UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLGICAS
SECCIN DE BIOQUMICA Y FARMACOLOGA HUMANA

BIOQUMICA DIAGNSTICA
BIOQUMICA DE SISTEMAS

EVALUACIN DEL EFECTO METABLICO PROVOCADO POR PARACETAMOL Y

GLUTAMINA EN HEPATOCITO DE RATA WISTAR

EQUIPO: 5

GRUPO: 1402

* ROMERO OCAA ALEJANDRA MONSERRAT

* ROSALES BOLAOS FRANCISCO ENRIQUE
* ZERN RIVERA MARA FERNANDA

PROFESORES
* DRA. MARA ESTHER REVUELTA MIRANDA
* Q. KARLA PAOLA HERNNDEZ PREZ
* QFB. JONATHAN GARCA MARTNEZ

FECHA DE ENTREGA
20-NOVIEMBRE-2015

NDICE
Introduccin........ 3
Captulo 1. Anatoma del hgado... 3
1.1 Caractersticas...... 3
1.2 Localizacin anatmica....... 4
1.3 Lbulos... 4
1.4 Ligamentos...................... 4
1.5 Irrigacin del hgado. 5
1.6 Hgado de rata Wistar.. 5
Captulo 2. Histologa heptica.. 6
2.1 Lobulillos hepticos...... 6
2.2 Acino heptico... 6
2.3 Hepatocitos.... 8
2.4 Sinusoides hepticos... 8
2.5 Canalculos y conductos biliares.... 8
Captulo 3. Fisiologa del hgado... 9
3.1 Funcin metablica...... 9
3.1.1 Metabolismo de carbohidratos.. 9
3.1.2 Metabolismo de lpidos.. 11
3.1.3 Metabolismo de protenas..11
3.2 Funcin digestiva. 12
3.3 Funcin cardiovascular... 12
3.4 Funcin inmunolgica. 12
3.5 Funcin de desintoxicacin, secrecin y eliminacin.... 12
3.6 Funcin almacenadora de nutrientes....... 13
Captulo 4. Hepatotxicos.. 14
Captulo 5. Hepatoprotectores.. 16
Captulo 6. Perfil heptico..... 16
6.1 Definicin...... 16
6.2 Pruebas enzimticas... 16
6.3 Pruebas metablicas...... 17
6.4 Pruebas inmunolgicas...... 17
6.5 Imagen (ultrasonido o ecografa).. 18
Captulo 7. Pruebas bioqumicas. 18
7.1 Protenas totales.. 18
7.2 Albmina... 18
7.3 Colesterol.. 19
7.4 Bilirrubinas (totales y directas).. 19
Objetivo... 20
Hiptesis..... 20
Metodologa........20
Resultados.. 23
Anlisis de resultados... 27
Conclusiones.. 2
Referencias........ 3

INTRODUCCIN
El hgado es un rgano de gran importancia, ya que recibe directamente la sangre del intestino
y utiliza los nutrientes recin absorbidos para llevar a cabo el metabolismo de carbohidratos,
lpidos y protenas; logrando almacenar energa en forma de glucgeno, sintetizar colesterol y
bilis, y fabricar muchas protenas del organismo. Adems, el hgado acta sobre numerosas
sustancias toxicas, las cuales transforma para que sean eliminadas, protegiendo al organismo.
Debido a todo esto, es necesario que el hgado funcione adecuadamente para que el
organismo est saludable.
La hepatotxicidad se define como la lesin o dao heptico causado por la exposicin a un
medicamento u otros agentes txicos. Algunos frmacos producen hepatotxicidad
dependiendo de la dosis administrada. Como el paracetamol, que es un analgsico y
antipirtico, que en dosis muy altas es capaz de causar hepatotxicidad. En este tipo de
frmacos, el efecto hepatotxico es dosis-dependiente y, por lo tanto, se puede plantear una
reduccin de la dosis del frmaco sin suspenderlo totalmente. (Tejada, 2010).
Las enfermedades hepticas causadas por hepatotxicidad son un serio problema de salud,
por lo cual dentro de los tratamientos y precauciones se encuentra el uso de hepatoprotectores,
los cuales ayudan a evitar daos en el hgado y refuerzan las funciones hepticas. (Jimnez,
2015). Existen muchos hepatoprotectores, uno de ellos es la glutamina, que es un aminocido
considerado como condicionalmente esencial y como uno de los aminocidos ms importantes
ya que, entre otras funciones, beneficia en situaciones de estrs, acta cuando existe un
proceso de recuperacin de cualquier tipo de lesin e incluso tiene propiedades antioxidantes.

Captulo 1. Anatoma del hgado

1.1 Caractersticas
El hgado es el rgano visceral de mayor tamao y uno de los ms verstiles del organismo, es
un rgano grande, consistente y de color pardo-rojizo. Pesa aproximadamente 1,5 kg y mide en
su dimetro mayor (o transverso) 20-22,5 cm, en la faz lateral derecha (verticalmente) mide
cerca de 15-17 cm y su mayor dimetro dorso-ventral mide 10-12,5 cm. (Martini, 2009).
El tejido del parnquima heptico est compuesto de lbulos unidos por un tejido areolar
extremadamente fino en el cual se ramifican la vena porta, la arteria heptica, las venas
hepticas, linfticos y nervios, estando todo el conjunto revestido por una tnica fibrosa y una
serosa (la tnica serosa deriva del peritoneo).

Imagen 1. La cara diafragmtica del hgado es convexa, extensa y relativamente lisa.

Recuperado el 10-09-2015:
https://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/images/ency/fullsize/8848.jpg

1.2 Localizacin anatmica

El hgado se localiza a la derecha de la cavidad abdominal, en mayor parte en el hipocondrio
derecho, y en menor parte en epigastrio e hipocondrio izquierdo, llenando el espacio de la
cpula diafragmtica, donde puede alcanzar hasta la quinta costilla, y se relaciona con
el corazn a travs del centro frnico, a la derecha de la vena cava inferior. Estas tres regiones
forman parte de la regin tronco abdominal, la regin intermedia entre el trax y la cavidad
abdominal propiamente dicha. El hgado situado debajo del diafragma comprende tres
compartimientos peritoneales: compartimiento subfrnico derecho o heptico, compartimiento
subfrnico izquierdo o esplnico, y compartimiento medio o celiaco.

1.3 Lbulos
Tradicionalmente, en el hgado se han diferenciado cuatro lbulos: derecho, izquierdo,
cuadrado y caudado. La impresin dejada por la vena cava inferior seala la divisin entre el
lbulo derecho y el pequeo lbulo caudado. Bajo este se sita el lbulo cuadrado,
comprendido entre el lbulo izquierdo y la vescula biliar.
La diferenciacin clsica en cuatro lbulos se basaba en la topografa superficial del hgado y
no satisfaca las necesidades de la ciencia mdica moderna, en particular en lo que se refiere a
la ciruga. Como consecuencia de ello, se desarroll un sistema ms completo para describir la
estructura del hgado. La nueva terminologa es compleja, pero, en esencia, subdivide los
lbulos del hgado en segmentos, basados en las divisiones principales de la arteria heptica,
la vena porta y los conductos hepticos.

1.4 Ligamentos
El hgado est fijado a la cara inferior del diafragma y a la pared ventral del abdomen por cinco
ligamentos, cuatro de stos: el falciforme, el coronario, el triangular derecho y el triangular
izquierdo, son pliegues peritoneales; mientras que el quinto, el ligamento redondo, no es
realmente un ligamento sino un cordn fibroso resultante de la obliteracin de la vena umbilical.
El hgado est unido tambin a la curvatura menor del estmago y al duodeno por los
ligamentos hepatogstrico y hepatoduodenal, respectivamente.
* El ligamento falciforme o suspensorio, est constituido por hojuelas peritoneales que se
originan de la reflexin del peritoneo visceral heptico sobre el peritoneo diafragmtico, al nivel
del borde anterior del hgado el ligamento falciforme contiene el ligamento redondo. Marca la
divisin entre el lbulo izquierdo y el lbulo derecho del hgado. Debido a que este ligamento es
fino, no ayuda en la fijacin, pero probablemente limite los desplazamientos laterales.
* El ligamento coronario consiste en una hojuela anterior y una posterior. La hojuela anterior es
la reflexin del peritoneo visceral de la cara superior del hgado sobre el diafragma, y se
contina con la hojuela derecha del ligamento falciforme. La hojuela posterior, reflexin del
peritoneo visceral de la cara inferior del hgado sobre el peritoneo parietal posterior, se refleja
del margen caudal del rea desnuda hacia el rin y la glndula suprarrenal derecha, siendo
llamado ligamento hepatorrenal.
* Los ligamentos triangulares son dos: derecho e izquierdo. El ligamento triangular derecho
est situado en el extremo derecho del rea desnuda, constituido por un pequeo pliegue que
se prende al diafragma, formado por la aposicin de las hojas anterior y posterior del ligamento
coronario. El ligamento triangular izquierdo es un pliegue bastante grande que une la parte
posterior de la cara superior del lbulo izquierdo al diafragma; su hoja anterior se contina con
la hoja izquierda del ligamento falciforme. Termina a la izquierda en una fuerte banda fibrosa, el
apndice fibroso del hgado.
* El ligamento redondo es un cordn fibroso resultante de la obliteracin de la vena umbilical.
Partiendo del ombligo, se dirige hacia lo alto, en la margen libre del ligamento falciforme, hacia
la incisura del ligamento redondo en el hgado, a partir de la cual podr ser seguido en su fisura
propia, en la cara inferior del hgado, hacia el hilio, donde se contina con el ligamento venoso.
4

* El ligamento venoso, similar al ligamento redondo, es una reminiscencia fibrosa del ducto
venoso que conecta la rama izquierda de la vena porta con la vena heptica izquierda prximo
a la unin con la vena cava inferior, no tiene funcin de fijacin heptica.
El hgado puede ser movilizado parcial o totalmente, seccionando los ligamentos triangulares,
falciforme y los ligamentos coronarios.

