FISIOLOGA BACTERIANA

A.CRECIMIENTO BACTERIANO
1. Nutricin: Para que una bacteria realice sus procesos de biosntesis y
pueda reproducirse, debe encontrar en el medio ambiente que la rodea
alimentos energticos, alimentos constitutivos y condiciones fsico qumicas
compatibles con la vida de dicha bacteria.
2. Alimentos energticos: todas las bacterias comensales para el hombre,
toman la energa necesaria para la biosntesis de los procesos de oxidacin
de un sustrato orgnico, denominndoles quimiotrofas. El sustrato oxidable,
donador de electrones, generalmente es un azcar, un aminocido o un
cido orgnico.
3. Alimentos constitutivos: son las sustancias fuentes de carbono, de
nitrgeno, de minerales en estado inico (fosfato, sulfato, Calcio, Cloro,
Sodio, Hierro, etc.). Si la bacteria obtiene el carbono a partir de una
molcula orgnica se dice que es heterotrofa, en cambio si lo obtiene a
partir del CO2 ambiental, ser auttrofa.
4. Alimentos especficos: muchas bacterias son capaces de crecer con
alimentos simples y se les dice prototrofas, es decir son capaces de
sintetizar todas las enzimas y los metabolitos esenciales para su
crecimiento. Ciertas cepas salvajes, o mutantes prototrofas, son incapaces
de sintetizar uno de los metabolitos esenciales, por lo tanto, no podrn
crecer si en el medio ambiente que las rodea est presente dicho
metabolito indispensable (factor de crecimiento), y se les denomina cepas
auxotrofas.
5. Factores fsico qumicos: para la mayora de bacterias de inters mdico,
la temperatura ptima para el desarrollo es de 37C, y se les denomina
mesfilas (20C a 45C). Hay excepciones como Campylobacter jejuni,
Pseudomonas aeruginosa y Pasteurella pestis, que desarrollan tambin a
42C, o el caso de Bartonella bacilliformis que lo hace a 29C.
Los sistemas enzimticos de la mayora de bacterias funcionan a pH
alrededor de 7.0, por ello para el desarrollo in vitro, los medios de cultivo
deben contener tampones que regulen los cambios bruscos del pH.
La concentracin de solutos que ejercen presin osmtica en el medio que
rodea a las bacterias, es similar a la del ser humano, con excepciones de las
bacterias de origen marino, que soportan concentraciones hasta diez veces
superiores de cloruro de sodio, llamadas haloflicas.
B. CRECIMIENTO BACTERIANO EN MEDIO LQUIDO
El uso de medios de cultivo lquidos tiene por finalidad incrementar la
poblacin inicial de una cepa bacteriana, no es recomendable su empleo en
muestras polimicrobianas. El desarrollo bacteriano se aprecia por turbidez del
medio lquido, que es proporcional a la masa bacteriana y
puede ser
cuantificado midiendo la luz absorbida (densidad ptica).
23

Cuando experimentalmente se inocula un bacteria en un volumen

definido de medio lquido, luego de un tiempo de incubacin, se apreciar un
incremento en la turbidez del medio, que dibuja una curva en papel
semilogartmico, llamada curva de desarrollo bacteriano. En ella se puede
obtener la tasa de crecimiento o tiempo de multiplicacin de la bacteria. En las
dos primeras horas de iniciado el proceso, la poblacin bacteriana se mantiene
constante, llamada fase de latencia. Luego viene una etapa en que la bacteria
se multiplica en forma exponencial; en sta etapa se puede calcular la tasa de
crecimiento ya que la bacteria se multiplica en forma constante en razn del
tiempo. Posteriormente cuando se agotan los nutrientes, el nmero de
bacterias viables es contante, denominndole fase estacionaria. Por ltimo el
medio se acidifica, se incrementan los desechos metablicos y el nmero de
bacterias viables decrece, es la fase de declinacin.
C. CRECIMIENTO BACTERANO EN MEDIO SLIDO
El uso de medios de cultivo slidos, que se consigue aadiendo agar al
medio lquido, ofrece una serie de ventajas para identificar a las bacterias. La
siembra por dispersin permite la formacin de colonias en la superficie del
medio; cada colonia independiente constituye un clon puro, formado por
clulas todas provenientes de la misma bacteria y que poseen por lo tanto el
mismo patrimonio hereditario y las mismas caractersticas fisiolgicas.
Los distintos grmenes formarn colonias con caractersticas distintas
como tamao, opacidad, bordes, elevacin, superficie, pigmento, etc., que son
tiles para la identificacin. Al agregar sustancias qumicas, colorantes o
antibiticos en el medio de cultivo slido, se han obtenido los medios
selectivos, de gran utilidad en el diagnstico clnico, porque se dispone
prcticamente de un medio selectivo especfico para cada germen patgeno.
D. VIAS DEL METABOLISMO ENERGTICO
Es el estudio de las reacciones de degradacin para sintetizar ATP
(adenosina tri fosfato) como reserva de energa. Revisaremos esas reacciones a
partir del sustrato glucosa.
La glucosa es oxidada por una secuencia de reacciones que liberan
varios electrones, los que son transportados hasta un aceptador final. Cuando
la glucosa es degradada a piruvato y luego es completamente oxidada,
liberando CO2 y H2O, y el aceptador final de electrones es el oxgeno, se habla
de respiracin o metabolismo aerbico; en cambio cuando es un compuesto
inorgnico (nitrato, sulfato) el que recibe los electrones, se dice que es una
respiracin anaerbica.

