Sei sulla pagina 1di 13

1.

--Un microscopio simple es aquel que utiliza una sola lente de aumento. Es el microscopio ms
bsico. El ejemplo ms clsico es lalupa. El microscopio ptico estndar utiliza dos sistemas de

2.

lentes alineados.
--Se denomina microscopio compuesto a aquellos instrumentos que poseen ms de una lente de
objetivo. Estos se utilizan especialmente para analizar objetos transparentes o que se encuentran

3.

cortados en finas lminas.


El microscopio confocal permite reconstruir imgenes tridimensionales o incrementar el contraste a
travs de un colimador de orificio delimitante que permite eliminar la luz que queda desenfocada.

4.

Este microscopio se usa especialmente en biologa y en el estudio de semiconductores


Los microscopios de antimateria son instrumentos que se basan en una antipartcula de los
electrones (positrones) para brindar imgenes de alta calidad. Se lo utiliza para detectar defectos en
las superficies de semiconductores. Gracias a estos microscopios es posible detectar fallas en
materiales que antes eran imposibles de hallar. El microscopio de antimateria fue desarrollado por un

5.

grupo de cientficos alemanes


--El microscopio de campo obscuro enfoca un haz de luz muy intenso que tiene la forma de un
cono hueco y se concentra en la muestra a observar. El objeto dispersa la luz que recibe y se hace
visible en contraste con el fondo obscuro. Este microscopio se utiliza para observar elementos

6.

biolgicos sin pigmentar y transparentes


--El microscopio de contraste de fases es muy til para el estudio de clulas vivas ya que permite
observarlas sin que sea necesario teirlas.El efecto lo logra al utilizar las dbiles diferencias de los
ndices de refraccin de las diversas secciones de la clula. De esta manera, se obtiene una imagen

7.

en el que gracias a los contrastes se observan las diferentes secciones


--El microscopio de fluorescencia es una variacin del microscopio de luz ultravioleta en el que los
objetos son iluminados por rayos de una determinada longitud de onda. La imagen observada es el
resultado de la radiacin electromagntica emitida por las molculas que han absorbido la excitacin
primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onda. Para dejar pasar slo la emisin secundaria
deseada, se deben colocar filtros apropiados debajo del condensador y encima del objetivo. Se usa
para detectar sustancias con autofluorescencia (vitamina A) o sustancias marcadas con

8.

fluorocromos.
Los microscopios de luz polarizada son instrumentos que poseen dos polarizadores. Uno de ellos,
se ubica entre el condensador y la muestra mientras que el segundo se encuentra entre el
observador y la muestra. El material utilizado es el cuarzo ya que permite el paso de luz polarizada.
Estos microscopios se usan para identificar substancias cristalinas, amiloides, colgeno, asbesto,

9.

cristales de urato, slice, queratina, entre otros


Un microscopio electrnico es aqul que utiliza electrones en lugar de fotones o luz visible para
formar imgenes de objetos diminutos. Los microscopios electrnicos permiten alcanzar
ampliaciones hasta 5000 veces ms potentes que los mejores microscopios pticos, debido a que la
longitud de onda de los electrones es mucho menor que la de los fotones "visibles
9.1 microscopio electrnico de transmisin (TEM) utiliza un haz de electrones para observar una
muestra. Para lograr visualizar la muestra debe ser muy delgada para permitir que los electrones la
atraviesen para brindar la imagen.
microscopios es de un milln.

