Aplicado para contar amostras em que o numero de bactrias muito pequeno, como lagos e fontes de gua. Esse mtodo permite que a bactrias seja concentrada sobre a superfcie de uma membrana de filtro de poros muito pequenos (bactria no passa pelos poros) aps passagem de um volume de 100 mL de gua. Essa membrana transferida para uma placa de Petri com um suporte embebido em nutriente lquido, que permite que as bactrias se desenvolvam sobre a membrana. Esse mtodo usado para deteco e registro de coliformes (indicadores de poluio fecal) em amostras de alimentos e guas. Coliformes podem ser identificador por meios de cultivo diferenciais.
Mtodo do Nmero Mais Provvel (MNP)
uma tcnica estatstica com base no seguinte princpio: quanto maior o numero de bactrias em um a amostra, maior ser o numero de diluies necessrias para eliminar totalmente o crescimento em tubos com meio de cultura. Esse mtodo o mais usado quando as bactrias a serem contadas no cresceriam em meio slido (como bactrias quimioautotrficas nitrificantes), ou quando o crescimento de bactrias em um meio liquido diferencial usado para identificar os microrganismos (como coliformes em gua, que seletivamente fermentam lactose produzindo cido). O mtodo fornece somente uma estimativa de 95% de probabilidade de a populao bacteriana conter um numero de bactrias e que o NMP da tabela estatisticamente o numero mais provvel.
Contagem Direta ao Microscpio
Nesse mtodo um volume conhecido de soluo bacteriana colocado em uma rea
definida de uma lamina especial de microscpio denominada clula de contagem PetroffHausser.
Metodos Indiretos
Turbidimetria
Para alguns tipos de experimentos, estimar a turbidimetria uma maneira de monitorar o
crescimento bacteriano. A medida que as bactrias se multiplicam em um meio liquido,o meio se torna turvo ou opaco com as clulas. O instrumento utilizado para medir a turbidez um espectrofotometro. No espectrofotmetro, um feixe de luz passa atravs de uma suspenso de bactrias ate um detector fotossensvel. Com o aumento de numero de bactrias, menos luz atingira o detector. Essa alterao da luz ser registrada na escala do instrumento como porcentagem de transmisso. Tambm ser registrada a expresso logartmica chamada de absorbncia. A absorbncia utilizada para representar graficamente o crescimento bacteriano. Quando as bactrias esto em crescimento logartmico ou em declnio, o grfico de absorbncia em funo do tempo ser uma linha quase reta. Se as leituras de absorbncia forem combinadas com contagem em placas da mesma cultura, essa correlao poder ser utilizada para estimativas futuras do numero de bactrias obtidas pela medida de turbidimetria. Mais de um milho de clulas por mililitro devem estar presentes para que os primeiros sinais de turbidez sejam visveis. Em torno de 10 milhes a 100 milhes de clulas por mililitro so necessrios para que uma suspenso seja turva o suficiente para possibilitar uma leitura no espectrofotmetro. Portanto, a turbidimetria no uma medida til de contaminao de lquido por um numero relativamente pequeno de bactrias.
Atividade Metablica
Outra maneira indireta de estimar o numero de bactrias medir a atividade metablica de
uma populao. Esse mtodo assume que a quantidade de um produto metablico determinado, como um acido ou CO2 diretamente proporcional ao numero de bactrias presentes. Um exemplo de aplicao pratica de um teste metablico o ensaio microbiolgico no qual a produo de acido utilizada para determinar quantidades de vitaminas.
Peso Seco
Para bactrias e fungos filamentosos, os mtodos comuns de medidas so menos satisfatrios.
Uma contagem em placas no poderia medir esse aumento e massa micelial. Nas contagens em placas de actinomicetes e fungos, o numero de esporos assexuados e mais frequentemente contado como alternativa, mais essa no e uma boa medida do crescimento. Uma das melhores maneiras de medir o crescimento de organismos filamentos pelo peso seco. Nesse procedimento, o fungo removido do meio de crescimento, filtrado para remover outros matrias e seco em dissecador, sendo ento pesado. Para bactrias, o mesmo procedimento bsico e seguido.
Referncias Microbiologia Por Gerard J. Tortora | Berdell R. Funke | Christine http://vida-microscopica.blogspot.com.br/2012/05/metodos-para-quantificar-ocrescimento.html
