I.

- TITULO
II.- PROBLEMA
2.1.- rea problema:
En la actualidad se est investigando ampliamente el uso de nuevas
alternativas a los antibiticos convencionales. Actualmente se emplean
plantas medicinales para combatir ciertas enfermedades, como es el uso
de la mua Minthostachys mollis, planta oriunda de la sierra del Per, su
uso ampliamente difundido en diversas regiones del pas, se debe por
poseer propiedades curativas, las cuales atribuyen a sus componentes,
entre los cuales destaca el aceite esencial, el cual acta dependiendo del
tipo de microorganismo y est principalmente relacionado con la
estructura de la pared celular y la membrana externa de los mismos (1) ,
adems que interferiran en la fase de metabolismo intermedio de los
microorganismos inactivan enzimas de reaccin (2). La "Mua" es una
planta que en la sierra del Per tiene mltiples usos: como condimento,
para repeler insectos de los cultivos, proteger las cosechas de la
putrefaccin, aliviar malestares gastrointestinales, en tratamiento de
tumores, inflamaciones, asma, halitosis, entre otros. Se ha demostrado la
actividad antimictica y antibacteriana del aceite esencial de mua,
probablemente por la accin de los monoterpenos encontrados.
2.2.- Delimitacin del problema:
Durante aos se ha estudiado la flora bacteriana predominante en la
enfermedad periodontal. Como agentes etiolgicos relacionados con esta
enfermedad, se le ha dedicado particular atencin a Actinobacillus
actinomycetemcomitans, Fusobacterium nucleatum y a especies de
Bacterias Anaerobias Gram Negativas Pigmentadas. Muchos autores
coinciden que entre los periodontopatgenos ms comunes se encuentran
Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Bacteroides forsythus F.
nucleatum, A. actinomycemcomitans y especies de Capnocytophaga. (3)
Resulta obvio que la microbiota periodontal es una comunidad compleja
de microorganismos. P. gingivalis y P. intermedia, actualmente se incluyen
en el grupo de patgenos periodontales ms importantes, conjuntamente
con A. actinomycetemcomitans, B. forsythus y Capnocytophaga sp., los
cuales son aislados en muchos laboratorios con fines de investigacin y
manejo de la periodontitis. El acmulo de placa supragingival, conduce
inevitablemente a gingivitis (Lee, 1965) y la periodontitis se desarrolla a
partir de gingivitis localizada (Lindhe y Lee 1975). En la evolucin de la
enfermedad periodontal existen distintas etapas desde las fases iniciales a
las ms avanzadas. La enfermedad periodontal se caracteriza por la
prdida de insercin periodontal, la presencia de bolsas periodontales y
prdida de hueso de soporte. Afecta a los tejidos que rodean y sujetan a
los dientes y es la causa ms frecuente de prdida de dientes en pacientes
mayores de 35 aos. Todas las etapas en la evolucin de la enfermedad

periodontal son de naturaleza inflamatoria y de causa infecciosa

(causadas por bacterias que se acumulan en la enca alrededor del diente)
que dependiendo de su grado de afectacin las denominamos gingivitis,
cuando el proceso inflamatorio solamente afecta al periodonto superficial
(la enca) y no estn afectados los tejidos que sujetan el diente. (4)
Cuando el proceso inflamatorio afecta a los tejidos periodontales
profundos, se produce destruccin del hueso y ligamento periodontal que
son los tejidos que soportan y sujetan los dientes. A este grado de
afectacin en evolucin de la enfermedad periodontal lo denominamos
periodontitis. Si la periodontitis no se trata evoluciona destruyendo todo el
soporte del diente y con ello el alojamiento y prdida del mismo. Por tal
motivo es importante detectar la periodontitis y tratarla en sus estadios
ms iniciales de la evolucin de la enfermedad periodontal. Si a esto
aadimos el insuficiente control mecnico de la misma, bien por tcnica
incorrecta de cepillado, bien por hbitos higinicos bucodentales
inadecuados en una parte extensa de la poblacin, parece clara la
necesidad de utilizar un agente antimicrobiano que complemente el
control de la placa bacteriana de forma continuada y eficaz. (5) Los
frmacos ms utilizados a tal fin son los antispticos bucodentales, siendo
ampliamente aceptada la clorhexidina como el de mayor eficacia. La
clorhexidina la cual su utilizacin es amplia y es el agente ms efectivo
para tratamientos periodontales (Bascones 2001). La reduccin de placa y
de gingivitis alcanza el 60%. Su mecanismo de accin se realiza mediante
una reduccin de la formacin de la pelcula adquirida y la alteracin del
desarrollo bacteriano y de la insercin al diente (6). La utilizacin de los
colutorios en odontologa es parte de las recomendaciones para mantener
una buena higiene, tenemos enjuagues que comparten las caractersticas
antimicrobianas cmo los colutorios con clorhexidina y los de manzanilla
como producto natural que
tienes las mismas propiedades y son
beneficiosos a la salud bucal, aunque muchos pacientes se quejan del
sabor desagradable de la clorhexidina acuosa.

2.3.- Formulacin del problema:

Cul es el efecto inhibitorio del aceite esencial de Minthostachys mollis
mua frente a la flora periodontal?
2.4.- Objetivos de la Investigacin
2.4.1.- General
Determinar el efecto inhibitorio in vitro del aceite esencial de Minthostachys
mollis griseb (mua) frente a flora periodontal.

2.4.2.- Especficos

 Determinar la efectividad antibacteriana cuantitativamente y cualitativamente

del aceite esencial de Minthostachys mollis griseb (mua) puro y en diluciones
del 50% y 25% frente al crecimiento bacteriano de la cepa Porphyromonas
gingivalis.

2.5.- Justificacin
Este estudio es impulsado por el deseo de que la mayora de los profesionales en
odontologa accedan a este tipo de productos, teniendo en cuenta la gran
aceptacin de la poblacin por la medicina alternativa. Esta investigacin
permitir valorar el efecto inhibitorio del aceite esencial de Minthostachys mollis
griseb (mua) frente a la flora periodontal. Los resultados finales pretenden
motivar el uso del aceite esencial de Minthostachys mollis griseb mua como
agente antibacteriano en el tratamiento de la enfermedad periodontal

2.6.- Limitaciones
En el presente estudio solo evaluaremos el efecto inhibitorio del aceite
esencial de Minthostachys
Porphyromonas gingivalis.

mollis

griseb

mua

frente

la

cepa

de

III.- MARCO TEORICO

3.1 ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIN

INGA A. Y GUERRA B. (2000), demostraron mediante un estudio las

propiedades bactericidas/bacteriostticas del aceite esencial de
Minthostachys mollis frente Staphylococcus aureus ATCC 25923, B. cereus
MC, Salmonella typhi, S. sonnei MC, Escherichia coli ATCC 25922 y K.
pneumoniae ATCC 10031, adems de la accin fungisttico/fungicida para
Fusarium moniliforme y Aspergillus niger. (7)
FUERTES Y MUNGUIA (2001) realizaron un estudio comparativo del
aceite esencial de Minthostachys mollis (Kunth) Griseb mua de tres
regiones peruanas: Tarma, Huaraz y Huancavelica (utilizaron ensayos
fsicos, espectro ultravioleta, espectro infrarrojo y composicin qumica),
concluyeron que el aceite esencial proveniente de Tarma contena en su
composicin
1-Tetradeceno,
2s-Transmentona,
pulegona
como
componentes principales y un porcentaje importante de timol,
demostrando as que el aceite extrado de ese lugar tiene mejores
condiciones que el aceite de los otros dos lugares. (8)
BRAVO Y COL (2004) realizaron una investigacin para estudiar la
presencia de flavonoides en Minthostachys mollis mua y Lepechinia
meyenii (Walp) Epling y la actividad antimicrobiana de sus extractos frente
a cepas de E. coli y S. aureus. Concluyendo que el Minthostachys mollis s
contiene flavonoides y que presenta actividad antibacteriana como
consecuencia de la presencia de aquellos
El factor ms importante en la patogenia de la enfermedad es la
capacidad de un gran nmero de bacterias orales de producir cidos a

