Fundamentos de

GENTICA BACTERIANA

Profa Francis Moreira Borges

As bactrias possuem material gentico, o qual transmitido aos descendentes

no momento da diviso celular. Este material gentico no est contido dentro de
um ncleo, portanto o genoma destes microrganismos est disperso no
citoplasma.

ORGANIZAO DO GENOMA BACTERIANO

O genoma bacteriano est condensado e organizado em uma estrutura

denominada NUCLEIDE.

NUCLEIDE ou CROMOSSOMO BACTERIANO: constitudo, geralmente, por uma

nica molcula de DNA fita dupla, circular, no delimitado por membrana nuclear,
tamanho variando entre 500 a 10.000 kb e capaz de auto-duplicao. No contm
introns e seus genes contm todas as informaes necessrias sobrevivncia da
clula.
Possuem apenas uma cpia de seu cromossomo, sendo portanto haplides.

ORGANIZAO DO GENOMA BACTERIANO

GENE: sequncia de nucleotdeos do DNA que expresso em um produto funcional, ou
seja, molcula de RNA e protena.
GENOMA: seqncia completa de DNA; algumas no so convertidas em produtos
funcionais
Sequncias no-codificadoras: INTRONS (bactrias no possuem)
Sequncias codificadoras: EXONS
OPERON: grupos de um ou mais genes estruturais expressos a partir de um promotor
especfico. Operons com muitos genes estruturais so chamados policistrnicos.

Promotores e operadores: sequncias de nucleotdeos que controlam a expresso de

um gene determinando as seqncias que sero transcritas no mRNA.
Transcrio

DNA

Traduo

RNA

PROTENA

cv

Transcrio de genes independentemente expressos cada gene precedido por um promotor (Pr).
A transcrio destes genes resulta na sntese de diferentes RNAs, um para cada gene RNAs monocistrnicos

cv
Transcrio de genes coordenadamente expressos o conjunto de genes forma um operon e precedido por um nico promotor (Pr).
A transcrio destes genes resulta na sntese de um nico RNA contendo a informao gentica correspondente a todos os genes
integrantes do operon RNA policistrnicos

Duplicao do DNA bacteriano

O DNA cromosmico precisa duplicar-se antes do processo de diviso celular,
para que todas as clulas da prognie bacteriana recebam uma cpia do
cromossomo (transferncia vertical de genes).

Duplicao

DNA

DNA

Clulas filhas

A duplicao do DNA cromossmico bacteriano

semi-conservativa, simtrica e bidirecional, a partir
de uma origem nica (oriC).
O processo requer enzimas, tais como as
girases, helicases, primases, polimerases, ligases
e topoisomerases.
A direo da sntese sempre no sentido 5 3.

FLUXO DA INFORMAO GENTICA

Estrutura dos ribossomos bacterianos:

A unidade S expressa unidades Svedberg e

representa uma medida da taxa de
sedimentao
das
subunidades
na
ultracentrifugao, relacionada com a
massa
molecular
e
estrutura
tridimensional.

RNAr eucariota: 80S (60S e 40S)

Elementos genticos extracromossomais

Esquema de um plasmdio

Plasmdios:
Segmentos de DNA fita dupla,
circulares; tamanho varia entre 1500 a
400.000 pb.
Auto-duplicam independentemente do
cromossomo.

Carregam informao gentica no

essencial a clula, mas podem prover
uma vantagem seletiva para as
bactrias que os possuem.
Ex.: genes de resistncia mltipla a
antibiticos; bacteriocinas; toxinas.

Elementos genticos extracromossomais

Transposons: tambm chamados genes saltadores ou sequncias de insero (IS),

so elementos genticos mveis que podem transferir DNA dentro de uma clula, de uma
posio para outra no genoma ou entre diferentes molculas de DNA (plasmdio-plasmdio
ou plasmdeo-cromossomo).
Possuem tamanho variando de 150 a 1500 pb, com repeties invertidas de 15 a 40 pb
em suas extremidades e informao gentica mnima necessria para sua prpria
transferncia.

Integrons
Um integron inclui:
Um gene codificador de uma integrase;
Um stio adjacente de recombinao;
Uma regio promotora, utilizada na expresso dos genes componentes do cassete;
Um ou mais cassetes de genes

Segmentos de DNA fita dupla, geralmente menores que os transposons;

no autoduplicam. Capturam genes de resistncia a drogas do citoplasma.
Ocorrem sobre transposons e podem ser transferidos ligados a eles, aos
plasmdios e aos cromossomos.

Variaes fenotpicas X variaes genotpicas

Variaes Fenotpicas

Resultam das adaptaes das bactrias ao ambiente. So reversveis, sem

comprometimento gentico.
Ex.: Serratia marcescens (37 C sem pigmentao

25 C vermelhas)

Bacillus sphaericus (2% peptona clulas vegetativas

Gram positivos (cultura nova clulas azuis

0,1% peptona esporos)

cultura velha clulas vermelhas)

Variaes Genotpicas

Alteraes na seqncia de nucleotdeos. So irreversveis (atravs dos

processos de mutao e recombinao).

