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PROYECTO DE TESIS
ndice
1.1. RESUMEN......................................................................................................... 1
II. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA......................................................................1
2.1. FUNDAMENTACION DEL PROBLEMA.............................................................1
2.2. JUSTIFICACION E IMPORTANCIA....................................................................2
2.3. OBJETIVOS....................................................................................................... 3
III.
MARCO TEORICO................................................................................................ 3
4.1. HiptesisH0:..................................................................................................... 7
4.2. Sistema de variables e indicadores.............................................................7
V. MATERIALES Y METODOS..................................................................................... 8
2.1
Fermentacin malolctica.................................................................13
ANALISIS ESTADISTICOS............................................................................................... 13
6.1. Poblacin....................................................................................................... 13
6.2. Muestra.......................................................................................................... 13
VI.
DISEO EXPERIMENTAL.................................................................................. 13
JUSTIFICACION E IMPORTANCIA
II.3.
OBJETIVOS
MARCO TEORICO
III.1. ANTECEDENTES DE ESTUDIOS REALIZADOS
EVALUACION DEL PROCESO DE FERMENTACIN DE ZUMO DE COPOAZ
(Theobroma grandinflorum) PARA LA OBTENCIN DE VINO EMPLEANDO
Saccharomyces cerevisiae
Copoaz Theobroma grandinflorum es una especie arbrea, nativa de la
Amazona oriental. Se cultiva en Brasil desde el estado de So Paulo, por el
sur, hasta Roraima, por el norte. Otros pases donde se cultiva ocasionalmente
son Ecuador, Guyana, Martinica, Costa Rica, So Tom, Trinidad Tobago,
Ghana, Venezuela y Colombia. (Humboldt; Proexport. 2002). El copoaz
(Theobroma grandinflorum) es un fruto promisorio de la Amazonia, del cual se
obtienen diferentes productos alimenticios. En este proyecto se evaluar la
capacidad de la levadura Saccharomyces cerevisiae en la fermentacin del
copoaz. Se determin la concentracin de slidos solubles y grados de alcohol
producidos durante 27 das de fermentacin. ( 5)
III.2. CONCEPTOS FUNDAMENTALES
III.2.1. ORIGEN Y TAXONOMA DEL COPOAZ
El copoaz es una planta amaznica pariente muy cercano del cacao, el cual es
considerado una fruta tropical muy promisoria para los trpicos hmedos y es
una especie nativa de Amrica oriental, distribuida en la cuenca amaznica de
Brasil, Colombia, Ecuador, Guyana, Per, Venezuela y Surinam.( 6)
CONTENIDO
Humedad (%)
87.27
Carbohidratos (%)
9.27
6.26
1.04
Cenizas (%)
0.70
Protena (%)
1.31
0.41
Calcio (ug.g-1)
100
Magnesio (ug.g-1)
200
Potasio (ug.g-1)
2.600
Fosforo (ug.g-1)
200
Hierro (ug.g-1)
11
Zinc (ug.g-1)
Selenio (ug.g-1)
Cadmio (ug.g-1)
0.03
Plomo (ug.g-1)
420
14071
0.13
11.17
Vitaminas A
90.13
4
Vitamina C
54.67
pH
3.45
2.15
7.00
Fuente:(7)
En general, la pulpa es pobre en protenas y grasas, pero tiene una baja acidez
que facilita la conservacin. Los contenidos de protenas, lpidos y carbohidratos
estn dentro de los lmites encontrados en la mayora de los frutos tropicales. En
relacin a los minerales y vitamidnas, la pulpa del copoaz es relativamente rica
en calcio, fsforo y fierro y presenta un contenido moderado de Vitamina C ( 8)
La pulpa constituye la parte del fruto de mayor valor econmico, se utiliza
principalmente en la elaboracin de refresco, nctar, gelatina, sorbete, dulce,
crema y licor. Las semillas son utilizadas, aunque en pequea escala, en la
elaboracin de un producto semejante al chocolate, denominado cupulate( 7)
III.2.3. LEVADURAS
Se les denomina levaduras a un grupo de hongos unicelulares cuya actividad ha
sido siempre de gran importancia, estos organismos son abundantes
especialmente en donde existe la presencia de azucares Las levaduras son de
forma esfrica, ovalada o cilndrica y en general la divisin celular se lo lleva a
cabo por gemacin.