partir de los hidratos de carbono de la dieta. Esta hiptesis fue sustentada

experimentalmente al aislar varios grupos de microorganismos orales. (9)
PEREZ LUYO (2005)
Dichos microorganismos orales, localizados en
sitios especficos de la superficie bucal, comprenden las bacterias que
producen las sustancias qumicas (cidos orgnicos y enzimas
proteolticas) que causan la destruccin de los componentes inorgnicos y
orgnicos de la cavidad oral. (10)
DAZ K. Y COL. (2005), obtuvo el aceite esencial de mua mediante la
tcnica arrastre de vapor de agua y fue sometida a cromatografa de
gases y se determin sus principales componentes pulegona y
transmenton. Concluy que el aceite esencial de mua presenta actividad
antibacteriana en Streptococcus mutans, Lactobacillus sp., Fusobacterium
nucleatum, Actinobacillus actinomycetemcomitans y Actinomyces sp.
frente a Amoxicilina como control positivo y agua destilada como control
negativo. En las pruebas de susceptibilidad concluy que la bacteria ms
sensible al aceite esencial de mua era Fusobacterium nucleatum seguido
de Actinobacillus actinomycetemcomitans, Streptococcus mutans,
Lactobacillus sp. y Actinomyces sp. con una media de halos de inhibicin
20.13 mm, 18.42 mm, 16.50 mm, 14.38 mm, 11 mm respectivamente. La
propiedad antimicrobiana se debera a las sustancias terpenoides
presentes en el aceite esencial del Minthostachys mollis. (11)
CANO Y COL (2007) realizaron un estudio para demostrar la actividad
antimictica in vitro del aceite esencial de Minthostachys mollis mua,
proveniente del distrito de Huacrapuquio, provincia de Tarma. Se observ
un alto efecto antimictico frente a las cepas de Cndida albicans a las
concentraciones de 50 y 100 % y dermatofitos Trichophytun tonsurans,
Trichophytun mentagophys, Microporun canis sensibles en los volmenes
de 5 y 50 mililitros; encontr en el aceite esencial los siguientes
componentes qumicos: pulegona, mentona y limoneno. (12)
(Cano, Bonilla, Roque, & Ruiz, 2008) La actividad antimicrobiana,
antifngica e inclusive antiviral de la Minthostachys mollis (Tipo), son
propiedades apreciables debido a que los aceites esenciales pueden
actuar como desacopladores, los cuales interfieren en la translocacin de
los protones sobre la membrana y consecuentemente interrumpir la
fosforilacion del ADP. (13)

CARHUAPOMA Y COL (2009) determin la actividad antibacteriana del

aceite esencial de Minthostachys mollis ruyaq mua frente a
Helicobacter pylori, Shigella dysenteriae, Salmonella typhi y Pseudomonas
aeruginosa. El aceite esencial se obtuvo por destilacin con arrastre de
vapor de agua. La actividad antibacteriana se determin por el mtodo de

excavacin placa cultivo; resultando en orden de sensibilidad, Shigella

dysenteriae es la que presenta ms sensibilidad al aceite esencial con un
promedio de 21,41 mm, seguido de Helicobacter pylori con 17,07 mm,
Salmonella typhi con 14,25 mm y la que menos sensibilidad present fue
Pseudomonas aeruginosa con 11,45 mm. La concentracin mnima
inhibitoria (CMI) y la concentracin mnima bactericida (CMB) para H.
pylori se determin por el mtodo de dilucin en microplacas, resultando 2
g/mL. Para las dems bacterias se determin por el mtodo de dilucin,
siendo para S. dysenteriae 4 g/mL, S. typhi 4 g/mL, y P. aeruginosa 9
g/mL de CMI y 10 g/mL de CMB. Observndose que a mayor
concentracin es mayor el efecto inhibitorio; es as que la concentracin
450 g/mL produjo en promedio 22,48 mm de halo de inhibicin, mientras
que para una concentracin de 4,5 g/mL fue de 11,99 mm en la prueba
de Duncan. Los porcentajes de inhibicin comparados con ciprofloxacino,
fueron: H. pylori 177,27; S. dysenteriae 126,11; S. typhi 63,44 y P.
aeruginosa 42,29 lo que estara demostrando que el aceite tiene mayor
actividad que el ciprofloxacino; esto posiblemente se deba a que los
constituyentes del aceite esencial de Minthostachys mollis, como el timol,
acetato de timol, metileugenol, pulegona, mentona, limoneno, linalol,
entre otros, actan en sinergismo; y comparado con cloranfenicol: P.
aeruginosa de 225,56; S. dysenteriae 171,97; S. typhi 135,95 y H. pylori
92,86 a una concentracin de 450 g/mL del aceite esencial. (14)
MORA Y COL (2009) examinaron y analizaron los componentes qumicos
del aceite esencial de las hojas de Minthostachys mollis (Kunth) Griseb var
Vaugth. Recogidos en enero del 2008 en la localidad de Tuame, estado de
Trujillo, Venezuela, fueron separados e identificados por el anlisis de
cromatografa de gases y espectrometra de masas. El aceite esencial se
obtiene por hidrodestilacin y trece componentes (98.5 % de la
muestra) fueron identificados por comparacin. Los dos componentes
principales son pulegona (55.2 %) y trans-mentona (31.5 %). El aceite
esencial mostr efecto inhibidor significativo contra bacterias Gram (+) y
Gram (-), especialmente Bacillus subtilis y Salmonella tiphy (4 ug/ml).
(15)
AZAA I. Y COL (2010) El aceite esencial de Minthostachys mollis
mua 100 % present una efectividad antibacteriana, tanto
cuantitativamente como cualitativamente mayor, en comparacin a las
diluciones del 50 % y 25 % frente a las cepas de Fusobacterium
nucleatum, Prevotella melaninognica, Enterococcus faecalis y muestras
de conducto radicular (16)
CASTILLO D. Y COL (2010) Demostr la actividad antibacteriana del
aceite esencial de Satureja brevicalyx Epling mua al 50 % y al 100 %
comparado con Clorhexidina al 0.2 % frente a cepas de Fusobacterium
nucleatum ATCC 255586 y Porphyromonas gingivalis ATCC 33277. La
muestra estuvo conformada por 18 placas petri para la cepa de

Fusobacterium nucleatum ATCC 255586 y 19 placas de Porphyromonas

gingivalis ATCC 33277, las cepas se cultivaron en agar Columbia que
contena 5 % de sangre de carnero desfibrinada, con hemina (0.5 %) y
vitamina K (0.1 %) y fueron incubados por 48 horas a 37 C. Las pruebas
antibacterianas se realizaron utilizando disco de difusin embebidos del
aceite esencial de Satureja brevicalyx Epling Mua al 50 y 100 % y
Clorhexidina al 0.2 %. Se encontr la actividad antibacteriana del aceite
esencial de Satureja brevicalyx Epling Mua al 50 y 100 % en ambos
patgenos siendo estadsticamente significativo en la concentracin 100
% en comparacin del aceite al 100 % con el aceite al 50 % (p menor que
0.001), al comparar el aceite esencial de Satureja brevicalyx Epling
Mua al 100 % con la Clorhexidina 0.2 % no se encontr diferencia
significativa (p mayor que 0.001) en ambas cepas bacterianas, por lo que
la planta en estudio presenta actividad antibacteriana comparable al
grupo control, concluy que el aceite esencial de Satureja brevicalyx
Epling Mua al 50 y 100 % presentan actividad antibacteriana frente a
cepas de Fusobacterium nucleatum ATCC 255586 y Porphyromonas
gingivalis ATCC 33277. (17)
AZAA ESPINOZA (2010), estudi la Efectividad Antibacteriana in vitro
del aceite esencial de Minthostachys mollis griseb (mua) sobre bacterias
prevalentes en patologas periapicales crnicas de origen endodntico,
obteniendo resultados favorables ya que el aceite esencial puro y en sus
diluciones present efectividad antibacteriana tanto cuantitativamente
como cualitativamente mayor al alcohol etlico al 70 y menor al
Paramonoclorofenol alcanforado frente a las muestras bacterianas en
estudio, que fueron el Fusobacterium nucleatum ATCC 25586, Prevotella
melaninognica ATCC 25845, Enterococcus faecalis ATCC 29212 y
muestras de conducto radicular con Periodontitis Apical Crnica. (18)
ALCAL Y COL (2011) demostr el efecto antimictico del aceite
esencial de las hojas de Minthostachys mollis (mua) en comparacin con
el Fluconazol en cultivo de Candida albicans. El efecto antimictico se
estudi midiendo 80 halos de inhibicin distribuidos en 5 grupos mediante
el mtodo Kirby-Bauer. Se utiliz una cepa clnica de Candida albicans. Los
grupos de estudio fueron grupo mua 25 % (GM25 %), grupo mua 50 %
(GM50 %), grupo mua 100 % (GM100 %), un grupo control positivo
(Fluconazol), y un grupo control negativo (aceite mineral). El anlisis
estadstico se realiz mediante la Prueba de Kruskal-Wallis y el Test de
Dunn usando el paquete SPSS v.17.0. Se consider un nivel de
significancia < 0,05. Se obtuvo La mediana de los halos de inhibicin del
GM25 % fue de 32,00 mm (31,00 a 33,75); del GM50 %: 40,00 mm (39,25
a 41,00); del GM100 %: 46,80 mm (46,00 a 48,00), y del grupo Fluconazol:
39,00 mm (38,00 a 40,75). No se obtuvo halos de inhibicin en el grupo
control negativo. Se encontr diferencia significativa entre GM25 %,
GM100 % y el grupo Fluconazol (p<0,001), ms no entre este ltimo y
GM50 % (p>0,05). Se concluy que el aceite esencial de las hojas de

