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Revista Iberoamericana de Tecnologa

Postcosecha
ISSN: 1665-0204
rebasa@hmo.megared.net.mx
Asociacin Iberoamericana de Tecnologa
Postcosecha, S.C.
Mxico
Surez--Quiroz, Mirna L.; Mendoza--Bautista, Irma; Monroy--Rivera, J. Alberto; de laCruz--Medina,
Javier; Angulo--Guerrero, Ofelia; Gonzlez--Ros, Oscar
AISLAMIENTO, IDENTIFICACIN Y SENSIBILIDAD A ANTIFNGICOS DE HONGOS
FITOPATGENOS DE PAPAYA CV. MARADOL (Carica papaya L.)
Revista Iberoamericana de Tecnologa Postcosecha, vol. 14, nm. 2, 2013, pp. 115-124
Asociacin Iberoamericana de Tecnologa Postcosecha, S.C.
Hermosillo, Mxico

Disponible en: http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=81329290004

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Aislamiento, identificacin y sensibilidad

Mirna L. Suarez-Quiroz y cols. (2013)

AISLAMIENTO, IDENTIFICACIN Y SENSIBILIDAD A ANTIFNGICOS DE


HONGOS FITOPATGENOS DE PAPAYA CV. MARADOL (Carica papaya L.)

Mirna L. Surez-Quiroz*, Irma Mendoza-Bautista, J. Alberto Monroy-Rivera, Javier de la


Cruz-Medina, Ofelia Angulo-Guerrero, Oscar Gonzlez-Ros.

Unidad de Investigacin y Desarrollo en Alimentos, Instituto Tecnolgico de Veracruz, Av. M. A. de Quevedo #


2779, C.P. 91897, Veracruz, Ver. Mxico. Telfono: 229-934-5701 ext. 210 fax 201, Veracruz, Ver. Mxico. E-
mail: mirnasq@itver.edu.mx *Autor para correspondencia (mirnasq@itver.edu.mx)

Palabras clave: Carica papaya, hongos fitopatgenos, antifngicos.

RESUMEN

La produccin de papaya (Carica papaya L.) tiene gran importancia econmica, Mxico ocupa el quinto lugar
como productor mundial y el primer lugar como pas exportador al producir ms de 638 mil toneladas, el estado
de Veracruz destac por su produccin alrededor de 194 mil toneladas en 2009. Este fruto es sensible al manejo
postcosecha requiriendo cuidados especiales para evitar daos mecnicos; por fro; por calor y el ataque por
hongos. Las prdidas postcosecha de papaya en Veracruz oscilan entre 10-50 % dependiendo de la poca y de
los tratamientos aplicados en el campo, las enfermedades fngicas son una de las principales causas, siendo la
aplicacin de productos qumicos el nico mtodo utilizado contra estas enfermedades. El objetivo de este
trabajo fue aislar, identificar y estudiar in vitro la sensibilidad a los antifngicos de los hongos fitopatgenos que
atacan durante la postcosecha a la papaya maradol en el estado de Veracruz. Se aislaron e identificaron doce
cepas fitopatgenas: Fusarium crookwellense, Rhizopus stolonifer, Stachybotrys chartarum, Alternaria alternata,
Fusarium oxysporum, Chrysonilia sitophila, Colletotrichum gloeosporioides, Aspergillus fumigatus, Mucor
hiemalis, Penicillum chrysogenum, Mucor circinelloides, Geotrichum candidum y una antagonista: Trichoderma
harzianum. Las cepas fueron probadas contra ocho fungicidas y dos combinaciones de los mismos. Las pruebas
-1
in vitro mostraron que las cepas aisladas tienen resistencia a los antifngicos: Captan (2000 mg L ), Benomilo
-1
-1
-1
-1
(1250 mg L ), Tiabendazol (900 mg L ), Metalaxil (346.5 mg L ) y Metalaxil-Mancozeb (3500 mg L ). Las
-1
-1
concentraciones de los fungicidas Mancozeb (4500 mg L ), Oxicloruro de Cu (4500 mg L ) y Oxicloruro de Cu-
-1
Mancozeb (3250 mg L ) que presentan efecto inhibitorio fueron superiores en un 50, 12.5 y 30 %
respectivamente, a las concentraciones recomendadas por los fabricantes, lo cual conlleva al riesgo de
desarrollar una resistencia secundaria y un riesgo a la salud.