24

El piruvato, producto de la degradacin de la glucosa, puede l mismo

ser receptor de los electrones, y reducirse en diferentes productos cidos,
denominando a ste proceso fermentacin.
De lo antedicho se desprende, que segn las diferentes vas
metablicas, pueden haber bacterias aerobias estrictas (pseudomonas),
aerobias y anaerobias facultativas (enterobacterias) y anaerobias estrictas
(clostridium).

RELACIN HUSPED MICROORGANISMO

Los microorganismos que residen en nuestro cuerpo, sea en la piel,
mucosas o tubo digestivo, constituyen la flora microbiana normal y son
saprofitos. Ellos viven de los desechos orgnicos, luego aseguran el ciclo
biolgico del carbono y del nitrgeno. Estos grmenes han adquirido
propiedades que les permite permanecer en determinadas reas o nichos por
largo tiempo, protegiendo al husped de la colonizacin por patgenos, como
Escherichia coli en colon o Lactobacillus acidphilus en canal vaginal,
constituyendo la flora residente, en cambio, otros lo hacen en forma temporal y
se llama flora transitoria.
Hay situaciones del husped que lo hacen vulnerable, de tal manera,
que las bacterias que constituyen la flora normal y las del medio ambiente
aprovechan esta condicin para desarrollar enfermedad, por lo que se les llama
oportunistas, es el caso de las infecciones de heridas por quemaduras o
escaras de decbito producidas por Pseudomonas aeruginosa.
La enfermedad infecciosa es el resultado del dao producido en un tejido
u rgano, o a la alteracin de una funcin del husped, ocasionada por una
cepa bacteriana portadora de diversos atributos de patogenicidad. Muchos
componentes que intervienen en el rol patgeno de una cepa bacteriana estn
contenidos en genes del cromosoma, de un plsmido o de un bacterifago,
aislados o integrados al ADN bacteriano; que generan sustancias qumicas
causantes de alteraciones en la clulas husped, o cambios en el
comportamiento de las bacterias frente a los sistemas de defensa. La
cantidad de bacterias que ingresan para producir enfermedad (inculo) es
importante, as, para una shigelosis basta con 200 bacterias ingeridas, en
cambio para infecciones con Vibrio choleare o Campylobacter se necesitan
cantidades superiores a 108 microorganismos.
A.BARRERA ANATMICA