Minthostachys mollis (al 100 %) tuvo mayor efecto contra la Candida

albicans que el Fluconazol; adems, el efecto antimictico del Fluconazol
fue mayor que la Minthostachys mollis al 25 %, y fue el mismo que la
Minthostachys mollis al 50 %. (19)
CRUZADO DONATO (2012) determin la Concentracin inhibitoria
mnima in vitro de Minthostachys mollis (mua) frente al Streptococcus
mutans ATCC 35668, la Concentracin Inhibitoria Mnima (CIM), despus
del conteo de Unidades Formadoras de Colonias (UFCs) de Streptococcus
mutans, se concluy que es en una concentracin al 50% ya que es desde
este porcentaje que presenta efecto inhibitorio y este efecto se
incrementa en relacin directa con el aumento de la concentracin. (20)

GONZLEZ Y COL (2013) demostr la actividad antibacteriana de

Minthostachys mollis frente a bacterias enteropatgenas; sin embargo,
frente a microorganismos de inters estomatolgico, son muy escasos. Por
esto, se determin la concentracin mnima inhibitoria (CMI), y la
concentracin mnima bactericida (CMB), para establecer el efecto
antibacteriano frente a Streptococcus mutans. El anlisis estadstico usado
fue la prueba ANOVA y la de KRUSKALL-WALLIS. Concluy que el aceite
esencial de Minthostachys mollis presenta efecto antibacteriano in vitro
frente a Streptococcus mutans, siendo la CMI de 0.31 L/mL y la CMB, de
0.62 L/mL a 0.75 L/mL. (21)
HUARI GUERRERO (2014), su estudio se bas en determinar el Efecto
antibacteriano in vitro del aceite esencial de Minthostachys mollis (mua)
en Streptococcus mutans, determinando que existe un efecto inhibitorio
mayor del aceite al 100% sobre la bacteria con un halo promedio de 10.79
mm, comparado con las diluciones al 50 % y 25 % (22)

3.2 BASES CONCEPTUALES

1.- PATGENOS PERIODONTALES
Desde el siglo pasado se han acumulado una cantidad de reportes sobre la
etiologa microbiana de la periodontitis, pero pocas bacterias, han sido hasta
ahora denominadas patgenos periodontales, los cuales, estn relacionados con
la iniciacin y progresin de la enfermedad. Mucha de la informacin obtenida
acerca de la microbiota de la periodontitis ha emergido de estudios realizados en
EEUU y Europa (23, 24, 25)
Algunos autores definen a la periodontitis como un proceso infeccioso
relacionado con la acumulacin de placa subgingival y clculo dental, siendo los
microorganismos anaerobios los principalmente involucrados. Si la placa formada
sobre la superficie del diente no es removida, las bacterias all presentes se
acumulan e inician una reaccin inflamatoria en la enca; el establecimiento de
un proceso infeccioso provoca la disminucin de la tensin de oxgeno molecular

y en consecuencia del potencial redox, con lo cual se favorece la supervivencia y

crecimiento de la flora bacteriana anaerbica, prevaleciendo sta sobre la flora
aerbica y anaerobia facultativa (26, 27, 28, 29, 30)

Las bacterias anaerobias son microorganismos que no pueden vivir en presencia

de oxgeno, ya que resulta txico para ellas. Poseen un alto poder de sntesis, de
tal forma que su desarrollo en medios sintticos depende del aporte de diversos
factores de crecimiento, especialmente vitaminas. Suelen estar dotadas por
diversas enzimas que le permiten actuar sobre diferentes productos orgnicos.
Cierto nmero de bacterias anaerobias son patgenas para el hombre, en
algunos casos originan procesos eminentemente txicos, mientras que en otros
la accin patgena est ligada a su morfoestructura y enzimas, a reacciones
inmunolgicas, o a mecanismos que van a perturbar los mecanismos de defensa
del hospedador.
Atendiendo a su morfologa, las bacterias anaerobias de inters clnico
odontolgico se clasifican en dos grandes grupos: Esporulados, constituidos por
bacilos Gram positivos, generalmente mviles. Dentro de este grupo se
encuentran
los
clostridios
periodontopatgenos,
que
forman
parte,
excepcionalmente de la microbiota de la cavidad bucal y se han relacionado con
la agresividad de periodontitis en individuos inmunodeprimidos (Tabla 1). Otro
grupo de anaerobios son los No Esporulados, que engloban cocos y bacilos, tanto
Gram positivos como Gram negativos, y espiroquetas9 (Tabla 2). Estos
microorganismos actan generalmente como oportunista, tanto a nivel de su
hbitat (mucosas, cavidades) como en tejidos y rganos distantes; es as como la
mayora de las infecciones por este grupo de bacterias anaerobias no
esporuladas, son de origen endgeno.
Cada da existe un mayor inters por este grupo de bacterias asociadas a la
enfermedad periodontal. El desarrollo de las tcnicas microbiolgicas durante los
ltimos 20 aos ha permitido aclarar considerablemente la etiologa de la
periodontitis, y se han establecido grupos de microorganismos especficos
presentes en dicha enfermedad. La microbiota periodontal es una comunidad de
microorganismos, principalmente anaerobios, muchos de los cuales an son
difciles de aislar en el laboratorio (30, 31, 32)
A pesar de las dificultades para aclarar los aspectos microbiolgicos de la
periodontitis, hoy en da se conoce un grupo limitado de bacterias anaerobias
asociadas a la periodontitis, denominadas patgenos periodontales, (Tabla 2), y
en la actualidad se estudian las propiedades de dichos microorganismos que les
permiten actuar como patgenos en el tejido periodontal.
Tabla 1
Especies de Clostridium asociados a la periodontitis

C.
C.
C.
C.

malenominatum
ramosum
sporogenes
hastiforme

C. histolyticum
C. subterminale
Fuente: Liebana, U. (1995).

De acuerdo a esta revisin bibliogrfica, en la Tabla 2 se recopilan las principales

bacterias que se hallan ampliamente y moderadamente asociadas a la
periodontitis.
Tabla 2
Especies bacterianas asociadas a la periodontitis

Ampliamente asociadas

Moderadamente
asociadas

Actinobacillus
actinomycemcomitans

Fusobacterium nucleatum

Porphyromonas gingivalis

Prevotella nigrescens

Prevotella intermedia

Streptococcus intermedius

Bacteroides forsythus

Peptostreptococcus micros

Treponema denticola

Eikenella corrodens

Campylobacter rectus

Eubacterium sp

Capnocytophaga sp.
Fuente: Nakagawa & col. (1990); Kamma & col. (1995); Slotwinska, S. (2000)
Durante aos se ha estudiado la flora bacteriana predominante en la
periodontitis. (13, 14)
Como agentes etiolgicos relacionados con esta
enfermedad, se le ha dedicado particular atencin a Actinobacillus
actinomycetemcomitans, Fusobacterium nucleatum y a especies de Bacterias
Anaerobias Gram Negativas Pigmentadas (BAGNP) (30, 31, 32, 33)
Investigaciones realizadas reportan que la etiologa de la periodontitis est
asociada a la presencia de especies de Bacterias Anaerobias Gram Negativas
(BAGN). Muchos autores coinciden que entre los periodontopatgenos ms
comunes
se
encuentran
Porphyromonas
gingivalis,
Prevotella
intermedia,Bacteroides forsythus F. nucleatum, A. actinomycemcomitans y
especies de Capnocytophaga (30, 31, 32, 33, 34, 35)
A. actinomycemcomitans, se ha relacionado principalmente con la Periodontitis
Juvenil, el cual se ha encontrado colonizando la mucosa bucal, paladar, lengua,
as como en placa supra y subgingival de individuos, tanto sanos como enfermos
periodontalmente.
P. gingivalis y P. intermedia son las especies ms virulentas dentro del grupo de
Bacterias Gram Negativas Pigmentadas (BGNP) y las ms comnmente asociadas

con la Periodontitis del Adulto (Figura 1); estas especies habitan en el surco
gingival y en la bolsa periodontal de la cavidad bucal. (32, 33; 36)

Figura 1. Coloracin de Gram.