1.5 Irrigacin del hgado

Los vasos sanguneos aferentes y otras estructuras llegan al hgado a travs del tejido
conjuntivo del epipln menor y convergen en una regin conocida como porta heptica. Dos
vasos sanguneos regulan la circulacin de sangre en el hgado, la arteria heptica propia y la
vena porta heptica. Aproximadamente la vena porta heptica trae el 70-75 % del flujo
sanguneo, contiene sangre poco oxigenada y rica en nutrientes proveniente del sistema
digestivo y del bazo; mientras que la arteria heptica contiene sangre oxigenada.
La sangre llega a los vasos sanguneos portales de los vrtices, los cuales traen las sustancias
desde el sistema digestivo, mientras que la arteria central drena el resultado de la actividad de
los hepatocitos. Los vasos portales y la vena central se comunican gracias a capilares que
discurren entre los hepatocitos denominados capilares sinusoidales, cuya pared est
compuesta por una capa discontinua de clulas endoteliales fenestradas que carecen de
membrana basal. Estos capilares discurren de forma radial, recogen el fluido de las venas
portas y arterias de los vrtices, adems de la secrecin endocrina de los hepatocitos, y
confluyen en el centro del lobulillo para liberar su contenido en la vena centrolobulillar. La
confluencia de las venas centrolobulillares da lugar a las venas hepticas que finalmente
drenan en la vena cava inferior.

1.6 Hgado de rata Wistar

El hgado se ubica sobre la cara caudal del diafragma extendindose a ambos lados del plano
mediano desde el arco costal derecho hasta el izquierdo. Presenta dos caras: parietal (craneal)
de forma convexa relacionada al msculo diafragma y una cara visceral (caudal) cncava
relacionada al estmago y parte craneal del duodeno. Est dividido en los lbulos derechos
(lateral y medial), izquierdos (lateral y medial), cuadrado (muy pequeo) y caudado el cual
presenta los procesos caudado y papilar (subdividido en parte dorsal y ventral). El ligamento
falciforme, se extiende desde la cara parietal del hgado hasta el diafragma sobre el plano
mediano llegando hasta el apndice xifoide. Hacia el dorsal se encuentra el ligamento
triangular derecho que se extiende desde la pared abdominal dorsalmente hasta el lbulo
lateral derecho. Sobre el lado izquierdo se encuentra el ligamento triangular izquierdo tambin
proveniente desde la pared dorsal, fijado al lbulo lateral izquierdo del hgado. El ligamento
hepatorrenal se extiende desde el proceso caudado del lbulo caudado hasta una ubicacin
dorsal de la pared abdominal, medialmente al rin derecho insertndose sobre la hoja
derecha del mesoduodeno o sobre la hoja derecha del mesocolon descendente. El ligamento
coronario relativamente pequeo se ubica por la cara visceral, sobre el hilio, se inserta el
omento menor que presenta una parte izquierda fijada a la curvatura menor del estmago a la
cual se le denomina ligamento hepatogstrico y una parte derecha fijada al duodeno llamada
ligamento hepatoduodenal; en esta misma cara se encontraba tambin el ligamento peritoneal
se extiende desde el lbulo lateral izquierdo hasta la hoja superficial del omento menor termina
sobre el borde de la curvatura menor del estmago al cual denominamos ligamento
hepatoomental.
Aunque la rata de laboratorio (gnero Rattus) es muy utilizada para la investigacin en diversas
reas del conocimiento, la anatoma del hgado no ha sido motivo de atencin y no hemos
encontrado bibliografa que describa las partes del rgano. (Mller, 2011).

Imagen 2. Cara visceral del hgado de rata Wistar. 1-Lbulo lateral derecho; 2Lbulo medial derecho; 4-Lbulo lateral izquierdo; 5-Lbulo medial izquierdo; 6Proceso caudado del lbulo caudado.
Recuperado el 10-09-2015: http://www.scielo.cl/pdf/ijmorphol/v29n1/art12.pdf

Captulo 2. Histologa heptica

2.1 Lobulillo heptico
Cada lbulo heptico est dividido por tejido conjuntivo en unos 100.000 lobulillos hepticos,
que constituyen las unidades funcionales bsicas del hgado.
El lobulillo heptico clsico tiene forma hexagonal y se organiza alrededor de la vena
centrolobulillar, la cual en su interior tiene cordones de hepatocitos que la rodean. Entre los
cordones de hepatocitos se localizan las sinusoides hepticas. En tres de los seis vrtices del
lobulillo heptico se localizan los espacios porta o de Kiernan, que son tringulos de tejido
conectivo dentro del cual se localizan un conductillo biliar, una rama de la arteria heptica, una
rama de la vena porta y un vaso linftico (A este conjunto de estructuras se le denomina triada
portal). Las ramas laterales de estos vasos convergen a los sinusoides hepticos situados
entre los cordones de hepatocitos, que drenan a la vena centrolobulillar.
El lobulillo portal se basa en el carcter exocrino del hgado, se centra en torno al conducto
biliar del espacio porta y se define como el rea triangular constituida por el parnquima de tres
lobulillos hepticos que son drenados por un mismo conducto biliar del espacio porta.

2.2 Acino heptico

El acino heptico es una unidad basada en el carcter endocrino del hgado y se define en
relacin a su aporte vascular. Tiene una forma aproximada de diamante y est formada por
porciones de dos lobulillos hepticos irrigados por ramificaciones terminales de la vena porta y
la arteria heptica. Los vasos sanguneos discurren en ngulos rectos desde el espacio porta
situado entre dos lobulillos hepticos formando el eje vascular del acino. Las dos venas
centrolobulillares ocupan los vrtices opuestos del diamante. Esta unidad funcional es
necesaria para entender los patrones de dao celular que se producen en casos de hipoxia o
por sustancias txicas. Dentro del acino se diferencian tres zonas:
- Zona 1: Es la ms prxima al eje vascular del acino. En esta zona los hepatocitos reciben un
excelente aporte de nutrientes y oxgeno, por lo que tienen un metabolismo ms activo. Estas
clulas son las primeras expuestas a sustancias txicas que llegan al hgado.
- Zona 2: Es una zona de actividad metablica intermedia y se localiza inmediatamente ms
externa que la zona anterior.

- Zona 3: Es la zona ms prxima a las venas centrolobulillares. Los hepatocitos de esta zona
reciben menos aporte de oxgeno y nutrientes, por lo que son ms susceptibles a sufrir daos.

Imagen 3. Estructura del lobulillo heptico tradicional.

Recuperado el 10-09-2015: http://higado-med-uaa.blogspot.mx/2009/04/vascularizacion-del-higado.html

Imagen 4. Tipos de lobulillos hepticos.

Recuperado el 10-09-2015:
7

https://anapaoar.wordpress.com/2013/04/07/una-visita-a-nuestro-cuerpo-sistema-digestivo/

2.3 Hepatocitos
Son las clulas del hgado y representan aproximadamente el 80% de las clulas de este
rgano. Presentan morfologa polidrica, pudiendo tener seis o ms caras, que pueden ser de
tres tipos diferentes: superficies con microvellosidades que forman la pared del espacio
sinusoidal, superficies que delimitan los canalculos biliares y superficies de contacto con
hepatocitos adyacentes que pueden presentar uniones estrechas. Presentan un ncleo esfrico
de posicin central, con uno o ms nuclolos evidentes. Presentan bastantes organoides
citoplasmticos debido a su funcin endocrina y exocrina, entre ellos destacan las mitocondrias
por sus necesidades energticas. El complejo de Golgi est bien desarrollado, pudiendo
presentar varias unidades que se suelen localizar prximas al ncleo y a los canalculos
biliares, ya que sus cisternas participan en el transporte de los constituyentes de la bilis hasta
estos canalculos. Las cisternas del REL y del RER son muy numerosas. El REL se estructura
como una red de tbulos anastomosados en cuya luz podemos encontrar unas estructuras
globulares que se corresponden a lipoprotenas de baja densidad que se sintetizan en el
hgado y cuando son liberadas a la sangre sirven como transportadoras de colesterol. En las
membranas del REL tambin aparecen una serie de enzimas que participan en la sntesis de
prostaglandinas y otras sustancias importantes para el metabolismo de frmacos y sustancias
txicas. En el citoplasma tambin aparecen ribosomas libres en gran cantidad, lisosomas y
peroxisomas. El glucgeno aparece en forma de grnulos densos en forma de rosetas y en
preparaciones histolgicas rutinarias las reas ricas en glucgeno presentan un aspecto
granuloso o se ven como espacios vacos con morfologa irregular. Los lpidos aparecen en
preparaciones histolgicas como vacuolas redondas. El aspecto del citoplasma vara
dependiendo de los cambios nutricionales y funcionales, que se manifiestan sobre todo como
modificaciones en el depsito de glucgeno y lpidos.

2.4 Sinusoides hepticas

Forman un plexo tridimensional en el interior de los lobulillos constituyendo una superficie
amplia para el intercambio de metabolitos entre la sangre y las clulas del parnquima
heptico. En los sinusoides se produce la mezcla de la sangre procedente de las ramas de la
arteria heptica y de la vena porta, que es transportada hasta la vena centrolobulillar. Estn
revestidos por un endotelio discontinuo y poroso, y tambin por grandes clulas denominadas
clulas de Kuppfer. El espacio que separa el endotelio de los hepatocitos se denomina espacio
de Disse, en este espacio penetran las microvellosidades de los hepatocitos permitiendo un
intercambio directo de sustancias con la sangre. Las sinusoides hepticas estn compuestas
por diferentes tipos de clulas:
- Clulas de Kuppfer: Se sitan a lo largo de los sinusoides. Su citoplasma presenta un
pequeo complejo de Golgi, numerosas mitocondrias, cortas cisternas de RE y lisosomas que
contienen peroxidasas y mieloperoxidasas, de importancia en lesiones hepticas agudas y en
procesos de fibrinognesis. Adems de en la fagocitosis, las clulas de Kuppfer intervienen en
la modulacin de la respuesta inmune y la respuesta inflamatoria mediante la elaboracin de
mediadores qumicos.
- Clulas de Ito: tambin denominadas clulas almacenadoras de grasa, se localizan en el
espacio de Disse y se caracterizan por presentar gotas de lpidos en su citoplasma.
- Adipocitos perisinusoidales: se sitan entre las clulas hepticas y presentan prolongaciones
citoplasmticas que contactan con las clulas endoteliales. Estas clulas tambin estn
implicadas en procesos de fibrinognesis heptica.
- Clulas NK (natural killer): son linfocitos granulados que destruyen clulas alteradas, como
clulas tumorales o clulas infectadas por virus.
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2.5 Canalculos y conductos biliares

Los canalculos biliares son pequeos conductos situados entre hepatocitos contiguos. En
estos canalculos las membranas celulares adyacentes se separan formando espacios
intercelulares ms amplios. Los hepatocitos conjugan y secretan los componentes de la bilis, la
bilis secretada pasa a los canalculos biliares y de stos a los conductos biliares que presentan
un epitelio simple cbico. Despus, conductos biliares pasan a grandes conductos biliares
intrahepticos en el sistema porta y abandonan el hgado a travs de vas biliares
extrahepticas. Todos estos conductos estn revestidos por un epitelio simple cilndrico con
una pared que consta de submucosa, muscular y adventicia.