25

La integridad anatmica y funcional de la piel y mucosas es de gran

importancia para impedir el ingreso de los microorganismos patgenos. Las
aberturas naturales (boca, nariz, va respiratoria, ojos, odos, va urogenital y
ano) estn protegidas de mucosidad, de epitelio ciliado, o por la secrecin de
sustancias antibacterianas que dificultan el ingreso de patgenos. Lesiones de
piel que destruyen la capa crnea crean una puerta de entrada, o un tejido
tumoral que altera la funcin de la mucosa digestiva, permite el ingreso de
bacterias intestinales al torrente sanguneo.
La flora bacteriana normal constituye un ecosistema de proteccin al
husped humano interfiriendo, por competicin, la colonizacin de bacterias
extraas y estimulando al sistema inmune adquirido. Se puede apreciar que
durante la administracin oral con antibiticos, la flora intestinal normal
disminuya y permita la proliferacin de cepas productoras de toxinas, como el
Clostridium difficile, ocasionando diarrea.
B. PODER PATGENO Y VIRULENCIA
Un microorganismo patgeno se define como aquel que tiene la
capacidad de producir enfermedad. En cambio la virulencia es una medida
cuantitativa de la patogenicidad o de la probabilidad de producir enfermedad.
Los factores de virulencia se refieren a las propiedades (genticas) que
permiten que un microorganismo se establezca en un husped. Ejemplo: el
neumococo capsulado es ms virulento que el no capsulado.
Para que un patgeno tenga xito debe encontrar un nicho de husped
apropiado y multiplicarse all. As como poseer rasgos genticos que le den
atributos que le permitan el establecimiento de la infeccin o enfermedad. El
patgeno debe acceder al husped en cantidad suficiente para alcanzar el
nicho dentro de l, utilizando mecanismos de movilidad, adhesinas, quimiotxis
y contrarrestar las defensas del husped secretando proteasas, enzimas,
toxinas o formacin de cpsula. La capacidad de multiplicarse, sea intracelular,
extracelular, en zona mucosa, en el torrente sanguneo o en el sitio de ingreso,
es una medida de xito del patgeno. El concepto actual de un patgeno
microbiano es el de un microorganismo altamente adaptado que sigue una
estrategia de supervivencia y que requiere la multiplicacin sobre otro
organismo viviente.
Postulados de Robert Koch
En el ao 1884 Koch propuso que, para que un microorganismo sea la
causa de una enfermedad, debe cumplir con los siguientes postulados:
1. Debe estar presente en el husped enfermo
2. El organismo debe crecer en cultivos puros a partir del husped enfermo
3. Debe reproducirse la enfermedad en animales susceptibles
26

4. Se debe recuperar el microorganismo del husped experimental

Hay muchas situaciones en las que no se puede cumplir con los postulados
sealados. As hay microorganismo que an no han sido cultivados in vitro,
como Mycobacterium leprae o Treponema pallidum. Hay enfermedades que
slo la padece el ser humano, como la gonorrea, luego no se dispone de animal
de experimentacin. Con los conceptos y tcnicas actuales en biologa
molecular, no se necesita ver ni cultivar el microorganismo, es suficiente con
demostrar la presencia del ADN microbiano.
C. MECANISMOS DEL PODER PATGENO
1. Adherencia y colonizacin: las bacterias patgenas para unirse a las
clulas del husped utilizan las adhesinas, que son proteinas filamentosas
ubicadas en la superficie de la bacteria o de los pili. Los receptores en la clula
animal son glucoproteinas o glucolpidos especficos, as Neisseria gonorrhoeae
se adhiere a las clulas mucosas con la molcula CD46, cepas de Escherichia
coli comunes se adhieren a las clulas que recubren el colon, en cambio las
cepas que causan infecciones en vas urinarias producen el pili llamado P I, los
enteropatgenos emplean pili para unirse a las clulas de los micropliegues
(M). Seguidamente la bacteria debe multiplicarse para colonizar la zona, y para
ello debe protegerse de las defensas, que incluye recambio de pili, secrecin
de proteasas e inducir cambios en la clula husped receptora.
2. Capacidad de invasin: siendo la piel la barrera ms difcil de atravesar
por los microorganismos, algunos patgenos deben esperar un traumatismo
que ocasione herida y pueda invadir, as Staphylococcus aureus es la causa
comn de infecciones de heridas, o Yersinia pestis que ingresa luego de la
picadura de las pulgas. En cambio, la va ms comn de invadir los tejidos son
las mucosas, para ello las bacterias inducen a las clulas a un proceso de
endocitosis. El patgeno se une a la clula y es englobado, en otros casos
administra proteinas que inducen a la clula el ingreso de la bacteria.
Algunos patgenos evitan la fagocitosis de los macrfagos y neutrfilos, por
diversos mecanismos, como la formacin de cpsula o protena M, que
interfieren la activacin del complemento C3b y se evita la accin opsnica, o
por la presencia de receptores Fc, que frustran la opsonizacin por los
anticuerpos, y por la produccin de citocinas que destruyen la membrana de
las clulas fagocticas.
Pocas bacterias permiten ser fagocitadas y dentro de ellos se multiplican, como
Salmonella, que evita la fusin del fagosoma con el lisosoma, o como Shigella,
que produce lisis del fagosoma, o ms aun como Listeria, que perfora la
membrana del fagososma para escapar al citoplasma. Las bacterias dentro de
los facgocitos se benefician, pues pueden evitar la accin de los anticuerpos, y
ser ubicados en otras partes del cuerpo.
27