Bacilos Gram Negativos.

Asimismo, P. gingivalis y P. intermedia han sido aisladas en jvenes con

Periodontitis Prepuberal junto conFusobacterium sp., A. actinomycemcomitans y
Eikenella corrodens , igualmente en individuos con Periodontitis Postjuvenil y
Periodontitis de Progresin Rpida, asociadas a Treponema denticola. (34, 35, 36)

Basndose en esta revisin, resulta obvio que la microbiota periodontal es una

comunidad compleja de microorganismos. P. gingivalis y P. intermedia,
actualmente se incluyen en el grupo de patgenos periodontales ms
importantes, conjuntamente con A. actinomycetemcomitans, B. forsythus
yCapnocytophaga sp., los cuales son aislados en muchos laboratorios con fines
de investigacin y manejo de la periodontitis. Muchas investigaciones an se
encaminan a describir los factores de virulencia de varios patgenos
periodontales, lo que permitir comprender an ms la patognesis de la
periodontitis.
2. PORPHYROMONA GINGIVALIS
(Jannet, Vijaya, & John, 2000) (Ramos Perfecto Donald, 2O11) Varias bacterias
tienen una gran particularidad por colonizar y prosperar a nivel subgingival
estando mucho ms vinculadas con enfermedades periodontales, la P. gingivalis
es un bacilo Gram negativo anaerobio estricto sobresaliente en la periodontitis
crnica, al igual que el Agregatibacter actinomicetencomitans que est presente
en esta patologa, los diversos factores de virulencia de la Porphyromonas
Gingivalis la hacen sumamente agresiva, ya que utiliza las condiciones del
husped para inducir mayor dao y en el surco gingival halla los requisitos
ptimos para su desarrollo provocando una devastacin lenta y persistente de los
tejidos periodontales.
(Ramos Perfecto Donald, 2O11) (Jannet, Vijaya, & John, 2000) La P. gingivalis
incluso suele exhibirse mucho ms patgeno siendo un agente de riesgo para

infecciones pulmonares, parto pre termino y bajo peso al nacer, y acrecienta el

riesgo de infarto al miocardio cuando existe su presencia en placas
arterioesclerticas.
(Libana Urea, 2002) El gnero Porphyromonas engloba bacterias asacarolticas,
nos referimos a que no metabolizan los carbohidratos ni por la ruta de EmbdemMeyerhof-Parnas (gluclisis) ni por la va de las pentosas fosfato; esto ltimo se
debe a que no poseen las enzimas glucosa-6-fosfato deshidrogenasa y gluconato6-fosfato deshidrogenasa. Se vale de compuestos nitrogenados para obtener
energa, no progresan en presencia de bilis al 20% y son susceptibles a
concentraciones superiores a 2 g/ml de vancomicina.
(Libana Urea, 2002) Las especies del gnero de inters en patologa humana
son: P. asaccharolytica la misma que est vinculada con patologa extraoral, ya
que pertenece a la microbiota normal del colon y la vagina, P. gingivalis, P.
endodontalis y P. catoniae, que se desarrollan en su hbitat natural que es la
cavidad oral y excepcionalmente producen procesos patolgicos fuera de ella.
(Ronimus & Morgan, 2003) La va de Embdem-Meyerhof-Parnas (gluclisis)
anteriormente nombrada es la secuencia metablica en la que se oxida la
glucosa, cuando no existe la presencia de oxgeno esta es la nica va que
produce ATP en los animales, se trata de nueve reacciones enzimticas mediante
las que se obtienen dos molculas de piruvato y dos equivalentes reducidos de
NADH, los que al incorporarse en la cadena respiratoria crean cuatro molculas
de adenosn trifosfato (ATP).
2.1. TAXONOMIA
(De Palm, Khalaf, & Bengtsson, 2013) (Ramos Perfecto Donald, 2O11) El empleo
de nuevos mtodos de clasificacin basndose en biologa molecular como ADNADN hibridacin y otras, apoy al gnero bacteroides que en primeras instancias
se lo clasifico como un grupo de bacterias heterogneas, anaerobios obligados
Gram negativas no esporuladas y de forma bacilar, del cual la bacteria en estudio
pudo ser definida en un grupo homogneo de especies a partir de los
bacteroides, nombrados ahora Porphyromonas, que en un comienzo eran tres
especies P. gingivalis, P. asaccharolyticus, P. endodontales, siendo particularidad
de estas l no ser fermentadores, tener como sustrato el nitrgeno y emplear a la
tripticasa y a la peptona para obtener energa.
(Negroni, 2009) Actualmente a la Porphyromonas gingivalis se la define como un
cocobacilo Gram-negativo, no mvil, anaerobio estricto, asacaroltico,
concerniente al filo Bacteroidetes.
2.2 MORFOLOGIA Y ESTRUCTURA
(Ramos Perfecto Donald, 2O11) Se lo observa como capsulado no esporulado sin
flagelos y abundantes fimbrias, a nivel de la membrana externa de la pared
celular expone endotoxinas, en su superficie presenta una diversa cantidad de
enzimas que benefician a la virulencia y posee la habilidad de elaborar enzimas
que degradan las protenas, se la considera un potencial comensal en la cavidad
oral y mide de 1 a 3,5 um de largo por 0,5 a 0,8 um de ancho.

(Macn Cabrera, 2015) La tonalidad marrn oscuro o negro de las colonias se

debe a la facultad que posee para almacenar hierro, acumulndolo
superficialmente para metabolizar en situaciones deficitarias, de ah que se las
conoce como bacterias pigmentadas de negro, las colonias no son fluorescentes
bajo la luz ultravioleta.
2.3. FACTORES DE VIRULENCIA
(Diaz Zuiga J, 2012) Lo que determina a un microorganismo como virulento es la
cualidad de producir metabolitos txicos, enzimas, toxinas, al igual que la
produccin de componentes de la superficie o pared celular que le posibilitan
eludir las barreras protectoras e invadir y sobrevivir en los tejidos y clulas del
anfitrin. As podemos precisar a la virulencia como la capacidad de un
microorganismo de interferir con los procesos metablicos y fisiolgicos del
hospedador lo que conlleva a la instauracin de una enfermedad.
(Garcia Reyna Roberto, 2015) La P. gingivalis es una bacteria asacarolitica
anaerobia que fabrica una amplio abanico de factores de virulencia entre los que
tenemos: cisten proteasas, lipopolisacridos, cpsulas y fimbrias, estas ltimas
codifican el gen fimA. Todos esos factores estn encaminados a la adquisicin de
hierro y pptidos de crecimiento como fuente de energa a partir de la hemina
(hierroprotoporfirina IX), la cual la obtiene de la hemoglobina, haptoglobina,
mioglobina, metahemoglobina, oxihemoglobina, lactoperoxidasa albmina,
catalasa, y citocromo c, de los glbulos rojos por medio de su reclutamiento en el
lugar de la invasin.
Podemos listar los factores de virulencia de esta bacteria periodontopatgena.
2.3.1. CAPSULA
(Ramos Perfecto Donald, 2O11) El rol preponderante que juega en la evasin del
sistema inmunolgico, le otorgan una vital importancia a esta estructura, lo hace
eludiendo la fagocitosis, opsonizacin y accionar del complemento, est
compuesta por polisacridos, siendo un gen codificante de epimerasa epsC
esencial para su sntesis, existiendo 6 serotipos capsulares de k1 a k6.
2.3.2. MEMBRANA EXTERNA
(Macn Cabrera, 2015) Posee un papel indispensable al favorecer a la adhesin y
congregacin bacteriana, colonizacin de clulas epiteliales y fibroblastos,
formacin y mantenimiento de la biopelicula subgingival.

