PRCTICA 01

Equipos, instrumentos e insumos del Laboratorio de Microbiologa Ambiental

I.

OBJETIVOS

Identificar y demostrar los equipos principales correctamente.

Conocer los la utilidad de los principales equipos del laboratorio para

su buen uso.
Conocer los estndares tcnicos y de

laboratorio.
Conocer las medidas y volmenes de cada material.
Conocer las temperaturas establecidas de los equipos de laboratorio

seguridad propios de un

para su mejor control.

II. INTRODUCCIN
Un laboratorio de Microbiologa es un lugar habilitado para manejar y
estudiar microorganismos, que se encuentran en muestras de agua, suelo,
aire y alimentos adems de muestras clnicas; para su buen uso es
necesario conocer el fundamento y manera correcta de uso de los
principales equipos del laboratorio as como de los instrumentos, insumos y
dems; para comprender as mejor los distintos anlisis microbiolgicos.
III. Equipos, instrumentos e insumos (ver anexo 1)
Microscopio binocular

Lmina portaobjetos

LAMINILLAS CUBREOBJETOS

CAMARA DE NEUBAUER

ACEITE DE INMERSION

CENTRIFUGA

MEDIDOR DE PH

BALANZA

AUTOCLAVE

ESTUFA

BAO MARIA

MEDIOS DE CULTIVO

BOTELLA CON TAPA

PLACA PETRI

ASA DE SIEMBRA

ESPATULA DRIGLASKY

TUBOS DE ENSAYO

AUXILIAR DE PIPETEADO

PROBETA

DESINFECTANTE

INDICADOR DE ESTERLIZACION

INDICADOR DE

CALOR HUMEDO

ESTERLIZACION-CALOR SECO

IV. PROCEDIMIENTO

Observar con cuidado en el

microscopio evitando
manipular con los dedos los
lentes de los objetivos y del
ocular.

Colocar los tubos de

ensayo en la
centrifugadora
diametralmente opuesto
uno al otro para un mejor
equilibrio y no abrir hasta
que termine sus respectivas

La balanza analtica te da
una mayor precisin de
masa, antes de medir la
cantidad de masa de
cualquier material cerrar la
puerta hermticamente.

En la balanza de
precisin se tiene que
evitar colocar algn objeto
y/o sustancia cerca que
altere la cantidad de masa
que se va a medir.

La autoclave utilizada
para esterilizar a calor
hmedo debe ser
hermticamente cerrada
luego de colocar el
material a esterilizar y al
finalizar el tiempo se debe
esperar a que la presin
est en 1 para abrirlo.

La estufa u horno se
utiliza como esterilizador

Bao mara o
termosttico utilizado
para desarrollar
microorganismos en un
cultivo.

Placa Petri, material en la

cual se colocan los
medios de cultivos.

V. ACTIVIDADES

Los tubos de ensayo,

materiales de vidrio en los
cuales se colocan sustancias
determinada que pueden ser
medios de cultivos lquidos.
En caso se requiera calentar
se puede utilizar el sujetador
de bureta.

a. Realice un mapa conceptual considerando los equipos de laboratorio

explicados en clase, indicar el principio y su importancia en el desarrollo
de las actividades prcticas.
b. Indicar los cuidados que se deben tener al manipular el microscopio.
c. Qu equipos y/o instrumentos son necesarios para la cuantificacin de
microorganismos?

EQUIPOS DE

MICROSCOPI
O
PTICO

PRINCIPIO: El objetivo de estas lentes es el de reducir la

aberracin cromtica y la aberracin esfrica.
IMPORTANCIA: Se utiliza Para observar objetos muy
pequeos y no captables a la vista humana.
PRINCIPIO: El centrifugado es una sedimentacin acelerada, ya
que la aceleracin de la gravedad se sustituye por la aceleracin
centrfuga.

CENTRFUGA

MEDIDOR DE
PH

IMPORTANCIA: aplicacin tpica consiste en acelerar el proceso de

sedimentacin, dividiendo el plasma sanguneo y el suero
sanguneo en un proceso de anlisis de sangre.

PRINCIPIO: Cuando este electrodo se pone en contacto con

una sustancia, esta accin genera una corriente elctrica
suave.
IMPORTANCIA: dispositivo para medir un rango potencial de
"comportamientos" de una sustancia.
PRINCIPIO: Todo el conjunto dispone de un sistema de
aseguramiento o bloqueo que permite a la palanca principal
reposar de forma estable cuando no es utilizada.

BALANZA

IMPORTANCIA: Permite pesar las masas de manera ms

exacta, ya que esta posee 4 decimales. De esta manera es
ms exacta.

AUTOCLAVE

PRINCIPIO: Las autoclaves funcionan permitiendo la

entrada o generacin de vapor de agua pero
restringiendo su salida.
IMPORTANCIA: usada para esterilizar material de
laboratorio.

ESTUFA

BAO
MARA

PRINCIPIO: estufas de secado constan, por lo general, de dos

cmaras: una interna y una externa.
IMPORTANCIA: La estufa de secado se emplea para esterilizar o
secar el material de vidrio y metal.