Captulo 3. Fisiologa del hgado

El hgado se encarga de cerca de 500 funciones orgnicas. Juega un papel en la digestin, en
el metabolismo de azcares y las grasas, e incluso en el sistema inmunitario. Alrededor del
90% de los nutrientes del organismo procedentes de los intestinos pasan por el hgado. El
hgado convierte los alimentos en energa, almacena nutrientes y produce protenas
sanguneas. Adems, acta como filtro para eliminar patgenos y toxinas de la sangre.

3.1 Funcin metablica

Por su situacin estratgica en el cuerpo el hgado es el primer rgano que recibe los
nutrientes absorbidos del tracto intestinal a travs de la circulacin portal y realiza una gran
variedad de funciones metablicas de vital importancia para el mantenimiento de la
homeostasis. Entre las funciones metablicas del hgado encontramos el procesamiento y la
redistribucin de la glucosa y los cidos grasos, principales combustibles metablicos del
cuerpo. Adems posee una maquinaria enzimtica para la modificacin y destoxicacin de
compuestos absorbidos desde el tracto gastrointestinal. No sorprende por lo tanto que las
lesiones hepticas, agudas o crnicas puedan alterar su capacidad biocintica y metablica,
produciendo diversos trastornos clnicos.
3.1.1 Metabolismo de los carbohidratos
El hgado regula la concentracin de glucosa que hay presente en la sangre circulante
(glucemia) dentro de unos rangos bastante estrechos, para realizar esta funcin los hepatocitos
disponen de una amplia bacteria enzimtica que le permiten llevar a cabo los procesos.
La regulacin de la concentracin de glucosa en la sangre es uno de los procesos ms
celosamente mantenidos por el cuerpo. Esta sustancia es el principal combustible del cerebro,
los eritrocitos y la mdula suprarrenal. En la homeostasis de la glucosa, el hgado ocupa un
papel central por su capacidad para almacenarla como glucgeno en condicin absortiva
(glucogenognesis heptica), y para producirla a partir del glucgeno almacenado,
(Glucogenolisis), o sintetizarla por gluconeognesis, a partir de precursores no glicdicos, en
condiciones de ayuno o ejercicio. Los sustratos para la gluconeognesis heptica son el lactato
obtenido de la oxidacin incompleta de la glucosa en las clulas anaerobias, los aminocidos
glucognicos provenientes de la proteolisis muscular, activada por cortisol, y el glicerol obtenido
de las grasas almacenadas en el tejido adiposo, previa activacin mediante fosforilacin de la
lipasa sensible a hormonas por accin de las hormonas hiperglicemiantes.
Un sistema de transporte facilitado, no dependiente de insulina, GLUT 2, en la membrana
sinusoidal, permite la entrada de glucosa desde los sinusoides hepticos o la salida de glucosa
a los sinusoides hepticos en la condicin de escasez de glucosa. El GLUT 2 tiene un Km de
60 mM, muy por encima del valor de la concentracin de glucosa que se alcanza en el estado
absortivo, lo cual determina que la concentracin intraheptica de glucosa est determinada
por las concentraciones de glucosa que circulan en sangre, la que a su vez est ligada a la
9

actividad de la glucocinasa, una enzima del hgado y de las clulas beta del pncreas. Los
hepatocitos pericentrales tambin contienen GLUT 1, un transportador de glucosa presente
tambin en el cerebro y los eritrocitos.
El mantenimiento de la homeostasis de la glucosa, resulta de las interrelaciones de varias vas
del metabolismo de la glucosa, estrictamente reguladas por mltiples seales, que previenen el
funcionamiento al mismo tiempo de vas antagnicas. La rpida fosforilacin de la glucosa a
glucosa 6 fosfato, reduce la concentracin de glucosa dentro del hepatocito, disminuyendo por
lo tanto el gradiente de concentracin que promueve la entrada o la salida de glucosa. La
glucosa 6 fosfato es importante por ser un punto de ramificacin comn para:
* La sntesis de glucgeno (glucogenognesis), y su movilizacin como glucosa,
(Glucogenolisis)
* La produccin de lactato o piruvato, va gluclisis y la generacin de acetil SCoA, un sustrato
del ciclo de Krebs.
* La va del 6 fosfogluconato, una ruta metablica para la produccin de poder reductor en la
forma de NADPH, para la sntesis de cidos grasos y esteroides.
La sntesis de glucosa 6 fosfato a partir de glucosa, est catalizada por dos enzimas diferentes:
La hexocinasa una enzima que es inhibida por el producto de la reaccin que puede fosforilar
adems otros monosacridos diferentes a la glucosa, como fructosa y manosa, y la
glucocinasa, una enzima que no sufre inhibicin por producto, y es exclusiva del pncreas e
hgado. La actividad relativa de glucocinasa es muy importante, ya que al disminuir la
concentracin de glucosa libre, promueve la captacin de glucosa desde los sinusoides. La
enzima es activada por insulina e inhibida por glucagn, a travs de las concentraciones
intracelulares de AMPc. La actividad de la glucocinasa tambin es inhibida por la interaccin de
una protena reguladora que liga Fructosa 6 fosfato, para inhibir la unin de la glucosa a la
glucocinasa e impedir su fosforilacin. En presencia de altas concentraciones de Fructosa 1
fosfato la protena inhibidora de glucocinasa tiene baja actividad. La conversin de glucosa 6
fosfato a glucosa libre y Pi, es catalizada por la glucosa 6 fosfatasa, una enzima microsomal,
localizada en la luz del retculo endoplsmico, por lo que la glucosa 6 fosfato debe atravesar la
membrana del retculo endoplsmico y entrar al lumen para ser desfosforilada. La ausencia de
esta enzima produce la glucogenosis tipo Ia., mientras que la deficiencia del transportador de
Glucosa 6 fosfato al retculo endoplsmico produce la glucogenosis tipo Ib.
Igualmente la glucosa 6 fosfato puede ser almacenada como glucgeno o entrar a la ruta de
fosfo pentosas para producir NADPH para la sntesis de cidos grasos, o entrar a la va
glucoltica para ser convertida en la reaccin final de la piruvato cinasa en piruvato. La actividad
de esta ltima enzima determina el destino del piruvato. En presencia de glucosa e insulina
altas, el piruvato producto de la accin aumentada de la piruvato cinasa, es convertido en
acetil SCoA, por la piruvato deshidrogenasa, para usar en el ciclo de Krebs o para la sntesis
de cidos grasos y su almacenamiento como grasa. Sin embargo en condicin de ayuno, el
piruvato que ser obtenido ahora de lactato o aminocidos glucognicos, es convertido va
fosfoenol piruvato en glucosa, por gluconeognesis.
El hgado tambin metaboliza otros azcares como galactosa y fructosa. La principal fuente de
galactosa es la lactosa de la leche y otros derivados lcteos. Una vez hidrolizada la lactosa en
glucosa y galactosa, por la lactasa intestinal, la galactosa es fosforilada por la galactocinasa
heptica a galactosa 1 fosfato, la cual puede ser convertida en glucosa 6 fosfato y convertida
bien en glucgeno o ser oxidada a acetil CoA, va piruvato, para ser utilizada como fuente de
energa; o ser utilizada para la sntesis de cidos grasos. El segundo monosacridos ms
abundante de la dieta es la fructosa, La fructosa es absorbida desde el intestino por el GLUT 5,
y convertida en fructosa 1 fosfato por accin de la fructocinasa heptica, la Fructosa 1 P es un
activador de la glucocinasa heptica por remover la inhibicin de la protena inhibidora de
glucocinasa. La fructosa 1 fosfato es luego desdoblada, por una aldolasa, en dihidroxiacetona
fosfato y gliceraldehido. El gliceraldehido es luego fosforilado por la gliceraldehido cinasa, a
gliceraldehido 3 fosfato, entrando las dos fosfo triosas a la va de la gluclisis, de forma igual a
10

