarria aquosa.
Klebsiella pneumoniae Algumas cepas podem produzir
enterotoxinas (Infeces no aparelhos intestinal, respiratrio, e
genital em animais) (Ex. Metrites em equinos).
Shigella dysenteriae Exotoxina ao de enterotoxina e
neurotoxina.

Escherichia coli (Theodor Von Escherich

(1885)

Atualmente 200 sorotipos

Espcie mais importante do gnero e tambm a mais verstil


Outras espcies so: Escherichia hermannii, E. vulneris,
E. blattae, E. fergusonii.

Comensal Isolado comum da microbiota do clon e sua


presena no intestino contribui para o seu normal
funcionamento
(presena na gua um indicador de contaminao fecal)
Oportunista Patgeno potencial para humanos (inmeras
doenas) e para quase todas as espcies animais.
Existem tipos de E.coli especializadas Pattipos

Escherichia coli
Caractersticas
Colnia seca, rosa (lactose positiva) com rea
rosa ao redor quando crescida em MacConkey

E. coli
K. pneumoniae

DIFERENCIAO BIOQUMICA DE ENTEROBACTRIAS


Escherichia
coli

Salmonella

Shigella
dysenteriae

Shigella
sonnei

Klebsiella
pneumoniae

Klebsiella
rhinoscleromatis

Enterobacter
cloacae

Enterobacter
aerogenes

Hafnia
spp.

Serratia
marcescens

Proteus
vulgaris

Proteus
mirabilis

GLICOSE GS

ARABINOSE

LACTOSE

+*

(+)

MALTOSE

+-

+-

MANITOL

SORBITOL

SACAROSE

-x

(+)

TREALOSE

(+)

CITRATO

+-

+(+)

MALONATO

+-

VERMELHO DE METILA

VOGES-PROSKAUER

REDUO DE NITRATO

HIDRLISE DE GELATINA

(d)

(d)

(+)

((+))

PRODUO H2S

INDOL

LISINA

UREASE

(d)

(d)

FENILALANINA

+-

TESTES\ESPCIES

MOTILIDADE

D = diferentes reaes em diferentes espcies de um gnero


d = diferentes reaes em diferentes isolados
(d) = diferentes reaes em diferentes isolados tardiamente
X = reaes tardias e irregularmente positivas (mutantes)
(+) = reaes tardias, mas sempre positivas
((+)) = liquefao muito lenta

(+)

IMVIC (+ + - -)

Fonte: Manual BERGEY 8 edio)

Escherichia coli
Infeces - Srie de patogenias (Colibaciloses)
Animais jovens so mais susceptveis colibacilose entrica
(bezerros < de 10 dias, cordeiros < de 2 semanas, leites
neonatos ou logo aps o desmame)
Em humanos atingem principalmente crianas.
Septicemias, Mastite, Abortamentos, Endometrite, Cistite,
Nefrite, Artrite, Osteomielite, Endocardite, Pneumonia,
Conjuntivite, salpingite em aves,

Infeces gastrintestinais Diferentes Patotipos

Plasmdeos

Ilhas de patogenicidade

Outras E. coli
-APEC
-NMEC, etc

(ETEC Enterotoxignica E. coli)

E. coli comensal

(EPEC Enteropatognica E. coli)

(UPEC-Uropatognica E. coli)

(EIEC Enteroinvasiva E. coli)


(EHEC Enterohemorrgica E. coli)

Ahmed ety al. Nature Reviews Microbiology 6, 387-394 (May 2008)

A absoro de elementos genticos mveis (fagos, plasmdeos de virulncia, ilhas de patogenicidade), e


perda de pores de DNA-cromossmico em linhagens distintas de E. coli, possibilitou surgimento de clones
de diferentes patotipos de E. coli associados a sintomas de doenas especficas.
LEE - locus of enterocyte effacement; PAIs - pathogenicity island; pEAF - enteropathogenic E. coli
adhesion-factor plasmid; pENT- enterotoxin-encoding plasmids; Stx - Shiga-toxin-encoding bacteriophage.

Enterotoxignica (ETEC) (diarria do viajante)


Aderem a entercitos do intestino delgado e induzir diarria aquosa
pela secreo das enterotoxinas
termo-lbeis (LTI e LtII)
(imunognicas e relacionada com a toxina colrica) e termo-estveis
(STa e STb) (no imunognica).
-desidratao
-acidose metablica
-morte

Obs. A maioria dos casos de colibacilose entrica


em bezerros e leites esto nesta categoria;
A diarria causada por ETEC em bezerros ocorre
em animais < de 1 semana de idade;
Sorotipos importantes O8, O9 e O101.