ISOLATION, IDENTIFICATION AND ANTIFUNGAL SUSCEPTIBILITY OF PHYTOPATHOGENIC


FUNGI IN PAPAYA CV. MARADOL (Carica papaya L.)

Key words: Carica papaya, phytopathogenic fungi, fungicides.

ABSTRACT

The production of papaya (Carica papaya L.) in Mexico has great economic importance. In 2009,
Mexico was the fifth largest world producer and the first national exporter, producing more than 638
000 tons; of these about 194 thousand tons were produced in Veracruz, Mxico. This fruit is sensitive
to postharvest handling and they require special care to avoid losses with a high economic cost. The
main fruit damage is caused by mechanical damage, temperature damage (cold and heat), and
especially damage cause by fungi attack. In Veracruz, post-harvest handling causes 10 to 50 % of
papaya losses, depending on the time of the year and the treatments applied in the field, where
fungal diseases are the main contributors. In fact, fungal attack losses, estimated by the producers of
the region of Cotaxtla, Veracruz, affects about 80 % of the total production in which the use of
chemicals is the only method used against these diseases. The aim of this study was to isolate, to
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identify and to study the in vitro antifungal susceptibility of pathogenic fungi that attack Papaya
Maradol (Carica papaya L.) after harvesting in the region of Cotaxtla, Ver. Fungi isolates, eight
antifungal agents and two combinations of both (fungi isolates and antifungal agents) were tested
against pathogenic fungi. Thirteen fungi strains were identified and isolated while twelve were
identified as phytopathogenic: Fusarium crookwellense, Rhizopus stolonifer, Stachybotrys chartarum,
Alternaria alternata, Fusarium oxysporum, Chrysonilia sitophila, Colletotrichum gloeosporioides,
Aspergillus fumigatus, Mucor hiemalis, Penicillium chrysogenum, Mucor circinelloides, Geotrichum
candidum and an antagonist: Trichoderma harzianum. In vitro tests showed that the isolates are
resistant to the following antifungal agents: Captan (2000 mg L-1), benomyl (1250 mg L-1),
Thiabendazole (900 mg L-1), Metalaxyl (346.5 mg L-1) and Metalaxyl-Mancozeb ( 3500 mg L-1).
Mancozeb tested at 4500 mg L-1, Cu oxychloride (4500 mg L-1) and Cu oxychloride-Mancozeb (3250
mg L-1) presented higher inhibitory effects on the strains by 50, 12.5 and 30 %, respectively, compared
to the concentrations recommended by manufacturers.