la glucosa. En este punto el metabolismo del esqueleto carbonado depende de los

requerimientos hepticos, pudiendo ser convertida en glucgeno, o entrar a la gluclisis para
producir energa y lactato o piruvato. Dado que el metabolismo de la fructosa soslaya el paso
de control de la fosfofructocinasa I. Este azcar es un mejor sustrato para la lipognesis
heptica que la glucosa. La deficiencia de la fructosa 1 fosfato aldolasa heptica, conduce a la
intolerancia hereditaria a la fructosa, con el desarrollo de disfuncin heptica y renal, razn por
la cual se debe eliminar de la dieta no solo la fructosa, sino tambin su precursor ms
importante, el disaccrido sacarosa, que contiene glucosa y fructosa.
3.1.2 Metabolismo de lpidos
La regulacin de la sntesis y el transporte de los cidos grasos a otros rganos o clulas, es
otra de las funciones importantes del hgado para el mantenimiento de la homeostasis calrica.
La sntesis y metabolismo de los cidos grasos estn regulados por mltiples factores, donde el
hgado desempea una funcin importante. En el hgado el exceso de glucosa puede ser
convertido en cidos grasos, reesterificados y transportados como lipoprotenas en la sangre
para ser almacenados en partes distantes como el tejido adiposo para su utilizacin posterior.
La conversin de glcidos y protenas en cidos grasos, y formacin de lipoprotenas para
transportar los cidos grasos mediante una estructura similar a los quilomicrones, con
fosfolpidos, colesterol y protenas especficas. Tambin participa en la formacin de colesterol
y fosfolpidos. El colesterol va a tener diferentes destinos como componente de membranas y
de estructuras celulares y su participacin en la sntesis de cidos biliares o en la eliminacin
de la secrecin biliar.
Dadas las mltiples funciones que desempean los cidos grasos en el cuerpo, su sntesis en
el citosol de la clula est bajo el control de la hormona insulina y la disponibilidad de acetil
CoA proveniente del piruvato obtenido de la glucosa. En situaciones de exceso de glucosa la
insulina promueve la conversin de sta en piruvato y de ste en acetil CoA, para la sntesis de
Malonil CoA, por la acetil CoA Carboxilasa. El malonil CoA es la molcula donadora de
carbonos para la sntesis del esqueleto carbonado de los cidos grasos, catalizada por la
sintetasa de cidos grasos. Tanto la acetil CoA Carboxilasa, como la sintetasa de cidos grasos
son enzimas activadas por insulina, en condicin absortiva. En condiciones contrarias como el
ayuno, el aumento en la relacin glucagn/insulina, promueve la movilizacin de la grasa de
reserva (liplisis), con el consiguiente aumento de los cidos grasos circulantes para su
utilizacin como combustibles metablico por diferentes rganos, incluido el hgado. El uso de
los cidos grasos como combustible requiere su conversin en Acetil CoA, FADH2 y NADH, por
el proceso de beta oxidacin. El FADH2 y el NADH, son sustratos de la cadena respiratoria,
mientras que el Acetil CoA, puede entrar al ciclo de Krebs o ser convertido en cuerpos
cetnicos, los cuales pasan a la sangre y son rpidamente metabolizados por los tejidos.
3.1.3 Metabolismo de protenas
El hgado sintetiza varias protenas esenciales, tales como las enzimas, las hormonas, los
factores de coagulacin y los factores inmunitarios. Es el rgano regulador de la cantidad de
aminocidos disponibles en la circulacin general, para ello, el total de los aminocidos que
alcanzan el hgado son sometidos a diferentes procesos como la desaminacin y
transaminacin de aminocidos, y una posterior conversin de la parte no nitrogenada en
molculas de carbohidratos o lpidos, que sern almacenados en forma de glucgeno o grasas.
Las enzimas hepticas aminotransferasas o transaminasas (ALAT y ASAT) descomponen los
aminocidos de la comida digerida y los utilizan para elaborar nuevas protenas necesarias
para el organismo. Cuando las clulas hepticas estn daadas, estas enzimas pueden
liberarse y acumularse en grandes cantidades en la sangre; es posible determinar su
concentracin mediante un sencillo anlisis de sangre. Varias de las protenas sintetizadas por
el hgado son necesarias para el funcionamiento adecuado de la sangre. Entre ellas, destacan
ciertas protenas de fijacin (que adhieren y transportan vitaminas, minerales, hormonas y
grasas) y la albmina (una protena que ayuda a mantener el volumen sanguneo adecuado).
Los factores de coagulacin producidos por el hgado son el fibringeno, la protrombina (Factor
11

II) y el Factor VII. Estos factores permiten a la sangre coagularse despus de sufrir una herida;
cuando los niveles son bajos, pueden producirse hematomas con facilidad y hemorragias
prolongadas. Otras protenas sintetizadas por el hgado son la alcalina-fosfatasa, la gammaglutamil-transferasa (GGT) y el factor de crecimiento insulnico.
La urea es el resultado final del metabolismo de las protenas. Se forma en el hgado a partir de
la destruccin de las protenas. Durante la digestin, las protenas son separadas en
aminoacidos , estos con tienen nitrgeno que se libera como ion de amonio (NH 4+), y el resto
de la molcula se utiliza para generar energa en las clulas y tejidos. El amonio (NH 4+) se une
a pequeas molculas para producir urea, la cual aparece en la sangre y es eliminada por la
orina.

3.2 Funcin digestiva

Se refiere especficamente a la produccin de bilis por las clulas hepticas. Las clulas
hepticas estn equipadas con dos bordes, uno a nivel sinusoidal por donde reciben los
nutrientes y otro borde llamado canalicular a travs del cual se excreta la bilis producida en el
citosol. El hgado genera diariamente alrededor de 800 a 1000 mL de este lquido verdeamarillento. La funcin de la bilis es actuar como detergente ayudando a emulsionar las grasas,
lo cual facilita su digestin y posterior absorcin. Por su alto contenido en bicarbonato tambin
ayuda a neutralizar el pH cido proveniente del estmago. Permite eliminar excesos de
bilirrubina y de colesterol. La vescula biliar almacena alrededor de 50-75 mL de bilis. La bilis
contiene los siguientes elementos: Colesterol, cuya concentracin es independiente de los
niveles en sangre; fosfolpidos (el 90% representada por lecitina); pigmentos biliares
(bilirrubina); sales biliares (cido tauroclico, deoxiclico, litoclico, etc.); lecitina fosfolpidos;
bicarbonato, calcio y agua.

3.3 Funcin vascular

El sistema vascular del hgado es dinmico y acta como un reservorio. Cuando se produce
una disminucin de la volemia, las reservas de sangre del hgado pasan a la circulacin
general, mientras que cuando la volemia aumenta se reserva sangre entre los sinusoides
hepticos. La formacin de la linfa se realiza mediante el paso por los poros que existen entre
las clulas endoteliales de los sinusoides hepticos para alcanzar el espacio de Disse, entre el
endotelio y los hepatocitos Desde aqu la linfa se transporta hasta los capilares linfticos. La
produccin de linfa por tanto es dependiente de la presin sangunea que se registre en los
sinusoides hepticos.

3.4 Funcin inmunolgica

La accin que conviene destacar es la de neutralizacin de toxinas y microorganismos
patgenos. Esto se lograr gracias a la accin de las fascinantes clulas de Kupffer. Estas
clulas representan el 80-90% de la poblacin de macrfagos del organismo y estn equipados
con poderosos sistemas de inactivacin de toxinas y microbios que incluyen:
* Fagocitosis: Permite ingerir y digerir patgenos
* Citocinas: Lo cual permite aumentar o reducir el flujo sanguneo en una determinada zona del
hgado.
* Molculas de adhesin: Permite fijar o inactivar a microorganismos patgenos.
* Eicosanoides: Lo cual amplifica o reduce la reaccin inflamatoria.
* Derivados reactivos de oxgeno. Esto permite inactivar o daar a agentes nocivos.

3.5 Funciones de desintoxicacin, secrecin y eliminacin

12

Eliminacin de frmacos: Todos los compuestos qumicos ajenos al organismo son reconocidos
como extraos y son eliminados con el fin de evitar su acumulacin y posible toxicidad. Las
clulas hepticas disponen de los siguientes procesos:
* Detoxificacin de Fase 1: A travs de procesos de oxidacin, reduccin e hidrlisis se fijan o
neutralizan toxinas gracias a ms de 50 a 100 enzimas que en su conjunto se llaman
citocromos P450 y cuya actividad vara en cada individuo en base a factores raciales, genticos
y nutricios.
* Enzimas de Fase 2: Es un proceso de transformacin que facilita su eliminacin. Incluye a la
conjugacin, la sulfatacin, la glucoronidacin, la metilacin o la acetilacin.
Algunos individuos son lentos o rpidos en la detoxificacin lo cual les puede conferir riesgos
de toxicidad e incluso de cncer, cuando se acumulan compuestos nocivos dentro de las
clulas.
Inactivacin de hormonas: Mltiples hormonas que se producen en el organismo son
inactivadas en el hgado. Esto incluye algunas de las hormonas esteroides (producidas en la
corteza suprarrenal, ovarios y testculos), las aminas biognicas (tiroideas, mdula suprarrenal
o de la glndula pineal) o las hormonas protenicas (hipotlamo e hipfisis, calcitonina,
pncreas endcrino, paratiroides, digestivas).
Transformacin de la bilirrubina: En condiciones normales, los glbulos rojos disponen de una
protena llamada hemoglobina, que contiene hierro, y que permite el transporte de oxgeno
desde el pulmn hacia los tejidos. Sin embargo, los glbulos rojos (o eritrocitos) tienen un ciclo
de vida mxima de 120 das al cabo de los cuales son destruidos en el bazo. Los macrfagos
del bazo liberan a la hemoglobina la cual es transformada rpidamente en biliverdina y luego
en bilirrubina indirecta (BI). En concentraciones excesivas esta sustancia es potencialmente
txica para los tejidos. La BI se conjuga con la albmina y es transportada por sangre hasta el
hgado (solo ah se difunde). Dentro del hepatocito, en el retculo endoplasmtico, se lleva a
cabo la conjugacin, gracias a la enzima glucoronil-transferasa, la BI se transforma en
bilirrubina directa (BD) la cual puede ser eliminada haca el duodeno. Esta sustancia da el
caracterstico pigmento amarillo-caf a las evacuaciones. Una pequea cantidad de bilirrubina
es reabsorbida en forma de urobilingeno y luego eliminado a travs de la orina como urobilina.
Metabolismo del alcohol: El hgado del ser humano est equipado con poderosos sistemas
para metabolizar y eliminar el alcohol. El alcohol puede ingresar al organismo en forma de
diversas bebidas pero tambin puede generarse en pequeas cantidades en el colon a travs
del proceso de fermentacin intestinal. Cuando se ingiere alcohol, el 20% se absorbe en el
estmago y el 80% en el intestino delgado. Posteriormente pasa a la sangre y las clulas
hepticas se encargan de su metabolismo. Al llegar al hgado, las clulas hepticas disponen
de los siguientes sistemas enzimticos para su metabolismo y eliminacin:
* Alcohol deshidrogenasa. Una enzima localizada en el citoplasma de los hepatocitos que se
produce en mayor cantidad en los hombres que en las mujeres. Es capaz de transformar el
alcohol en acetaldehdo.
* Acetaldehdo deshidrogenasa. Transforma el acetaldehdo en acetato y luego en CO2 y agua.
* Sistema microsomal de oxidacin de etanol intraheptico (MEOS). En particular se refiere al
citocromo P450 2E1 que puede sintetizarse en mayores concentraciones en caso de hbito de
consumo crnico de alcohol.

3.6 Funcin almacenadora de nutrientes

Las clulas hepticas almacenan los siguientes nutrientes:
* Grasas. Hasta 75 gramos, lo cual representa un 5% de su peso.
* Carbohidratos. Hasta un 10% de su peso, que equivale a 150 gramos, en forma de glucgeno
que puede ser transformado en glucosa en situaciones de ayuno.
13

* Vitaminas liposolubles e hidrosolubles. Destaca en particular la vitamina A que se concentra

en las clulas de Ito.
* Hierro y otros minerales como zinc y cobre.