2.3.3. FIMBRIAS
(Libana Urea, 2002) Estas actan como adhesinas, fomentan los fenmenos de
congregacin y adhesin a superficies epiteliales y dentales con la mediacin de
la saliva, al igual que las protenas de la membrana externa. Poseen la capacidad
de sumarse a distintas molculas, clulas y sustratos, como epitelial,
fibronectina, fibringeno, lactoferrina, al mismo tiempo expone cualidades
quimiotacticas y de induccin de citoquinas, se presentan en forma pertrica de
0,3 a 3,0 um de largo y 5 nm de ancho, compuestos por monmeros de
fimbrilina, codificadas por el gen fimA.

2.3.4. PROTEASAS
(Libana Urea, 2002) Gracias a ellas se obtiene la capacidad de penetracin,
multiplicacin y diseminacin que la bacteria posee, ya que consigue nutrientes a
partir de los tejidos del anfitrin, induciendo significativos daos tisulares. La
Porphyromonas gingivalis genera una vasta serie de enzimas proteolticas; varias
de las cuales se asocian a la membrana externa y otras se liberan al exterior o
son transportadas a distancia por las vesculas superficiales.
(Macn Cabrera, 2015) Est implicada en la destruccin del periodonto, tejido
conectivo del diente y reabsorcin sea, presentan accin hemoltica que es la
desintegracin de hemates para obtener hierro, dentro de sus propiedades
tenemos:
Elevacin de la permeabilidad vascular del surco gingival, inflamacin y mayor
nmero de nutrientes para las bacterias debido a la destruccin de protenas
reguladoras, destruccin de inmunoglobulinas igAI, igAII e igG
Perciben hierro de molculas que engloben transferrina, lactoferrina o
hemoglobina
Activacin de metaloproteasas en la matriz de clulas epiteliales que rodea al
diente resultando en la destruccin tisular
(Del Ro Martinez, 2006) Se consideran a las colagenasas y a las aminopeptidasas
como decisivas en la patognesis de las bacterias, adems existen otras
proteinasas especficas como arginina y lisina proteinasa que son proteinasas
cistenas y han recibido un nombre en comn gingipains y son un potente
normalizador de la permeabilidad vascular, siendo capaces de inducir la
permeabilidad vascular en el plasma humano y unirse directamente a
bradiquininas. La Arg-gingipain es capaz de inactivar especies oxigeno reactivas
(bactericidas naturales) producidas por PMNN el cual es un primordial mecanismo
de defensa del hospedador.
2.3.5. PROTEASAS CASEINOLITICAS
(Macn Cabrera, 2015) Inhiben la actividad bacteriana de PMNN pero el principal
papel de estas es degradar colgeno tipo I y IV, igG humana, fibronectina y
complemento C3, C4, C5 y C5a.
2.3.6. METABOLITOS TXICOS TISULARES
(Libana Urea, 2002) La particularidad principal de estas es aumentar la
permeabilidad de la mucosa oral, son cidos grasos de cadena corta, compuestos
azufrados voltiles, amonaco e indol. Tambin posee molculas antibacterianas,
varios de los metabolitos mencionados desempean un rol competitivo con
diferentes bacterias; a ellos hay que sumar la elaboracin de bacteriocinas por
parte de determinadas cepas de P. gingivalis. Todas estas molculas estn
implicadas en las vastas interrelaciones que las bacterias instauran en la cavidad
oral.
2.4. FISIOPATOLOGIA
(Ramos Perfecto Donald, 2O11) Se presenta a travs de la saliva por contagio o
transmisin por individuos infectados, es considerado un colonizador secundario,

comensal del surco gingival, su capacidad de adherirse principalmente por sus

fimbrias pertricas tipo Ib, II as como por sus vesculas de membrana,
hemaglutininas, capsula, le proporcionan la facultad de dar el primer paso en la
colonizacin del surco, poder adaptarse e invadir las clulas epiteliales en un
lapso aproximado de 20 minutos, logrando replicarse dentro de ellas y
diseminarse a las clulas de alrededor, esta peculiaridad de invadir la clula le da
la capacidad de evadir las defensas del anfitrin.
(Jannet, Vijaya, & John, 2000) La P. gingivalis posee la capacidad de degradar
diversas protenas, componentes del surco gingival, ligamento periodontal y
hueso alveolar, adems de alterar la respuesta propia y especfica del
hospedador. A todo esto se suma un factor husped, que ante la presencia de
esta bacteria, activa una inmensidad de respuestas que pueden exacerbar el
proceso inflamatorio presente en el surco, aumentando el proceso de destruccin
del periodonto.
2.5. NUTRICION
(Del Ro Martinez, 2006) El ecosistema subgingival suministra un entorno propicio
para esta especie ya que invariablemente coloniza en sitios donde la tensin de
oxigeno es nfima, pero en la cual hay sustratos abundantes en nitrgeno, en
estos sitios el potencial redox es bajo y ms bajo aun en bolsas periodontales que
posee nutrientes endgenos ricos en pptidos y aminocidos.
(Grenier, 2014) La P. gingivalis necesita de un requerimiento imprescindible de
hierro para crecer sin embargo cuando existe una deficiencia del mismo en el
sistema de poros de la bacteria (sideporo, los cuales quelan hemina) utiliza
hemina (hierro protoporfirina IX), los niveles de hemina son cambiantes en boca y
el sangramiento, como resultado de la inflamacin gingival, elevara su
conglomeracin subgingival, de modo que este puede ser un factor que
predispone a la acumulacin de la bacteria. Esta hemina que se almacena en la
membrana extracelular acta como basurero de oxigeno fomentando a
conservar un microambiente anaerobio.
(Diaz Zuiga J, 2012) Su notoriedad como colonizador se debe a su capacidad de
adhesin a los diferentes tipos de clulas de los tejidos de la cavidad oral, con
otras bacterias, con la matriz extracelular y con componentes salivales. Esta
capacidad de adhesin es proporcionada por las fimbrias, componente que
adems ha sido asociado a su potencial patognico; de hecho, la mayora de
pacientes con inflamacin de los tejidos de soporte dentarios (periodontitis)
presentan el genotipo fimA II seguido en frecuencia por el genotipo fimA IV,
mientras que el genotipo fimA tipo I, III y V se detectan mayoritariamente en los
adultos sanos con presencia de P. gingivalis.
3. Plantas Medicinales
3.1 Principio activo de las plantas Medicinales
Thompson (37) refiere que el valor medicinal de las plantas curativas, se debe a
la presencia de una sustancia qumica principio activo que produce un efecto
fisiolgico. Mucho de los principios activos son sumamente complejos,
desconocindose an su naturaleza qumica; otros han sido purificados,
sintetizados o imitados. Por lo general pertenecen a una de estas categoras:

aceites esenciales, alcaloides, glcidos, taninos, sapogeninas, fenoles, quinonas,

terpenos, carotenoides, cumarinas, flavonoides, resinas
3.2 Generalidades del aceite esencial
Definicin
Los aceites esenciales son mezclas de sustancias voltiles con propiedades
aromticas, extrados de plantas, en su mayora por destilacin; son
generalmente lquidos y rara vez slidos. (38, 39, 40) Son el producto final del
metabolismo secundario de muchas clulas vegetales, por lo que no se
reintegran al metabolismo celular.
Augusto (41) define a los aceites esenciales como aquellas sustancias
caracterizadas por su volatilidad, formadas por agrupaciones de un gran nmero
de compuestos qumicos aromticos. Existen en las diferentes partes de las
plantas, siendo estas sustancias no miscibles en agua.
Morales (42) reporta que la mayora de las esencias estn constituidas por un
compuesto predominante; pero que no siempre las caractersticas de olor y sabor
estn dadas por el compuesto principal. Otros componentes en menor tasa son
importantes y en algunos casos la calidad comercial de ciertas esencias depende
de dichos constituyentes.
Composicin
Se considera que los aceites esenciales son qumicamente una mezcla compleja
y muy variables de hidrocarburos alicclicos, denominados terpenos y sus
derivados oxigenados llamados alcanfores. (43)La composicin de los aceites
esenciales es diversa. Estn principalmente constituidos por hidrocarburos de
formula C10 H16. En la actualidad se refieren a un gran
nmero de
hidrocarburos que aparecen en la naturaleza con formula (C5H8), sus derivados y
compuestos aromticos. (38, 39, 40)
Los terpenos por su composicin, pueden derivar de la condensacin de dos
molculas de Isopreno C5H8. En los mismos aceites esenciales, y en otros
productos naturales, aparecen compuestos derivados, anlogamente, del
Isopreno, de modo que la calificacin de terpeno se extiende a todos aquellos,
dividindolos
en
hemiterpenos
C5H8, terpenos
propiamente
dichos,
sesquiterpenos C15H24, diterpenos C20H32 y politerpenos (C5H8)n, siendo n un
nmero elevado. (39, 40)
Los productos derivados de los terpenos que tienen oxigeno reciben el nombre de
alcanfores, como ejemplo: en los hidrocarburos terpnicos figuran los limonenos,
el mirceno, el pineno. Entre los alcoholes terpnicos ms importantes, el geraniol
(de las esencias de las rosas), citronelo, etc. (39, 40)
Propiedades Fsicas (44)
Lquidos a temperatura ambiente (a diferencia de los aceites fijos).
Muy raramente son coloreados.
En general, su densidad es inferior a la del agua.
Poseen un ndice de refraccin elevado.