Enteropatognica (EPEC) - lactentes e crianas; surtos em berrios de


hospitais e creches; fezes com muco mais sem sangue
Aderem aos entercitos do intestino delgado e destroem a arquitetura das microvilosidades,
induzindo a formao de leses do tipo attaching/effacing Desarranjos do citoesqueleto so
acompanhados por uma resposta inflamatria e diarria.
1-Aderncia inicial,
2-Translocao de protena utilizando sistema de secreo do tipo III,
3-Formao pedestal

Bezerros com mais de 4 meses de idade so afetados por EPEC;


Leses (vilosidades) similares ocorrem em sunos, cordeiros e ces;
EPEC ocorre em bezerros de 2 dias a 4 meses de idade e determinam
deficincia na absoro e digesto.

Enteroagregativa (EAEC) - Adere ao epitlio do intestino delgado e


grosso em um biofilme espesso e elabora enterotoxinas e citotoxinas
secretoras Diarria aquosa persistente (por mais de duas semanas).

Duas enterotoxinas termoestvel,


-EAST-I, semelhante STa de ETEC, que promove
aumento do GMP cclico intracelular;
-toxina antigenicamente relacionada com uma
hemolisina:

No est devidamente esclarecida a importncia destes microrganismos


nas infeces nos animais;

Enterohemorrgica (EHEC ex. sorotipo 0157: H7) (diarria


hemorrgica e sndrome hemoltico-urmica (HUS).
Induzem a leso do tipo attaching and effacing , porm no clon.
A caracterstica distintiva a elaborao de toxina de Shiga (Stx), a
absoro sistmica que leva a potenciais complicaes fatais
Propagao da doena Alimentos
ex. carne moda crua,
leite cru, verduras cruas
contaminadas.
De 1 a 15% dos casos de colite
hemorrgica podem evoluir para um
quadro de sndrome hemolticourmica destruio dos eritrcitos e
falha aguda dos rins.
Afetam bezerros com 4 a 28 dias de idade
Leso vascular caracterstica da doena
edematosa dos sunos (frequentemente
fatal em leites desmamados)

Enteroinvasiva (EIEC) - Invade a clula epitelial do clon (plasmdeo


ipaH), lisa o fagossomo e se move atravs das clulas por nucleao
microfilamentos de actina. Produz disenteria (diarria aquosa com
sangue) devido a invaso e destruio da mucosa intestinal
NO fermentar a lactose; identificados atravs de sondas de DNA

So bioquimicamente e sorologicamente
semelhantes Shigella;

Colibacilose dos pintinhos


Causam colite erosiva hemorrgica

Virotype

Virulence Factors

Disease

ETEC

Pili; LT, STa, STb

Diarrhea

EAEC

Bundle-forming pili (BFP); EAST

Diarrhea

EPEC

Pili; effacing enteroadherence

Diarrhea

EHEC

Effacing enteroadherence; Shig a-like toxin

EIEC

Invasins (no SLT)

Diarrhea; dysentery;
HUS
Diarrhea; dysentery

Ex. ETEC

COLISEPTICEMIA
-Esta condio pode se desenvolver em estgios terminais de
animais que sofrem de colibacilose entrica;

-Cepas que causam colisepticemia geralmente so invasivas;


-A patognese no elucidada, mas acredita-se que a endotoxina
desempenha um papel importante;
-Os principais sorotipos em animais so O78:K80 em bovinos, leites
O26 e O165, aves O1, O2 e O78:K80.

Fala-se em APEC (Avian pathogenic E. coli)

Salmonella

Produzir infeces clinicas (Salmoneloses)


importantes em seres humanos e animais
(ruminantes- bovinos de 4 a 6 semanas)
(Trato gastrintestinal e Sepses)
Grupo de organismos grande e complexo ;
agrupados por antgenos O, H e Vi (de
virulncia)

Wester&Hensel. Microbes and infection, v. 3, n. 7, 549-559, 2001.

Salmonella pathogenicity islands (SPIs)

Salmonella
Gastroenterite aguda ou intoxicao alimentar
Fonte = Animais de estimao, ovos e carne
de frango mal cozidos, utenslios de cozinha
contaminados
Ocorre 8 a 36 horas aps a ingesto
Requer uma elevada carga microbiana para a
infeco
Auto-limitada
em
indivduos
saudveis
(antibiticos e agentes antidiarricos podem
prolongar os sintomas)

Nomenclatura do gnero Salmonella

Genticamente so duas espcies (so mais de 2501 sorotipos)


doenas so do tipo gastrintestinais e sepses
Espcie
Enterica

Sub-Espcie
Enterica (I) (1478)

Sorotipo
Paratyphi A
Typhimurium
Paratyphi B
Bredeney
Choleraesuis
Montevideo
Oranienburg
Paratyphi C
Newport

