PROCEDIMIENTO RECUENTO DE E COLI

EN ALIMENTOS UTILIZANDO
AGAR VRB-MUG
Seccin Microbiologa
de Alimentos
1.

PRT-712.00-037

Fecha emisin:
1996
Revisin: 4
Fecha revisin:
20-04-2009
Pgina 1 de 4

OBJETIVO

Enumerar los microorganismos E. coli presentes en una muestra de alimento

2.

CAMPO DE APLICACIN Y ALCANCE

Muestras de alimentos que se requiera realizar mtodo rpido de Recuento de E. coli

3.

FUNDAMENTO

La incorporacin de 4-methylumbelliferyl- beta- D- glucoronide (MUG) en Agar Rojo Neutro

permite la deteccin de E. coli de entre otras colonias coliformes a travs de la deteccin de la
actividad beta- glucoronidasa. E. coli produce la enzima beta-glucoronidasa la cual hidroliza el
MUG produciendo un compuesto fluorogenico detectable con luz UV a 366 nm.
Las cepas tpicas de E. coli, colonias rojas con precipitacin biliar, muestran fluorescencia. Los
coliformes que no son E. coli pueden producir colonias rojas con zonas de precipitacin biliar
pero son MUG negativas.
4.

REFERENCIAS

4.1

Bacteriological Analytical Manual Online Septiembre 2002 Capitulo 4, letra G

5.

TERMINOLOGA

5.1

No Aplica

PROCEDIMIENTO RECUENTO DE E COLI

EN ALIMENTOS UTILIZANDO
AGAR VRB-MUG
Seccin Microbiologa
de Alimentos

PRT-712.00-037

6.

MATERIALES, INSUMOS Y EQUIPOS

6.1

EQUIPOS

6.1.1

Todo lo requerido para el mtodo convencional, PRT-712.03-008

6.1.2

Lmpara UV 6 Watt

6.2

MATERIALES

6.2.1

Lentes UV

6.3

Fecha emisin:
1996
Revisin: 4
Fecha revisin:
20-04-2009
Pgina 2 de 4

MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS

6.3.1

Todo lo requerido para el mtodo convencional PRT-712.03-008

6.3.2

Agar VRB-MUG (100 ug. de MUG/ ml. de medio)

7.

DESARROLLO

7.1

TEST PRESUNTIVO

7.1.1

Realizar el mtodo convencional descrito en el punto 7 del PRT-712.03-008 Mtodo de

recuento en placa para la determinacin de coliformes en alimentos, utilizando agar
VRB-MUG.

7.1.2

Utilizar cepa de E. coli como control positivo.

7.1.3

Al trmino del perodo de incubacin, observar la fluorescencia de las colonias bajo luz
UV.

7.1.4

Anotar los resultados en el registro cdigo RG-712.00-072.

7.2

CLCULO Y EXPRESION DE RESULTADOS

7.2.1

Considerar para hacer el recuento aquellas colonias que presentan fluorescencia bajo la
luz UV.

7.2.2

Los resultados del Recuento de E. coli se expresan cuantitativamente en N ufc/g o mL.

de muestra.

PROCEDIMIENTO RECUENTO DE E COLI

EN ALIMENTOS UTILIZANDO
AGAR VRB-MUG
Seccin Microbiologa
de Alimentos
8.

PRT-712.00-037

Fecha emisin:
1996
Revisin: 4
Fecha revisin:
20-04-2009
Pgina 3 de 4

REGISTROS

Identificacin
Almacenamiento Proteccin
Recuperacin
del registro
RG-712.00-072.
Archivador
Bajo custodia Lab. Papel
Registro de resultados rotulado: Registro 348
anlisis de coliformes, de
Lectura
e
de
E. coli y Salmonella Informe
en
muestras
de Resultados
Lab
alimentos
348
RG-712.00-004
Archivador
Bajo custodia Lab. Papel
Registro cepas control rotulado: Registro 348
de incubadoras.
Cepas
Control
Incubadoras Lab
348
RG-712.00-006
Archivador
Bajo custodia Lab. Papel
Registro control de rotulado: Registro 348
esterilidad de medios Cepas
Control
de cultivo utilizados Incubadoras Lab
en el anlisis de 348.
coliformes, coliformes
fecales y Escherichia
coli

Tiempo retencin
y disposicin
Almacenar por 5
aos
y
luego
disponer en la
basura cortado en
trozos.

RG-712.00-050.
Archivador
Bajo custodia Lab. Papel
Registro control de rotulado: Registro 348
ambiente laboratorio Cepas
Control
Enterobacterias
Incubadoras Lab
348.

Almacenar por 5
aos
y
luego
disponer en la
basura cortado en
trozos.

Almacenar por 5
aos
y
luego
disponer en la
basura cortado en
trozos.
Almacenar por 5
aos
y
luego
disponer en la
basura cortado en
trozos.

PROCEDIMIENTO RECUENTO DE E COLI

EN ALIMENTOS UTILIZANDO
AGAR VRB-MUG
Seccin Microbiologa
de Alimentos
9.

Fecha revisin:
20-04-2009
Pgina 4 de 4

TABLA DE MODIFICACIONES

Revisin N Pg.
Modificada
4
1
4

PRT-712.00-037

Fecha emisin:
1996
Revisin: 4

10. ANEXOS
No Aplica

Motivo del cambio

Se modifica fundamento y
referencia
Se actualiza PRT y RG

Fecha Aprobacin