3. Elaboracin de toxinas: la palabra toxina viene de toxikon (veneno de

arco), son sustancias qumicas elaboradas por la bacteria que daan
directamente los tejidos o activa mecanismos destructivos. En muchos casos la
toxina es la nica responsable de los sntomas de la enfermedad. Clsicamente
se dividen en dos categoras:
a) Exotoxinas: son protenas producidas por grmenes gram positivos y
negativos que ocasionan daos especficos, y codificadas por genes
cromosmicos o extra cromosmicos. Muchas veces se secretan por la bacteria
en actividad o se difunden luego de la lisis bacteriana en la zona colonizada por
el patgeno; otras veces se ingiere la toxina preformada en los alimentos,
como es el caso de la intoxicacin por Clostridium botulinum. Las exotoxinas
pueden actuar localmente o ser transportadas y tener efectos sistmicos, como
en la difteria. Por la composicin proteica de las exotoxinas, estas son potentes
antgenos, y los anticuerpos actan inactivando su accin; por ello la
elaboracin de vacunas a partir de la toxina desnaturalizada (sin efecto txico)
por el formol, se crea el toxoide, vacuna contra la difteria y ttanos. La clases
de
exotoxinas pueden ser de tipo funcional: neurotoxinas (parlisis),
enterotoxinas (diarrea y vmitos), citotoxinas (lisis celulares), etc., o ms
propiamente por el mecanismo de accin, as:
Toxinas A-B: formada por dos molculas, la A, que por lo general es una
enzima, parte activa o txica, y la B que se une al receptor especfico de la
clula blanco.
Toxinas que daan membranas: son verdaderas citotoxinas que destruyen
eritrocitos o fosfolipasasa que remueven los fosolpidos de la membrana
citoplasmtica.
Superantgenos: que activan en forma inespecfica a los linfocitos T
cooperadores para que se unan al complejo de histocompatibilidad clase II,
desencadenando respuestas de autoinmunidad, liberando grandes cantidades
de citocinas, insuficiencia multiorgnica, shock y muerte. Se observa en el
sndrome de shock txico por Staphylococcus aureus y con la toxina
eritrognica de Streptococcus pigenos.
b) Endotoxinas: son las molculas de lipopolisacridos (LPS), componentes de
la membrana externa de las bacterias gram negativas, que estn compuestas
por dos fracciones, la lipdica A con propiedades txicas, y el polisacrido
especfico O. El LPS producido es activador de reacciones inflamatorias y de las
reacciones de fase aguda, denominndole endotoxina. El husped responde
con fiebre, vaso dilatacin y respuesta inmune; en septicemias, con cantidades
muy elevadas de endotoxina bacteriana, se puede producir shock, coagulacin
intra vascular diseminado y muerte.
El peptidoglucano, el cido teicoico de los grmenes gram positivos pueden
ocasionar sntomas similares a la producida por la endotoxina.

BACILLUS Anthracis
La enfermedad producida por este microorganismo es conocida como la
causante de la quinta plaga en Egipto (1,500 a.C.) y de la pandemia en el siglo
XVIII, llamada peste negra. Pero correspondi a Robert Koch, en el ao 1876,
28