hongos causantes de pudricin. (Silva et al.,
INTRODUCCION
2002).
La papaya (C. papaya L.) es un fruto
Las enfermedades fngicas constituyen la
originario de zonas tropicales de Mxico y
principal causa de prdida de papaya durante
Centroamrica, tiene gran importancia
la comercializacin debido a la falta de
econmica por su alto valor nutritivo,
controles fitosanitarios durante el cultivo y a
propiedades sensoriales y medicinales,
un manejo inadecuado de almacenamiento
caractersticas que han contribuido a
(Flrez et al., 2009). La naturaleza y frecuencia
incrementar su cultivo. Mxico ocupa el quinto
de estas enfermedades depende de un
lugar como productor de papaya a nivel
completo conocimiento del agente patgeno,
mundial con una produccin de 634,000 ton
la planta hospedera, el medio ambiente y sus
(FAO, 2011). El estado de Veracruz aporta
interacciones (Ventura et al., 2004). Las
alrededor del 50% de la produccin nacional
enfermedades fngicas de mayor frecuencia
siendo el municipio de Cotaxtla el primer
reportadas en este fruto son la antracnosis
productor con 49 mil toneladas por ao
causada por C. gloeosporioides (Hernndez-
(SAGARPA, 2011).
Albiter et al., 2005), las pudriciones
La papaya es una fruta susceptible al
pedunculares causadas por Lasiodiplodia
manejo postcosecha por lo que requiere
theobromae, y Phoma caricae-papayae y la
cuidados para evitar prdidas y mermas de un
pudricin acuosa causada por R. stolonifer.
alto costo econmico. Las enfermedades
Aunque la infeccin por los hongos se puede
postcosecha pueden iniciarse durante la
producir en el estado inmaduro, permanece
ontogenia del fruto o despus de la cosecha
latente y se desarrolla hasta que la fruta
con la maduracin fisiolgica. Despus de
madura. Existen estrategias de control para
cosechados, los frutos pasan por una serie de
evitar el dao causado por hongos: el manejo
transformaciones endgenas resultantes del
cuidadoso para minimizar el dao mecnico y
metabolismo celular. El aumento de los
evitar vas de penetracin del inculo fngico;
azucares solubles, de agua libre y de las
mantener la temperatura y humedad relativa
pectinas es acompaado por la reduccin de
ptimas durante las operaciones de
alguno
componentes
fenlicos
y
postcosecha; la inmersin en agua caliente a
protopectnicos, que tornan los frutos ms
49C y la aplicacin de fungicidas.
sensibles al dao mecnico y al ataque de
El uso de fungicidas para el control de
diversos microorganismos, principalmente de
enfermedades que afectan los frutos de
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papaya ha sido ineficiente debido a que ciertas


especies han presentado resistencia a los
principios activos utilizados en el campo y
durante la postcosecha. Esto puede ser
consecuencia del uso excesivo de estos
compuestos o por utilizar dosis inadecuadas
(Saboro et al., 2000). Se han encontrado altos
niveles de resistencia a benzimidazoles por
cepas de C. gloeosporioides asociados al
cultivo de la papaya en diversas zonas de
Costa Rica (Asta-Monge et al., 1994). En
Mxico, se ha observado poca eficiencia del
benomilo en frutos de papaya (Zavala-Len et
al., 2005), lo que crea la necesidad de buscar
otras opciones de combate qumico. Debido a
lo anterior, el uso de altas dosis de fungicidas
o el uso de la combinacin de dos o ms
productos qumicos es una prctica comn
entre los productores de este fruto. Lo
anterior provoca que los fitopatgenos
desarrollen resistencia secundaria o adquirida
como consecuencia de una exposicin
prolongada a los antifngicos y un riesgo para
la salud humana. El propsito del presente
trabajo fue aislar e identificar los hongos
fitopatgenos que atacan a la Papaya (C.
papaya L.) cv. Maradol durante la postcosecha
y determinar la susceptibilidad de las cepas a
los fungicidas usados en la regin para
controlar las enfermedades fngicas y
determinar las concentraciones ptimas para
su aplicacin.

MATERIALES Y METODOS
Los frutos de papaya (Carica papaya)
cultivar Maradol en estado de madurez
fisiolgica fueron recolectados de plantaciones
del municipio de Cotaxtla, Veracruz, Mxico.
Los frutos presentaban dao fngico como
pudriciones basales, pudriciones blandas,
moho superficial y otras lesiones.
Aislamiento de hongos filamentos: A partir
de frutos con sntomas de dao fngico se
realiz
un
corte
triangular
de
aproximadamente 1-2 mm, y se realizo
siembra directa en medio PDA acidificado. Los