Las levaduras no forman filamentos ni micelio y las clulas de levadura
permanecen como una coleccin de clulas solas, por lo que se destacan como
clulas individuales Algunas levaduras se reproducen sexualmente a lo que se
conoce como apareamiento, en la cual dos clulas se fusionan.( 1)
III.2.4. CLASIFICACIN DE LA LEVADURA
La Saccharomyces cerevisiae es la levadura ms conocida y de importancia
industrial ya que es la especie de levadura utilizada por excelencia para la
obtencin de etanol a nivel industrial debido a que es un organismo de fcil
manipulacin y de recuperacin, no es exigente en cuanto a su cultivo, no
presenta alto costo, tolera altas concentraciones de etanol, en la fermentacin
produce bajas concentraciones de subproductos, es osmotolerantes, capaz de
utilizar altas concentraciones de azucares, presenta alta viabilidad celular para
el reciclaje y caractersticas de floculacin y sedimentacin para el
procesamiento posterior. La clasificacin taxonmica se describe a continuacin:
(1)
5
III.2.5. Fermentacin
En ausencia de aceptor de electrones, muchos organismos efectan reacciones
redox balanceadas de algunos compuestos orgnicos, con liberacin de
energa. Este proceso se llama fermentacin. Existen muchos tipos diferentes
de fermentacin, pero en procesos fermentativos solamente se efectan una
oxidacin parcial de los tomos de carbono del compuesto orgnico y, por
consiguiente una pequea cantidad de energa se libera. La oxidacin en una
fermentacin esta acoplada a la reduccin posterior de un compuesto orgnico
generado a partir del catabolismo del sustrato inicial fermentable; as, no se
requiere un aceptor de electrones suministrado exteriormente
El ATP se produce en las fermentaciones en un proceso que se llama
fosforilizacin a nivel de sustrato, en la que el ATP se sintetiza durante etapas
enzimticas especficas en el catabolismo del compuesto orgnico. Un ejemplo
de fermentacin es el catabolismo de la glucosa por levaduras en ausencia de
oxigeno. (1)
C12H22O11 ----------------------------------- 2C2H6O + 2CO2
Glucosa
2 Etanol + 2 bixido de carbono
En esta reaccin parte de los tomos de carbono terminan en CO2, una forma
ms oxidada que la de los tomos de carbono de la molcula que parti,
mientras que los otros tomos de carbono terminan en etanol, que es ms
reducido que la glucosa (Brock & Madigan, 1982).
La energa liberada en la reduccin de la glucosa a etanol es 238.8 Kj/mol se
conservar por fosforilaciones a nivel de sustrato en forma de enlaces fosfato de
alta energa en el ATP, con una produccin neta de dos de estos enlaces.
Explicaremos las etapas bioqumicas comprendidas en la fermentacin de la
glucosa a etanol y la forma en que parte de la energa liberada se conserva en
enlaces fosfato de alta energa.(1)
III.2.6. Temperatura
La temperatura ejerce un marcado efecto sobre la velocidad metablica del
organismo. La temperatura tiene una influencia directa sobre la velocidad de
reaccin y esta puede cambiar la configuracin de los constituyentes celulares,
especialmente de las protenas y de los componentes de la membrana La
temperatura optima de crecimiento de las levaduras especialmente de la
Saccharomyces cerevisiae es de 30 a 35C. La temperatura afecta al organismo
de manera notable ya que los organismos de una especie dada solo pueden
crecer en un rango de temperatura y esto afecta de manera notable al
organismo. (9)
La acidez o alcalinidad de una solucin se expresa por su ndice de pH en una
escala de 0 a 14. Es importante recordar que el pH es una funcin logartmica,
un cambio en una unidad de pH representa un cambio de diez veces en la
6
IV.2.1.2.
Variables independientes
Concentracin la levadura (1, 2 y 3 %)
ph
Variables dependientes
rendimiento en la en la obtencin
Determinar el rendimiento del etanol obtenido (%)
Indicador
Unidad
de
7
medida
Variable Independiente
concentracin
% g/l
ph
Variable dependiente
rendimiento
% (G.L)
Caracticas organolecticas
FUENTE: propia
V.
MATERIALES Y METODOS
2.1
Ubicacin y diseo de la investigacin.
Los procedimientos experimentales sern llevados a cabo en la Planta Piloto
Laboratorio Universidad Nacional Amaznica de Madre de Dios, que se encuentran
ubicados en la Cuidad de puerto Maldonado, regin de la selva . Dentro de la
investigacin realizada se distinguen cuatro etapas: 1) Adaptar a la Saccharomyces
cerevisiae activa seca. 2) Establecer rangos de pH, Brix y temperatura en el
proceso de fermentacin alcohlica por la levadura activa seca (LAS) y la levadura
adaptada (LA) obtenida de la etapa anterior. 3) Evaluar el proceso de fermentacin
alcohlica con la adicin de tres tipos de nutrientes a tres concentraciones distintas
por la levadura activa seca (LAS) y la levadura adaptada (LA) obtenida de la
primera etapa y 4) Determinar la cantidad de inculo por litro de sustrato para
reducir el tiempo de fermentacin por la LAS y la LA. La fermentacin se realizoara
en un sistema de fermentacin por lotes.
V.1. Sustrato utilizado.
Se usara jugo de copoaz como sustrato. El copoaz que se us para obtener el
jugo se obtuvo de los agricultores del sector Planchn provincia de Tambo pata
8
V.6. Metodologa
V.7.Tcnica de muestreo
Se us el mtodo de cuarto segn la NTP y luego se procedi a recoger la
muestra de forma aleatorizada.