cultivar el germen y constatar el fenmeno de la esporulacin, luego Luis

Pasteur demuestra la patogenia de la enfermedad y prepar la vacuna.
Los Bacillus conforman un gnero de bacterias distribuidas en el medio
ambiente, algunas especies son utilizadas en biotecnologa para la produccin
de alcoholes, vitaminas, enzimas y antibiticos. Slo la especie B. anthracis es
patgena para el hombre, causantes del carbunco o ntrax maligno; desde
hace unas dcadas, las esporas se han convertido en una arma de uso en la
guerra biolgica.
A.ESTUDIO BACTERIOLGICO
1. Morfologa y estructura: son bacilos gruesos con los extremos
rectos, que se orientan formando cadenas, gram positivos, inmviles. Las
formas vegetativas poseen una cpsula compuesta por polipptidos con cido
glutmico (codificada por el plsmido pXO2), y tienen la capacidad de formar
esporas centrales no deformantes muy resistentes a los cambios ambientales.
2. Fisiologa: B. anthracis es aerobio de fcil desarrollo en medios de
cultivo, las esporas se forman con facilidad en cultivos viejos, mas no en
muestras clnicas. En los cultivos las colonias son grandes, de superficie spera
(in vitro no forman cpsula), no hemolticas e inmviles, caractersticas que
permiten orientar su identificacin.
3. Enzimas y toxinas: poseen un plsmido, denominado pXO1, que
produce el antgeno protector (AP), el cual se une a los receptores de las
clulas del husped para permitir el ingreso de los otros factores de virulencia,
este antgeno tiene gran capacidad inmunognica.
Las protenas, factor edema y factor letal, son potentes toxinas cuando
se unen al factor protector. El factor edema es una adenil ciclasa que origina
edema por incremento del AMP cclico; en cambio el factor letal es una
proteasa que inhibe a los macrfagos y provoca necrosis tisular.
B. PODER PATGENO
El carbunco es una enfermedad propia de los animales herbvoros, el
humano la adquiere, en la mayora de casos, por inoculacin y contaminacin
de la herida con tierra o pelo de animales; presentando luego una ppula que
se ulcera y se forma una escara necrtica (pstula maligna). Esta lesin puede
ser controlada mdicamente, pero se reporta complicacin de sepsis, con 20
% de mortalidad.
Las esporas pueden tambin ingresar por inhalacin, como es el caso de
los trabajadores en curtiembres o los que esquirlan las ovejas o por terrorismo.
En los alveolos pulmonares las esporas son fagocitadas por los macrfagos y
transportadas a los linfticos del mediastino, produciendo un cuadro infeccioso
29

general; seguidamente se presenta ensanchamiento del mediastino por

adenopata (RX de trax), complicacin con meningitis y shock, la mortalidad
es elevada que puede llegar al 95%.
La infeccin oral con B. anthracis es ms frecuente en animales y muy
rara en humanos, con la presentacin de lceras en la cavidad oral o intestinal.
C. DIAGNSTICO DE LABORATORIO
1. Microscpico: de gran utilidad y facilidad, puesto que el germen se
encuentra en grandes cantidades en las lesiones drmicas, en los ganglios y en
el torrente sanguneo. Se observan bacilos gram positivos largos dispuestos en
cadenas. Se puede utilizar la fluorescencia directa, empleando anticuerpos
contra el polipptido capsular, ya que la cpsula se forma slo in vivo.
2. Cultivo: desarrolla con facilidad dando colonias, en el agar sangre, de
tamao grande, superficie rugosa, de bordes irregulares, no hemoltica e
inmviles. La confirmacin de B. anthracis se hace por la presentacin de lisis
de un cultivo, por la accin del fago gamma y con la reaccin PCR.
3. Diagnstico indirecto: la deteccin de anticuerpos no tiene utilidad,
por la agudeza del proceso infeccioso.
4. Inoculacin experimental: el ratn y el cobayo son muy
susceptibles de infectarse por va subcutnea, producindoles edema local,
seguido por hemorragia y septicemia. Este procedimiento se utiliza para
demostrar, por fluorescencias directa, la cpsula bacteriana.
D. PREVENCIN Y TRATAMIENTO
El control de la enfermedad est orientado a la vacunacin del ganado y
medidas preventivas a los trabajadores en la industria del cuero y carniceros.
Para los animales se empela la vacuna atenuada procedente de una cepa
avirulenta. Para los humanos en riesgo de contagio, se emplea el filtrado
estril del cultivo de una cepa avirulenta.
En el tratamiento se utiliza penicilina, doxiciclina y ciprofloxacina

NEISSERIA
Los microorganismos integrantes de la familia Neisseriaceae han venido
incrementndose en los ltimos tiempos, pero los gneros de mayor inters
para humanos son Neisseria, Moraxella (branhamella) y Eikenella. El tracto
respiratorio alto y otras mucosas del hombre, son reservorio de especies de los
dos primeros gneros, constituyendo parte de la flora microbiana saprofita.
Neisseria meningitidis y Neisseria gonorrhoeae, son las especies de mayor
inters, por su elevada patogenicidad.
A.ESTUDIO BACTERIOLGICO
30