La capacidad mxima de aumento que tiene esta clase de

10. El microscopio petrogrfico o de polarizacin se utiliza para identificar y estimar cuantitativamente


los componentes minerales de lasrocas.
11. El microscopio de luz ultravioleta no es un dispositivo para observar directamente con la vista sino
que sus resultados se obtienen a travs de fotografas. Es ideal para analizar cidos nucleicos.
Los elementos pticos se componen de cuarzo y fluorita ya que el vidrio no puede utilizarse debido a
que no transmite la luz ultravioleta.
12. --Un microscopio ptico es un microscopio basado en lentes pticos. Tambin se le conoce
como microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro. El desarrollo
de este aparato suele asociarse con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los microscopios de
Leeuwenhoek constaban de una nica lente pequea y convexa, montada sobre una plancha, con un
mecanismo para sujetar el material que se iba a examinar (la muestra o espcimen). Este uso de una
nica lente convexa se conoce como microscopio simple, en el que se incluye la lupa, entre otros
aparatos pticos.
13. --Microscopio electrnico de barrido o SEM (Scanning Electron Microscope), es aquel que utiliza
un haz de electrones en lugar de un haz de luz para formar una imagen. Tiene una gran profundidad
de campo, la cual permite que se enfoque a la vez una gran parte de la muestra. Tambin produce
imgenes de alta resolucin, que significa que caractersticas espacialmente cercanas en la muestra
pueden ser examinadas a una alta magnificacin. La preparacin de las muestras es relativamente
fcil pues la mayora de SEMs slo requieren que estas sean conductoras.
14. microscopa de iones en campo (FIM) es una tcnica analtica empleada en ciencia de materiales.
El microscopio de iones en campo es una variedad de microscopio que puede ser usado para
visualizar la ordenacin de los tomos que forman la superficie de la punta afilada de una aguja de
metal
15. microscopio de sonda de barridoes aquel que tiene el transmisor en la parte exequimal del lente
(Objetivo 4x). Este microscopio electrnico utiliza una sonda que recorre la superficie del objeto a
estudiar
16. microscopio de efecto tnel es un instrumento para tomar imgenes de superficies a nivel
atmico. est basado en el concepto de efecto tnel. Cuando una punta conductora es colocada muy
cerca de la superficie a ser examinada, una corriente de polarizacin (diferencia de voltaje) aplicada
entre las dos puede permitir a los electrones pasar al otro lado mediante efecto tnel a travs del
vaco entre ellas.
17. El Microscopio de fuerza atmica es un instrumento mecano-ptico capaz de detectar fuerzas del
orden de los piconewtons. Al rastrear una muestra, es capaz de registrar continuamente
sutopografa mediante una sonda o punta afilada de forma piramidal o cnica
18. La microscopa virtual es un mtodo de revisin y transmisin de imgenes provenientes de
un microscopio a travs de redes informticas. Esto permite la visualizacin independiente de las
imgenes por grandes nmeros de personas en distintos lugares. Involucra la unin de tecnologas
pticas microscpicas y digitales

Aplicaciones del microscopio ptico


Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre todo en los campos de la ciencia en donde la estructura y la
organizacin microscpica es importante, incorporndose con xito a investigaciones dentro del rea de la
qumica (en el estudio de cristales), la fsica (en la investigacin de las propiedades fsicas de los materiales),

la geologa (en el anlisis de la composicin mineralgica y textural de las rocas) y, por supuesto, en el campo
de la biologa (en el estudio de estructuras microscpicas de la materia viva), por citar algunas disciplinas de
la ciencia.
Hasta ahora se da uso en el laboratorio de histologa y anatoma patolgica, donde la microscopa permite
determinadas aplicaciones diagnsticas, entre ellas el diagnstico de certeza del cncer, numerosas
estructuras cristalinas, pigmentos, lpidos, protenas, depsitos seos, depsitos de amiloide, etctera.
Parte mecnica del microscopio
Esquema de un microscopio ptico.
5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
La parte mecnica del microscopio comprende el pie, el tubo, el revlver, el asa, la platina, el carro y el tornillo
micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de
iluminacin; adems, permiten los desplazamientos necesarios para
el enfoque del objeto.

El pie y soporte: Constituye la base sobre la que se apoya el


microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es
rectangular. Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que
permite el sostn estable del mismo.

La columna o brazo:llamada tambin asa, es una pieza en


forma de C, unida a la base por su parte inferior mediante
una bisagra, permitiendo la inclinacin del tubo para mejorar la
captacin de luz cuando se utilizan los espejos. Sostiene el tubo
en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie.
*Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y los
tornillos de enfoque asociados al tubo o a la platina. La unin
con la base puede ser articulada o fija.