 Desvan la luz polarizada.

Son liposolubles y solubles en los disolventes orgnicos habituales.
Arrastrables en vapor de agua (muy poco solubles en ella).
Punto de ebullicin es superior a los 100C.
Composicin Qumica
Estn constituidos por muchas clases de compuestos qumicos, algunos por un
solo componente en un alto porcentaje y otros por mezclas complejas de
compuestos cclicos aromticos, acclicos, heterocclicos y derivados oxigenados.
Los constituyentes principales de los aceites esenciales son: (45)
Hidrocarburos: Mirceno, cinemo, pineno, canfeno, felandreno, bineno, limoneno,
cariofileno, geranioleno, santaleno
Alcoholes: Isoamlico, geraniol, linalol, citronelol, nerodinol, farsenol, terpinol,
mentol, borneol, benclico, fenil-etlico
Fenoles: Timol, carbacrol, eugenol, vainillina
Aldehidos: Citral, citronelal, anisaldehido, benzaldehido, cinamadehido
Cetonas: Alcanfor, carvona, mentona, piperitona, acetato fenona
Eteres: Anetol, metil chavicol, eucaliptol, ascarodol
Esteres: Salicilato de amilo, benzoato de metilo, acetato de terpinilo, acetato de
geranilo
Localizacin de los aceites esenciales en las plantas
especies de plantas producen aceites esenciales.

Segn Miller (46) 2000

Las especies que proporcionan mayor cantidad de aceites esenciales pertenecen

a las Familias Labiadas, Umbelferas, Compuestas, Mirtceas, Laureceas,
Rutceas y Pinceas. Los aceites esenciales se hallan en regiones circunscritas a
la planta; son segregadas por estructuras especializadas como los pelos
glandulares, cavidades esquizgenas, etc.
Funcin de los aceites esenciales en la planta Meyer (47) informa que no se
conoce exactamente la importancia bioqumica que desempean los aceites
esenciales en las plantas.
Probablemente deben considerarse como productos accesorios del metabolismo,
es probable que tengan un papel ecolgico. Sin embargo; otros estudios han
demostrado que los aceites esenciales regulan la transpiracin, especialmente al
alterar o modificar la actividad calorfica y la presin osmtica, manifiesta que los
aceites esenciales son secreciones patolgicas como la resina, el blsamo, etc.,
sirviendo a la planta como sustancias protectoras contra las enfermedades de los
rganos daados. (48)
Influencia de
esenciales

los factores externos en la produccin de aceites

Diversas investigaciones estudiaron el tipo de influencia de los factores externos

y su relacin con los aceites esenciales, concluyendo que la luz, el suelo, el clima,
la velocidad del viento, etc. determinan su produccin. (37, 49, 50)
Actividad antimicrobiana de los aceites esenciales
Los aceites esenciales, compuestos extrados de varios tipos de plantas y usados
para preservar alimentos y bebidas, tienen un efecto inhibitorio sobre el
desarrollo de microorganismos. En su estudio Walton y col. demostr que el
extracto destilado del ajo tiene efectos bactericidas y bacteriostticos. (44) Se
conoce de la actividad antimicrobiana de varias especies vegetales en forma de
extractos o hierbas aromticas en los alimentos, inhiben la formacin vegetativa
de esporas, detienen el crecimiento de alimentos patgenos y levaduras. (44)
Mecanismo de accin del aceite esencial sobre los microorganismos
Este mecanismo de accin hacia los microorganismos es complejo y an no ha
sido del todo entendido y explicado. El modo de accin de los aceites esenciales
tambin depender del tipo de microorganismos y esta principalmente
relacionado con la estructura de la pared celular y la membrana externa de los
mismos. Kakrani y col. Establecieron, in vitro, la actividad antimicrobiana,
antiparasitaria y antimictica de los aceites esenciales de Aglia odoratissima. Las
investigaciones plantean que los aceites esenciales interferiran la fase del
metabolismo intermedio de los microorganismos inactivando enzimas de
reaccin. (51)
Extraccin del aceite esencial
Para obtener la fraccin cromtica del material vegetal, a lo largo de los aos, se
usaron diferentes procesos. Motle (52) en su estudio consideraba los siguientes
mtodos:
a) Extraccin por expresin
b) Extraccin por solucin
- Con grasas slidas y fras
- Con grasas lquidas y calientes
- Con solventes voltiles
c) Extraccin por destilacin
- Extraccin por destilacin con agua caliente
- Extraccin por arrastre de vapor
Extraccin por destilacin por arrastre de vapor
Esta tcnica resulta una de las ms simples y econmicas para obtener el aceite
esencial de este tipo de planta y en general para cualquier otro. Las ventajas de
este mtodo son su simplicidad, bajo costo y el hecho de poder maniobrar
grandes volmenes de materia prima.
Este mtodo se fundamenta en que los aceites esenciales son arrastrados por la
corriente de vapor de agua que se genera en la fuente de vapor, luego esta

mezcla (vapor de agua y aceite) es condensada mediante su paso por un

refrigerante de vidrio, para luego separar el aceite del agua por simple diferencia
de densidades. La destilacin es una operacin farmacutica que tiene por
finalidad separar los principios voltiles (contenidos en una mezcla compleja) de
los que no lo son. El equipo de destilacin est compuesto por un sistema de
destilacin de doble baln, en el cual solo uno de los balones que contiene agua,
es sometido al calor directo; mientras que el segundo baln que contiene la
planta licuada recibe los vapores de agua, para luego liberar el vapor mixto
(agua-aceite esencial) hacia el condensador.
El mtodo involucra los siguientes pasos: (53)
a. Seleccin de las hojas, talluelos y flores en buen estado.
b. Las hojas se pesan y lican, para lo cual se utiliza una pequea cantidad de
agua destilada, este luego se deposita en el segundo baln de destilacin.
c. Se activ el sistema al someter a calor directo (mechero de bunsen) el baln
de agua destilada.
d. El destilado se recibi en un depsito estril y cerrado, aqu se observa un
estado difsico entre agua y aceite esencial, debido a la diferencia de
densidades. Esto permiti separar el aceite esencial mediante el uso de pipeta
Pasteur a viales estriles.
e. Los aceites esenciales obtenidos luego son esterilizados por filtracin con
membrana de Millipore de 0.22 u; almacenado a temperatura ambiente y en
oscuridad hasta su utilizacin.
4. Minthostachys Mollis
4.1 Descripcin general
Se denomina en la lengua Quechua mua, y en la Aymara tiene 2 nombres:
Coa y Huaycha. Debido a sus caractersticas semejantes al pleo y organo,
los espaoles la denominaban poleo silvestre. Otros nombres vulgares con los
que se le conoce a esta planta son: "Mua negra", "Polco silvestre", "coz", "muamua", "arash mua", "kon" "Orcco-mua". (54, 55)
La mua, es un recurso natural que tiene un plano altitudinal de crecimiento
entre los 2500 3500 m.s.n.m.139 Habita entre los diferentes pisos ecolgicos de
nuestra serrana, comportndose como tal; existe en gran abundancia. As como
es una planta hemicriptfila que durante la poca ms fra del invierno y seco
desaparecen sus rganos areos para brotar nuevamente con las primeras lluvias
de la primavera.140 Alcanza una altura de 0.80 a 1.50 m., desarrollndose en
forma difusa y muy ramificada, crece en lugares cercanos a acequias,
manantiales sin tener grandes requerimientos de agua.125 Se desarrolla en
suelos arenosos, ricos en materia orgnica, bien drenados, con buena retencin
de humedad, con un pH entre 5-8 y un clima con elevada luminosidad, florece en
poca de lluvia, se multiplica por semilla y por codo. (42)
4.2 Clasificacin sistemtica
Reino