Captulo 4. Hepatotxicos
Los hepatotxicos son agentes que pueden provocar toxicidad en el hgado, produciendo una
lesin heptica, pueden considerarse de dos tipos segn la zona del dao que causen:
El agente citotxico es el que origina una degeneracin o necrosis del parnquima heptico, la
necrosis puede ser centrolobulillar o difusa. Las aminotransferasas aparecen muy elevadas.
El agente colesttico se caracteriza por originar una retencin de bilis con una mnima lesin
del parnquima heptico. Da lugar a hepatitis obstructivas y niveles de aminotransferasas
discretamente elevados.
Adems, los hepatotxicos tambin pueden clasificarse en:
Hepatotxicos intrnsecos (predecibles): Se reconocen por la incidencia de toxicidad, pueden
ser reproducibles en animales de laboratorio, el periodo entre exposicin y desarrollo de lesin
heptica es breve, y dependen de la dosis. Hay dos tipos: Los directos que son venenos
protoplasmticos capaces de originar rpidamente una lesin en el hgado, atacan al
hepatocito y provocan disrupcin de todos los elementos de la clula. Y los indirectos, que son
selectivos y atacan al hepatocito mediante la interferencia de una va metablica especfica.
Hepatotxicos dependientes de la idiosincrasia del husped (impredecibles): Se reconocen por
que producen lesin solo en una pequea parte de los individuos expuestos y dicha lesin
aparece despus de un periodo largo de latencia, no se relacionan con la dosis y no son
reproducibles en animales de laboratorio.

Cuadro 1. Productos hogareos que pueden ser hepatotxicos.

Recuperado el 10-09-2015: http://www.fmed.uba.ar/depto/toxico1/hepatotoxicidad.pdf

14

Los hepatotxicos pueden seguir diversos mecanismos para causar hepatotoxicidad, al menos
hay 6 mecanismos implicados en la lesin heptica, la manera en la que diversos orgnulos del
hepatocito se ven afectados define el patrn de la enfermedad:
* La interrupcin de la homeostasis del calcio intracelular conduce a la disociacin de las fibras
de actina en la superficie del hepatocito, lo que da como resultado la aparicin de
protuberancias en la membrana celular, con su posterior ruptura y lisis celular.
* La disociacin se puede producir al lado del canalculo, la porcin encargada de la excrecin
de bilis, hay prdida de los procesos vellosos y la interrupcin de las bombas de transporte de
protena asociada a resistencia multidroga 3 (MRP3), impidiendo la excrecin de bilirrubina y
otros compuestos orgnicos.
* Mltiples reacciones hepatocelulares implican el citocromo P-450, generando reacciones que
pueden conducir a la unin covalente del frmaco a la enzima, creando as nuevos complejos
que no funcionan.
* Los complejos (enzima-droga) anteriormente mencionados migran a la superficie de la clula
en vesculas para servir como inmungenos (objetivo para el ataque por la clulas T citolticas),
el resultado es una respuesta inmune con participacin de clulas T y citoquinas.
* La activacin de las vas de apoptosis por el factor de necrosis tumoral o receptor Fas puede
desencadenar la cascada de caspasas intracelulares, que resulta en la muerte celular
programada con la prdida de la cromatina nuclear.
* Ciertos frmacos inhiben la funcin mitocondrial, tanto la -oxidacin como las enzimas que
participan en la cadena respiratoria. Los cidos grasos libres no pueden ser metabolizados, y la
falta de oxgeno conduce a la acumulacin de lactato y especies reactivas del oxgeno.

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Cuadro 2: Mecanismos de lesin heptica predecible/impredecible.

Recuperado el 10-09-2015: http://www.fmed.uba.ar/depto/toxico1/hepatotoxicidad.pdf

Capitulo 5. Hepatoprotectores
Los agentes hepatoprotectores son considerados una importante terapia para acelerar la cura
del hgado afectado por una enfermedad primaria o secundaria. Estos agentes tienen la
capacidad de apoyar las funciones hepticas proporcionando materiales tiles para los
procesos de sntesis y/o reforzando las funciones hepticas normales. Adems, tienen que
evitar los daos al hgado reforzando los canales normales de destoxificacin, los canales
normales de excrecin e inhibiendo la apoptosis y la formacin de compuestos nocivos.
(Cascales, 1987).
Los hepatoprotectores se dividirse en naturales y sintticos (frmacos). Los naturales por lo
general son plantas o frutos como: Aloe, ans, perejil, carambola, remolacha, etc. Los frmacos
hepatoprotectores se pueden clasificar en varios grupos de acuerdo a su estructura qumica, su
procedencia o su mecanismo de accin, entre los que se encuentran:
* Aminocidos y derivados: L-cisteina, nacetil, l-cisteina, glutaton reducido, cido tiazolindin
carboxlico y tiazolidincarboxilato de arginina, cido a,aditiocaproico, diobenzotiolina,
malotilato.
* Flavonoides y productos de origen natural: Silimarina, clanidanol, Schirandrin B.
* Transemilantes: S-adenosil/L-metionina.
* Colerticos con accin hepatoprotectora: cido cicloxifilico, piprozolina, cido ursodeoxiclico.

Captulo 6. Perfil heptico

6.1 Definicin
El perfil heptico es una serie de pruebas realizadas en el laboratorio con el fin de evaluar la
funcin heptica. Las pruebas de funcin heptica se utilizan en general para detectar,
diagnosticar especficamente, estimar la severidad, y monitorear el curso de la enfermedad
heptica. La interpretacin efectiva del panel de funcin heptica requiere un conocimiento de
la fisiopatologa subyacente y las caractersticas de las pruebas del panel. Para una correcta
interpretacin de las pruebas hepticas, es necesario acompaarlas de una historia clnica
completa y de un examen fsico apropiado.

6.2 Pruebas enzimticas

Alanina Aminotransferasa (ALT): Las clulas hepticas producen la enzima ALT. Las
concentraciones de ALT aumentan cuando las clulas hepticas estn daadas o se estn
muriendo. A concentraciones de ALT ms elevadas, mayor muerte celular o inflamacin del
hgado est ocurriendo. Sin embargo, las ALT no siempre son buenos indicadores de qu tan
bien est funcionando el hgado, slo una biopsia del hgado puede revelar eso. Las
concentraciones de ALT pueden permanecer bajas an si el hgado est inflamado o se est
formando tejido cicatricial, o durante la fase inmunotolerante de la enfermedad en un nio, o
durante la fase inicial de la hepatitis C. Valores normales 10-55 UI/I.
Aspartato Aminotransferasa (AST): Tal como la enzima ALT, la AST es una enzima producida
por las clulas hepticas, pero los msculos tambin producen AST y puede estar elevada por
enfermedades diferentes a la enfermedad heptica. Por ejemplo, a menudo la AST es alta
durante un infarto del miocardio (ataque al corazn). En muchos casos de inflamacin del
16

hgado, las ALT y AST tambin estn altas. En algunas enfermedades, como la hepatitis
alcohlica, las concentraciones de AST pueden ser ms altas que las de ALT. Las
concentraciones de AST pueden ser normales, y de todas maneras se puede estar
presentando dao heptico. Valores normales 10-40 UI/I.
Deshidrogenasa lctica (LDH): La LDH es una enzima que se encuentra en el citoplasma de
los hepatocitos y cataliza la oxidacin reversible de cido lctico a cido pirvico. Existen cinco
isoenzimas, LD1 a LD5, distribuidas en hgado y otros tejidos como el msculo cardiaco, rin
y eritrocitos, lo cual tambin le resta especificidad a esta prueba como indicadora de dao
heptico, sin embargo, puede ser una prueba til en combinacin con otras pruebas hepticas
y en ciertos diagnsticos diferenciales.
Fosfatasa alcalina (FA): La fosfatasa alcalina se encuentra presente en varios tejidos,
incluyendo el hgado, el hueso, el rin, el intestino y la placenta. Cada uno de estos sitios
contiene una isoenzima diferente que puede ser separada mediante electroforesis. La fosfatasa
alcalina del hgado se encuentra en la superficie canalicular y por tanto es un marcador de
disfuncin biliar, cuyos valores se pueden aumentar hasta 10 veces en obstrucciones de las
vas biliares, en procesos infecciosos o en presencia de masas. Esta enzima se encuentra
tambin aumentada durante el tercer trimestre del embarazo, en una gran variedad de
enfermedades intestinales y en la cirrosis. En el individuo normal la mayora de la fosfatasa
alcalina est compuesta por la fosfatasa alcalina proveniente del hgado y del hueso. Valores
normales 45-115 UI/I.
Gamma-glutamil transferasa (GGT): La GGT regula el transporte de aminocidos a travs de
las membranas celulares al catalizar la transferencia de un grupo glutamil a los aminocidos
libres. Su medicin concomitante con la fosfatasa alcalina es fundamental en la determinacin
del origen de unos valores altos de fosfatasa alcalina, ya que la gamma-glutamil transferasa
proviene casi exclusivamente del hgado y no es producida por el hueso; as, unos valores
elevados de fosfatasa alcalina acompaados de unos valores elevados de la gamma-glutamil
transferasa se asocian con una enfermedad del tracto biliar. Valores normales 0-30 UI/I.

6.3 Pruebas metablicas

Bilirrubina: La bilirrubina es el principal metabolito del grupo hemo de la hemoglobina,
mioglobina y los citocromos. Diariamente se producen alrededor de 250 mg a 350 mg de
bilirrubina, 85% como resultado de la destruccin de los eritrocitos viejos. La bilirrubina
indirecta o no conjugada se encuentra unida a la albmina mientras que la bilirrubina
conjugada o directa se encuentra unida al cido glucurnico. La fraccin directa corresponde a
menos del 20% de la bilirrubina total. Las concentraciones de bilirrubina en la sangre pueden
subir debido a sobreproduccin, disminucin de la absorcin por parte del hgado, disminucin
de la conjugacin, disminucin de la secrecin del hgado o bloqueo de las vas biliares. En
caso de aumento de produccin, disminucin de absorcin del hgado o disminucin de la
conjugacin, la bilirrubina indirecta estar elevada. En casos de disminucin de secrecin del
hgado u obstruccin de las vas biliares, la bilirrubina directa estar elevada.
Albmina: La albmina es la principal protena producida por el hgado; sin embargo, no slo se
altera cuando hay dao heptico, sino cuando hay prdida de protenas, estados catablicos y
desnutricin. Es la protena transportadora de numerosas sustancias endgenas, como son la
bilirrubina y las hormonas tiroideas, y de sustancias exgenas, como son muchos
medicamentos. Una disminucin en la albmina srica se observa cuando hay destruccin
masiva del tejido heptico y es uno de los principales factores pronsticos de la cirrosis.
Valores normales 3.5-5 g/dL.
Tiempo de protrombina (TP): El tiempo de protrombina es dependiente de la actividad de los
factores de coagulacin I, II, V, VI y X, todos ellos sintetizados en el hgado, por ello es la
prueba con mayor utilidad para detectar anormalidades en la coagulacin asociadas con dao
heptico. Comparadas con las aminotransferasas, la albmina y el tiempo de protrombina son

17

unos indicadores pobres de dao heptico pero son buenos indicadores de la severidad de la
enfermedad, en particular el tiempo de protrombina. Tiempos normales 10.9-12.5 s.

