Practica N: 10

Tema: HIDROLISIS DE LAS GRASAS POR LA LIPASA PANCREATICA

Nuevo Chimbote 21 de junio de 2016

I.

INTRODUCCIN

La lipasa es una enzima de la clase de las hidrolasas, que se usa en el

organismo para disgregar los lpidos (grasas) de los alimentos de manera que
se puedan absorber. Su funcin principal es catalizar la hidrlisis de
triacilglicerol a glicerol. Las lipasas se encuentran en gran variedad de seres
vivos, al igual que las esterasas hidrolizan grasas y aceites en los procesos
digestivos; tambin estn involucradas en el rompimiento y movilizacin de los
lpidos dentro de las clulas de un organismo y de la transferencia de lpidos de
un organismo a otro. Las lipasas, cuya denominacin bioqumica es acil-esterhidrolasas, son enzimas relativamente especficas en su actividad cataltica y
algunas de ellas se distinguen por su alta estereoespecificidad. Poseen un
sustrato especfico y tienen una ptima actividad en un amplio rango de
temperatura, esto las hace unos biocatalizadores verstiles. Las lipasas son
enzimas lipoliticas que hidrolizan las uniones steres de los triglicridos, estas
enzimas se encuentran ampliamente distribuidas en plantas, procariontes y
eucariontes especialmente en animales, en vertebrados se encuentran tres
isoenzimas tejido especificas (pncreas, hgado, intestino)se ha encontrado
que estas enzimas estn altamente asociadas a quilomicrones, y protenas de
bajo peso molecular. En estas protenas se encuentra una regin altamente
conservada, la cual est alrededor de una serina, la cual participa junto con
residuos de histidina y cido asprtico en la estabilizacin de la molcula esta
misma regin se encuentra en otras lipasas procariotas como lecitin-colesterol
aciltransferasa la cual cataliza cidos grasos transferidos entre la fosfatidil
colina y el colesterol. La funcin principal de esta lipasa gstrica es ayudar a la

absorcin de grasas. Hay que destacar que la produccin de jugo gstrico est
controlada por dos mecanismos:* nervioso (sensaciones visuales, gustativas,
etc), hormonal* a travs de la hormona Gastrina.

II.

MATERIALES Y MTODOS
Se prepar el siguiente esquema de tubos de ensayo:

TUBOS(ml)
I
II
III
IV
V
Aceite
3.0
3.0
3.0
----Emulsin de aceite
------3.0
3.0
Buffer
4.0
2.0
2.0
2.0
2.0
Sales biliares
--2.0
2.0
--2.0
Emulsionar bien cada tubo, verificar que el color rosado se mantenga. Si no
es as, aadir unas gotas de NaOH 0.1N hasta que reaparezca.
Pancreatina
----2.0
2.0
2.0
Agitar bien e incubar a 37C por 30 minutos.
Fenolftalena(gotas)
0.2
0.2
0.2
0.2
0.2
Luego se titul cada uno de los tubos de ensayo (de ambos aceites)
con NaOH 0.1N hasta que el color rosado del indicador de
fenolftalena se obtuvo nuevamente.
III.

RESULTADOS

Tabla de datos obtenidos (ml de NaOH 0.01N gastados en la titulacin de

cada tubo)
Con aceite de soya:
TUBOS(ml)
NaOH gastado

I
0

II
0.8

III
0.7

IV
3.2

V
2.7

II
0.8

III
2.5

IV
0.7

V
2.8

Con aceite de oliva:

TUBOS(ml)
NaOH gastado
IV.

I
0

DISCUSIN

La lipasa cataliza la hidrlisis de los cidos grasos. Para poder realizar la

hidrlisis utilizamos NaOH, responsable de separar los cidos grasos de la

larga cadena de los TG produciendo cidos grasos libres. Esto nos demuestra
que mientras mal ml de NaOH se necesiten para que los cidos se hidrolicen,
ms cidos grasos libres hay.
Para la eficiente accin de la enzima lipasa pancretica es necesario, un
pH superior a 4.0, la presencia de sales biliares y eficiente la presencia de un
cofactor, que debe estar en cantidades adecuadas y que corresponde a la
colipasa pancretica, que es producida por el mismo pncreas.
La colipasa se une a los triglicrido en la interfase aceite-agua, en
presencia de los cidos biliares. Luego la lipasa se une a la colipasa
acomodando su sitio activo en posicin favorable para la hidrlisis. Los
productos de la digestin son los monoglicridos y cidos grasos de longitud
superior a 10 carbonos se incorporan en micelas mixtas con cidos biliares y
fosfolpidos, para su posterior absorcin.
La reaccin de hidrolisis frecuentemente es seguida por una alteracin del
pH, debido a la disociacin de los triglicridos en el transcurso del tiempo de la
reaccin enzimtica.
En los nios y adultos la hidrolisis de los triglicridos, se lleva a cabo en el
intestino delgado y se realiza de forma eficaz y completa en condiciones
normales, mientras en los recin nacidos la secrecin de enzimas pancreticas
(www.fao.org/)
V.