1. Morfologa y estructura: son diplococos, con la caracterstica de

tener el lado adyacente achatado (en grano de caf), gram negativos. La
estructura es similar a todas las bacterias gram negativas; algunas especies,
como N. meningitidis posee cpsula, base de la clasificacin en 13 serogrupos.
La mayora de neisserias estn rodeadas de pili, que les sirve para adherirse al
epitelio no ciliado de las mucosas,
as como en los mecanismos de
transferencia de material gentico. En la membrana externa de la pared de la
Neisserias patgenas, se ubican tres protenas, las porinas, la proteina Opa y la
proteina Rmp, que participan en los mecanismos de patogenicidad.
2. Fisiologa: son bacterias aerobias, lbiles a variaciones ambientales
que provocan lisis bacteriana, portadoras de la enzima respiratoria citocromo
oxidasa y metabolizan los carbohidratos por va oxidativa. Las especies
patgenas son exigentes para desarrollar in vitro, requieren medios con
sangre calentada (agar chocolate), con el agregado de almidn, para
neutralizar la accin txica del cido grasos, e incubacin a 37C en ambiente
con 10 % de CO2. Se recomienda el medio Tayer Martn que contiene,
adems, inhibidores de la flora saprofita y factores de enriquecimiento. Las
especies saprofitas son menos exigentes, incluso desarrollan en medio sin
sangre.
3. Clasificacin: La diferenciacin de las neisserias saprofitas o
patgenas se realiza mediante el estudio de caractersticas bioqumicas y de
crecimiento.
Tabla: I-3-1: Clasificacin del gnero Neisseria
Glucosa Maltosa Sacarosa Lactosa SH2 DNasa Crecimiento
Pigmento
Especie
a 22C
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------N. gonorrhoeae
+
-------N. meningitides
+
+
------N. lactmica
+
+
-+
+
--+
N. sicca
+
+
+
-+
-+
-N. flava
+
+
v
-+
-+
-Moraxella catarrhalis --+
-+
+
v
+
---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

NEISSERIA meningitidis
B. PODER PATGENO

31

La meningitis epidmica fue descrita por primera vez por Vieusseaux en

el ao 1805, y Weichselbaum en el 1887 aisla el meningococo en LCR. Luego
se demostr la presencia del microorganismo en la nasofaringe de portadores
sanos, as como la importancia de los serogrupos en la presentacin de
epidemias.
La infeccin se adquiere por inhalar gotitas del tracto respiratorio de
otras personas. Las bacterias se adhieren a la mucosa y se multiplican; luego
pasan a travs de stas e invaden el torrente sanguneo para ser transportadas
a las meninges y lquido cefalorraqudeo (LCR). Las bacterias y los leucocitos
consumen glucosa, lo que origina un marcado descenso en el LCR.
N. meningitidis libera endotoxinas, que producen hipotensin y lesin en
el endotelio capilar, expresndose por la presentacin de micro hemorragias
drmicas (petequias). La exposicin repetida a las endotoxinas puede producir
sensibilizacin y conducir a un cuadro de coagulacin intravascular diseminada
(CID).
El polisacrido capsular es antignico y provoca la formacin de
anticuerpos que confiere proteccin especfica de grupo, base de la
vacunacin. Los serogrupos ms frecuentes aislados en pacientes son: A, B, C,
Y y W135. Es preciso anotar que el serogrupo B tiene baja antigenicidad, razn
por la cual las epidemias a ste serogrupo son ms frecuentes.
C. DIAGNSTICO DE LABORATORIO
1. Microscopa: De utilidad en muestras de lquido cefalorraqudeo,
donde se observan, a la coloracin de Gram, diplococos gram negativos y
numerosos leucocitos polimorfo nucleares. Las muestras de exudado naso
farngeo no se vlidas para la microscopa.
2. Cultivo: Para el asilamiento in vitro, las muestras puede ser LCR,
sangre o exudado naso farngeo. El medio de cultivo Tayer Martin es el
adecuado o agar chocolate sin inhibidores, incubarlo en ambiente con 10 % de
CO2 a 37C. Luego de 48 horas, observar las colonias al Gram y realizar la
reaccin de oxidasa, la cual debe ser positiva. La identificacin se confirma por
las reacciones bioqumicas antes mencionadas.
3. Deteccin de antgenos: Se puede detectar la presencia de
antgenos capsulares en diversas muestras, empleando partculas de ltex
recubiertas con anticuerpos monoclonales.
D. PREVENCIN Y TRATAMIENTO
La vacuna est compuesta de polisacridos capsulares de los serogrupos
A,C,Y, y W135, as como la conjugada est disponible para nios como para
adultos, respectivamente.
32

Las persona expuestas a pacientes con meningococemia (mdicos,

enfermeras, etc.)se les debe administra profilcticamente rifampicina. La
penicilina y la cefalosporina de tercera generacin son los antibiticos de
eleccin para el tratamiento.