V.8.Metodologa.
Metodologa: experimental
La metodologa que se tomara a seguir ser segn la concentracin de
solvente; como se tiene 3 concentraciones distintas el proyecto de investigacin
se dividir en 3 fermentaciones distintas de 1%, 2% y 3% de levadura
Saccharomyces cerevisiae de los cuales se realizara una comparacin en los
rendimientos de cada fermentacin.
DESINFECTADO
DESCOCADO
DESPULPADO
10
ACONDICIONAMIENTO DEL
Tiempo: 15 das.
FERMENTACION
DESCUBAD
MADURACI
PRODUCTO
Fermentado de copoaz
V.9.3. Seleccin
En esta operacin se eliminaron aquellos cocos con daos mecnicos,
defectuosos, magullados y que presentan contaminacin por
microorganismo. Buscando la estandarizacin de la materia prima. El
objetivo es para obtener un mejor producto final.
V.9.4. Pesado
Se pesaron nuevamente las uvas para saber cunto de perdida se
produjo, durante la seleccin y despalillado. El pesado se efectu
mediante la ayuda de una balanza granataria .se obtuvieron los
siguientes datos:
V.9.5. Descocado
Se separa la cascara de la pulpa manualmente rompiendo el coco con un
martillo sin contaminar la pulpa.
V.9.6. Despulpado
11
Muestra.
La muestra a tomar ser de 5000 g copoaz (Saccharomyces cerevisiae)
= es la media global
2%
3%
3.45
13
3.95
4.45
GRADOS
SUMA
DE
CUADRADO
LIBERTAD
Tratamientos (t - 1)
Error
t(r - 1)
DE
CUADRADOS
MEDIOS
F.C
=0.01
=0.05
( yr i )r
i
Sct sct
SCTt
t1
CMTt
CME
De tabla
SCE
t (r 1)
14
Total
rt 1
Y ij
ij
Fuente: propia
Se realiz un anlisis de varianza (ANOVA) usando un DBCA simple sobre los
parmetros de concentracin de azcares reductores y de alcohol para determinar
la existencia de diferencia significativa entre los datos en funcin del concentracion
de levadura de fermentacin y brix. Para el anlisis estadstico se empleara el
software Desing-Expert 6.0.10, utilizando un valor de 0.05. Posteriormente se
aplicara la prueba del rango mltiple de Duncan (RMD) con un nivel de
significancia de 0.05 y 8 grados de libertad (Montgomery, 2006), para determinar los
pares de medias que presentaran diferencia significativa, en los parmetros de
concentracin azcares reductores y alcohol.
ASPECTOS ADMINISTRATIVOS Y PRESUPUESTALES
Potencial Humano
Tesista
Asesor
Co-asesor
Recursos materiales
Cuadro N 5: Materiales de trabajo
MATERIAL
UNIDADES
Embudo de vidrio
Varilla de agitacin
Piscetas
Rallador metlico
Soporte universal
Mangueras
Papel filtro
25
15
Balanza analtica
Estufa
Plancha de calentamiento
Agitador mecnico
1100.00
Asistente
1000.00
Derecho
de
usar
planta
piloto
y 1000.00
laboratorios
Materiales
500.00
Otros
1000.00
Total
7000.00
Agosto
Semanas
3
Setiembre
Semanas
4
Semanas
4
4
16
Elaboracin del
perfil del
proyecto
Adquisicin de
materiales
Realizacin de
pruebas
Anlisis de
resultados
Redaccin de
informe
x
x
x
x
x
x
BIBLIOGRAFIA
1. McCollom TM, Shock EL. Geochemical constraints on chemolithoautotrophic
metabolism by
microorganisms in seafloor hydrothermal systems.
Geochimica et cosmochimica acta. 1997;61(20):4375-91.
2. Oren MB. Power, faith, and fantasy: America in the Middle East, 1776 to the
present: Taylor & Francis; 2008.
3. Nieto Galarza HO. Evaluacin de las condiciones de la fermentacin alcohlica
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para obtener etanol. 2010.
4. Weller DE. A reevaluation of the-3/2 power rule of plant self-thinning. Ecological
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5. Tigse M, Benjamn C. Aprovechamiento del suero de quesera en la obtencin de
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(Saccharum officinarum). 2013.
6. Zamora-Crescencio P, Domnguez-Carrasco MdR, Villegas P, Gutirrez-Bez C,
Manzanero-Acevedo LA, Ortega-Haas JJ, et al. Composicin florstica y estructura
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7. Cruz E, Barrera V, Monar C, Escudero L, Montfar C, Gonzlez D. planificacion
participativa para el reordenamiento territorial productivo en la subcuenca del
rio chimbo-ecuador basado en los enfoques de gestion integrada de cuencas
hidrograficas y medios de vida1. 2008.
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