TECNOLOGIAS DE LOS

ALIMENTOS II

SEPARACIONES CON MEMBRANA BASADOS

EN PROCESOS BIOTECNOLGICOS.

INTRODUCCIN.
Las separaciones basadas en membranas son las operaciones unitarias ms ubicuas en
los procesos biotecnolgicos. Existen varias razones.
1. En primer lugar, se pueden utilizar con una gran variedad de aplicaciones incluida
la clarificacin, concentracin, intercambio de tampn, purificacin y esterilizacin.
2. Estn disponibles en una variedad de formatos, tales como filtracin en
profundidad, ultrafiltracin, diafiltracin, nanofiltracin, smosis inversa, y
microfiltracin.
3. Son fciles de operar y son generalmente robustas hacia variaciones normales en
el tipo de material y parmetros de funcionamiento.
4. Separaciones basadas en membranas tpicamente requieren un menor coste de
capital en comparacin con otro tipo de elaboracin.
Las operaciones basadas en membranas son relativamente menos duras y no requieren
la adicin de otros productos qumicos, por lo tanto se hacen muy adecuados para el
procesamiento de productos biotecnolgicos.
Algunos de los objetivos comunes para el uso de separaciones de membrana incluyen la
separacin de partculas de la corriente de proceso para obtener la corriente lista para su
posterior procesamiento (por ejemplo, filtros de guardia para columnas de cromatografa),
separacin de las impurezas de la corriente del proceso.
Separaciones de membrana se pueden clasificar sobre la base de la conduccin la fuerza
y la direccin del flujo con respecto a la superficie de la membrana.
La siguiente figura ilustra los diferentes tipos de separaciones de membrana que son
utilizados en el procesamiento biolgico. Un paso proceso de membrana tpica implica el
paso de alimentar a travs de la membrana de tal manera que las molculas se separan
en retenido y permeado sobre la base de su tamao, carga, u otra interaccin diferencial.

Figura 1. Correlacin de propiedades de membranas con rangos de separacin.

AVANCES RECIENTES EN SEPARACIONES CON MEMBRANA BASADOS

Membranas y carcasas de membrana (mdulos de membrana) constituyen la parte
consumible de la operacin de filtracin. Medios de filtracin en profundidad se componen
de material fibroso mezclado con un ayudante de filtracin y el aglutinante capaz de echar
en una lmina de membrana. Lo ms destacado es tal vez el diseo de filtro de
profundidad de mltiples capas de tal manera que las diferentes capas realizar diferentes
funciones y juntos el filtro funciona como una secuencia de varios diferentes operaciones
unitarias basadas en membranas.
Una aplicacin tradicional de la filtracin en profundidad ha sido en el rea de cosecha de
clulas y aclaracin. Con la adicin de las superficies adsorbentes, estos filtros ahora
tambin se utilizan para una variedad de otras aplicaciones que implican la eliminacin de
endotoxinas, virus, cidos desoxirribonucleico (ADN), y pro- clula husped protenas
(HCP).
Las separaciones basadas en membranas requieren el uso de membranas polimricas de
un definido y especfico tamao de los poros. Mientras que las membranas utilizadas para
la microfiltracin a menudo son simtricas con poros de tamao regular, los utilizados
para la ultrafiltracin son membranas de material compuesto con capa polimrica delgada
sobre la microporosa estructura.
El material de membrana juega un papel importante en la seleccin de la membrana para
una aplicacin particular en purificacin biofarmacutica catin. Seleccin de membrana
con caractersticas apropiadas (tamao de poro, corte de peso molecular qumica de la
superficie, etc.) es quizs la parte ms importante de la optimizacin de un proceso de
membrana paso. Otros parmetros que deben tenerse en cuenta durante el desarrollo
incluir el rea de superficie de la membrana, la presin transmembrana (TMP).
Los materiales de membrana usados comnmente incluyen polivinilideno, fluoruro
(PVDF), nylon, politer sulfona (PES), polisulfona (PS), y celulosa regenerada (RC), ya
que estos materiales ofrecen una reduccin inespecfica.
Los acontecimientos recientes tambin incluyen aparicin de las membranas
funcionalizados que son selectivos para ciertos productos qumicos. Tambin llamados
adsorbedores de membrana, tales productos estn disponibles con el intercambio inico y
de interaccin hidrfoba ligandos en mdulos y diseados especialmente para su uso est
ganando rpidamente en forma de cromatografa de membrana.
Otro avance reciente es la disponibilidad de membranas cermicas en fibra hueca y
formatos de hoja flexibles. Estas membranas se han utilizado en la produccin de los
productos lcteos como protenas de suero.
Operaciones de nanofiltracin se utilizan comnmente para la eliminacin de virus durante
el procesamiento de productos biotecnolgicos derivados de clulas de mamferos
cultura.
Esta etapa del procedimiento es, sin embargo, a menudo empaado por flujos inferiores
debido para el tamao de poro pequeo de los nanofiltros. Los avances en estos filtros
tienen centrado en aumentar el rendimiento.
Virosolve Pro utiliza de Millipore de doble membrana de PES en el que la membrana de
nano filtracin est protegida por una membrana de adsorcin que se pueden eliminar los
agregados. Ha sido demostrado que este mdulo ofrece una mayor capacidad de
retencin y el rendimiento en comparacin con los filtros virales tradicionales.