Typhi
Enteritidis
Gallinarum
Pullorum
Dublin
Anatum
Butantan
Give
Salamae (II)
Arizonae (IIIa)

(498)

Daressalam

(94)

Diarizonae (IIIb) (327)

Bongori

Houtenae (IV)

(71)

Houten

Indica (VI)

(12)

Ferlac

Bongori

(21)

Bongor

Fonte. Zuniga (2006)

Total (2501)

Sorogrupo
A

Bovinos,Sunos,
B
Ovinos, Outros
C1

Sunos
Vrias
espcies animais
C2

Humanos
(parece ser
D

susceptvel a todos os sorotipos)

Aves domsticas
E
Bovinos
Eqinos e
outros

Rpteis e aves

Fontes de contaminao de Salmonella na Avicultura

A Salmonella utiliza seus fatores de virulncia (flagelos, T3SS-1 e T3SS-2) para invadir o epitlio e
sobreviver nas clulas mononucleares. A resposta inflamatria resulta na liberao de
um
antimicrobiano (lipocalina-2) que sequestra o agente quelante de ferro (enterobactina) produzido pela
microbiota, mas no inibe o quelante salmoquelina, produzida pela Salmonella. Espcies reativas de
oxignio (ROS) gerados por neutrfilos que migram para o lmen intestinal oxidam compostos de
enxofre produzindo um aceptor de eltrons (tetrationato) para a respirao anaerbia de Salmonella
garantindo ao patgeno vantagens para a multiplicao e transmisso
Thiennimitr et al. Salmonella: the host and its microbiota. Current Opinion in Microbiology, v.15, n.02, p.108-114, 2012.

Patogenia

DIFERENCIAO BIOQUMICA DE ENTEROBACTRIAS


Escherichia
coli

Salmonella

Shigella
dysenteriae

Shigella
sonnei

Klebsiella
pneumoniae

Klebsiella
rhinoscleromatis

Hafnia
spp.

Serratia
marcescens

Proteus
vulgaris

Proteus
mirabilis

GLICOSE GS

ARABINOSE

LACTOSE

+*

(+)

MALTOSE

+-

+-

MANITOL

SORBITOL

SACAROSE

-x

(+)

TREALOSE

(+)

CITRATO

+-

+(+)

MALONATO

+-

VERMELHO DE METILA

VOGES-PROSKAUER

REDUO DE NITRATO

HIDRLISE DE GELATINA

(d)

PRODUO H2S

INDOL

LISINA

UREASE

FENILALANINA

+-

TESTES\ESPCIES

MOTILIDADE

D = diferentes reaes em diferentes espcies de um gnero


d = diferentes reaes em diferentes isolados
(d) = diferentes reaes em diferentes isolados tardiamente
X = reaes tardias e irregularmente positivas (mutantes)
(+) = reaes tardias, mas sempre positivas
((+)) = liquefao muito lenta

(+)

Enterobacter Enterobacter
cloacae
aerogenes

TSI Triplice accar e ferro


(+)
((+))
+
(0,1% Glicose, 1% Lactose e 1%
Sacarose)
A.d Salmonella
sp. +
+
B.- Escherichia
coli+
(d)
(d)
C.- Unknown
D. Proteus mirabilis
(d)

Fonte: Manual BERGEY 8 edio)

B C D E

Meio de TSI

A- No inoculado, B- P. aeruginosa,
C- E. coli, D- Salmonella Typhimurium,
E- Shigella flexneri

Produo de gs por
Salmonella ????

Salmonella
Febre tifide (Salmonella Typhi) e outras febres
entricas
febre prolongada
bacteremia
Envolvimento do sistema RE, particularmente
do fgado, bao, intestino, mesentrio
H disseminao para vrios rgos

Salmonella
Bacteremia
Estado de portador
Organismos so eliminados junto com as fezes
Vescula biliar o local de refgio dos
organismos (remoo de vescula biliar pode
ser a nica soluo para estado de portador)

Shigella sp
Todas as espcies causam desinteria bacilar
(fezes com sangue, muco e numerosos leuccitos)
(Prottipo do patgeno entrico invasivo) ( EIEC)
Humanos so os mais importantes reservatrios
conhecidos (e outros primatas)
S. dysenteriae , S. flexneri, S. boydii, S. sonnei (mais
comum)

Transmisso fecal-oral
Menos de 200 bacilos so necessrios para a
infeco em indivduos saudveis (elevada virulncia)