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cultivos fueron incubados a 28 +1 C por 5 das


y reaislados hasta obtener un cultivo
monosprico en el mismo medio.
Identificacin de las cepas aisladas: La
identificacin se realiz en medios PDA
(Bioxon), Agar Czapec (Dibico S.A. de C.V.) y
CYA (Agar Czapek y extracto de levadura). Se
determinaron las caractersticas culturales
macroscpicas y morfolgicas por microcultivo
y la observacin directa en preparaciones
teidas con azul de algodn lactofenol
utilizando un microscopio Motic BA200
provisto de un procesador de imgenes Motic
Images Plus 2.0 ML (Motic Co. LTD, China).
Para la identificacin de cada cepa se
utilizaron las claves propuestas por Samson et
al. (2004)
Pruebas de sensibilidad a los
antifngicos y determinacin de la CMI
(Concentracin Mnima Inhibitoria)
Preparacin de las placas. El mtodo de
microdilucin en caldo para hongos
filamentosos fue realizado de acuerdo al
protocolo M38-P de la NCCLS (NCCLS, 2002)
(Espinel-Ingroff y Cantn, 2007). Los
antifngicos mas utilizados por los
productores de papaya de la regin fueron
seleccionados en el presente estudio. Se
estudiaron tres fungicidas de contacto:
Mancozeb
(Manganese
ethylene
bisdithiocarbonate + Zinc); Oxicloruro de
Cobre y Captan (N (trichloromethylthio)
Cyclohix-4 ere-1,2 dicarbozimide), que actan
directamente sobre la superficie del fruto
evitando la germinacin y penetracin del
patgeno
y
tres
fungicidas
sistmicos:Tiabendazole (1H-Benzimidazole, 2-
(4-thiazolyl)-); Metalaxil (Alanine,N-(2,6-
dimethylphenyl)-N-(methoxyacetyl)
metil-
ester)
y
Benomilo
(Methyl1-(butyl
carbamamoyl)-2-benzimidazole carbaonate)
que actan al ser absorbidos a travs del
follaje y las races, todos fueron adquiridos en
Sigma-Aldrich Co. Se prepararon soluciones
stock de cada producto utilizando DMS
(Dimetil Sulfoxido) (Sigma-Aldrich Co.) y agua

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destilada estril. Se realiz una dilucin 100


veces mayor a la recomendada y
posteriormente se diluy 10 veces superior a
la concentracin final deseada en caldo RPMI
1640 con glutamina y sin bicarbonato sdico
(Gibco, ICN, Oxoid, Sigma), ajustado a pH 7
0.1 con MOPS (cido morfolino propano
sulfnico) 0.164 M (ICN, Sigma). Finalmente,
se realiz una dilucin con caldo RPMI hasta
obtener una concentracin dos veces mayor
que la concentracin final deseada. Con 100 L
de esta solucin se llen una placa estril con
96 pocillos. La columna 12 se llen con 100
L de RPMI (control de crecimiento) y la
columna 1 con 200 L de caldo RPMI (control
de esterilidad). La concentracin final de cada
antifngico se mantuvo en los rangos
siguientes: Mancozeb (1500 a 4500 mg L-1);
Oxicloruro de cobre (3000-5000 mg L-1);
Tiabendazol (300-900 mg L-1); Metalaxil (115.5-
346.5 mg L-1); Captan (500-2000 mg L-1);
Benomilo (250-1250 mg L-1); tambin fueron
probadas la combinacin de dos antifngicos
Mancozeb/Metalaxil (1500-3500 mg L-1) y
Oxicloruro de Cobre/Mancoceb (1000-4000
mg L-1).
Inoculacin de las placas. A partir de
cultivos en medio PDA de siete das de
incubacin, se prepar una suspensin
conidial utilizando agua peptonada adicionada
con Tween 80 al 0.04 %. La suspensin fue
ajustada a una concentracin de 1-5*106
conidias/ml. El conteo se realiz en una
cmara de recuento Neubauer (BLAUBRAND,
Alemania). Las placas fueron inoculadas con
100 L de la suspensin e incubadas sin
agitacin a 25C hasta que se observ
crecimiento en el control. Las lecturas se
realizaron dependiendo de la especie de
hongo, (Rhizopus spp) entre 21-26 h y otras
especies como Aspergillus y Fusarium entre
46-50 h. Las lecturas se realizaron en un lector
de microplacas (Biorad, Benchmark USA) a 655
nm. Todos los ensayos fueron realizados por
duplicado.

