Introduccin

Todas las clulas, tejidos y organismos de los que ellas forman parte son sistemas
qumicos complejos que contienen toda la informacin necesaria para crecer y
reproducirse a expensas de la energa y de las materias primas del medio
ambiente. Esto se lleva a cabo debido al contacto que tiene la clula y organismo
en general con compuestos tanto inorgnicos como orgnicos.
El agua es un compuesto inorgnico que est formado por dos tomos de

hidrgeno y uno de oxigeno. Este puede encontrarse en estado lquido, slida o

gaseosa. Posee propiedades fsico-qumicas tales como fuerzas de cohesin o
sea una fuerte tendencia a unirse entre s, y una de adhesin, es decir, la
capacidad de unirse a otras sustancias, de las cuales depende su alto grado de
tensin superficial, de capilaridad e imbibicin (Anderson, 1991)
Los compuestos orgnicos son sustancias qumicas que contienen carbono,
formando enlaces covalentes carbono-carbono y/o carbono hidrgeno. En muchos
casos contienen oxgeno, nitrgeno, azufre, fsforo y otros elementos. Estos
compuestos se denominan Molculas Orgnicas, de las cuales en los organismos
se encuentran cuatro tipos diferente en mayor cantidad, estos son: carbohidratos,
lpidos, protenas y cidos nucleicos. (Spencer, 2004)
Los glcidos, carbohidratos o hidratos de carbono son biomolculas compuestas
por carbono, hidrgeno y oxgeno y cuyas principales funciones en los seres vivos
son el prestar energa inmediata y estructurales. La glucosa y el glucgeno son las
formas biolgicas primarias de almacenamiento y consumo de energa;
la celulosa cumple con una funcin estructural al formar parte de la pared
celular de las clulas vegetales, mientras que la quitina es el principal
constituyente del exoesqueleto de los artrpodos. (Mozaffarian, 2006)
Los lpidos son un conjunto de molculas orgnicas compuestas principalmente
por carbono e hidrgeno y en menor medida oxgeno, aunque tambin pueden
contener fsforo, azufre y nitrgeno. Tienen como caracterstica principal el
ser hidrfobas (insolubles enagua) y solubles en disolventes orgnicos como
la bencina, el benceno y el cloroformo. Los lpidos cumplen funciones diversas en
los organismos vivientes, entre ellas la de reserva energtica (como
los triglicridos), la estructural (como los fosfolpidos de las bicapas) y la
reguladora (como las hormonas esteroides). (Donatelle, 2005)

Las protenas son molculas formadas por cadenas lineales de aminocidos que
se mantienen unidos a travs de enlaces peptdicos. Por sus propiedades fsicoqumicas, las protenas se pueden clasificar en protenas simples o holoproteidos y

protenas conjugadas o heteroproteidos. Las protenas desempean un papel

fundamental para la vida y son las biomolculas ms verstiles y diversas. Son
imprescindibles para el crecimiento del organismo y realizan una enorme cantidad
de funciones diferentes, entre las que destacan: estructural, inmunolgica,
enzimtica, contrctil, homeosttica, transduccin de seales y protectora o
defensiva. (Fulton, 1991)
Los cidos nucleicos son grandes polmeros formados por la repeticin de
monmeros denominados nucletidos, unidos mediante enlaces fosfodiester que
estn formados por una pentosa, un grupo fosfato y una base nitrogenada. Existen
dos tipos bsicos, el cido ribonucleico (ADN) y el cido desoxirribonucleico
(ARN). Estos almacenan la informacin gentica de los organismos vivos y son los
responsables de la transmisin hereditaria. (Dahm, 2008)

Objetivos

Observar e identificar diferentes componentes orgnicos en clulas

eucariontes, tanto animal como vegetal.

Asociar las funciones de los componentes con el tejido a analizar.

Notar y destacar el uso de la tcnica de tincin utilizada para la observacin

de la ubicacin especfica de cada componente en diferentes tejidos.

Realizar cuidadosamente un corte de tubrculo de papa para su posterior

tincin y observacin.

Notar la diferencia del corte del tubrculo de papa no teido con el corte de
tubrculo despus de aplicar la tcnica de tincin.