CORYNEBACTERIUM
En el gnero Corynebacterium se han agrupados bacterias por su
similitud morfolgica irregular (forma de mazo). Numerosas especies se
encuentran en el medio ambiente, plantas, animales o colonizando piel y
mucosas del hombre, como patgenos oportunistas. Loefler, en el ao 1884,
describe a la especie Corynebacterium diphtheriae, la cultivada y demuestra el
rol patgeno en la enfermedad denominada difteria; luego Roux y Yersin
confirman que las lesiones orgnicas encontradas lejos del foco infecciosos,
eran producidas por accin de una toxina; y en el ao 1923, Ramn prepar la
vacuna, luego de transformar la toxina en toxoide.

Corynebacterium diphtheriae
A.ESTUDIO BACTERIOLGICO
1. Morfologa y estructura: son bacilos con los extremos
redondeados, unidos de forma irregular dando imgenes de letras chinas,
algunos con los extremos ms gruesos. Son positivos a la coloracin de gram y
presentan granulaciones de fosfatos, generalmente de ubicacin polar. No
forman espora ni poseen flagelos.
2. Fisiologa: la bacteria es aerobia, aunque puede desarrollar en la
profundidad de un medio semislido. Para el aislamiento a partir de una
muestra clnica se requiere de medios enriquecidos con sangre o suero y los
aminocidos cistina y cido glutmico. A partir de muestras de exudado
farngeo, el agar chocolate con telurito de potasio es el recomendado, pues el
telurito inhibe a la flora saprofita y las colonias de C. diphtheriae toman una
coloracin gris oscura.
3. Toxinas: la produccin de exotoxinas por C. diphtheriae depende de
la presencia del fago beta lisognico, el que transporta el gen (tox+) que
codifica la toxina. El ADN circular del bacterifago se integra en el material
gentico de la bacteria (profago), luego la bacteria husped puede sintetizar la
toxina. Cepas de C. diphtheriae carentes del bacterifago, no producen toxina,
aunque pueden adquirirlo sin son expuestas a cepas portadores del fago beta.
La toxina es un polipptido, formado por dos segmentos, el B que se une a
receptores especficos (corazn, clulas nerviosas), y el A que acta
interrumpiendo la elongacin de las cadenas peptdicas, y as inhibe la sntesis
de protenas.
B. PODER PATGENO
33

La difteria es una enfermedad de distribucin mundial, de prevalencia en

zonas con condiciones de vida en hacinamiento y ausencia de programas de
vacunacin. La transmisin se efecta entre personas, mediante las gotitas
respiratorias y el contacto cutneo. El reservorio lo constituye portadores
sanos en zonas endmicas. Tras el contagio se desarrollan signos y sntomas
locales de inflamacin en el tracto respiratorio alto (nariz, faringe, laringe y
trquea), donde se forman membranas blancas, que se tornan grises y
necrticas, acompaadas con sntomas generales. Luego se presentan
sntomas de miocarditis y neuropata. Es poco frecuente la presentacin
cutnea, con lceras de evolucin crnica, que no se asocian a signos de
intoxicacin y que induce a elevados ttulos de antitoxina (inmunizacin
natural).
La resistencia a la infeccin est estrechamente relacionada con los
niveles de antitoxina circulante, se estima debe ser superior a 0.01 unidad de
floculacin por mililitro (Uf/ml). La vacuna se obtiene a partir de cultivos en
medios lquidos, los cuales son filtrados y para inactivar la toxina se les aade
formol, el producto es un toxoide.
C. DIAGNSTICO DE LABORATORIO
1. Microscopa: si bien es cierto que las caractersticas morfolgica de
los corynebacterium son orientadoras, pero es a veces subjetivo y lleva a
errores.
2. Cultivo: el diagnstico se fundamenta por el aislamiento del
microorganismo y la demostracin de formacin de exotoxina. Se utilizan
medios enriquecidos con sangre y selectivos, a los cuales se les ha aadido
aminocidos y telurito de potasio. A las colonias de color gris oscuro se les
investiga actividad contra la cistena, para sospechar en C. diphtheriae; la
secuenciacin de cidos nucleicos es un procedimiento confirmatorio.
La demostracin de que la cepa aislada es productora de exotoxina, se
realiza in vitro por inmunodifusin o test de Elek. Para lo cual en una placa
petri con agar suero fundido se deposita un papel de filtro embebido en
antitoxina diftrica; una vez solidificado el agar se siembra, en estras
transversales, la cepa sospechosa. Luego de 24 a 48 horas de incubacin,
cuando la cepa es productora de exotoxina, se observarn lneas de
precipitacin ubicadas en la interseccin entre el papel de filtro y la lnea de
siembra.
D. PREVENCIN Y TRATAMIENTO
Como la difteria es producto de la accin de la exotoxina, la
neutralizacin de su actividad por accin especfica de los anticuerpos, es la
nica manera de control de la enfermedad. La inmunizacin se obtiene
34

