QUESTES:

1. Durante a coloraodeGram,umtcnicolaboratorialemmicrobiologiainverteua
ordem das etapas e submeteu a amostra soluo delcoola95%antesdetratar
a amostra com lugol. Com base na morfologia de procariotos e afinalidade desse
mtodo de colorao, a opo que contm a consequncia da distrao do
profissional:
A)olcoolpodeseradicionadoemqualqueretapadacoloraodeGram
B)olugolfuncionacomodescorante,retirandooexcessodecristalvioleta
C)asbactriasGramnegativasnoserocoradaspelolugol
D)olugolnofaznenhumadiferenanacoloraodeGram
E)asbactriasGrampositivasserodescoradaspelaaodolcool.

2. Um paciente, com suspeita detuberculose, foiencaminhadoaum laboratriode

microbiologia para realizao da baciloscopia a fim de confirmar o diagnstico da
doena.Apresenadabactriadatuberculoseapartirdoescarrofoievidenciada
utilizandoseomtodode
A)Gram,quecorouosbaciloslcoolcidoresistentesemvermelho.
B)ZiehlNeelsen,quecorouosbaciloslcoolcidoresistentesemvermelho.
C)ZiehlNeelsen,quecorouosbacilosnolcoolcidoresistentesemvioleta.
D)Gram,quecorouosbacilosnolcoolcidoresistentesemvioleta.

3. Os corantes bsicos de anilina so os mais utilizados dentre as tcnicas de

colorao aplicadas na bacteriologia. Esses corantes apresentam grupos
cromforos,dotadosdecarga:
A)positiva,quecoramasmitocndrias.
B)negativa,quecoramamembranacitoplasmtica.
C)negativa,quecoramaparedecelular.
D)positiva,quecoramoscomponentesnucleares.

4.Ummicrobiologistarecebeuummaterialbiolgicoparaquefossepreparadoum
esfregaonumalminaesubmetidoaumatcnicadecoloraosimples.Dentreas

opesabaixorelacionadasaopreparoefixaodoesfregao,oprocedimento
correto:
A) espalhar o material sobre a lmina fazendo movimentos circulares e, ainda
mido,
passaralminaduasatrsvezesnachamadobicodeBunsen.
B)depositarumagotadomaterialsobrealmina,deixarsecartemperatura
ambientee,emseguida,passaralminatrsvezesnachamadobicodeBunsen.
C)espalharomaterialsobrealminafazendomovimentoscirculares,deixarsecar
temperaturaambienteepassaralminatrsvezesnachamadobicodeBunsen.
D)depositarumagotadematerialsobrealminae,aindamido,passaralmina
duasatrsvezesnachamadobicodeBunsen

5. A colorao de Gram,amplamenteutilizada na microbiologia,permite diferenciar

asbactriasGrampositivasdasGramnegativas.Nessatcnica,afunodoiodo:
A)fixarocorantenointeriordasclulas.
B)atuarcomoagentediferenciadordacolorao.
C)coraroncleodasclulasemprpura.
D)corartodasasclulasemprpura.

6. Os mtodos de colorao de Gram e ZiehlNeelsen so os mais usados em

bacteriologia clnica, podendo ser aplicadosparacaracterizaoerastreamentoda
maioria das cepas de importncia clnica. Em relao aos mtodos e ao
comportamentocitomorfolgicodebactrias,analiseasafirmativasabaixo.
1. Esfregaos corados pelomtododeZiehlNeelsen so teis nodiagnsticobem
como no acompanhamento da resposta do paciente ao tratamento. Usando a
metodologia para acompanhamento, caso o nmero de microrganismos no
diminua aps o incio da terapia, devese considerarapossibilidade de resistncia
aosfrmacos.
2. Nacaracterizaodosprincipaispatgenosenvolvidosemquadrosdemeningite,
o mtodo de colorao de Gram de fundamental importncia, visto que os
principaisagentesetiolgicos apresentamdiferenas nacolorao,sendoNeisseria

meningitidis diplococo Gram negativo, Streptococcus pneumoniae diplococo Gram

positivoeHaemophilusinfluenzaecocobaciloGrampositivo.
3. Alguns erros podem acontecer quando se realiza a colorao pelo mtodo de
Gram, tais como a descolorao insuficiente com lcoolacetona, resultando na
retenodocristalvioletadificultandoaobservaodebactriasGramnegativas

Aalternativacorreta:
a)Opo1.
b)Opes1e2.
c)Opes1e3.
d)Opes2e3.
e)Todasasopes(1,2e3).