6.4 Pruebas inmunolgicas

Inmunoglobulinas y anticuerpos tisulares: El panel de funcin heptica incluye la determinacin
de protenas totales y de albmina, lo cual permite calcular la concentracin de globulinas
totales. Un aumento de las inmunoglobulinas (Ig) totales es indicativo de una enfermedad
heptica crnica o de una gammapata. Las enfermedades autoinmunes pueden tambin
causar dao heptico. Entre las principales estn la cirrosis biliar primaria, para la cual se
utilizan los anticuerpos mitocondriales como prueba diagnstica, y la colangitis esclerosante
primaria, en donde se pueden encontrar positivos los anticuerpos anti-citoplasma de neutrfilos
(ANCA), los anticuerpos anti-msculo liso (anti-SMA) y los anticuerpos antinucleares (ANAs).

6.5 Imagen (ultrasonido o ecografa)

Las imgenes por ultrasonido, tambin denominadas exploracin por ultrasonido o ecografa,
involucran el uso de un pequeo transductor (sonda) y un gel para ultrasonido para la
exposicin del cuerpo a ondas acsticas de alta frecuencia. El transductor recoge los sonidos
que rebotan y una computadora luego utiliza esas ondas sonoras para crear una imagen. Las
examinaciones por ultrasonido no utilizan radiacin ionizante (como se usa en los rayos X).
Debido a que las imgenes por ultrasonido se capturan en tiempo real, pueden mostrar la
estructura y el movimiento de los rganos internos del cuerpo, como as tambin la sangre que
fluye por los vasos sanguneos.
Las imgenes por ultrasonido es un examen mdico no invasivo que ayuda a los mdicos a
diagnosticar y tratar condiciones mdicas. Un ultrasonido abdominal produce una imagen de
los rganos y otras estructuras de la parte superior del abdomen. El ultrasonido abdominal se
realiza para evaluar: riones, hgado, vescula biliar, pncreas, bazo, aorta abdominal y otros
vasos sanguneos del abdomen.
El ultrasonido se utiliza para ayudar a diagnosticar distintas dolencias, tales como: dolor o
distensin abdominal, funcin anormal del hgado, rgano abdominal agrandado, clculos en la
vescula o en el rin o aneurisma en la aorta. El ultrasonido Doppler consiste en una tcnica
especial de ultrasonido que le permite al mdico ver y evaluar la circulacin de la sangre a
travs de arterias y venas en el abdomen o dentro de varios rganos del cuerpo tales como el
hgado y los riones.

Capitulo 7. Pruebas bioqumicas

7.1 Protenas totales
Cuando se hace referencia a las protenas totales en suero, se trata una medicin aproximada
de todas las protenas presentes en la parte lquida de la sangre. Las protenas totales son el
resultado de sumar los distintos componentes proteicos presentes en el organismo tales
como: Alfa1, alfa2, beta gamma globulina y albmina.
Valores normales: 6.0 a 8.3 g/dL.
Valores altos: Hiperproteinemia causada por deshidratacin, hemoconcentracin o aumento en
la concentracin de protenas especficas.
Valores bajos: Hipoproteinemia por hemodilucin producida por un defecto en la realizacin de
la sntesis proteica, catabolismo proteico excesivo o perdidas excesivas (hemorragias).

7.2 Albmina
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La albmina es la protena de ms concentracin en la sangre. La albmina transporta muchas

molculas pequeas y tiene tambin la funcin de mantener la presin sangunea. La
determinacin de albmina se realiza para evaluar la posible presencia de enfermedades del
rin o del hgado, o bien que el cuerpo no absorba bien suficientes protenas.
Niveles normales: 3.4-5.4 g/dL.
Niveles bajos: La disminucin de albmina en la sangre puede ocurrir cuando el cuerpo no
obtiene ni absorbe suficientes nutrientes, esto puede ser un signo de enfermedades renales o
de enfermedades hepticas.

7.3 Colesterol
Se trata de una sustancia presente en las grasas, aceites y yema de huevo, y que se distribuye
ampliamente por el organismo (sangre, hgado, bilis).
Niveles normales: Colesterol (120-200 mg/dL); HDL (42-90 mg/dL), LDL (0-160 mg/dL)
Niveles altos: La subida del colesterol produce xantomas (ndulos de color amarillo que
aparecen en la piel) y xantelasmas (en este caso los ndulos aparecen alrededor de los ojos).
Cuando la cifra de colesterol est dentro de lo normal (entre 0 y 200 mg/dL), significa que el
nivel de grasas presente en el organismo es adecuado, pero si est elevado es necesario
analizar los dos tipo de colesterol (HDL y LDL), teniendo en cuenta que el colesterol total no es
la suma de los otros dos.
HDL (colesterol bueno): Es una protena capaz de transportar el colesterol desde el interior de
las arterias hasta el hgado, donde ser metabolizado.
Niveles altos: de esta protena implican una proteccin contra el riesgo de padecer
enfermedades cardiovasculares graves, como puede ser un infarto de miocardio.
Niveles bajos: especialmente en las mujeres, son un factor de riesgo para sufrir episodios de
isquemia cardaca.
LDL: Este tipo de colesterol puede acumularse en las clulas de la pared arterial, llegando
incluso a obstruirlas.
Niveles altos: cuanto mayor sea el nivel de este tipo de colesterol, mayores probabilidades
habr de padecer enfermedades cardacas por obstruccin arterial. Debido a este riesgo, lo
ptimo sera mantener unos niveles bajos de este colesterol en la sangre, y esto es
particularmente importante para aquellas personas que ya hayan tenido algn problema
cardiovascular (en estos casos se recomiendan niveles por debajo de los 100mg/dL).

7.4 Bilirrubinas (totales y directas)

Es una sustancia que suele contener la bilis, que resulta de la degradacin de la hemoglobina,
y es de color amarillento. Indica si el hgado y la va biliar funcionan como deben.
Niveles normales: 0.2-1 mg/dL.
Niveles altos: El aumento de la bilirrubina puede deberse a: alteraciones hereditarias en el
metabolismo y eliminacin de dicha protena, alteraciones en la anatoma de los conductos
biliares o obstrucciones por piedras en la vescula, o bien a enfermedades hepticas
(cirrosis o hepatitis). Si esta sustancia aumenta mucho va a aparecer ictericia (coloracin
amarillenta de piel y mucosas) y coluria (orina de color oscuro, debido a la eliminacin urinaria
de bilirrubina).

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OBJETIVOS
Administrar diariamente durante 35 das a ratas Wistar macho: paracetamol mg/kg de peso y
glutamina mg/kg de peso, por va oral, obtenindose muestra de sangre por puncin cardiaca
cada 7 das y la cuantificacin de analitos sricos: albmina, protenas totales colesterol,
bilirrubina total, bilirrubina conjugada y bilirrubina indirecta y la medida antropomrfica peso;
todo ello con la finalidad de analizar los resultados obtenidos, discutir y proponer los
mecanismos bioqumicos provocados en el hgado de las ratas que evidencien el efecto de las
sustancias administradas en el metabolismo del hepatocito.

HIPTESIS
S la glutamina tiene la capacidad de inhibir la produccin de N-acetil-p-benzoquinonemina
entonces puedes ser utilizado para reducir los cambios ocasionados al hepatocito de las ratas
WIstar por efecto del paracetamol y provocar que los analitos del suero, (protenas totales,
bilirrubina total y directa, colesterol total y albmina) de las ratas del lote glutamina/paracetamol
no presenten variaciones significativas y mantengan sus valores constantes en comparacin
con el lote control.

METODOLOGA
El da viernes 18 de septiembre fueron entregadas 24 ratas Wistar, del mismo sexo y de
edades parecidas, las cuales fueron pesadas en el laboratorio. Posteriormente se dividieron en
relacin a su peso en 4 lotes de 6 ratas, siguiendo el mtodo de la culebra japonesa. Los lotes
fueron:
Lote control, no se le suministr ni el hepatotxico ni hepatoprotector.
Lote paracetamol: Se le suministr Paracetamol, 0.3 mL por cada 300 g por va oral,
diariamente a las 10:30 pm.
Lote glutamina: Se le suministr Glutamina, 0.5 mL de la solucin X% por va oral, diariamente
a las 10:30 pm.
Lote glutamina/paracetamol: Se le suministr Paracetamol y Glutamina, ambas por va oral y
en las cantidades mencionadas respectivamente, la Glutamina se suministr a las 10:30 pm y
el Paracetamol a las 11:00 pm, ambas por va oral.
Todas las ratas fueron alimentadas con nutricubos (20 g por da para una rata de
aproximadamente 300 g) y agua a saciedad, a lo largo de la experimentacin las ratas vivieron
en jaulas individuales, en un ambiente de temperatura constante (15-25C aproximadamente) y
ciclos alternados de 12 hrs de luz y 12 hrs de oscuridad.
El viernes 18 de septiembre se realizaron los lotes de trabajo. La administracin de
Paracetamol y de Glutamina comenz el sbado 19 de septiembre y termin el 22 de octubre.
A partir del 25 de septiembre, cada viernes, todas las ratas Wistar fueron pesadas y se les
tom muestras sanguneas mediante puncin cardiaca para realizar: cuantificacin de
20

protenas totales, cuantificacin de albumina, cuantificacin de colesterol y cuantificacin de

bilirrubinas. Los valores que obtenidos con el transcurrir de las semanas fueron anotados en
tablas control para realizar graficas comparativas entre los 4 lotes.
El viernes 23 de octubre se realiz la necropsia a todas las ratas estudiadas, con el fin de
visualizar el dao en el hgado.