PRINCIPIO: El bao de Mara o bao serolgico para

laboratorio es un equipo que se utiliza en laboratorios de
qumica.

b. Indicar los cuidados

que se deben
tenerpara
al manipular
el microscopio.
IMPORTANCIA:
utiliza
el calentamiento
indirecto, por
conveccin trmica del medio y de sustancia.

Al ser el microscopio un aparato de precisin y, por lo tanto, delicado, es

muy conveniente asegurar un buen funcionamiento atendiendo siempre a las
siguientes normas:
1. Para transportar el microscopio deben utilizarse siempre las dos manos,

sujetndolo por el brazo con una mano y por el pie con la palma de la
otra.
2. Una vez colocado el microscopio en su sitio, no debe moverse hasta que
finalice la prctica. Cuando se vaya a cambiar de observador se debe
mover l y no el microscopio.
3. Mover siempre suave y lentamente cualquier elemento del microscopio.
4. Nunca poner los dedos en las lentes del ocular ni del objetivo. Si se
ensucian dichas lentes se limpiarn con un pao suave de algodn, sin
utilizar ningn disolvente.
5. No sacar de su sitio el ocular ni los objetivos, a no ser que vayan a ser
sustituidos, en cuyo caso la operacin debe realizarse lo ms
rpidamente posible, para evitar la entrada de polvo.
6. Asegurarse de que el portaobjetos est bien seco cuando va a ser
colocado sobre la platina.

7. Al enfocar, sobre todo con los objetivos de mayor aumento, hay que
evitar que el extremo del objetivo choque con la preparacin. Para ello
acercaremos el objetivo a la preparacin mirando lateralmente y luego,
mirando ya a travs del ocular, enfocamos alejando el objetivo.
c. Qu equipos y/o instrumentos son necesarios para la cuantificacin
de microorganismos?

Pinzas de pato

Manguera para vaco

Membrana Millipore estril de 5 cm de dimetro y 0.45 m de poro

Placa Petri de ENDO

Vaso de precipitado de 250 mL

Pinzas Millipore

Equipo Millipore para filtracin (matraz, filtro, embudo) estril

Mecheros

Gradillas

Etanol (96) para flamear pinzas

Microscopio electrnico

Balanza analtica

Autoclave

Estufa

Cmara de neubauer

Aceite de inmersin

Lminas porta objetos

Lminas cubreobjetos

Bao mara

Centrfuga

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

a. Grainger, J., J. Hurts y D. Burdass. 2001. Basic Practical Microbiology: A

Manual. The Society gor General Microbiology. United Kingdom.
b. Aquiahuatl, M., M. Prez. 2004. Manual de Prcticas del Laboratorio de
Microbiologa General. Primera edicin. Universidad Metropolitana,
Unidad Iztapalapa. Mxico.
c. Bautista W. 2002. Manual de prcticas: Mtodos Instrumentales de
Anlisis. Departamento de Qumica Biolgica y Fisiologa Animal.
Universidad Nacional de Trujillo.
d. Instituto Nacional de Salud. BIOSEGURIDAD EN LABORATORIOS DE
ENSAYO, BIOMDICOS Y CLNICOS. Per. Comit de Bioseguridad.
2005.
ANEXOS
ASPECTOS DE IMPOPRTANCIA
NOMBRE

MICROSCO
PIO
OPTICO

LAMINAS
PORTAOBJE
TOS

LAMINILLA
S
CUBREOBJ
ETOS

FUNDAMENT
O
Observar
objetos que
son
demasiado
pequeos
para ser
vistos a
simple vista
Aparato
donde se
ponen
muestras
para ser
analizadas
Es una fina
hoja
transparente
que se coloca
sobre el porta
objeto para
una muestra

USOS
Sirve de la luz
visible para
crear una
imagen
aumentada
del objeto

PRECAUCIONES

Nunca hay que

tocar las lentes con
las manos.
No dejar el
portaobjetos
puesto sobre la
platina si no se
est utilizando el
microscopio

Para realizar
las
observaciones
al
microscopio.

Evitar tocar con los

dedos la lmina
portaobjetos

Para realizar
las
observaciones
al
microscopio.

Evitar tocar con los

dedos la laminilla

TIPOS

Compuesto de
camp claro
Campo oscuro
Microscopio
de
fluorescenci
as

CAMARA
DE
NEUBAUER

ACEITE DE
INMERSIO
N

CENTRIFUG
A

MEDIDOR
DE PH

BALANZA

AUTOCLAV
E

Es un
instrumento
utilizado para
el conteo de
clulas
Sirve para
enfocar los
rayos a la
lmina

Muestra para
acelerar la
decantacin o
sedimentacin

Mide el ph de
una
disolucin

determina
densidades o
pesos
especficos

esteriliza
medios de
cultivo

realizar el
recuento de
esporas y
clulas en un
medio liquido
Observacin de
objetos muy,
como las
bacterias
individuales y
aplicaciones de
alta resolucin,
como el Tirf y
las aplicaciones
de
fluorescencia
confocal.
permite la
separacin de
distintos
componentes
de la muestra
mediante la
precipitacin
en el fondo del
tubo de las
partculas en
suspensin

Mide un rango
potencial de
comportamie
ntos de
sustancias

mide la masa
de un cuerpo o
sustancia
qumica
,utilizando
como medio de
comparacin la
fuerza de la
gravedad que
acta sobre el
cuerpo
Sirve para
esterilizar
material de
laboratorio,
utilizando
vapor de agua
a alta presin y
temperatura.