El tubo: tiene forma cilndrica. El tubo se encuentra en una carretera superior de la columna mediante
un sistema de cremalleras, las cuales permiten que el tubo se mueva mediante los tornillos. * Tubo: es la
cmara oscura que porta el ocular y los objetivos. Puede estar unida al brazo mediante una cremallera
para permitir el enfoque.

El tornillo macromtrico o macroscopico: girando este tornillo, asciende o desciende el tubo del
microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a un mecanismo de cremallera. Estos movimientos
largos permiten el enfoque rpido de la preparacin.

El tornillo micromtrico o microscopico: mediante el ajuste fino con movimiento casi imperceptible
que produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva
acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm, que se utiliza para precisar sus movimientos y
puede medir el espesor de los objetos.

Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de enfoque, mueven la platina o el tubo hacia arriba y

hacia abajo. El macromtrico lo hace de forma rpida y el micromtrico de forma lenta, para un enfoque
ms preciso. Pueden llevar incorporado un mando de bloqueo que fija la platina o el tubo a una
determinada altura.
La platina: es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se va a

observar. Presenta un orificio, en el eje ptico del tubo, que permite el paso de los rayos luminosos a la
preparacin. La platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser
giratoria; es decir, mediante tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio central, sobre el que se coloca la preparacin, que
permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminacin situada por debajo. Dos pinzas
sirven para retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de cremallera guiado por dos tornillos de
desplazamiento permite mover la preparacin de adelante hacia atrs o de izquierda a derecha y
viceversa. Puede estar fija o unida al brazo por una cremallera para permitir el enfoque.
Las pinzas: son dos piezas metlicas que sirven para sujetar la preparacin. Se encuentran en la

platina.
El revlver: es una pieza giratoria provista de orificios en los que se enroscan los objetivos. Al girar

el revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, lo que se nota por
el ruido de un pin que lo fija. 7 * Revlver: Es el sistema que porta los objetivos de diferentes
aumentos, y que rota para poder utilizar uno u otro, alinendolos con el ocular.
Sistema ptico
El sistema ptico es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que
lo componen. Est formado por el ocular y los objetivos. El objetivo proyecta una imagen de la muestra que el
ocular luego ampla.

El ocular: se encuentra situado en la parte superior del tubo. Su nombre se debe a la cercana de la
pieza con el ojo del observador. Tiene como funcin aumentar la imagen formada por el objetivo. Los
oculares son intercambiables y sus poderes de aumento van desde 5X hasta 20X. Existen oculares
especiales de potencias mayores a 20X y otros que poseen una escalamicromtrica; estos ltimos tienen
la finalidad de medir el tamao del objeto observado. Ocular: lente situada cerca del ojo del observador.
Capta y ampla la imagen formada en los objetivos.
Los objetivos: se disponen en una pieza giratoria denominada revlver y producen el aumento de

las imgenes de los objetos y organismos, y, por tanto, se hallan cerca de la preparacin que se
examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos: objetivos secos y objetivos de
inmersin. 2 * Objetivo: lente situada en el revolver. Ampla la imagen, es un elemento vital que permite
ver a travs de los oculares

Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la
preparacin. En la cara externa llevan una serie de ndices que indican el aumento que producen, la
abertura numrica y otros datos. As, por ejemplo, si un objetivo tiene estos datos: plan 40/0,65 y

160/0,17, significa que el objetivo es planacromtico, su aumento 40 y su apertura numrica 0,65,


calculada para una longitud de tubo de 160 mm. El nmero de objetivos vara con el tipo de
microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los objetivos secos ms frecuentemente
utilizados son: 4X, 10X, 20X, 40X y 60X.

El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes. Para


observar a travs de este objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo
y la preparacin, de manera que la lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro.
Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue por uno o dos crculos o anillos de color
negro que rodea su extremo inferior.

Sistema de iluminacin
Este sistema tiene como finalidad dirigir la luz natural o artificial de tal manera que ilumine la preparacin u
objeto que se va a observar en el microscopio de la manera adecuada. Comprende los siguientes elementos:
Fuente de iluminacin: se trata clsicamente de una lmpara incandescente de tungsteno sobrevoltada; en
versiones ms modernas con leds. Por delante de ella se sita un condensador (una lente convergente) e,
idealmente, un diafragma de campo, que permite controlar el dimetro de la parte de la preparacin que
queda iluminada, para evitar que exceda el campo de observacin produciendo luces parsitas.