: Vegetal

Sub reino

: Embryophyta

Divisin
Clase

: Magnoliophyta
: Magnoliopsida

Sub clase
Orden

: Methachlamydeae
: Tubiflorae

Familia
Gnero
Especie

: Lamiaceae (Labiatae)
: Minthostachys
: M. mollis (Spach) Griseb

Nombre vulgar : Mua

Frmula floral

: K(5) C(2-3) A(2-2) G(2)

4.3 Caractersticas Botnicas

Es una planta arbustiva, leosa, frondosa en la parte superior, de aspecto general
glauco, erecta y pubescente, su tallo es ramificado desde la base. La hoja es el
elemento vegetativo simple ligeramente aserrado, carece de estpulas,
cortamente pedunculares de filotaxia opuesta. Su peciolo mide entre 4 y 6 mm.
de largo, pubescente acanalada en la parte superior y convexo en la parte
inferior, es aqu donde se deposita la mayor cantidad de aceite, que al estrujarlos
dejan sentir su aroma caracterstico. Las flores son hermafroditas.
El limbo es aovadote 1.7 a 2.5 cm. En su mayor ancho, y de 2 a 4 cm. de largo;
su base es atenuada de bordes aservados, pice agudo de nerviacin
penninervia. El limbo es pubescente tanto en el haz como en el envez, debido a
lo cual la hoja presenta una coloracin verde plida; sus nervaduras secundarias
son muy desarrolladas y ligeramente reticuladas. El cliz soldado con 13
venaciones terminado en 5 lbulos dentados casi iguales entre si con pelos
cerelosos en la base, la corola raramente es de 6mm. De largo, dividida en 2
labios: 2 lbulos o labio superior y 3 lbulos o labio inferior. Los pelos de las
partes areas, o sea de las hojas y tallos, parece que forman una especie de
manto protector contra los cambios bruscos de temperatura y al mismo tiempo
son los lugares en donde se deposita el aceite esencial, de aqu que al estrujarlos
dejen sentir su aroma o el sabor picante que da una impresin de fro que es
caracterstico. Las flores son pequeas, reunidas en verticilos falsos, situados en
la parte superior de las ramas con pednculos cortos, 2 en cada axila.
4.4 Tipos de mua
Se indica un total de 12 especies, cuya distribucin abarca desde Argentina hasta
Venezuela; (56) y en el Per encontraron 6 especies distribuidas desde el norte
(Cajamarca) hasta el sur (Cuzco), con una mayor distribucin en la regin central,
cuyas especies son: (56, 57)
M. glabrescens
M. salicifolia
M. cetosa
M. spicata

 M. tomentosa
M. mollis (HKB) griseb

4.5 Caractersticas fsico-qumicas del aceite esencial de M. mollis (HKB)

griseb mua (41, 42)
- Aspecto

: Lquida, clara, transparente

- Color

: Incoloro

- Olor

: Caracterstico en menta

- Sabor

: Picante

- Densidad relativa : 0.92

- Indice de refraccin : 1.4699
- Solubilidad en alcohol al 70% : 5
- Indice de mentona : 33.88%
- Indice de menta : 22%
- Indice de acidez : 1.683
- Indice de esteres : 5.819
- Rotacin especfica :-2 45
- Indice de ter : 16.80 %
- Contenido de mentol total : 4.042 %
- Solubilidad en etanol : 95 %
4.6 Composicin Qumica
Con respecto a la composicin qumica del aceite esencial de M. mollis (mua)
existen pocos trabajos de investigacin por lo que se tiene poca informacin; el
aceite esencial de M. mollis (mua), al igual que otros aceites esenciales,
presenta una estructura aldehdica, cetnica, alcohlica (mentol y mentona),
steres, teres y terpenos en mayor porcentaje.
Gibaja (58) realiz la desterpenacin del aceite esencial de M. mollis (mua)
determinando el 10.20% para la parte desterpenada (compuestos oxigenados) y
89.80 % para la fraccin terpnica. Chica12 determin la presencia de carvacril
acetato, carvacrol, pulegona y mentona.
4.7 Molculas presentes en Minthostachys mollis
Pulegona
Uno de los componentes ms importantes de muchos aceites Minthostachys,
pero es mejor conocido por pulegium poleo (Mentha). Es altamente txico en
grandes cantidades, daa el hgado y puede provocar el aborto. Su toxicidad

probablemente explica algunos de los efectos del aceite de Minthostachys contra

las plagas y parsitos. La sustancia tambin se usa en perfumera y saborizantes.
Mentona
Otro componente muy importante, junto con Pulegona a menudo representan
ms del 75% de la composicin del aceite entero. El ms conocido de la menta
(Mentha x piperita). Tiene un aroma muy agradable sabor a menta y se usa en
perfumera, pero tambin tiene propiedades digestivas.
Carvacrol
Se han encontrado para ser componentes dominantes en una menor proporcin
de los estudios de los aceites de Minthostachys molis. Carvacrol tambin se
encuentra en varias hierbas conocidos como el organo (Origanum vulgare), la
ajedrea de verano (Satureja hortensis) o tomillo (Thymus serpyllum), y es sobre
todo un valor para sazonar.
Carvona
Como su nombre lo sugiere, esta sustancia es conocida como un producto de
semillas de alcaravea (Carum carvi), un Apiaceae. Tiene propiedades digestivas y
se utiliza para dar sabor.
Mentol
Por lo general, mucho menos importante en Minthostachys mollis, pero a veces
se encuentra como componente menor de la mezcla de aceite. Se est enfriando
y adormece el dolor, y se utiliza contra throatsore.
Linalol
Empleado como condimento y como insecticida, linalol es ms conocido de
cilantro (Coriandrum sativum) de la familia Apiaceae. A menudo es uno de los
componentes menores del aceite de Minthostachys mollis.
Timol
Como su nombre lo sugiere, esta sustancia es bien conocida de los aceites de
distintas especies de tomillo. Acta como antisptico y contra el dolor de
garganta y tos. A veces se encuentra como un componente menor en el aceite de
Minthostachys mollis.
4.8 Composicin nutritiva de Minthostachys mollis (mua) En 100 gr. De
parte comestible
Componentes mayores:
Agua 16 ug. %
Protenas 3.20 ug. %
Grasas 2.80 ug. %
Carbohidratos 66.30 ug. %
Fibras 9.40 ug. %
Cenizas 11.70 ug. %

Minerales:
Calcio 2.24 ug. %
Fsforo 269 ug. %
Hierro 22.40 ug. %
Vitaminas
Retinol 306 ug. %
Tiamina 0.35 ug. %
Riboflavina 1.81 ug. %
Niacina 6.85 ug. %
Ac. Ascrbico 21.10 ug. %
Otros componentes
Acidos dbiles 2.54 ug. %
Esteres 14.02 ug. %
Taninos Positivo
Resinas Positivo
Fenoles Positivo
Alcoholes Positivo
Aldehidos Positivo
Cetonas Positivo
Carbonilo 22.06 ug. %
Mentol 40.42 ug. %
4.9. Propiedades y usos
La mua es reconocida tradicionalmente por sus propiedades digestivas contra
clicos, flatulencia (carminativo), vmitos, diarreas; antitusgenas, antiasmtico,
(55) expectorante, antiespasmdicas, antisptica, analgsico, antiinflamatorio,
febrfugas, en tratamiento de tumores y mezclndola con chilca se empleaba en
fracturas. Es excelente contra la halitosis (59) y para combatir jaquecas y
soroche. Adems es utilizada como condimento para preparar platos tpicos.
En el campo agrcola se emplea para la preservacin de algunos productos como
la papa, del ataque de insectos. (54, 55) A manera de fumigante orgnico vegetal
contra el gorgojo de los andes y Norimoschema y como antimoho.4
En el campo pecuario es utilizado para controlar los ectoparsitos y
endoparsitos de los animales domsticos, adems para curar sarna en equinos y
camlidos. En otras zonas de Latinoamrica, principalmente en Argentina, se le
emplea para aromatizar y fabricar licores y bebidas.
5. Pruebas de Susceptibilidad Microbiana