7. A observao da forma das bactrias possvelpela utilizaodo microscpio.

Para facilitar essa observao, existe uma srie decombinaes entresubstncias
qumicas e corantes. Essas tcnicas de colorao para posterior visualizao so
utilizadas rotineiramente no laboratrio de microbiologia. Com relao s tcnicas
decolorao,julgueasassertivasabaixo:
I. O preparo de suspenses de microorganismos para posterior observao
realizado utilizandoumaala deplatina, comaqualumagotaretiradadasoluo
contendoomicroorganismoeespalhadasobreumalminalimpaeseca.
II. A ala de platina deve ser flambada entre a semeadura emumalmina eoutra,
mesmoquesejammicroorganismossemelhantes.
III.O tempodeincubaodafucsinasobrealminade45segundosnacolorao
simplescomfucsina.
IV. O leo de imerso deve ser evitado quando utilizada a colorao simples de
fucsina.
V.Acoloraopelafucsinatingeosmicrorganismosdevermelho

8. Considerando a tcnica de colorao de Gram e as caractersticas da parede

bacteriana,julgueasassertivasabaixo:

I. As bactrias, de acordo com a colorao apresentada pela tcnica de Gram,

podemserclassificadasemGrampositivaseGramnegativas.
II. A parededasbactriasconsideradasGrampositivas maisdelgada, permitindo
aentradadocorantenaclulabacteriana.
III.AsbactriasGrampositivasapresentamcoloraoazulaofinaldatcnica.
IV. A parede celular das bactrias consideradas Gram negativas composta por:
lipopolissacardeos, fosfolipdeos, lipoprotenas e uma fina camada de
peptideoglicano.
V. As bactrias consideradas Gram negativas apresentam colorao vermelha ao
finaldatcnica.

9. Na realizao da tcnica de Gram, todos os passos devem ser criteriosamente

seguidos pelo tcnico do laboratrio de microbiologia, de modo a evitar o
comprometimento da tcnica e a dificuldade na interpretao dos resultados.
Considerandoessasinformaes,julgueasassertivasabaixo:
I.Aexposiomximadalminaaocristalvioletadeveserde15segundos.
II. O lugol deve ser adicionado posteriormente ao cristal violeta e o tempo para
reaode1minuto.
III. A lmina, aps o lugol, deve ser lavada com gua destilada para retirar o
excesso.
IV.O leo de imerso deveseracrescentado aofinaldoprocessoparaobservao
nomicroscpio.
V.AfucsinaoprimeirocoranteaseracrescentadolminanatcnicadeGram.

10. As interpretaes dos esfregaos corados pelo Gramenvolvem consideraes

relacionadas com as caractersticas dacolorao,tamanho, forma e agrupamento
dasclulas. Estascaractersticaspodemserinfluenciadasporvriosfatores.Dentre
elespodemseincluir:
A) forma de coleta e transporte do material, experincia do profissional, estado
nutricionaldopaciente.
B) experincia do profissional, estado imunolgico do paciente e a presena de
substnciasinibidoras.

C)omeiodecultivoutilizado,aatmosferadeincubao,experinciadoprofissional,
estadoimunolgicodopaciente.
D) idade da cultura, presena de substncias inibidoras, estado imunolgico do
pacienteeformadecoletaetransportedomaterial.
E) idade da cultura, o meio de cultivo utilizado, a atmosfera de incubao e a
presenadesubstnciasinibidoras.

11. Para o estudo damorfologia bacteriana corretoutilizar,na rotina,acolorao

de:
A)ZiehlNeelsen.
B)Gram.
C)Leishman.
D)White.