El espejo: necesario si la fuente de iluminacin no est construida dentro del microscopio y ya


alineada con el sistema ptico, como suele ocurrir en los microscopios modernos. Suele tener dos caras:
una cncava y otra plana. Goza de movimientos en todas las direcciones. La cara cncava se emplea de
preferencia con iluminacin artificial, y la plana, para natural (luz solar). Los modelos ms modernos no
poseen espejos sino una lmpara que cumple la misma funcin que el espejo.

Condensador: est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos
luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo ngulo que el del
campo del objetivo. El condensador se sita debajo de la platina y su lente superior es generalmente
planoconvexa, quedando la cara superior plana en contacto con la preparacin cuando se usan objetivos
de gran abertura (los de mayor ampliacin); existen condensadores de inmersin, que piden que se llene
con aceite el espacio entre esa lente superior y la preparacin. La abertura numrica mxima del
condensador debe ser al menos igual que la del objetivo empleado, o no se lograr aprovechar todo su
poder separador. El condensador puede deslizarse verticalmente sobre un sistema de cremallera
mediante un tornillo, bajndose para su uso con objetivos de poca potencia. Condensador: lente que
concentra los rayos luminosos sobre la preparacin.

Diafragma: el condensador est provisto de un diafragma-iris, que regula su abertura para ajustarla
a la del objetivo. Puede emplearse, de manera irregular, para aumentar el contraste, lo que se hace
cerrndolo ms de lo que conviene si se quiere aprovechar la resolucin del sistema ptico. 4
* Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al condensador

Tcnica histolgica
Se denomina tcnica histolgica al conjunto de
operaciones a que se somete una materia
organizada (tejido biolgico), a fin de que sea posible su estudio por medio del microscopio, posibilitando la
observacin de estructuras no visibles al ojo humano.
Pasos de la tcnica histolgica

Obtencin del material histolgico para estudiar

Proceso de fijacin

Lavados

Deshidratacin

Aclaramiento

Infiltracin

Inclusin

Microtoma

Tincin

Observacin (Este ltimo no es considerado como un paso de la tcnica histologica por varios

autores)
Obtencin del material histolgico
Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas:

Biopsia

Abiopsia

Necropsia (llamada vulgarmente autopsia)

Fijacin
En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora para evitar los cambios post-mortem. Unos
de los fijadores ms usado es el formol al 10% (formaldehido). En el caso de que utilicemos ms adelante el
microscopio electrnico, usaremosglutaraldehdo (para protenas) u osmio (para lpidos).
Lavados
Se debe lavar el tejido para quitar el exceso de fijador.
Deshidratacin
Suena incoherente que se deba lavar el tejido y despus deshidratarlo. El exceso de fijador al momento de la
infiltracin, incluso en la microtoma, podra afectar los cortes histolgicos, y por ello se debe lavar. La
deshidratacin se hace empleando diferentes soluciones de alcohol de concentracin creciente.
Aclaramiento
En este paso se sustituye el alcohol por un disolvente de parafina. El ms usado es el xilol (xileno) ya que
como la muestra est deshidratada, el xilol entrar hasta lo ms profundo del tejido. Tambin el tejido pierde
color y adquiere un tono acaramelado.
Infiltracin
En este paso la muestra se coloca en parafina lquida, cabe mencionar que se debe usar parafina histolgica.
Como se ha dicho en el paso anterior el tejido est completamente lleno de xilol, ahora debido a smosis sale
el xilol y entra la parafina.
La deshidratacin, aclaramiento e infiltracin pueden ser realizadas manualmente pero hoy en da se realizan
de modo automtico en mquinas especficas.
Inclusin
Aqu se forman bloques de parafina dentro de los cuales estn las muestras a estudiar. Tambin hay
maquinas especializadas para la inclusin en parafina de tejidos. Despus de su inclusin y posterior secado,
estos se deben poner a enfriar en un congelador para su posterior corte.