LOS AVANCES EN LA FILTRACIN DE SKID / HARDWARE

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La seleccin del hardware es crtica ya que el equipo debe ser econmico de usar y debe
cumplir con los requisitos normativos, operativos y de seguridad. En el caso de
separaciones basadas en membranas, algunas de las caractersticas clave de hardware.
Las separaciones de membrana-base en Biotecnologa incluir un volumen mnimo de
retencin (de piernas muertas y longitud de tubo), una bomba adecuada que proporciona
las velocidades de flujo requeridas precisin sin daar el producto de cizallamiento, una
limpieza eficiente en el lugar (CIP) y cocer al vapor en su lugar (SIP) de protocolo, el
procesamiento automatizado, y un archivado de datos eficiente y sistema de anlisis.
La filtracin de las materias primas para piensos concentrados viscosos o es a menudo
empaado por la obstruccin de la membrana. Tasa o mdulos con especialmente de
flujo cruzado de alta pantallas diseadas que crean turbulencia cerca de la superficie de la
membrana se generan aliado utilizado para dicho tratamiento. El sistema de filtracin Pall
Sep de Life Pall ciencias es uno de tales sistemas. Se basa en la filtracin de membrana
vibratoria (VMF) operacin, en la que el mdulo de filtracin vibra durante el
procesamiento debido al movimiento de torsin de la placa de ssmica conectado a la
membrana por barra de torsin.

Figura 2.- El sistema de filtracin Pall Sep de Life

Pall
En separaciones basadas en membranas, la bomba es la causa principal del dao a las
protenas debido a la cizalladura que genera. Cavitacin y la gran superficie rea de la
cara de las micros burbujas producidas en zonas de baja presin en todas las cuchillas de
la bomba causan dao a las protenas mediante la alteracin de la conformacin de
protenas.
Los sistema de filtracin de Pall cadencia es un sistema de filtracin de una sola pasada
con un mdulo especial que permite la eliminacin de la bomba de mltiples diseado.

LOS AVANCES EN LAS PRCTICAS DE FILTRACIN

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La ultrafiltracin convencional requiere una diferencia mayor de 10 veces entre las

diferentes especies para conseguir la separacin aceptable.
Dos enfoques, a saber, de alto rendimiento de filtracin de flujo tangencial (HPTFF) y
filtracin de flujo en cascada, han sido capaces de reducir significativamente la diferencia
de tamao requerido.
El alto rendimiento de filtracin de flujo tangencial (HPTFF) se basa en el principio de que
a pesar de las separaciones basadas en membranas son generalmente de tamao
basado, la transmisin de protenas es fuertemente dependiente de la electrosttica,
interacciones y carga de las protenas, sobre todo en el caso de las membranas cargadas.
En HPTFF, las molculas de tamao similar se pueden separar sobre la base de
diferencias en la carga. La carga de la protena determina el espesor de la capa inica,
que a su vez determina el tamao efectivo de la protena. Una protena dada tiene el
tamao ms pequeo en su punto isoelctrico (carga neta cero).
Dado que la presencia de iones reduce el espesor de la capa inica alrededor de la
superficie de la protena, el efecto del pH en el tamao eficaz de una protena es ms alta
en menor resistencia inica. La resolucin puede mejorarse an ms por el uso de
membranas cargadas.
Filtracin de flujo en cascada es otra prctica de filtracin para la eficiente separacin de
las protenas de tamao similar. Un flujo tangencial contracorriente ultrafiltracin (filtracin
de flujo en cascada) de configuracin ha sido utilizado para separacin de las protenas
utilizando las membranas de ultrafiltracin. Los mdulos de la membrana se conectaron
en la serie y se utiliz el flujo en contracorriente de la alimentacin y barrido = diafiltracin
Las membranas con diferentes puntos de corte de peso molecular tambin se pueden
usar para la separacin eficiente.