Cronograma de actividades
18/Sep/15

19/Sep/15

20/Sep/15

21/Sep/15

22/Sep/15

23/Sep/15

24/Sep/15

Entrega de ratas
Pesar ratas
Distribucin lotes
Administracin:
Lote 2 Paraceta.
Lote 3 Glutamina
Lote 4 Par y Glut

Administracin:
Lote 2
Paracetamol
Lote 3 Glutamina
Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Administracin:
Lote 2
Paracetamol
Lote 3 Glutamina
Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Administracin:
Lote 2
Paracetamol
Lote 3 Glutamina
Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Administracin:
Lote 2
Paracetamol
Lote 3 Glutamina
Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Administracin:
Lote 2
Paracetamol
Lote 3 Glutamina
Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Administracin:
Lote 2
Paracetamol
Lote 3 Glutamina
Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

25/Sep/15

26/Sep/15

27/Sep/15

28/Sep/15

29/Sep/15

30/Sep/15

1/Oct/15

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

3/Oct/15

4/Oct/15

5/Oct/15

6/Oct/15

7/Oct/15

8/Oct/15

Muestra
sangunea
Pruebas
bioqumicas:
P. Totales
Albmina
Colesterol
Bilirrubinas
Administracin:
Lote 2 Paraceta.
Lote 3 Glutamina
Lote 4 Par y Glut

2/Oct/15
Muestra
sangunea
Pruebas
bioqumicas:
P. Totales
Albmina
Colesterol
Bilirrubinas
Administracin:
Lote 2 Paraceta.
Lote 3 Glutamina
Lote 4 Par y Glut

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

10/Oct/15

11/Oct/15

12/Oct/15

13/Oct/15

14/Oct/15

15/Oct/15

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

17/Oct/15

18/Oct/15

19/Oct/15

20/Oct/15

21/Oct/15

22/Oct/15

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Administracin:

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 2
Paracetamol

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 3 Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

Lote 4
Paracetamol y
Glutamina

9/Oct/15
Muestra
sangunea
Pruebas
bioqumicas:
P. Totales
Albmina
Colesterol
Bilirrubinas
Administracin:
Lote 2 Paraceta.
Lote 3 Glutamina
Lote 4 Par y Glut

16/Oct/15
Muestra
sangunea
Pruebas
bioqumicas:
P. Totales
Albmina
Colesterol
Bilirrubinas
Administracin:
Lote 2 Paraceta.
Lote 3 Glutamina
Lote 4 Par y Glut

23/Oct/15
Muestra sangunea
Pruebas bioqumicas:
P. Totales
Albmina
Colesterol
Bilirrubinas
Necropsia

21

Obtencin del suero sanguneo

Para realizar las pruebas bioqumicas se extraer 1 mL de sangre de cada rata, vertindolo en
un tubo de ensayo por las paredes, se colocar el tubo inclinado y se incubara durante 10
minutos a 37C, luego se centrifugara a 2500 rpm por 10 minutos y se extraer el suero con
una pipeta Pasteur, colocndolo en otro tubo de ensayo.
Cuantificacin de protenas totales
Las protenas sricas se cuantifican al reaccionar con el Cu 2+ del reactivo de Biuret en solucin
alcalina, formando complejos de color violeta. Se realiza la siguiente serie de tubos:
Agua destilada
STD protenas (mL)
Albumina bovina
[0.1g/mL]
(L)
Suero problema
NaOH 3%
(mL)
Reactivo de Biuret

Blanco
0.1

Problema

10

20

30

40

1.5

1.5

1.5

1.5

1.5

0.1
1.5

0.25

0.25

0.25

0.25

0.25

0.25

Se deja reposar por 15 minutos y luego se lee en el espectrofotmetro a 545nm de longitud de

onda.
Cuantificacin de albmina
La albmina se conjuga con colorantes formando complejos con stos y obteniendo
propiedades pticas distintas a las que posee el colorante slo. Se realiza la siguiente serie de
tubos:
Solucin VBC (mL)
Agua destilada (L)
STD protenas (L)
Suero problema (L)

Blanco
2.5
5

Estndar
2.5

Problema
2.5

5
5

Luego se lee en el espectrofotmetro a 630 nm de longitud de onda.

Cuantificacin de colesterol
El colesterol srico reacciona con el reactivo de Lieberman Buchard (cido sulfrico
concentrado, cido actico glacial, anhdrido actico y sulfato de sodio) formando el cido 3,3biscolesta-3,5-dienilsulfnico (amarillo) ms el cido 3,3-biscolesta-2,4-dienilsulfnico (azul);
cuya mezcla es de color verde. Se realiza la siguiente serie de tubos:
cido actico glacial (mL)
Estndar colesterol [40mg/dL]
(mL)

Blanco
0.1

0.05

0.1

0.15

0.2

Problema

22

Suero problema
Reactivo de Lieberman (mL)

2.5

2.5

2.5

2.5

2.5

0.1
2.5

Se incuba a 25C por 20 minutos y se lee en el espectrofotmetro a 610 nm de longitud de

onda.

Cuantificacin de bilirrubinas
Las bilirrubinas reaccionan con el cido sulfanilico diazotado produciendo un pigmento de color
rojo-violaceo (azobilirrubina). Se realiza la siguiente serie de tubos:
Suero
Agua destilada (mL)
Desarrollador (mL)
Reactivo sulfanilico (L)
Diazoreactivo (L)

Blanco
200
2.5

Directa
200
2.5

Total
200
2.5

200
200

200

Se mezclan y se dejan reposar por 5 minutos, despus se lee en el espectrofotmetro a 530

nm de longitud de onda. Por ltimo se realizan los clculos para obtener la bilirrubina indirecta.

RESULTADOS

Peso
Grfica 1.- Peso de las ratas Wistar.

23

Protenas totales
Grfica 2.- Concentracin de protenas totales.

Protenas totales
8
7
6
Blanco

5
Concentracin de protenas totales mg/dL

Paracetamol

Glutamina
Glu/Paracetamol

3
2
1
0
7

14 21 28 35

Das de induccin

24

Albmina
Grfica 3.- Concentracin de albmina.

Albmina
4
3.5
3
Blanco

2.5
Concentracin de albmina mg/dL

Paracetamol

Glutamina
Glu/Paracetamol

1.5
1
0.5
0
7

14

21

28

Das de induccin

Colesterol
Tabla y grfica 4.- Concentracin de colesterol.

25

Colesterol
400
350
300
Blanco

250
Concentracin de colesterol mg/dL

Paracetamol

200

Glutamina
Glu/Paracetamol

150
100
50
0
7

14

21

28

35

Das de induccin

Bilirrubinas
Tabla y grfica 5.- Concentracin de bilirrubinas totales.

Bilirrubinas totales
0.9
0.8
0.7
0.6

Blanco

0.5
Concentracin de bilirrubinas totales
0.4
mg/dL

Paracetamol
Glutamina
Glu/Paracetamol

0.3
0.2
0.1
0
7

14

21

28

35

Das de induccin

Grfica 6.- Concentracin de bilirrubinas directas.

26

Bilirrubinas directas
4
3
2
1
Concentracin de bilirrubinas
mg/dL

0
25/09/201502/10/201509/10/201516/10/201523/10/2015
-1
-2
-3
-4
-5

Necropsia
Tabla 7. Peso de hgados.
Lote
Paracetamol/Glutamina
Paracetamol/Glutamina
Paracetamol
Glutamina
Blanco
Paracetamol

Rata
LoCo
Mi
MdPd
MiLo
CaPi
MiCo

Peso (g)
12.85
13.21
14.06
12.12
11.54
11.84

Porcentaje de hgado en peso

4.3%
4.57%
4.85%
4.16%
5%
4.04%

ANLISIS DE RESULTADOS
27

Peso
Los cuatro lotes fueron alimentados con nutricubos (20g por da aproximadamente por cada
300 g) y agua a saciedad como se indica en la metodologa.
Se observa en la grfica la variacin de peso de los lotes (Y) a medida que transcurran los
das de la experimentacin (X), con los datos obtenidos de las ratas blanco obtenemos nuestro
lmite superior que es de 262.854 g y nuestro lmite inferior que es de 233.81 g, al inicio de la
experimentacin se puede observar que los tres lotes de ratas en tratamiento estaban por
debajo del lmite inferior pero todas con un peso mayor a 200 g lo cual nos indica que estas se
encontraban en etapa adulta segn los valores de referencia encontrados en el artculo Curvas
de referencia para valorar el crecimiento fsico de ratas macho Wistar.
Los resultados graficados son: peso (Y) contra das de induccin (X), los pesos graficados se
obtuvieron sacando la media de cada lote, los puntos graficados se comportan de manera
ascendente pero el aumento no es constantes.
El lote de paracetamol se muestra con menos cambios bruscos en el cambio de peso durante
los das de induccin y es el lote que muestra los menores pesos cuando se comparan con los
otros dos lotes, esto puede que ocurra debido al dao causado por el paracetamol ya que en
la primera etapa de toxicidad que se presenta de los 30 a los 40 minutos post-ingesta la rata
pudo haber presentado sntomas como cansancio, nuseas, vmito, ligero malestar, en esta
fase se est produciendo el dao heptico, aunque slo un punto de estos lotes sale del rango
determinado por el lote blanco aproximadamente al da 25 de la administracin por lo que
puede que el dao heptico no se haya logrado por la cantidad de paracetamol administrado o
que el dao no se logr observar por el tiempo que dur la experimentacin.
El lote tratado con glutamina sale del lmite superior el da 16, este lote es el que se presenta
con mayor tiempo arriba del lmite superior, la glutamina que se les era suministrada puede
transformarse en glutamato por medio de la enzima glutamasa, est a su vez puede entrar a
ser metabolizada en el Ciclo de Krebs o sufrir transaminacin donde se obtienen aminocidos
los cuales pueden sufrir recambio proteico o entrar a gluconeogenesis, en este caso se obtiene
glucosa a partir de los aminocidos la cual por medio de la glucolisis se convierte en piruvato y
posteriormente en Acetil CoA el cual puede metabolizarse mediante la lipognesis para dar
como resultado Triacilgliceridos son lpidos de reserva los cuales se almacenan en el tejido
adiposo por esta razn es que se observa que las ratas tratadas con esta protena se
encuentran con valores mayores a diferencia de los dems lotes.
El lote tratado de glutamnia/paracetamol salen del lmite superior el da 15, del da 15 al da 20
no se observa mucho variacin en el peso, posteriormente del da 25 al da 29 hay un ascenso
notable.
A pesar de que los cuatro lotes se encontraban bajo la misma dieta, hay que considerar que el
grado de actividad fsica que desarrolla cada rata era variable, as como la cantidad de
nutricubos que consuman da con da, ya que la cantidad era aproximada pero eso depende
del requerimiento de cada uno de los roedores, es importante resaltar esto debido a que esto
justifica que los pesos no se hayan comportado de manera proporcional as como tambin hay
acumulacin de errores en el pesaje debido a la mala calibracin de las bsculas y a la lectura
del peso que vara de lector en lector.