Microtoma
Se realizan cortes histolgicos muy delgados segn lo requerido o la costumbre del laboratorio donde se
realice la tcnica. Los cortes van desde 0,5 micras hasta 8 u 10 micras. Los cortes se echan al bao de
flotacin y se pescan con un portaobjetos, se marcan con la fecha, el tipo de tejido y la tincin con que se
van a procesar. El ngulo de corte entre el cuchillo del microtomo y el bloque ha de estar entre 10 y 15. Una
vez realizado el corte se da un bao de agua destilada, para que la parafina se estire. Un buen corte
histolgico debe tener un grosor aproximado de 3-5 micras para que sea fcilmente atravesado por la luz.
Tincin
Hay muchos tipos de tinciones para diferenciar en los tejidos las diferentes estructuras o sustancias.
La tincion ms usada o tambin llamada "de rutina" es la de hematoxilina y eosina (H&E). Se usa un colorante
llamado hematoxilina que tie las sustacias cidas o que las contengan, como el ncleo que contiene cido
desoxirriboncleico (ADN) La eosina amarillenta tie las estructuras bsicas como el citoplasma y dems
orgnulos eosinoflicos de la clula.
Otra tincin muy usada es la de Papanicolau Usa colorantes como:

OG6

EA50

Hematoxilina de Harris o Bsica segn el caso

Esta tincin es muy usada para teir excreciones corporales como saliva, orina, etc. (La sangre NO es una
excrecin sino un fluido corporal.)
Como se mencion anteriormente hay muchas tinciones Otros ejemplos son:

Masson

PASCHIFF

Perls

Plata metenamina

Warthin-Starry

Ziehl-Neelsen

Van Gieson

Azul alciano

Sudn III

Rojo Congo

Observacin
Como se menciono al principio algunos autores no consideran la observacin como un paso de la tcnica
histolgica sino el objetivo final de la misma. Como se puede deducir, se observa la laminilla al microscopio y
se busca lo que se necesite ver para llegar a un diagnostico.
La tcnica histolgica es muy empleada en laboratorios y hospitales. Permite hacer diagnsticos de distintas
enfermedades, como para saber si un tumor es maligno o beningno, etc.

Pasos a seguir para observar una preparacin al microscopio ptico


1.

Para comenzar, se coloca en objetivo de menor poder de aumento en posicin de trabajo.


Bajamos la platina hasta el tope inferior, todo lo que se pueda. Este primer paso podemos saltarlo si
hemos dejado el microscopio, como veremos al final, guardado de la forma ms correcta, es decir, si lo
dejamos guardado en estas condiciones.

2.

Pasamos a colocar la preparacin sobre la platina de forma que la muestra quede centrada en el
orificio por el que pasar la luz. El portaobjetos debe quedar firmemente sujeto por las pinzas metlicas
que en la platina.

3.

Ahora ya podemos comenzar con la observacin. Se empieza con el objetivo de menor poder de
aumento que hemos puesto en posicin en el primer paso. Este normalmente es el de 4x. Podemos
pasar directamente al objetivo de 10x en caso de preparaciones de bacterias o clulas de tamao
similar. Pasamos a realizar el enfoque.

4.

Enfoque de la preparacin al microscopio:


1.

Lo primero es acercar la preparacin lo mximo posible a la lente del objetivo. Para


ello utilizamos el tornillo macromtrico mirando desde el exterior, no mirando a travs del ocular.
Si lo hacemos a travs del ocular corremos el riesgo de que acerquemos demasiado, incluso que
forcemos el objetivo contra la preparacin pudiendo daar tanto el objetivo como la muestra.

2.

Ahora ponemos los ojos sobre el ocular y mirando a travs de el procedemos a


realizar el enfoque grueso. Moviendo el tornillo macromtrico lentamente vamos separando la
preparacin del objetivo. Llegar un momento en que veamos la muestra de forma ms o menos
ntida; en este momento dejamos de mover el macromtrico y pasamos a mover el tornillo
micromtrico para ajustar de forma ms precisa el enfoque (enfoque fino).

5.