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RESULTADOS Y DISCUSIN
A partir de la siembra directa de frutos de
papaya que presentaron dao fngico como
pudriciones basales, pudriciones blandas,
moho superficial y otras lesiones se aislaron 26
cepas que fueron identificadas en 13 especies
de hongos; 10 fitopatgenos: F. crookwellense,
R. stolonifer, S. chartarum, A. alternata, F.
oxysporum, C. sitophila, C. gloeosporioides, A.
fumigatus, M. hiemalis, P. chrysogenum, M.
circinelloides y un antagonista: Trichoderma
harzianum.; adems fue aislada una levadura
filamentosa: G. candidum. Las lesiones
provocadas sobre frutos de papaya por cada
una de las especies identificadas se describen
a continuacin: A. alternata produce en los
frutos pequeas lesiones superficiales
circulares de color negro, que no causaron un
dao significativo a la pulpa; las lesiones
aparecieron por todo el fruto, sin alcanzar a
cubrirlo. Este hongo es de gran importancia
para la papaya debido a que la refrigeracin
aumenta el desarrollo de la enfermedad
(Durn Quirs y Mora, 1989). A. fumigatus
comenz su crecimiento desde el pednculo
hasta rodearlo al inicio se observ un color
blanquecino que con el tiempo se torn de un
verde oscuro. A. fumigatus ha sido asociado a
la contaminacin de semillas oleaginosas,
granos de caf, cacao arroz y cereales. Pocos
reportes han sido publicados de su aislamiento
en frutos, sin embargo por su carcter
termoflico
los
productos
tropicales
almacenados
son
susceptibles
de
contaminacin por este microorganismo (Pitt y
Hocking, 2009). Con C. sitophila se observaron
pudriciones pardas en forma de anillos
concntricos los cuales al transcurrir el tiempo
se tornaron de color negro, este hongo
presenta importancia en algunas frutas de
cascara blanda como el melocotn debido a
que ataca con facilidad y ocasiona prdidas en
el rendimiento, sin embargo no existen datos
que indiquen que este hongo sea de
importancia para el fruto de papaya. La
antracnosis causada por C. gloeosporoides

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(Penz.) es uno de los principales problemas


fitosanitario que afectan a la papaya Maradol,
lo cual ocasiona que su valor en el mercado
disminuya. Los frutos presentaron manchas
acuosas, hundidas y de color marrn oscuro en
la superficie, afectando la calidad externa as
como la interna del fruto, Pez (2003) describe
que si la afectacin es severa puede
observarse dao en el mesocarpio como una
continuacin del dao inicial en el epicarpio.
Los sntomas en la papaya por F.
crookwellense y F. oxysporum iniciaron con
una pequea lesin de tamao variable, sin
forma, muy acuosa y suave, que con el tiempo
abarc la mayor parte del fruto. Estos
fitopatgenos son el causantes de grandes
prdidas econmicas en plntulas de papaya
(Gonzlez Crdenas et al., 2005), algunos
autores coinciden en afirmar que junto con la
antracnosis las pudriciones causadas por
Fusarium son las de mayor incidencia en frutos
de papaya (Albornett y Sanabria, 1994). G.
candidum es una levadura filamentosa que ha
sido muy poco reportada en papaya sin
embargo fue aislada en este trabajo (Fatima et
al., 2009), este fitopatgeno provoc en los
frutos lesiones blandas, de color blanco, las
cuales no tenan un tamao uniforme, al
transcurrir los das las lesiones comenzaron a
gotear; esta situacin es de gran importancia
debido a que con un solo fruto que est
enfermo se puede llegar a contaminar una
parte importante de la produccin. Los frutos
daados por M. circinelloides presentaron
lesiones blandas y acuosas; en las zonas que
presentaron rupturas se observ crecimiento
del hongo, el cual en un corto tiempo se
cubrieron de esporas negras mientras que con
M. hiemalis los frutos afectados se
caracterizaron por manchas de color marrn
las cuales se desprendan con facilidad de las
zonas sanas. Las pudriciones en los frutos por
P. chrysogenum inicialmente presentaron
manchas blandas, aguanosas, ligeramente
decoloradas y de tamao variable, aparecieron
en toda la superficie de este, posteriormente