CONCLUSIONES
Las sales biliares en la hidrolisis de las grasas (aceite) cumplen la
funcin de emulsificar y solubilizar las grasas, transformndolas en
pequeas micelas con lo cual disminuye la tensin superficial

producindose la ruptura de los enlaces esteres.

La hidrolisis del aceite por medio de la lipasa pancretica va
liberando cidos grasos en la solucin y al emplear NaOH en la
valoracin cido base para la determinacin indirecta de la
cantidad de cidos libres liberado, provoca una reaccin cido

VI.

base debido a la mezcla entre un lcali y los cidos grasos libres.

CUESTIONARIO

1. Qu cambio sufren los triglicridos a nivel oral y gstrico?

El proceso de digestin de los lpidos comienza en el estmago ya que en la
cavidad oral no sufren cambio alguno, se ha descrito una lipasa gstrica que
hidroliza los triglicridos parcialmente solo en un 20% mientras el otro 80%
sigue su trayecto hacia el duodeno, al llegar a esa instancia 2 hormonas son
liberadas en presencia de los cidos grasos y por el pH bajo que indica un
factor fisiolgico.
2. Cul es la composicin de la bilis?
La bilis est formada principalmente por agua y por productos de desecho del
hgado, entre los que nos encontramos con lecitina (fosfolpido), colesterol y
sales biliares, que son unos componentes que posibilitan la absorcin y la
degradacin de las grasas.
Las principales funciones de la bilis:

Degrada las grasas y mejora su absorcin.

Permite la digestin.

til en el transporte y la absorcin de los productos finales de la

digestin.

Favorece la eliminacin de los desechos del hgado: exceso de

colesterol y bilirrubina.
3. De 5 ejemplos de cidos grasos
SATURADOS

El cido Palmtico (C16:0) es el principal cido graso saturado presente

en los alimentos de origen animal. Diferentes investigaciones han
arrojado que incrementa los niveles de colesterol total y LDL, cuando
sustituyen en la dieta a los hidratos de carbono u otro tipo de grasas.

El cido Esterico (C18:0) no eleva los niveles plasmticos de colesterol

total, segn distintos estudios en animales y humanos, en contraste con

otros cidos saturados. Este cido se metaboliza ms rpidamente hacia

cido oleico que otras grasas saturadas.

El cido Mirstico (C14:0), aunque en menor medida que el palmtico,

tambin aumenta la concentracin de colesterol total. La dieta mixta

habitual contiene cantidades pequeas de cido mirstico, presente

fundamentalmente en la mantequilla.
INSATURADOS

4. Cules son las condiciones ptimas para la actividad de la

lipasa pancretica?

Una caracterstica peculiar de las lipasas es que son enzimas solubles en agua
que actan sobre sustratos insolubles y agregados, por lo que operan unidas a
interfaces lpido-agua. Bajo estas condiciones, se produce un incremento de la
actividad cataltica, respecto a las soluciones con concentraciones por debajo
de la concentracin micelar crtica, fenmeno conocido como activacin
interfacial (Sarda y Desnuelle, 1958). La temperatura ptima para las lipasas
puede encontrarse en el intervalo entre 35 y 50 C, aunque existen lipasas
termoestables que exhiben valores de temperatura ptima superiores a 50 C
5. Qu componentes tiene la pancreatina?
La pancreatina est compuesta por las enzimas del pncreas de la vaca o el
cerdo, llamadas amilasa, proteasa y lipasa, que digieren el almidn, las
protenas y los lpidos, respectivamente. Histricamente, los preparados de las
enzimas pancreticas estaban disponibles sin receta.
VII.
REFERENCIAS
www.fao.org/docrep/v4700s/v4700s07.htm
www.academia.edu/4750102/DIGESTI%C3%93N_DE_L%8DPIDOS
http://www.natursan.net/funciones-de-la-bilis/