Tras enfocar la muestra utilizando un objetivo de pocos aumentos, pasamos al siguiente objetivo
de mayor aumento. La imagen puede desenfocarse un poco y tendremos que ajustar el enfoque con el
tornillo micromtrico. En algunas ocasiones puede ocurrir que al pasar a un objetivo de mayor aumento
se pierda por completo la imagen; en este caso ser mejor pasar de nuevo al objetivo anterior y volver a
realizar el enfoque. As vamos pasando a objetivos de mayores aumentos. A ms aumentos, el objetivo
enfoca de forma ms cercana a la preparacin. Por ello hay que tener cuidado de que el objetivo no
toque la muestra, pues se puede estropear tanto la lente del objetivo como la propia preparacin.
Tambin puede ocurrir que no se estropee pero que se manche de aceite de inmersin si se est

observando una preparacin que ya se haba observado con el objetivo de inmersin. En este ltimo
caso habr que limpiar la lente del objetivo de forma adecuada.
6.

Cmo usar el objetivo de inmersin: El objetivo de inmersin del microscopio ptico se


sumerge en un aceite, llamado aceite de inmersin (comnmente aceite de cedro). Para utilizar el
objetivo de inmersin hay que seguir estos pasos:
1.

Bajamos totalmente la platina.

2.

Subimos el condensador todo lo que podamos para que se visualice de forma clara y
ntida el crculo que se ilumina en la muestra. En este crculo ser dnde pondremos una gota del
aceite de inmersin.

3.

Giramos el revlver dnde van los distintos objetivos del microscopio hasta que quede
en una posicin media entre el objetivo del inmersin y el anterior. As nos queda el espacio libre
para colocar el aceite sin ningn obstculo.

4.

Ponemos una gota de aceite de inmersin en el crculo de luz que se debe visualizar
ntidamente en la preparacin. Una gota es una gota, ni dos ni tres. Hay que poner la cantidad
mnima que podamos.

5.

Giramos el revlver para colocar el objetivo de inmersin en posicin de trabajo.

6.

Mirando desde fuera del microscopio, no a travs del ocular, acercamos la platina al
objetivo hasta que la lente frontal del objetivo entre en contacto con el aceite de inmersin. Este
acercamiento hay que realizarlo de forma lenta. En cuento el aceite y la lente entren en contacto,
paramos.

7.

Pasamos a mirar a travs del ocular y enfocamos con el tornillo micromtrico. Hay que
realizar el enfoque con cuidado, la distancia entre la preparacin y el objetivo es realmente corta!!!

8.

Tras poner el aceite de inmersin sobre la preparacin, hay que volver a realizar el
enfoque desde el principio si queremos volver a mirar con un objetivo diferente al objetivo de
inmersin. De lo contrario se corre el riesgo de manchar la lente de los objetivos.

9.

Cundo terminemos de observar la preparacin y queramos retirarla, primero bajamos


la platina y luego giramos el revlver para dejar el objetivo de menor aumento en posicin de
trabajo. Ahora ya podemos retirar la preparacin con menor riesgo de daar algn objetivo y de
forma ms cmoda.

10.

Por ltimo, antes de guardar el microscopio, limpiamos el objetivo de inmersin y los


oculares con papel especial que no ralle las lentes y que absorba el aceite.

Colorantes histolgicos ms comunes


Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las clulas o tejidos, y estas
propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o reas especficas. Algunos de los
colorantes biolgicos ms comunes se listan ms abajo. A menos que se indique lo contrario la mayora de
estos colorantes se utilizan con clulas y tejidos fijados. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con
organismos vivos) se encuentran destacadas.