mediante la vacunacin con toxoide, que se aplica en los nios, asociada con
toxoide tetnico y B. pertussis.
El uso de antitoxina diftrica est indicado en los primeros das de la
enfermedad, para lo cual se emplea suero hiperinmune de caballo, en
concentraciones de 60,000 a 100,000 unidades. Es importante recordar que la
antitoxina neutralizar slo a la toxina circulante, mas no a la ya fijada en los
tejidos; ms aun, se estima que un 10% de la poblacin es hipersensible al
suero equino. La administracin de penicilina o eritromicina es necesaria para
erradicar el foco infeccioso.

NOCARDIA
El gnero Nocardia pertenece al grupo de los actinomicetos aerobios,
denominado as por Edmond Nocard, que en 1888 hizo el primer aislamiento
en bovinos. Todos los miembros de ste grupo contienen en la pared celular el
cido diamino pimlico y el cido miclico, ste ltimo responsable de la
resistencia a la decoloracin con alcohol cido.
Las especies de Nocardia son saprofitas ambientales, habitan en el
suelo, materia orgnica y agua. Las infecciones en el humano son
consecuencia de contaminaciones por inoculacin o inhalacin. Son muy
conocidas las infecciones en animales, en especial en bovinos.
A.MORFOLOGA Y ESTRUCTURA
1. Morfologa y estructura: son bacilos filamentosos que forman
ramificaciones, tanto en las muestras biolgicas como en los cultivos in
vitro. Tien dbilmente con el gram, pero la estructura de la pared
corresponde a una bacteria gram positiva. Son cido-alcohol resistentes
dbiles, por lo que se recomienda el uso de la coloracin de Kinyoun.
2. Fisiologa: desarrolla con facilidad en la mayora de medios de cultivo
en 2 a 3 das de Incubacin, dando colonias secas de aspecto creo con
presencia de hifas areas
3. Clasificacin: para la identificacin de especies es necesario el empleo
de tcnicas moleculares, ya que las actividades metablicas in vitro son
limitadas. Se describen las especies N. asteroides (la ms frecuente), N.
brasiliensis, N. nova, N. farcinica, etc.
B. PODER PATGENO
Las infecciones respiratorias se inician con colonizacin de la Nocardia
en vas areas superiores; en cambio las infecciones primarias en la piel se
producen por inoculacin traumtica. Seguidamente se forman abscesos, como
las Nocardias resisten la capacidad fagoctica de los neutrfilos, stas se
reproducen y diseminan va sangunea al sistema nervioso central o a los
tejidos subcutneos. La infeccin crnica, indolora, subcutnea, con
35

presentacin de fstulas que supuran, se denomina micetoma, la especie N.

brasiliensis es la causa ms frecuente de ste proceso.
C. DIAGNSTICO DE LABORATORIO
1. Microscopa: el frotis de la secrecin purulenta coloreado con gram y
kinyoun, para bacterias cido resistentes, son de gran importancia
para el diagnstico; se observarn filamentos ramificados gram
positivos plidos, cido resitentes.
2. Cultivo: para el aislamiento se puede utilizar los medios empleados
para los hongos, como sabouraud.
3. Identificacin: para la determinacin de la especie se recomienda el
uso de tcnicas moleculares.
D. PREVENCIN Y TRATAMIENTO: Siendo una bacteria de hbitat ambiental
es imposible prevenir una colonizacin o infeccin. La asociacin
sulfametoxazol con trimetoprim es la recomendada para el tratamiento.

36