12. Para a colorao de bacilos lcoolcido resistentes, devemos utilizar a

coloraodeZiehlNeelsennaseguinteordem:
A)Fucsinadiluda,lcoolacetonaeAzuldeMetileno.
B)Fucsinafenicada,lcoolacetonaeAzuldeMetileno.
C)Fucsinadiluda,lcoolcidoeAzuldeMetileno.
D)Fucsinafenicada,lcoolcidoeAzuldeMetileno

13. A colorao pelo mtodo de Gram identifica as bactrias grampositivas por

apresentaremummaiorpercentualde:
(A)lipdeos
(B)peptideoglicanos
(C)protenasnucleares
(D)protenascitoslicas
(E)carboidratos.

14. Mycobacterium tuberculosis se diferencia de outras bactrias que no so

lcoolcido resistentes, pelo mtodo de ZiehlNeelsen, por apresentar uma
colorao:

(A)roxa
(B)Azulescuro
(C)verde
(D)vermelha
(E)laranja.

15.AssinaleaopoCORRETA:
A)BactriasGramnegativassofremdescoloraopeloiodo.
B)BactriasGrampositivassofremdescoloraopelolcool.
C)BactriasGrampositivascoramse comsafraninaapsdescoloraopelolcool.
D) Bactrias Gram positivas coramse de violeta e bactrias Gram negativas
coramsedevermelho

16. Dadas as afirmativas abaixo quanto aos Mtodos de Colorao de

Microorganismosparavisualizaoemmicroscpioptico:
I. A colorao de ZiehlNeelsen pode ser utilizada somente para colorao de
micobactrias.
II. Ao final da colorao de Gram, as bactrias Gram positivas coramse com o
coranteprimrio,denominadosafraninaoufucsina.
III. Ao final da colorao de Gram, as bactrias Gram negativas coramse com o
corantesecundrio,denominadosafraninaoufucsina.
IV.Coloraessimplesutilizamumnicocorante
Verificasequeestocorretasapenas
A)IIIeIV.
B)IIeIV.
C)IIeIII.
D)I,IIIeIV.
E)IeII.

17.
Acolorao de Gramumimportantemtodoempregadonamicrobiologia,que
permite diferenciar bactrias em duasclasses as GrampositivaseGramnegativas
em funo das propriedades qumicas da parede celular. As bactrias

Grampositivas possuem na parede celular uma camada espessa de

peptideoglicano,que umaredepolimricacontendoacares(Nacetilglicosamina
e cido Nacetilmurmico) e oligopeptdeos, enquanto que as bactrias
Gramnegativascontm uma camada fina.Na coloraodeGramutilizaseocristal
violeta (cloreto de hexametilpararoanilina), que interage com o peptideoglicano. A
adio de iodeto causa a precipitao do corante e as partculas slidas ficam
aprisionadas na rede polimrica, corando a parede celular. Ao lado esto
esquematizadas a rede polimrica do peptideoglicano e as estruturas das espcies
envolvidas.

A partir das informaes fornecidas, correto afirmarque a principal interaoentre o

cristalvioletaeaparedecelular:
a)ligaodehidrognio
b)interaoondipolo.
c)interaoondipoloinstantneo
d)interaodipolodipolo.
e)interaodipolodipoloinstantneo

18.
Para a identificao de bactrias a colorao um dos passos mais
importantes, cuja finalidadesuaobservao microscpicaparadiferenciao. Em
relaoscoloraes,assinaleaalternativaincorreta:
A. Na colorao de Gram asbactrias Grampositivas retmoprecipitado azul
formadopelocorantecristalvioleta,reagindocomolugol.
B. Na coloraodeGramasbactrias Gramnegativas no retmoprecipitado
azulformadoeadquiremacoloraodocorantedefundo.
C. Na colorao de ZiehlNeelsen a colorao feita a frio pelo azul de
metileno.
D. A resistncia de muitas bactrias Grampositivas descolorao diminui
medidaqueaclulabacterianaenvelhece.
E. As bactrias Gramnegativas so facilmente dissolvidas ou desorganizadas
pelolcool

19. A identificao demicroorganismosrequer, entre outros,aobservao de sua

morfologia. Aps o preparo do esfregao, a lmina passadaalgumas vezespela
chama,numprocessodenominado:
A)Secagemdoesfregao.
B)Fixaodoesfregao.
C)Ebuliodoesfregao.
D)Coloraodoesfregao.
E)Evaporaodoesfregao.

