MATERIALES

Propipeta
Reactivo EDTA/cu
Agua destilada
Muestra de Sangre
Reactivo BFC
Espectrofotmetro
Micro pipeta
Pipeta
Tubos de ensayo
Incubadora
Suero Patrn

PROCEDIMIENTO:

1. PROTEINAS TOTALES:
En tres tubos de ensayo marcados B (Blanco); S (Estndar); D (Desconocido),
colocar:

AGUA
DESTILADA
SUERO PATRON
MUESTRA

50 UL

50 UL

50 UL

REACTIVO
3,5 ML
3,5 ML
3,5 ML
EDTA/cu
Mezclar con varilla; Incubar 15 min a 31 C, leer en espectrmetro a 540 nm llevando a
cero con el blanco de reactivo.

2. DETERMINACION DE ALBMINA:
En tres tubos de ensayo, B (Blanco); S (Estndar); D (Desconocido), colocar:
B

SUERO-PATRON

10 UL

MUESTRA

10 UL

3,5 ML

3,5 ML

3,5 ML

REACTIVO BCF

Mezclar con varilla, mantener los tubos entre 15-28 C durante 10 minutos, leer en el
espectrofotmetro a 625 nm llevando a cero con el blanco de reactivo.

DISCUSION DE RESULTADOS

La albumina proporciona alrededor del 80 % de la presin osmtica intravascular debido

a las protenas , el resto depende de las globulinas que tienen un peso molecular mayor
.las protenas contribuyen en un grado mnimo al mantenimiento de presin osmtica
total debido a que tienen pesos moleculares elevados . casi la mitad de la cantidad
corporal de la albumina se encuentra en el compartimiento intravascular relativamente
pequeo , en consecuencia el volumen liquido se mantiene dentro del rbol vascular en
contra de la fuerza de extravasacin de la presin capilar hidrosttica , la disminucin de
la presin oncnica plasmtica da lugar a una respuesta opuesta de la presin capilar
hidrosttica por ese motivo , la hipoalbumina incrementa la tendencia del edema con una
distribucin desproporcionada del volumen del lquido dentro del compartimiento
intravascular.

La

concentracin

de

la

albumina

mantenimiento de un volumen intravascular adecuado.

srica

es

fundamental

para

el

RESULTADOS

PROTEINAS TOTALES :

Protenas totales g/dl =tubo (D) x f

f = P.T (g / dl ) / tubo estndar
factor = 4,8 / 0,364 = 13,186 x ( D) = 13,186 (0,380

protenas totales g / dl = 5,01

ALBUMINA :

Albumina (g/dl ) = desconocido x f

= 0,697(4,56) =3,18
f = Alb(g/dl)/estndar = 2,9 / 0,636 = 4,56

Relacin Alg = albumina (g/dl)/prot.totales

albuminas

= 3,18 / 5,01-3,17 = 1,73

CALCULOS DE RESULTADOS

% Albumina = albumina / prot. Totales x 100

= 63,47 =
63 %%

% Globulina = globulina / prot.totales x 100

= 36,7 =
37 %

INTRODUCCIN
PROTEINAS
Los nutrientes de gran importancia biolgica que son las protenas, son macromolculas
que constituyen el principal nutriente para la formacin de los msculos del cuerpo.
Las protenas son macromolculas compuestas por carbono, hidrgeno, oxgeno y
nitrgeno. La mayora tambin contienen azufre y fsforo. Las mismas estn formadas por
la unin de varios aminocidos, unidos mediante enlaces peptdicos. El orden y
disposicin de los aminocidos en una protena depende del cdigo gentico, ADN, de la
persona.
Las protenas constituyen alrededor del 50% del peso seco de los tejidos y no existe
proceso biolgico alguno que no dependa de la participacin de este tipo de sustancias.
FUNCIONES DE LAS PROTENAS
Las funciones principales de las protenas en el organismo son:

Ser esenciales para el crecimiento. Las grasas y carbohidratos no las pueden

sustituir, por no contener nitrgeno.

Proporcionan los aminocidos esenciales fundamentales para la sntesis tisular.
Son materia prima para la formacin de los jugos digestivos, hormonas, protenas

plasmticas, hemoglobina, vitaminas y enzimas.

Funcionan como amortiguadores, ayudando a mantener la reaccin de diversos
medios como el plasma. Energticamente, las protenas aportan al organismo 4 Kcal

de energa por cada gramo que se ingiere.

Actan como catalizadores biolgicos acelerando la velocidad de las reacciones

qumicas del metabolismo. Son las enzimas.

Actan como transporte de gases como oxgeno y dixido de carbono en sangre.

(hemoglobina).
Actan como defensa, los anticuerpos son protenas de defensa natural contra

infecciones o agentes extraos.

Permiten el movimiento celular a travs de la miosina y actina (protenas

contrctiles musculares).
Resistencia. El colgeno es la principal protena integrante de los tejidos de sostn.

CLASIFICACIN DE LAS PROTENAS

Las protenas son clasificables segn su estructura qumica en:

Protenas simples: Producen solo aminocidos al ser hidrolizados.

Albminas y globulinas: Son solubles en agua y soluciones salinas diluidas (ej.:

lactoalbumina de la leche).
Glutelinas y prolaninas: Son solubles en cidos y lcalis, se encuentran en
cereales fundamentalmente el trigo. El gluten se forma a partir de una mezcla de

gluteninas y gliadinas con agua.

Albuminoides: Son insolubles en agua, son fibrosas, incluyen la queratina del

cabello, el colgeno del tejido conectivo y la fibrina del coagulo sanguneo.

Protenas conjugadas: Son las que contienen partes no proteicas.

Ej.:

nucleoprotenas.
Protenas derivadas: Son producto de la hidrlisis.
En el metabolismo, el principal producto final de las protenas es el amonaco (NH3)
que luego se convierte en urea (NH2)2CO2 en el hgado y se excreta a travs de la
orina.
PROTENAS PLASMTICAS
Las protenas plasmticas son un conjunto de molculas formadas por la unin de
diversos aminocidos que se encuentran en el plasma sanguneo. Los principales
tipos de protenas plasmticas son la albmina, las globulinas y e fibringeno. La
misin de principal de la albmina es proporcionar presin coloidosmtica al plasma
para evitar la salida del este por los capilares. Las globulinas cumplen mltiples
funciones, una de ellas es ocuparse de la inmunidad natural adquirida del
organismo frente a los microorganismos invasores. El fibringeno se polimeriza en
largos filamentos de fibrina durante la coagulacin sangunea, formando de esta
manera cogulos de sangre que ayudan a reparar las pequeas roturas del aparato
circulatorio Cmo se forman las protenas plasmticas? Prcticamente gran parte
de la albmina y el fibringeno de las protenas, as como del 50% al 80% de las
globulinas, se sintetizan en el hgado. El resto de las globulinas se forma casi
exclusivamente en los tejidos linfticos. Se trata sobre todo de las gammaglobulinas
que constituyen los anticuerpos por el sistema inmunitario.

OBJETIVOS

Introducir en la determinacin de protenas en el plasma sanguneo.

Entender y practicar los principios de la espectrofotometra
Aprender a manejar pipetas automticas.
Familiarizarse con el concepto de actividad enzimtica y su utilizacin en clnica.
Calcular velocidades de reaccin.
Utilizar mtodos grficos para el clculo de KM y velocidad mxima de las enzimas.