Variabilidade Gentica em Bactrias

As bactrias podem apresentar variaes que conduzem formao de clones com
propriedades distintas do clone selvagem original. A variao se d atravs de mutao ou
recombinao.
MUTAO => alterao na sequncia de bases nitrogenadas do DNA, geralmente resultante de deleo, insero
ou substituio de um ou mais nucleotdeos; esta alterao gentica pode modificar o produto (protena).
As mutaes podem ser neutras, desvantajosas ou benficas.

RECOMBINAO => processo de variabilidade gentica que envolve trasnferncia de material gentico entre duas
clulas.

MUTAO

RECOMBINAO

Processo vertical

Processo horizontal

Ocorre durante a replicao

do cromossomo bacteriano

Ocorre durante os processos

de conjugao, transformao
ou transduo

Variabilidade gentica vertical associada mutao

Principais tipos de mutao

Mutao puntiforme

Mutao por insero

Mutao por deleo

Transposio

MECANISMOS DE RECOMBINAO GENTICA BACTERIANA

Embora as mutaes sejam responsveis pela expresso de vrias novas caractersticas por
uma clula, muitos fentipos procariticos so decorrentes da aquisio de novos fragmentos
de DNA, por meio de processos de transferncia horizontal de genes:

Transformao
Conjugao
Transduo

Transformao: incorporao de DNA livre, geralmente

decorrente da lise celular
Na natureza, o processo ocorre quando uma clula sofre lise, liberando seu DNA. Este, por ser
de grande tamanho tende a sofrer fragmentao e outras clulas podem absorver alguns
fragmentos.

Para que o processo ocorra, necessrio que a clula encontre-se competente - apresentar
stios de superfcie para a ligao do DNA da clula doadora - e apresentar a membrana em
uma condio que permita a passagem deste DNA.

Experimento de Griffith - Frederick Griffith, 1928

Evidncia da transformao bacteriana (pneumococos)

As bactrias no-encapsuladas foram transformadas em encapsuladas.

Experimentos subseqentes comprovaram que o fator de transformao era DNA.

Conjugao: processo de transferncia de DNA de uma

bactria para outra, envolvendo o contato entre as duas
clulas
A conjugao est associada presena de plasmdeos F. Estes plasmdeos contm genes
que permitem a transferncia do DNA plasmidial de uma clula para outra ou, em outras
palavras, a capacidade conjugativa.
Quando a clula porta um plasmdeo de natureza F denominada F+, doadora,
enquanto clulas desprovidas de tais plasmdeos so denominadas F-, receptoras.

A capacidade conjugativa est associada presena de genes localizados

em um operon denominado tra que conferem caractersticas envolvidas na
conjugao como a sntese do pili F, responsvel pelo reconhecimento,
contato entre as clulas e a transferncia do DNA plasmidial.

Eventualmente, os plasmdeos podem ser integrados no cromossomo, sendo este processo

mediado por pequenas seqncias de DNA denominadas IS (insertion sequences).
As clulas apresentando tais plasmdeos integrados so denominadas Hfr.
Quando integrados, esses plasmdeos podem mobilizar a transferncia de genes
cromossomais tambm.

A conjugao pode ser de dois tipos: entre clulas F+ e F-, resultando em duas
clulas F+ e entre clulas Hfr e F-, resultando em uma clula Hfr e outra F-.

Nos dois processos, acredita-se que o mecanismo provvel de transferncia do DNA seja
pelo crculo rolante, onde apenas uma das fitas transferida, sendo a fita complementar
sintetizada pela clula receptora.

Transduo: transferncia de material gentico mediada por

vrus (bacterifagos)
Transduo generalizada: Este tipo de processo requer a ocorrncia de um ciclo ltico, onde
eventualmente pode haver o empacotamento de fragmentos de DNA da clula hospedeira, gerando
partculas denominadas partculas transdutoras, que correspondem ao capsdeo viral contendo em seu
interior DNA bacteriano.
Embora no possam ser descritas como vrus, as partculas transdutoras exibem a capacidade de
adsoro superfcie de outras clulas bacterianas.
A freqncia com que um determinado gene transferido baixa, uma vez que cada partcula
transdutora leva apenas um determinado fragmento de DNA.

Transduo especializada: Evento raro, embora bastante eficiente.

A etapa inicial corresponde infeco e lisogenizao do fago, que ocorre em stios especficos do
genoma.

Pela ao de algum indutor (ex: UV) h a separao do fago do genoma (integrao reversa), que
normalmente ocorre perfeitamente. Entretanto, em alguns casos, essa separao defeituosa,
promovendo a remoo de genes bacterianos e deixando parte do genoma viral na clula.

Transduo generalizada

Transduo

especializada

 Converso lisognica

- transferncia de DNA de uma partcula viral para uma

bactria. A prpria lisogenizao torna a bactria imune a
outras infeces por este fago, mas alm disso, outros
fentipos podem ser adquiridos.

- a bactria recebe um gene que codifica uma toxina, sendo

este gene de origem viral.
Ex: Corynebacterium diphtheriae