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se hundieron. Despus un moho blanco


comenz a crecer sobre la superficie del fruto
cerca de la parte central de la mancha.
R. stolonifer en frutos de papaya produce
una frecuente y severa enfermedad
postcosecha, el hongo invade a los frutos a
travs de heridas y de manera rpida pudre los
frutos. Cuando el hongo rompe la cutcula de
la papaya llegando hasta las semillas, el fruto
enfermo se cubre con un micelio areo de
color blanco grisceo de textura spera, este
hongo es uno de los de mayor incidencia en
frutos de papaya, un solo fruto infectado es
capaz de contaminar toda la produccin, de
ah su gran importancia (Velzquez-del Valle et
al., 2008).
Sensibilidad in vitro de las cepas a los
antifngicos utilizados por los productores de
papaya de la regin de Cotaxtla, Ver.
Los seis fungicidas fueron probados a
diferentes concentraciones en contra de las 13
cepas aisladas. La Figura No. 1 presenta el
efecto del Benomilo (a) y del Oxicloruro de
Cobre (b). Para el Benomilo se recomienda una
concentracin de 750 mg L-1, sin embargo a
esta concentracin solo se inhibi el
crecimiento de A. alternata y de M. hiemalis.
A la mxima concentracin probada (1250 mg
L-1), no se inhibi el crecimiento de C.
gloeosporioides, R. stolonifer, M. circinelloides
y F. crookwellense lo que nos indica que este
antifngico es ineficiente para controlar la
antracnosis del fruto y las pudriciones suave y
acuosa causadas por estas especies y que son
consideradas las enfermedades postcosecha
de mayor incidencia en frutos de papaya.
Zavala-Len et al. (2005) evaluaron la eficacia
in vitro del Benomilo en la germinacin
conidial y el crecimiento micelial del C.
gloeosporioides encontrando que los conidios
pudieron germinar, a pesar de que los
benzimidazoles actan en el proceso de
mitosis y meiosis. En contraste, el Oxicloruro
de Cobre Figura 1 (b) present un efecto
inhibitorio sobre F. crookwellense, A.
alternata, C. sitophila, C. gloeosporioides, A.

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fumigatus, P. chrysogenum, M. circinelloides y


G. candidum a la mxima concentracin
permitida de 3500 mg L-1. Este compuesto
acta formando complejos que penetran a la
clula fngica y reacciona con las protenas
formando quelatos y desalojando metales
esenciales e hidrgeno (Pemn et al., 2009). La
diferencia en eficacia de ambos compuestos
puede ser debida a su modo de accin ya que
mientras el benomilo es un fungicida
sistmico, el Oxicloruro de Cobre lo es de
contacto, siendo ms efectivo para controlar
los fitopatgenos que atacan el fruto.

Figura 1 Sensibilidad in vitro de las cepas aisladas


a los antifngicos (a) Benomilo y (b) Oxicloruro de
Cu utilizados por los productores de la regin de
Cotaxtla, Ver.