Shigella sp
Caractersticas gerais
No mveis,
No produz gs a partir da fermentao da glicose ,
No hidrolisa uria
No produz H2S em TSI
Lisina decarboxilase negativa
ONPG (Ortho-nitrophenyl beta-D-galactopyranoside
semelhante a lactose) positivo (lactose retardada +)
Organismos frgeis
Possuir O e alguns tm antgenos K
(Vide Tabela de identificao de enterobactrias)

Shigella consegue invadir o epitlio do lmen intestinal por meio de clulas-M. Aps atingir o epitlio,
invade clulas epiteliais e fagocitada por macrfagos residentes. A bactria escapa do fagossomo de

ambas as clulas, mas enquanto replica dentro das clulas epiteliais induz a apoptose em macrfagos,
provavelmente, por ativao de caspase-1 (Casp-1). Os macrfagos sofrem lise e liberam as citocinas
pr-inflamatrias IL-1 e IL-18. Juntamente, as IL-8 liberadas pelas clulas epiteliais invadidas sinalizam
para PMN (leuccitos polimorfonucleares ou neutrfilos). Estes PMN eventualmente resolvem o processo
infeccioso.

Diagnstico Laboratorial das Enterobactrias


Coleta e Processamento
Se no forem processadas imediatamente, as
. colhidas em meios de
amostras devem ser
transporte (Cary-Blair, Amies ou Stuart)
Isolamento e Identificao
Local de orgem devem ser considerados, pois
enterobactrias em stios corporais estreis so
altamente significativos.
Rotineiramente cultivadas a partir de fezes

Diagnstico Laboratorial das Enterobactrias

Identificao dos gneros de enterobactrias


(importante em microbiologia clnica e epidemiologia; base de muitos sistemas de identificao
comerciais (Enterotube, API-E)

Ver se usa ou no a lactose

Diagnstico Laboratorial das Enterobactrias


Meios para isolamento e identificao de enterobactrias
A maioria dos laboratrios utiliza Agar Sangue, e um
meio seletivo/diferencial (MacConkey)
Para fezes, so usados meios altamente seletivos, como
Hektoen Entrico (HE), XLD ou SS juntamente com
MacConkey.
Maioria dos laboratrios utilizam
um sistema de
identificao miniaturizado (API) ou automatizado
comercial, em vez de tubos mltiplos inoculados
manualmente Testes Bioqumicos

O meio IAL / Rugai foi elaborado para triagem de enterobactrias e consiste


de nove provas em apenas um tubo de ensaio: indol (tampa), fermentao da
sacarose, fermentao da glicose, produo de gs, fenilalanina, uria, H2S,
lisina e motilidade.

Identificao de enterobactrias (Meio de EPM)

MEIO EPM (Fermentao da glicose, produo


de gs, H2S, uria, fenilalanina)
Inocular picando at o fundo e semear na superfcie, incubar com a
tampa frouxa 24hs/35oC.
Base:
Fermentao da glicose: cor amarela.
Produo de gs: formao de bolhas ou deslocamento do meio do
fundo do tubo.
Produo de H2S: Enegrecimento do meio em qualquer intensidade
Hidrlise da uria: Aparecimento da cor azul ou verde-azulada (reao
fraca) que se estende para a base do meio, envolvendo-a totalmente ou
no.
Superfcie:
Desaminao do Triptofano: aparecimento de cor verde-garrafa no
superfcie do meio. Quando a reao negativa, a superfcie do meio
adquire cor azul ou, raramente, amarela.

Identificao de enterobactrias usando MILi

MEIO MILi (Movimento, Indol e Lisina)


Fazer picada central apenas e incubar 24hrs/35oC
-Motilidade: A bactria mvel cresce alm da picada turvando parcial ou
totalmente o meio. A bactria imvel cresce somente na picada.
-Descarboxilao da Lisina: Quando a lisina descarboxilada, o meio
adquire cor prpura acentuada ou discreta. Quando o aminocido no
utilizado, o meio adquire cor amarela ntida nos seus 2/3 inferiores.
Considerar o teste positivo sempre que o meio no estiver amarelo
-Produo de indol: Aps a leitura dos testes de motilidade e lisina,
adicionar 3 a 4 gotas de reativo de Kovacs a superfcie do meio e agitar
levemente. Quando a bactria produz indol, o reativo adquire cor rosa ou
vermelha. Quando no o produz, o reativo mantm a sua cor inalterada.

Identificao de enterobactrias (citrato de


Simmons)

IMVIC (+ + - -) = E. coli)

Pesquisa dos patgenos em fezes


Porque as fezes tm uma microbiota numerosa,
eficientes mtodos de triagem devem ser usados
para recuperar os patgenos.

Os patgenos entricos incluem Salmonella,


Shigella, Aeromonas, Campylobacter, Yersinia,
Vibrio, e E. coli 0157:H7

Potrebbero piacerti anche