INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

CINETICA ENZIMATICA
EFECTO DEL PH Y CONCENTRACION DE ENZIMA SOBRE
LA VELOCIDAD DE REACCION
Casillas Ramos Guillermo Arturo, Orta Camargo Berenice
3FV2 SECCION 2
Objetivo General:
-

Tablas de resultados pH.

Analizar algunos factores que modifican la

velocidad de la reaccin catalizada por la invertasa
y caracterizar de esta manera a dicha enzima.

Objetivo especfico:
-

Analizar la importancia del pH del medio sobre la

velocidad de una reaccin enzimtica y su efecto
sobre el carcter inico de la enzima y del sustrato
Demostrar que la velocidad de la reaccin
enzimtica es directamente proporcional a la
concentracin de enzima

Introduccin:
Las enzimas son catalizadores proteicos, que aceleran la
velocidad de una reaccin enzimtica. Estas reducen la
energa de activacin, que es esencial para el inicio de
cualquier tipo de reaccin qumica. Con un requisito de bajo
consumo de energa para la activacin, la reaccin tiene
lugar ms rpidamente, De forma general, la velocidad de
una reaccin catalizada enzimticamente es proporcional a
la cantidad de enzima en la mezcla de ensayo
Los enzimas poseen grupos qumicos ionizables
(carboxilos, amino, tiol, imidazol, etc.) en las cadenas
laterales de sus aminocidos. Segn el pH del medio, estos
grupos pueden tener carga elctrica positiva, negativa o
neutra, La conformacin de las protenas depende, en
parte, de sus cargas elctricas, habr un pH en el cual la
conformacin ser la ms adecuada para la actividad
cataltica. Este es el llamado pH ptimo y depende de la
secuencia de aminocidos que conforman la enzima.
Cualquier cambio brusco en el pH, afecta las propiedades
catalticas de una enzima.

Resultado:
Tabla resultados [E].
Tubo 1
0.041

Tubo 2
0.469

Tubo 3
0.520

Tubo 4
1.132

Tubo 5
1.477

Azcar reductor
(moles)
Velocidad (U.I.)

0.04

4.9

5.6

12.1

15.7

0.004

0.49

0.56

1.21

1.57

Concentracin
de enzima (g/
2.0 mL)

Absorbancia

Tubo
1
0.308

Tubo
2
0.992

Tubo
3
1.167

Tubo
4
1.344

Tubo
5
0.674

Azcar reductor
(moles)

3.3

10.7

2.6

14.55

7.3

Velocidad (U.I.)

0.33

1.07

1.26

1.45

0.73

PH

3.5

4.5

5.5

6.5

7.5

Absorbancia

Discusiones:
La sacarosa es un acetal que no se oxidan con facilidad,
porque ambos tomos de carbono anomricos estn fijos
en un enlace glicosdico, El cido 3,5 dinitrosaliclico (DNS),
reacciona nicamente con los azcares reductores. La
sacarosa es un disacrido no reductor, pero tras su
hidrlisis se libera glucosa y fructuosa, que son reductores
y reaccionan con el DNS generando un producto coloreado
que es posible analizar en el espectrofotmetro, Al aadir el
3,5-DNS ocurre una reaccin de xido-reduccin, en la cual
el 3,5-DNS (amarillo) es reducido por la glucosa al cido 3amino-5-nitrosaliclico (rojo), mientras que la glucosa se
oxida a cido D-glucnoico, Se adiciono DNS porque este,
cumple con varias funciones como proporciona el pH
alcalino necesario para que ocurra el equilibrio ceto
enlico, en el cual la DFructosa se isomeriza formando D
glucosa y viceversa, adems inactiva la accin de la
enzima.
La velocidad de reaccin es proporcional a la concentracin
de enzima, pues a mayor cantidad de enzima, es posible
transformar ms sustrato en menor tiempo, ya que se
forma una cantidad mayor del complejo ES. La cantidad de
molculas de sustrato presente en la mezcla de reaccin es
demasiado alta en comparacin con las molculas de
enzima, por lo que, al adicionar enzima, est siempre
tendr sustrato disponible para reaccionar, es decir el
sustrato nunca ser el reactivo limitante.
La actividad de la invertasa se ve afectada por el pH al cual
se lleva a cabo la reaccin. La curva actividad-pH puede
ser diferente para cada tipo de enzima, pero en el caso de
la enzima utilizada, muestra una tendencia grfica parecida
a una campana o parbola
El pH modifica la velocidad de reaccin de distintas
maneras. Una de ellas es por la ionizacin del sitio activo,
en donde el proceso cataltico usualmente requiere que la

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enzima y el sustrato tengan grupos qumicos en una Conclusiones:
forma inica particular para poder interactuar. Otro aspecto
en la que el pH se ve involucrado es en la
desnaturalizacin de la enzima, ya que pH extremos
pueden ocasionar que la enzima pierda su estructura nativa
y por tanto su actividad o funcin, debido al cambio de las
interacciones inicas, tambin la estabilidad de la enzima,
se ve modificada.
La actividad mxima de la enzima, ocurre en el pH ptimo.
Aunque experimentalmente, los valores obtenidos en la
Absorbancia no fueron los esperados, debido posiblemente
a la medicin inadecuada del tiempo de reaccin de la
invertasa o a la adicin de diferentes volmenes de
reactivos, es posible observar en la representacin grfica
que para la invertasa el pH optimo se encuentra en un
rango de pH de 6 a 6.5. Si el medio se torna muy cido o
muy bsico la enzima se desactiva y se desactiva de
manera irreversible.

La velocidad de reaccin es directamente proporcional a la

concentracin de enzima y la concentracin del sustrato
tambin aumenta la velocidad de reaccin hasta que llega
a una velocidad mxima.
El pH ptimo de la invertasa es un rango de 6 a 6., a
valores inferiores o superiores la actividad de la enzima
disminuye.

Bibliografa:
Voet, Pratt, 2007, Fundamentos de bioqumica, la
vida a nivel molecular, 2 edicin, editorial mdica
panamericana pp: 250-273