La Tabla 1 presenta la susceptibilidad a los
antifngicos probados en contra de las
principales cepas que atacan a la papaya en la
Regin de Cotaxtla, Ver., en la tabla se indica s
120

el fitopatgeno es resistente (R) o sensible (S)


a las dosis mximas recomendadas. As mismo
se determin su Concentracin Minma
Inhibitoria (CMI), considerando sta como la
concentracin ms baja de antifngico que
produjo una inhibicin en el crecimiento del
100% del crecimiento del hongo (Espinel-
Ingroff y Cantn, 2007). La concentracin
recomendada de aplicacin del Captan es de
1,250 mg/L, a esta concentracin present un
efecto de inhibicin sobre F. crookwellense, R.
stolonifer y M. Hiemalis. Este compuesto no
fue capaz de inhibir el crecimiento de M.
circinelloides a la mxima concentracin
probada de 2000 mg L-1. El Tiabendazol no fue
capaz de inhibir el crecimiento de cepas de
gran incidencia en frutos de papaya como el F.
crookwellense,
F.
oxysporum,
C.
gloeosporioides, M. hiemalis y M. circinelloides
en la concentracin recomendada de 600 mg
L-1. La CMI requerida para inactivar estos
fitopatgenos est por arriba de las dosis
recomendadas, incluso no fue posible
determinarla debido a que estos presentaron
resistencia a la mxima concentracin probada
de 900 mg L-1. Asta-Monge et al. (1994)
reportaron que existe una marcada reduccin
en la sensibilidad al Tiabendazol. Asimismo, la
resistencia cruzada a los benzimidazoles en
aislamientos
de
C.
gloeosporioides
provenientes de papaya. Aular et al. (2001),
encontraron que el Tiabendazol no afect la
incidencia de frutos con pudricin y el nmero
de frutos afectados por la antracnosis en
parchita maracuy. Las pruebas realizadas con
Metalaxil indican que F. crookwellense y R.
stolonifer son sensibles al antifngico a 231 mg
L-1. Sin embargo, no fue capaz de inhibir a C.
gloeosporioides a la mayor concentracin
probada de 346.5 mg L-1, contrariamente a lo
publicado por Gwary y Asala (2006), quienes
reportaron que este producto present una
eficacia del 70-80% en la inhibicin del gnero
Colletotrichum. En lo referente al Mancozeb a
una concentracin de 3,000 mg L-1 se inhibi el
crecimiento de R. stolonifer, S. chartarum, F.

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oxysporum, M. hiemalis, P. chrysogenum, G.


candidum y T. harzianum, sin embargo,
todava se present crecimiento de cepas
importantes como A. alternata, C.
gloeosporioides, M. circinelloides. Al aumentar
la concentracin a 3,750 mg L-1 se inhibi a A.
alternata no obstante C. gloeosporioides
persista. Se determin que la CMI para inhibir
este importante fitopatgeno fue de 4,500 mg

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L-1, siendo esta mayor a la reportada por


Gonzlez et al. (2006), que determinaron una
inhibicin del 100% in vitro en C.
gloeosporioides con concentraciones de 1600
y 3200 mg L-1 y Solano y Arauz (1995)
reportaron que a una concentracin de 4000
mg L-1 encontraron reduccin en la incidencia
y severidad de la antracnosis.



Tabla 1. Susceptibilidad a los antifngicos y CMI (Concentracin Mnima Inhibitoria) de cepas de hongos
filamentosos aisladas de papaya cv. Maradol (Carica papaya L.).


