6.

CALIBRACIN
6.1. Introduccin
La medida de la concentracin mediante un mtodo instrumental se basa en la
existencia de una relacin proporcional entre dicha concentracin y la seal analtica o
respuesta que genera un instrumento.
Generalmente esta relacin es lineal, de modo que puede expresarse como:

y =a+bCA

donde CA es la concentracin del analito, y la seal medida, a la ordenada en el origen

y b la pendiente de la recta.
La ecuacin de la recta se obtiene mediante calibracin con disoluciones de
concentracin perfectamente conocida (disoluciones patrn) a partir de la medida de la
seal analtica proporcionada por stas. Los pares de valoresconcentracin-seal se
ajustan a una recta, a partir de la cual pueden obtenerse la concentracin del analito
en muestras desconocidas.

6.2. Preparacin de la recta de calibrado

En general, la etapa de calibracin y la obtencin de la concentracin de

analito en una muestra consta de los siguientes pasos:

Paso 1: Preparacin de los patrones

Paso 2: Obtencin de la relacin seal-concentracin

Paso 3: Uso de la recta de calibrado

Paso 1: Preparacin de los patrones

Se preparan patrones del analito que cubran un intervalo adecuado de
concentraciones, y se mide la seal analtica proporcionada por los
mismos.

Disoluciones del analito de concentracin conocida y creciente

Paso 2: Obtencin de la relacin seal-concentracin

Se traza un grfico con las seales frente a la concentracin de analito y
se calcula la recta que "mejor" se ajusta a los datos mediante un ajuste
por mnimos cuadrados. De esta forma se obtiene la pendiente (b) y
la ordenada (a) en el origen que definen la recta.

Grfico seal-concentracin y recta ajustada por mnimos cuadrados

En la actualidad las calculadoras cientficas realizan el ajuste por mnimos cuadrados y,

dicho ajuste, tambin puede realizarse en el ordenador mediante la hoja de clculo EXCEL.

A continuacin se os da una plantilla para el ajuste por mnimos cuadrados mediante la hoja
de clculo EXCEL y dos tutoriales que os ayudarn a utilizar dicha plantilla y la
herramienta de grficos de dicho programa.

Pantilla EXCEL para el ajuste por mnimos cuadrados.

Tutorial 1 que explica como utilizar la plantilla de EXCEL.

Tutorial 2 que explica como utilizar la herramienta grficos de EXCELpara

obtener una recta ajustada por mnimos cuadrados.

Paso 3: Uso de la curva de calibrado

Se mide la seal analtica para las muestras desconocidas y se interpola
en la recta de calibrado para obtener valores de concentracin de
analito.

Obtencin de la concentracin de analito en las muestras a partir de la grfica y la recta

Finalmente, para obtener la concentracin de analito en la muestra hay que tener en

cuenta en los clculos las posibles diluciones a las que se ha sometido la muestra para
obtener las disoluciones M1, M2 y M3 de medida.

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