20. Para a visualizao da morfologia, arranjo e/ou reao tintorial, os

microorganismos sofrem um processo de colorao.Oprimeiropassodastcnicas
decoloraoconsiste
(A)napreparaodasuspensobacteriana.
(B)naconfecodoesfregaobacteriano.
(C)napreparaodaeluiobacteriana.
(D)naconfecodoinculobacteriano.

21. Para cadaquestomarqueV, se aproposio verdadeira F,seaproposio

falsa.
(

)As bactrias do gneroMycobacteriumresistemdescoloraoporsolventes

orgnicosfortes,motivopeloqualsocoradasatravsdomtododeZiehlNeelsen.
(

) A principal utilizao da coloraonegativa a deteco deendosporos nas

bactrias.
(

)Aidentificaopresuntivadebactriaspodeserrealizadaatravsdautilizao

dacoloraodeGram,associadamorfologiadasclulas.

22. OmtododeGram,tcnicadecoloraodebactriasdesenvolvidapelomdico
dinamarqus Gram, permite separar as espcies de bactrias em dois grandes
grupos: as bactrias grampositivas e as gramnegativas. A colorao de Gram
um dos mais importantes mtodos de colorao empregados nos laboratrios de
microbiologia na determinao de amostras de bactrias. Assinale a opo que
explicaoprincpiodessemtodo.
AAs mitocndrias debactriasgrampositivasretmocorantecristalvioletausado,
enquantoasmitocndriasdebactriasgramnegativasnoofazem.
B Os cidos nucleicos de bactrias grampositivas retm o corante cristal violeta
usado,enquantoasparedescelularesdebactriasgramnegativasnoofazem.
C Os ncleos de bactrias grampositivas retm o corante cristal violeta usado,
enquantoosncleosdebactriasgramnegativasnoofazem.
D As membranas plasmticas de bactrias grampositivas retm o corante cristal
violeta usado, enquanto as membranas plasmticas de bactrias gramnegativas
noofazem.
E As paredes celulares de bactrias grampositivas retm o corante cristal violeta
usado,enquantoasparedescelularesdebactriasgramnegativasnoofazem.

23. Em 1884, o bioqumico dinamarqus Hans Christhian Gram (18531938) criou

um processo, chamado coloraodeGram, usadoparaclassificarasbactriasem
grampositivas ou gramnegativas, conforme absorvam ou no um determinado
corante.Nesteprocedimento,asbactrias:

(A) grampositivas so identificadas em vermelho pela coloraodecontraste com

fucsina.
(B) gramnegativas so identificadas em roxo pela colorao de contraste com
safranina.
(C) grampositivas so identificadas em vermelho pela coloraode contraste com
safranina.
(D) grampositivas so identificadas em roxo pelacoloraodecontrastecomlugol.
(E) gramnegativasso identificadas emvermelho pelacolorao decontrastecom
safranina.

24.SobreacoloraodeZiehlNeelsen,avalieasafirmativasaseguir:
I uma colorao feitaaquentee a fucsinaconcentradaficaretidanasbactrias
lcoolcidoresistentes.
II Como a coloraodefundo feitacom azul de metileno, asbactriasqueno
soresistentestornamseazuis.
III As bactrias lcool cido resistentes coramse de rosa j que estas retm o
corante aps a descolorao do esfregao feita comumamistura de lcoolecido
clordrico.
Assinaleaalternativacorreta.
a)SomenteasafirmativasIeIIestocorretas.
b)SomenteasafirmativasIeIIIestocorretas.
c)SomenteasafirmativasIIeIIIestocorretas.
d)SomenteaafirmativaIIestcorreta.
e)Todasasafirmativasestocorretas.