Materiales y mtodos
A travs del Microscopio ptico se observaran muestras con sus determinadas
tinciones, para luego comprobar la presencia de macromolculas. Para esto lo
primero que debe realizarse es conectar al enchufe el cable del M.O., luego
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presionar la perilla de encendido, verificar que se encuentra enfocado con el

menor de lo objetivos (3,2X), posteriormente se toma la muestra a analizar y con
ayuda de los tornillos focalizadores lograr la distancia focal adecuada para ver con
mayor nitidez la muestra. Seguidamente localizamos la estructura que deseamos
ver y se procede a repetir nuevamente lo mismo hasta el objetivo 40X, con el cual
se logra ver con mayor aumento la estructura molecular que deseamos ver, por lo
que se debe observar detalladamente tanto la estructura como el entorno,
ubicacin y contexto en el cual se encuentra. Cuando lo anteriormente
mencionado se ha realizado se debe dibujar, pintar y rotular en el cuaderno de
prctico lo que observa en la muestra. Posteriormente debe realizarse con todas
las muestras propuestas en la gua de prctico, o sea de tejido muscular , heptico
y de piel.
Para el reconocimiento de la existencia de almidn se utilizar Solanum
tuberosum (papa). Para esto se debe ejecutar el siguiente procedimiento: Realice
un corte fino al tubrculo, depostelo sobre un porta objeto, agregue una gotita de
agua y proteja la muestra con un cubreobjeto, luego observe. Posteriormente
agregue una gota de lugol en un extremo de la muestra y observe en el M.O..
Reconozca la existencia de almidn, y su ubicacin especfica en la clula. Dibuje,
pinte y rotule lo observado.

Resultados

Corte Hgado

Fig. 1: Corte Hgado (Glucgeno)

Objetivo: Mayor
Aumento Total: 100X
Tincin: Acido peridico de Schiff - Hematoxilina
Observaciones Figura 1:
Una de las funciones del hgado es almacenar grandes cantidades de glucgeno
sintetizndolo a partir de la glucosa; el glucgeno es degradado cuando el cuerpo
necesita elevar los niveles de azcar manteniendo as el equilibrio de glucosa en
la sangre. En este corte de tejido heptico se puede observar entonces una gran
cantidad de este componente orgnico en forma de grnulos. La tcnica de tincin
utilizada (cido Periodico de Schiff - Hematoxilina) destaca al glucgeno de una
tonalidad rosada.

Corte Piel

Fig. 2: Corte piel (Melanina y Colgeno)

Objetivo: Mayor
Aumento total: 400X
Tincin: Warthin Starry
Observaciones Figura 2:
La piel no es de la misma tonalidad en una misma especie, sino, ms bien, vara
de tonos ms claros a ms oscuros. La tonalidad de la piel depende de la
melanina, un pigmento que se encuentra intracelularmente en la capa externa de
la piel, la epidermis. En nuestra muestra la tcnica Warthin Starry nos permite
visualizar melanocitos, clulas que sintetizan este componente, como pequeos
grnulos

de

una

pigmentacin

negra.

Otra caracterstica de la piel es que es un tejido resistente y flexible, esto se debe

a la presencia de colgeno. El colgeno es una protena conformada por largas
cadenas de aminocidos que se enrollan y enlazan entre s generando fibras que
le dan esta resistencia y flexibilidad a la piel. Por lo anterior en este corte de piel
podemos observar grandes cantidades de colgeno en forma de fibras
entrelazadas entre s en la dermis o segunda capa de la piel. La tcnica Warthin
Starry destaca al colgeno de diferentes tonalidades de amarillo-caf. Entremedio
de las fibras podemos visualizar tambin clulas incoloras que corresponden a los
fibroblastos, responsables de la sntesis de este componente.
Corte Piel
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Fig. 3: Corte piel (Membrana basal)

Objetivo: Mayor
Aumento total: 100X
Tincin: cido Peridico de Schiff - Hematoxilina
Observaciones Figura 3:
Las capas observadas en nuestra muestra anterior corresponden a la epidermis y
dermis, capas que tambin podemos observar en esta muestra ya que se trata de
un mismo tejido pero con diferente tcnica de tincin. La epidermis y la dermis en
nuestra muestra estn separadas por una membrana, llamada membrana basal.
La membrana basal la podemos observar en la parte inferior del epitelio
estratificado, esta contiene grandes cantidades de glucosaminglicanos, un
heteropolisacrido poco flexible, voluminoso e hidratado que mantiene a la
estructura de la membrana basal en un estado de gel permitiendo que esta
resista fuertes presiones mecnicas. El mtodo de tincin utilizado nos permite
visualizar a la membrana basal de una tonalidad rosada.

Corte Piel

Fig. 4: Corte piel (Histaminas)

Objetivo: Mayor
Aumento total: 400X
Tincin: Giemsa
Observaciones Figura 4:
En la dermis de la piel podemos encontrar clulas llamadas mastocitos. Los
mastocitos son capaces de sintetizar histaminas que son aminas, compuestos
qumicos orgnicos de diversas funciones. En este corte observamos gracias a la
tincin de Giemsa utilizada a los mastocitos de una tonalidad violeta, de forma
ms bien redondeada y de variada posicin en la parte superior y media de la
dermis.