La actividad antimicrobiana se mide in vitro para determinar principalmente la

potencia de un agente antibacteriano en solucin, su concentracin en los
lquidos del cuerpo o en los tejidos y la susceptibilidad de un microorganismo
dado a concentraciones conocidas del medicamento. Los mtodos ms utilizados
son:
5.1 Mtodo de Dilucin
Se incorporan cantidades graduadas de las sustancias antimicrobianas en medios
bacteriolgicos lquidos o slidos; los medios se inoculan despus con las
bacterias de prueba y se incuban. El punto final se toma como la cantidad de
sustancia antibacteriana requerida para inhibir el crecimiento o para matar las
bacterias de prueba. (60, 61)
Las pruebas de sensibilidad por dilucin en agar consumen tiempo y su uso est
limitado a circunstancias especiales. Sin embargo, el advenimiento de series
preparadas de dilucin de caldos para muchos frmacos distintos en placas con
microdilucin ha aumentado y simplificado de manera considerable al mtodo. La
ventaja de las pruebas con microdilucin es que permite informar un resultado
cuantitativo que indica la cantidad de un frmaco dado necesaria para inhibir (o
matar) a los microorganismos sujetos a la prueba. (60, 61)
5.2 Mtodo de Difusin
Este mtodo, que sufri diferentes modificaciones hasta que fue estandarizado
por Kirby-Bauer en los Estados Unidos en 1966, representa la prueba de
susceptibilidad ms ampliamente utilizada en bacteriologa clnica porque
permite obtener resultados bastante exactos mediante un mtodo cuantitativo,
semicuantitativo o cualitativo, este ltimo es el ms utilizado.
El Comit de Expertos de la OMS (NCCLS en su documento M7-T) public
las
Normas para efectuar algunas modificaciones al descrito por Bauer, de manera
que los resultados sean comparables en todas partes del mundo. Estas normas
tienen en cuenta: (60, 61)
Condiciones de la cepa:
Debe aislarse del material de estudio.
Debe obtenerse en forma de cultivo puro.
Debe ser agente etiolgico del proceso infeccioso.
Se podrn utilizas cepas de referencia cuando existan dudas del material que
se usa.
Cualidades del disco de papel:
Debe tener un tamao de 5 a 7 mm. y un espesor de 0.02 mm.
Deben cargarse con una concentracin de antimicrobiano selectivo de manera
que se obtenga una zona de inhibicin no mayor de 40 mm.
La cantidad de antimicrobiano selectivo que contiene cada disco debe ser justa
porque una sobrecarga falseara los resultados.

 Deben mantenerse almacenados a temperaturas de 4C o segn las

instrucciones del fabricante, para que no haya deterioro en la potencia de la
droga.
Tienen que estar en un ambiente con sustancias desecadoras para evitar los
vapores de condensacin al almacenarlos en el refrigerador.
Indicaciones para la preparacin de las placas:
El medio deber distribuirse uniformemente en la caja.
La altura del medio debe ser de 4mm para que se pueda estandarizar la
difusin de la droga porque si se disminuyera el espesor de la capa de agar se
obtendra halos inhibicin ms amplios.
Este mtodo requiere experiencia de laboratorio y conocimiento de bacteriologa
porque de lo contrario se pueden cometer errores que repercutirn clnicamente.
A continuacin se detalla los pasos a seguir para realizar esta prueba: (60, 61)
Se realiza la siembra de la placa con el agar selectivo para el microorganismo
especfico, esta siembra puede ser por diseminacin en la superficie, por
inundacin o por agotamiento por estras.
Se deja secar entre 3 y 5 minutos.
Con una pinza estril de puntas finas se colocan sobre la superficie del agar
sembrado discos individuales o en estrella; estos llevan impresa la abreviatura
del antimicrobiano selectivo en el cual se encuentran embebidos y la serie a la
cual pertenecen.
Con respecto a los discos se debe tener en cuenta que para asegurar el
contacto adecuado y por lo tanto una difusin uniforme se los debe presionar
suavemente. Para permitir la lectura de los resultados se los debe colocar con la
inscripcin hacia el medio de cultivo. Para impedir la superposicin de los halos
de inhibicin deben estar a una distancia no menor de 15 mm entre s y a 1.5 cm.
del borde de la placa.
Se deja la placa no menos de media hora a temperatura ambiente para que el
disco absorba agua del medio de cultivo y as permita la difusin radial del
antimicrobiano selectivo, lo que produce un gradiente de concentracin, es decir
que cuanto ms nos alejamos del disco menor ser la concentracin del
antimicrobiano. Esta predifusin es necesaria para reducir una posible causa de
error.
Luego se incuba de acuerdo a las caractersticas de cada microorganismo. Una
vez transcurrido el tiempo indicado se procede a la medicin e interpretacin de
la zona circunda el disco, llamada halo de inhibicin. Este informa si el
microorganismo es sensible, resistente o intermedio. La falta de desarrollo
alrededor del disco indica que la bacteria es sensible al antimicrobiano
selectivo, lo que significa que despus de tratar al paciente infectado por el
microorganismo con las dosis habituales de dicho antimicrobiano se observar
una respuesta favorable al tratamiento. El crecimiento del microorganismo
alrededor del disco indica una cepa resistente, es decir, una con la cual no se
obtendr ninguna respuesta teraputica. Existe un tercer tipo de cepa, la cepa

intermedia, que es la que exige la administracin de dosis de antimicrobianos

superiores a las habituales para obtener una respuesta teraputica favorable.
Como el tamao de cada halo de inhibicin depende de la sensibilidad de la cepa
al antimicrobiano, de la velocidad de crecimiento del microorganismo, de la
cantidad (carga) de antimicrobiano selectivo presente en el disco y de la
capacidad para difundir en el medio, etc., un halo ms grande no siempre indica
mayor actividad antimicrobiana.
5.3 Evaluacin de la Susceptibilidad Microbiana
Muchos microorganismos han desarrollado diferentes grados de resistencia a los
quimioterpicos, lo que en algunos casos, con el paso del tiempo causan efectos
colaterales; lo que no sucede con el uso de los principios activos de una planta.
(38) Duraffourd ha trabajado mucho en fitoterapia clnica, aplicando tratamientos
en base de principios activos comparndolos con la actividad de antibiticos,
segn lo que reporto el uso de principios activos en humanos no reportaron
efectos secundarios.
Para demostrar la susceptibilidad que tienen los microorganismos a diversos
aceites esenciales Duraffourd y col. realizaron estudios estadsticos determinando
tablas de actividad antimicrobiana basada en porcentajes. (38)
Estos consideran la actividad de los aceites esenciales en funcin al dimetro del
halo de inhibicin de crecimiento bacteriano (HICB):

Nula (-), para un dimetro inferior a 8 mm.

Sensibilidad lmite (sensible = +) para un dimetro comprendido entre 8 a
14mm
Medio (muy sensible =++) para un dimetro entre 14 y 20mm
Finalmente para un dimetro superior a 20 mm el microorganismo es
sumamente sensible (+++)

3.3 DEFINICION DE TERMINOS

Aceite esencial: Los aceites esenciales son mezclas de varias sustancias
qumicas biosintetizadas provenientes de las plantas, que dan ciertas
caractersticas a flores, rboles, semillas y a ciertos extractos de origen animal.
Qumicamente estn formados por monoterpenos y algunos sesquiterpenos, y
compuestos aromticos.
Cepa bacteriana: Todos los organismos descendientes de un cultivo puro, por
tanto, con fenotipo y genotipo definidos.
Efectividad antibacteriana: Cualidad de un frmaco o agente qumico
determinado consistente en eliminar o inhibir el crecimiento de las bacterias
patgenas que se desarrollan en un medio dado, al actuar sobre ellas indirecta
(obstaculizando el desarrollo bacteriano) o directamente (ocasionando la muerte
de la clula bacteriana).

 Principio Activo: Sustancia qumica responsable de la actividad farmacolgica

y del uso teraputico de una droga.

3.4 HIPOTESIS
El aceite esencial de Minthostachys mollis al 100 %, presenta mayor
efecto antibacteriano frente a flora periodontal, comparado con las
diluciones al 50 % y 25 %.

3.5 VARIABLES

Efecto antibacteriano

3.6 OPERACIONALIZACION DE VARIABLES

Unidad de anlisis: Concentracin aceite esencial
Elemento lgico: Mayor
Efecto antibacteriano del aceite esencial de
(Mua)

Minthostachys mollis

Variable
Efecto
antibacteriano
del
aceite
esencial
de
Minthostachys
mollis (Mua)

Escala
del Cuantitativa
de Razn
de

Definicion
Es la capacidad
del
aceite
esencial
de
mua va afectar
en
el
crecimiento
bacteriano.

Indicadores
Medicin
dimetro
inhibicin
crecimiento
bacteriano
mm.

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