25. A colorao um dos passos mais importantes na identificao debactrias.

Assinaleaalternativaincorretasobreastcnicasdecolorao.
a) Os esfregaos so fixados, na rotina de laboratrio, pelo calor, passandose a
lminacomesfregaorapidamentepelachamadobicodeBunsen.
b) Raramente, em laboratrios clnicos, usase colorao de esfregaos apenas
com um corante, pois a colorao diferencial mais satisfatria e fornece um
nmeromuitomaiordeinformaes.

c) As coloraes de maiorimportnciaparaamicrobiologiasoasdeGrameZiehl
Neelsen.
d) As bactrias se comportam como o material nuclear e, por isso, a maioria dos
corantesutilizadosnabacteriologiapossuemcaractersticasbsicas.
e) Fatores como pH da soluo de lavagem, pureza dos reagentes e limpezadas
lminas no influenciam nos resultados da colorao quando as tcnicas so
seguidas.

26. O mtodo de colorao de Gram consiste no tratamento sucessivo de um

esfregao bacteriano, fixado pelo calor e corado com determinados reagentes.
Assinaleoitemquecontemplaaordemcorretadosreagentesduranteareao.
A)Cristalvioleta,lugol,fucsinabsicaeetanolacetona.
B)Fucsinabsica,cristalvioleta,lugoleetanolacetona.
C)Cristalvioleta,lugol,etanolacetonaefucsinabsica.
D)Cristalvioleta,fucsinabsica,lugoleetanolacetona.
E)Fucsinabsica,etanolacetona,cristalvioletaelugol.

27. A tcnica de colorao de Gram est relacionada s caractersticas de cada

microrganismoespecfico.Baseadonessatcnica,corretoafirmarque:
A) esta tcnica permite somente a separao de amostras bacterianas em Gram
positivas.
B) o corante cristal violeta pode ser substitudo, com os mesmos resultados, pela
safranina.
C) as bactrias Gram positivas e Gram negativas absorvemde maneira idntica o
coranteprimrioeofixador.
D) as bactrias Gram positivas no retm o cristal violeta, apso tratamento com
etanolacetona.
E) o corante fucsina bsica pode ser substitudo com os mesmos resultados pelo
azuldemetileno

28. Um estagirio do laboratrio de Microbiologia Clnica recebeu uma lmina

contendo esfregao de Escherichia coli e uma lmina contendo esfregao de

Staphylococcus aureus para serem coradas pelacolorao deGram(cristalvioleta,

lugol, lcool, fucsina diluda). Aps fixar os esfregaos pelo calor, o estagirio
realizou a colorao, porm inverteu a ordem da utilizao dos corantes (fucsina,
lcool diludo, cristal violeta,lugol). Qual foi o resultadodacolorao observadoao
microscpioparaE.colieS.aureus,respectivamente?
(A)Bacilosvioletaescuroecocosvermelhoclaros.
(B)Bacilosvermelhoclarosebacilosvioletaescuro.
(C)Bacilosecocosvermelhoclaros.
(D)Bacilosecocosvioletaescuro.
(E)Cocosvermelhoclarosecocosvioletaescuro.

29. A sequncia CORRETA na qual os corantes e reagentes so utilizados para a

realizaodeumacoloraodeGramadaopo:
A)Lugol,lcool,cristalvioletaesafranina.
B)Cristalvioleta,lugol,lcoolesafranina.
C)Cristalvioleta,safranina,lcoolelugol.
D)Cristalvioleta,lcool,lugolesafranina.

30. Descrevaum textosobreafunodosreagentesparaidentificaodebactrias

Gram positivas e negativas (princpio do mtodo), e comente a importncia do
mtododecoloraodeGramparaolaboratriodemicrobiologia.

31. Ao fazer uma colorao de Gram, o tcnico equivocouse e esqueceuse de

aplicar o mordente, o resultadoesperado paraa coloraodeummicroorganismo
GrampositivoeumGramnegativorespectivamente:
A)Rosaerosa.
B)Violetaerosa.
C)Rosaevioleta.
D)Violetaevioleta.
E)Violetaeincolor

32. A preparao de esfregao a partir de uma cultura em caldo dispensa a

utilizaode:
A)Lmina.
B)Aladeplatina.
C)BicodeBunsen.
D)Salinafisiolgica.
E)Fixaodoesfregao