Figura 3.- Membrana de Ultrafiltracin.

TECNOLOGA DE FILTRACIN DESECHABLE
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El uso de tecnologas desechables es una tendencia emergente.

Existen varias razones por las que una empresa puede elegir para adoptar estas
tecnologas.
El aumento de la flexibilidad operativa y menor inversin de capital son deseables tanto
para las pequeas empresas que se centran en reducir al mnimo el costo y para
establecer, multi producto, las grandes empresas que desean rpidamente aumentar su
capacidad de produccin.
La decisin de utilizar materiales desechables tambin podra ser parte de una estrategia
de gestin de riesgos para una empresa. Estas tecnologas tambin ofrecen una manera
ms rpida a la comercializacin, ya que permiten el desarrollo de procesos de alto
rendimiento y la puesta en prctica y significativamente a reducir los costos mediante la
eliminacin de pasos como el CIP y SIP, junto con los principales porciones de proceso y
la validacin equipo.
Las tecnologas desechables han sido ampliamente utilizados para las partes de
procesamiento de aguas arriba, su uso en el procesamiento de aguas abajo ha sido
alguien lo que limita.
A menudo las empresas utilizan una combinacin de reutilizables y tecnologas
desechables basados en los factores pertinentes econmicos y tecnolgicos.
De las diferentes operaciones unitarias empleadas en aguas abajo procesamiento, las
separaciones basadas en membranas son sin duda la operacin ms adecuada que se
lleva a cabo utilizando tecnologas desechables.
ALTO RENDIMIENTO DESARROLLO DE PROCESOS DE FILTRACIN
Desarrollo y comercializacin de productos biotecnolgicos estn sintiendo aumento de la
presin para contener los costos y al mismo tiempo generar un mayor nivel de producto y
la comprensin de los procesos.
El desarrollo del proceso de una etapa de membrana normalmente implica optimizacin
de las variables clave en el diseo, como la presin y flujo de permeado para lograr un
alto rendimiento y ensuciamiento mnimo.
La absorbancia, conductividad y pH del permeado se controlan continuamente para la
determinacin del ptimo pH y concentracin de sal. La demostracin exitosa de este
enfoque se ha realizado para la ultrafiltracin de las protenas de suero bovino albmina,
albmina de suero humano, y un anticuerpo monoclonal.

MEMBRANAS ADSORBENTES
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Los avances en gentica molecular y la ingeniera bioqumica han dado lugar a un

aumento significativo en los ttulos de productos bioteraputicos.
La necesidad de tecnologas que pueden sustituir uno o ms cromatografa pasos en el
proceso se ha destacado en la literatura.
La cromatografa de membrana es una alternativa potencial a la convencional
cromatografa de lecho empaquetado. Sus ventajas incluyen la reduccin de hardware,
requisito, la facilidad operativa, y ms corto tiempo de procesamiento.
Membrana adsorbedores son membranas microporosas con adsorbente ligando injertado
sobre la superficie de los poros.
El transporte de molculas en tales membranas es principalmente impulsado por
conveccin con la difusin de poros muy limitada en comparacin con cromatografa en
columna de lecho fijo.

Figura 4.- Cromatografa de Membrana.

Hay algunas limitaciones que surgen durante el uso de la membrana adsorbente cuando
se comparan con cromatografa de lecho fijo convencional. Estas incluyen distorsin de
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flujo de entrada, grosor de la membrana irregular, de tamao de poro irregular, falta de

dispositivos de escala hacia abajo, y una menor capacidad de unin.
La siguiente tabla resume algunas de las recientes aplicaciones que implican el uso de
adsorbentes de membrana. La mayora de ellos implican la eliminacin de impurezas
(cidos nucleicos, protenas de clulas husped, endotoxinas y virus) de la alimentacin
corriente en el modo de flujo continuo.

Tabla 1.- Aplicaciones que implican el uso de adsorbentes de membrana.

La Cromatografa de membrana ya ha encontrado un lugar en algunos de los procesos
comerciales a nivel mundial y esperamos que este pase a ser ms popular en los
prximos tiempos. Para los casos en que la columna de cromatografa est siendo
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operada en un modo de flujo continuo y otros tales casos, este paso ofrece una alternativa
convincente a cromatografa de lecho fijo tradicional.

Figura 5.- Cromatografa de Membrana.