Azul brillante de Coomassie


Coomassie blue (tambin conocido como azul brillante) es un colorante que tie en forma no especfica a
todas las protenas con un fuerte color azul. Se utiliza frecuentemente para teir las corridas de protenas en
las electroforesis en gel.
Azul de metileno
Azul de metileno se utiliza para teir clulas animales, para hacer ms visibles sus ncleos. Es tambin
utilizado para teir los extendidos de sangre para ser utilizados en citologa y como colorante vital en el
recuento de reticulocitos.
]Azul Nilo
El Nile blue (o Nile blue A), es decir azul Nilo, tie a los ncleos de color azul. Tambin puede ser utilizado
para teir clulas vivas.
Bismarck brown
Bismarck brown, Marrn Bismarck, (tambin conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le
imparte un color amarillo a lasmucinas cidas. Se puede utilizar con clulas vivas.
Bromuro de etidio
El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. A pesar de que
no es capaz de teir clulas vivas ya que no atraviesa las membranas intactas, puede ser utilizado para
identificar clulas que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis, ya que tales clulas poseen unas
membranas mucho ms permeables. Por el mismo motivo, el bromuro de etidio es utilizado como un
marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida
enelectroforesis en gel. Este colorante puede ser utilizado en combinacin con naranja de acridina (NA) en el
conteo de clulas viables. Esta tincin combinada BE/NA le otorga a las clulas vivas un color verde
fluorescente mientras que las clulas apoptticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja.
Carmn
El carmn es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teir
glicgeno, mientras que las sales de alumbre-carmn son colorantes que se adhieren al ncleo. Las tinciones
con carmn requieren del uso de un mordiente, que usualmente es aluminio o alumbre.
Cristal violeta
El cristal violeta, al ser combinado con un mordiente adecuado, tie las paredes celulares de color prpura. El
cristal violeta es un componente importante en la coloracin de Gram.
DAPI
El DAPI es un colorante nuclear (tie el ncleo) fluorescente, se excita con luz ultravioleta para producir una
fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN. El DAPI se une a las regiones de alta repeticin
A=T en los cromosomas. Adems no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisin corriente.
Puede ser utilizado en clulas vivas o fijadas. La tcnica de tincin con DAPI es especialmente adecuada para
el recuento celular.6

Hematoxilina Tipo Bsica / Acidoflica


Caractersticas: Tie ncleos, cidos nucleicos y estructuras basoflicas (mitocondrias y ribosomas) en azul.
Uso: Tincin histolgica general
Eosina
La eosina se utiliza ms frecuentemente como contracoloracin de la hematoxilina, impartiendo un color que
va del rosado al rojo al material citoplasmtico, membrana celular, y algunas estructuras extracelulares.
Adems imparte un fuerte color rojo a los eritrocitos. La eosina puede ser utilizada tambin en algunas
variantes de la coloracin de Gram, y en muchos otros protocolos de tincin. De hecho existen dos
compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina. El ms
frecuentemente utilizado es la eosina Y (tambin conocida como eosina amarillenta) ya que posee una
tonalidad amarillenta muy suave. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B, tambin conocida
como eosina azulada o rojo imperial, la cual posee una suave tonalidad azul. Los dos colorantes son
intercambiables, y el la utilizacin de uno u otro es ms una cuestin de preferencia y tradicin.
colorantes cidos: como por ejemplo la eosina, colorante cargado en forma negativa, se une a
componentes celulares cargados positivamente. Estos componentes cargados positivamente se denominan
acidfilos, porque tienen afinidad por los colorantes cidos. Por ejemplo, estos colorantes se unen a
grupos aminos de las protenas. Estas protenas pueden pertenecer al citoesqueleto de la clula o hallarse en
la matriz extracelular. Debido al elevado contenido de protenas del citoplasma la eosina es un excelente
colorante citoplasmtico. La eosina se une tambin a las membranas plasmticas, sin embargo, se desconoce
la naturaleza qumica de esta unin. Las clulas que presentan un gran desarrollo de membranas (muchas
mitocondrias, mucho retculo endoplasmtico liso, etc.) son sumamente acidfilas, o sea, se tien
intensamente con la eosina.
colorantes bsicos: como por ejemplo el azul de metileno, colorante cargado positivamente, se une a
componentes celulares cargados negativamente. Estos componentes cargados negativamente se denominan
basfilos, porque tienen afinidad por los colorantes bsicos. Por ejemplo, estos colorantes se unen al ncleo y
ciertas regiones del citoplasma.
Como caso particular, la hematoxilina no tiene carga, para teir un tejido se la une a un mordiente que junto a
la hematoxilina forman una laca. La laca es bsica y por lo tanto se une a cargas negativas de la clula o
matriz extracelular

Potrebbero piacerti anche