Corte tubrculo papa

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Fig. 6: Corte tubrculo papa

Objetivo: Mayor
Aumento total: 400X
Tincin: Lugol
Observaciones Figura 6:
La papa posee una gran cantidad de almidn. El almidn es reservado en plastos
o plastidios llamados amiloplastos. En el corte realizado estos son observados con
tonalidades que pueden ser cafs, negros pasando por los violetas gracias al uso
del Lugol. Notamos que poseen una forma variada, redondeados, ovalados y
alargados. Tambin con algo de dificultad logramos identificar la pared celular que
se mostraba de forma ms bien rectangular y de tonalidad incolora.

Discusin
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Las distintas tcnicas de tincin utilizadas en un mismo tejido fueron cruciales para
nuestro prctico. Destacando en este caso el tejido de la piel. Se busc en este
tejido melanina, colgeno, membrana basal e histaminas. La tcnica de tincin de
Warthin Starry sirvi para destacar mejor la melanina y colgeno, en comparacin
a las tcnicas de tincin cido Peridico de Schiff Hematoxilina o Giemsa donde
no se logra distinguir o visualizar tan claramente dichos componentes. La tcnica
Warthin Starry ti notoriamente el colgeno de diferentes tonalidades de amarillocaf y fuertemente de negro a los melanocitos que secretan melanina. El cido
Peridico de Schiff - Hematoxilina por su lado nos destacaba la membrana basal
de color rosado, ya que el cido Peridico de Schiff tie a los carbohidratos de
este color (recordemos que la membrana basal posee glucosaminglicanos), esta
tcnica contrastada con hematoxilina nos permiti entonces visualizarla de una
manera ms eficiente. Por otro lado la tcnica de tincin Giemsa nos destac los
mastocitos, sintetizadores de histaminas de una tonalidad violeta.
El glucgeno (o glicgeno) es un polisacrido de reserva energtica formado por
cadenas ramificadas de glucosa; es insoluble en agua, en la que forma
dispersiones coloidales. Abunda en el hgado y en menor cantidad en los
msculos, as como tambin en varios tejidos. (William D. ,2006)
La melanina drmica es producida por los melanocitos. stos raramente se
encuentran en las capas superficiales de la epidermis. Sin embargo, aunque
generalmente todos los seres humanos poseen concentraciones similares de
melanocitos en su piel, se producen variaciones en algunos individuos y segn los
diferentes grupos tnicos. En este ltimo caso, la gentica interfiere confiriendo
una mayor o menor concentracin de melanina en la piel. Algunos individuos, tanto
en animales como en humanos, carecen de melanina, o bien tienen
concentraciones mnimas de ella, lo que produce la condicin conocida como
albinismo.(Agara, 2005)
El colgeno es una molcula proteica o protena que forma fibras, las fibras
colgenas. Estas se encuentran en todos los animales. Son secretadas por las
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clulas del tejido conjuntivo como los fibroblastos, as como por otros tipos
celulares. Es el componente ms abundante de la piel y de los huesos, cubriendo
un 25% de la masa total de protenas en los mamferos. (Devlin, 2004)
La clula cebada es el sitio predominante de almacenamiento de la histamina en
casi todos los tejidos; la concentracin de esta sustancia es particularmente
grande en tejidos que contienen gran nmero de dichas clulas, como piel y
mucosa del rbol bronquial y de las vas intestinales. ( Marieb, E. 2001)
Los glicosoaminglicanos son unas estructuras glucdicas, que suponen la fraccin
glucdica constituyente de los proteoglicanos, un tipo de biomolculas de funcin
estructural presentes fundamentalmente en el tejido conectivo, epitelial y seo, as
como en el medio intercelular. (Champe, 2004)
Las

clulas

del

tubrculo

de

patata

contienen

granos

de

almidn

(leucoplastos).(James,2009)

Referencias Bibliogrficas

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Fulton, A; Isaacs W (1991). Titin, a huge, elastic sarcomeric protein with a

probable role in morphogenesis. BioEssays
Spencer L, Seager y Michael R, Slabaugh (2004). Chemistry for Today: general,
organic, and biochemistry. Thomson Brooks/Cole.
Mozaffarian D, Katan MB, Ascherio A, Stampfer MJ, Willett WC (2006). Trans Fatty
Acids and Cardiovascular Disease. New England Journal of Medicine 354.
Donatelle, R. J. Health (2005). The Basics. 6 th ed. San Francisco: Pearson
Education.
Anderson (1991). Water Rights: Scarce Resource Allocation, Bureaucracy, and the
Environment.
Dahm (2008). Discovering DNA: Friedrich Miescher and the early years of nucleic
acid research. Human Genetics 122.
"Warthin-starry stain - Medical Definition and More from Merriam-Webster."
Dictionary and Thesaurus - Merriam-Webster Online. N.p., n.d. Web. Junio 2015.
<http://www.merriam-webster.com/medical/warthin-starry%20stain>.

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