Las reacciones y
reactivos usados y los
caducados deben de
eliminarse como
desechos especiales

el electrodo debe
mantenerse hmedo
siempre para evitar
daos al mismo

Tipo A: baja
viscosidad
Tipo B: alta
viscosidad

Analticas
Preparativas:
de mesa, de alta
capacidad, de alta
velocidad,
ultracentrifugador
as

De contenido de
alcohol.
De grados Brix.
De polarimetria
De peso.
Densidad.
viscosidad
color
brillantez
dureza

Balanzas
mecnicas
Balanzas
electrnicas

El tipo olla de
presin.

El de
desplazamiento
por la gravedad.

ESTUFA

BAO
MARIA

NOMBRE

Esterilizar o
secar el
material

Da
temperatura
para el
desarrollo de
microorganism
os.

FUNDAMENT
O

MEDIOS
DE
CULTIVO

Crecimientos
de bacterias

PLACA
PETRI

recipientes
para la
preparacin de
medios de
cultivo slidos

ASA DE
SIEMBRA

Para tomar
una porcin
del cultivo y
llevarlo a una
placa petri

Se utiliza para
secar y
esterilizar
recipientes de
vidrio y metal
en el
laboratorio

No usar en la estufa
materiales o sustancias
que sean inflamables o
explosivas.
Evitar derrames
interiores de soluciones
acidas o que formen
vapores corrosivos

se utiliza para
el
calentamiento
indirecto, por
conveccin
trmica del
medio y de
sustancia

Al calentar solventes
inflamables en pequea
cantidad, utilice un bao
mara con el mechero
apagado.

Las que operan

mediante
conveccin
natural
Las que operan
mediante
conveccin
forzada
Baja
temperatura
Alta
temperatura
isotrmicos

ASPECTOS DE IMPORTANCIA
PRECAUCION
USOS
TIPOS
ES
Esterilizar los
Permite
materiales con
seleccionar el
los que se va a
slidos
crecimiento de
trabajar para
un
lquidos
realizar
microorganism
medios de
o
cultivo
Utilizado para
poder
observar
diferentes
Utilizar
tipos de
implemento de
muestras
proteccin
tanto
De cristal o de plstico
antes de
biolgicas
desechables
trabajar con
como
organismos
qumicas.
biolgicos.
Para el cultivo
de bacterias y
otras especies
relacionadas
Se emplea
Asa de siembra
para
estril
transportar o
arrastrar o
Asa de siembra por
transvasar
radiacin
inculos.
Asa de siembra
realizacin de
metlica
frotis

ESPATULA
DRIGLASK
Y

TUBOS DE
ENSAYO

AUXILIAR
DE
PIPETEAD
O

PROBETA

INDICADO
R DE
ESTERLIZA
CIONCALOR
SECO
INDICADO
R DE
ESTERLIZA
CION
CALOR
HUMEDO
DESINFECT
ANTE

Para la
distribucin
uniforme en
suspensiones
bacteriolgica
s

Se utilizan
para la
extensin de
microorganism
os sobre la
superficie de
un medio de
cultivo en
placa Petri.

permite
preparacin de
soluciones

se utiliza para
contener
pequeas
muestras
liquidas ,y
prepara
soluciones.

succionar un
liquido

Succionar
sustancias en
pequeas
cantidades

Esptula de Drigalski,
cabezal recto

Esptula de Drigalski,
cabezal curvo

Tubos de vidrio
borosilicatado (Pyrex)
Tubos de ensayo de
material plstico,

Instrumento
volumtrico de
vidrio

instrumento
volumtrico,
que permite
medir
volmenes
superiores y
ms
rpidamente
que las
pipetas ,aunque
con menos
precisin

Es un sistema
apto para
material
termoressistent
e de accin
germicida

Esteriliza
metales y
vidrios

Durante el ciclo
esterilizacin no
debera de
abrirse la puerta
de la estufa

Sirve para
esterilizar
vidrio.acero y
plsticos

Retirar el
recipiente
esterilizado
cuando la
presin sea uno

Se usa para
destruir a los
microrganismo
s ya que estos
tienen
propiedades

nunca debe
llenarse un
envase
semivaco a
partir de otro
deben
almacenarse en

las que son de goma

blanda en toda su
composicin
las que son de
plstico ms duro

Probeta clase A :
se usan mucho en
validacin de
mtodos analticos

Probeta clase B:
mediciones en las
que no se requiere
tanta precisin.
Mayormente son
de plstico, su
precio es bajo
respecto a las
probetas clase A.

toxicas

reas
secas,ventiladas
y protegidas de
la luz