Tambin
fueron
probadas
las
combinaciones de dos fungicidas tal y como se
presenta en los productos comerciales, como
es el caso del Metalaxil y el Mancozeb
esperando un efecto sinrgico sobre el control
del ataque fngico. La Tabla 1 y la Figura 2,
muestran que el Mancozeb usado
individualmente tiene mayor eficacia sobre el
control de C. gloeosporioides, A. alternata, F.
oxysporum, P. chrysogenum, S. chartarum que
al combinarse con el Metalaxil, el uso de la
mezcla solo tuvo un efecto inhibitorio sobre
M. circinelloides, lo que indica que esta
especie es sensible al Metalaxil. El uso de la
mezcla Oxicloruro de cobre + Mancozeb,
inhibi el crecimiento de R. stolonifer, S.
chartarum, A. alternata, C. sitophila, C.
gloeosporioides, A. fumigatus, M. hiemalis, M.
circinelloides, G. candidum y T. harzianum a
una concentracin de 1750 mg L-1,

controlando el hongo fitopatgeno de mayor


importancia
para
la
papaya,
C.
gloeosporioides, sin embargo, se observ
crecimiento de F. crookwellense, F. oxysporum,
y P. chrysogenum.
El uso de fungicidas para evitar el ataque
por hongos no ha sido eficaz en algunos casos
debido a que ciertas especies han desarrollado
resistencia secundaria a los principales
productos fungicidas utilizados en el campo y
durante la postcosecha (Saboro et al., 2000).
Dicha resistencia puede deberse al uso
inadecuado de las concentraciones de los
fungicidas en el momento de aplicarse a los
frutos. Los resultados obtenidos en el presente
trabajo podran ayudar a los productores de
Papaya Maradol a determinar la mejor
concentracin y el ms efectivo antifngico o
mezcla de antifngicos para ser usados y evitar
el abuso de los mismos, sin embargo es

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Aislamiento, identificacin y sensibilidad

Mirna L. Suarez-Quiroz y cols. (2013)

recomendable que el uso de estos productos


sea ms eficiente con la aplicacin de Buenas
Prcticas de Agrcolas, as como evaluar el uso
de otros tratamientos fsicos como el ozono
que permitan implementar un tratamiento
eficaz para su control (Ong et al., 2012).
Existen varias alternativas de tratamiento de
frutos de papaya con demostrada eficacia
como el uso de quitosanos para evitar la
actracnosis debido a que este compuesto
disminuye la velocidad de respiracin y evita la
prdida de agua del fruto con la consecuente
mejorar la vida media de este fruto (Bautista-
Baos et al., 2006), (Hewajulige et al., 2008).
Otros estudios reportan que el tratamiento
con quitosano induce la actividad enzimtica
de peroxidasas, quitinasas y 1,3 glucanasas,
enzimas relacinadas con la actividad de
defensa de frutos (Ali et al., 2012)


Figura 2 Sensibilidad in vitro de las cepas aisladas
a la combinacin de antifngicos (a) Mancozeb y
Metalaxil y (b) Oxicloruro de Cu y Mancozeb
utilizados por los productores de la regin de
Cotaxtla, Ver.


122

CONCLUSIONES
El ataque por hongos fitopatgenos es un
problema que produce grandes prdidas
econmicas y de disponibilidad de papaya en
la Regin de Cotaxtla,Ver. El presente estudio
permiti poner de manifiesto nuevas especies
fitopatgenas y la presencia de resistencia
secundaria en cepas asociadas a este fruto;
esto probablemente es consecuencia del uso
no controlado e inadecuado de antifngicos
qumicos. En las pruebas in vitro las cepas de
hongos aislados de la regin de Cotaxtla, Ver.,
presentaron resistencia a los fungicidas:
Captan, Tiabendazol, Benomilo, Metalaxil y
Metalaxil-Mancozeb. Las concentraciones de
los productos que presentaron efecto de
inhibicin fueron superiores a las dosis
recomendadas para su uso en campo. Los
resultados del presente estudio permitirn
seleccionar las estrategias de control
postcosecha ms adecuado en donde deben
incluirse el uso de tratamientos solos o
combinados con mtodos fsicos o biolgicos
que no pongan en riesgo la seguridad del
medio ambiente y la salud humana.

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