Protenas totales
Los resultados de los anlisis de protenas totales se observan en la grfica 2. El lote control
mostr un comportamiento no tan comn, ya que al encontrarse el hgado en condiciones
optimas, la sntesis de protenas plasmticas debi ser constante, sin embargo se present una
disminucin en la concentracin de protenas durante las primeras semanas, indicando que el
hepatocito no sintetizaba correctamente las protenas totales, hasta que la concentracin
comenz a aumentar; debido a esto, del lote control se tomaron los valores mximo y mnimo
28

registrados para establecer un rango de valores normales y poder analizar el comportamiento

que siguen los otros lotes.
En el lote paracetamol se presenta que la concentracin de protenas totales va disminuyendo
con el paso de los das de induccin, esto se debe a que prcticamente gran parte de las
protenas en el suero sanguneo (albmina as como del 50% al 80% de las globulinas) se
sintetizan en el hgado (Brandan, 2008), de manera que la concentracin de protenas
comienza a bajar a causa del efecto que el paracetamol comienza a ejercer en los hepatocitos,
pues un 5 % del paracetamol total ingerido es convertido en metabolito activo por el sistema de
oxidacin del citocromo P-450 que se encuentra presente en las clulas hepticas, dando lugar
a la N-acetil-p-benzoquinoneimina (NAPBQI); en condiciones normales, el NAPBQI es
detoxicado mediante conjugacin con glutation y eliminado en la orina como conjugados no
txicos de cistena y cido mercaptrico. Sin embargo, cuando le dosis de paracetamol es alta,
el glutatin reduce su actividad y el NAPBQI comienza la formacin de especies reactivas del
oxgeno (ROS) que dan como resultado estrs oxidativo e incluso la muerte celular (Gonzlez,
2005), ya que se unen covalentemente a DNA, RNA y protenas, evitando as la nueva sntesis
de nuevas protenas. Esto conlleva a que el hgado no sintetice la misma cantidad de protenas
plasmticas. Sin embargo, luego de que los niveles de protenas totales fueran disminuyendo
normalmente, ocurre una disminucin drstica de la concentracin por debajo del rango
normal, que si bien aun se explica por el mecanismo de accin del paracetamol, es muy
drstico, y en especial porque a partir de ese punto los valores de concentracin de protenas
totales comenzaron a aumentar; este aumento no sigue lo estudiado sobre el paracetamol,
pero puede explicar con respecto a que la dosis de paracetamol no era tan alta como para
saturar completamente la va del citocromo P-450, por lo que al paso de las semanas, el
hepatocito comenzaba a conjugar el paracetamol con el glutatin y lograba una sntesis de
protenas plasmticas normal.
En el lote glutamina se observa una tendencia inicial de disminucin y posteriormente de
aumento en la concentracin de las protenas totales. La glutamina no tiene un efecto notorio
en la sntesis de protenas plasmticas, y su efecto antioxidante no tiene participacin en el
metabolismo de las ratas Wistar de este lote ya que no se les suministro alguna otra sustancia
adems de la glutamina: Sin embargo, es el lote que present ms valores por debajo del
rango, indicando que la sntesis de protenas era mnima por lo menos hasta la cuarta semana,
donde los valores aumentaron regresando al rango normal; si se observan los valores de la
primer semana y la ltima semana, son muy parecidas las concentraciones, esto significa que a
pesar de las resultados obtenidos cada semana, al final la concentracin de protenas totales
se normaliz, esto se debe a que la glutamina, si bien no promueve la sntesis de protenas
plasmticas, si mantiene al hgado en optimas condiciones por lo cual la sntesis de protenas
plasmticas no se ve modificada y la concentracin se mantiene casi constante.
En el lote glutamina/paracetamol, muestra que en la primera semana de administracin, la
concentracin de protenas totales estaba incluso ms baja que el rango normal, sin duda el
paracetamol tuvo mayor efecto que la glutamina, evitando la sntesis de protenas plasmticas
en el hepatocito. Aunque despus el lote presentara una tendencia de aumento y disminucin
de la concentracin de protenas totales, si bien no se observan las concentraciones como
valores constantes, el aumento y disminucin de los valores si es constante. Esto se debe a
que la glutamina promueve la sntesis heptica de glutatin en forma significativa y es capaz de
recuperar los niveles endgenos del mismo; esto permite que el glutatin conjugue al NAPQI
(Gonzlez, 2005) que la dosis de paracetamol est generando en el hepatocito, evitando la
formacin de ROS e impidiendo que exista un estrs oxidativo. Como el glutatin permite la
transformacin y eliminacin del NAPBQI, el hgado no sufre modificaciones en su metabolismo
29

y puede continuar sintetizando, entre otros compuestos, a las protenas plasmticas. Cuando
se presenta disminucin de la concentracin se debe al efecto del paracetamol y cuando
vuelven a aumentar las concentraciones indica que la glutamina contrarresta los cambios
generados por el paracetamol.

Albmina
Tomando en cuenta la grfica 3, se realiz un intervalo del valor ms bajo al ms alto obtenido
en la experimentacin, cuyos valores son: 0.47-3.45 esto se realiz para poder interpretar el
grfico de la siguiente manera.
En el lote de paracetamol, se muestra una baja que aunque se encuentra dentro del parmetro,
no se mantiene constante, esto se debe a que en el hgado produce alrededor de 12 g de
albmina por da, lo cual representa alrededor de 25% de la sntesis proteica heptica total. Al
principio, la albmina se sintetiza como una prealbmina. Su pptido seal se desprende
conforme pasa a las cisternas del RER. La sntesis de albmina se deprime en diversas
enfermedades, en particular las hepticas, al existir un dao generado por el hepatotxico
existe una menor produccin de albmina. (Abcouver, 1996).
La unin paracetamol-albmina ocurre ya que la albumina es el mayor fijador de frmacos de
preferencia fija frmacos neutros y cidos dbiles, el sitio de unin de los cidos es el grupo Nterminal de las protenas, mientras que las bases se fijan de una forma inespecfica. (UNAM,
2010), El acetaminofeno es metabolizado en el hgado tras su ingestin primariamente
mediante conjugacin de su grupo parahidroxilo con sulfatos y cido glucurnico hasta en un
90 % del total del frmaco, un 5 % del total consumido es convertido en metabolito activo por el
sistema de oxidacin del citocromo P-450 que se encuentra presente en las clulas hepticas,
dando lugar a la N-acetil-p-benzoquinoneimina (NAPBQI), en esta especie es donde se genera
la unin con albmina; una vez sintetizada, la albmina se excreta inmediatamente al sistema
linftico, implicando la inexistencia de reservas hepticas. Sin embargo, ante situaciones de
mayor demanda el hgado puede aumentar su sntesis hasta en un 200 a 300%, regulado
fundamentalmente por la p onctica y la osmolaridad de su espacio extravascular existira un
catabolismo de albmina elevado asociado al aumento de corticoesteroides generados durante
la respuesta al estrs, pese a esto la tasa total de degradacin disminuira en la medida que lo
hace la concentracin plasmtica de albmina. Por tanto, la degradacin absoluta de albmina
disminuye, aunque la tasa de degradacin fraccional sea normal o incluso elevada. (Pacheco,
2007).
Ya que en la grfica se muestra un descenso seguido de un ascenso esto tambin lo podemos
atribuir a que la reduccin de los niveles sricos de albmina se asocia a malos resultados
clnicos (Pacheco, 2007), por lo que existira una influencia de errores experimentales. Por lo
tanto el comportamiento de la tendencia del lote paracetamol est influenciado por los dos
factores, no hubo un dao tan evidente inducido por paracetamol ya que la dosis y el tiempo no
fue suficiente para notar esto cambios, sin embargo se notan algunos cambios que nos indican
a pensar que el descenso si se debe al hepatotxico.
Al observar la tendencia de lote de glutamina, existe un comportamiento an por debajo de
paracetamol, pero como ya antes se mencion la reduccin de albmina se asocia a malos
resultados clnicos, ante esta situacin la glutamina es imprescindible ya que el hgado se
convierte en el primer consumidor de glutamina, a costa del intestino, y el msculo estriado,
junto con el rin y el pulmn, son sintetizadores netos de glutamina, pues es el sustrato para
ureognesis en el hgado y para la gluconeognesis heptica (Reeds, 2001), porque solo le
atribuimos al factor experimental los resultados.

En el lote glutamina/paracetamol sigue la tendencia de los dems lotes, aunque en su punto

mximo sobrepasa los niveles de referencia, puede ser errores experimentales; as como la
estabilidad de los reactivos utilizados en este caso el verde de bromocresol, ya que no se tiene
30

la fecha exacta de preparacin del reactivo y si el resguardo fue bajo las condiciones
especificas, por lo que esto puede ser un factor de tal tendencia. Al suministrar glutamina,
basndonos en la literatura sabemos que si acta como un hepatoprotector ya que NAPBQI es
conjugado rpidamente con glutatin, y este proviene de la glutamina suministrada, esto
compensa y reduce los efectos del paracetamol en el citocromo P-450, pues el glutatin
conjuga al NAPBQI y permite su eliminacin, pues se estaran formando en cantidades iguales
cistena y mercaptano y la desintoxicacin seria continua. Por lo que al estar suministrando
paracetamol y glutamina, se llega a un balance y no ocurre ningn dao si se ingiere bastante
glutamina, pero si no se consumiera nada el organismo la sintetiza en cantidad suficiente. El
msculo, los pulmones y el hgado son productores de glutamina, por lo que n estados de
estrs por injuria, infeccin, algunos rganos consumen en forma inapropiada mayor cantidad
de glutamina y el hgado aumenta sus requerimientos de glutamina. El hgado se convierte en
consumidor en vez de dador. Por lo tanto la glutamina ayuda a regular las actividades del
hgado, sin afectar aunque el dao con paracetamol haya sido nulo o poco notable, la
glutamina no afectar al funcionamiento ya que el hgado regula la sntesis de esta.

Colesterol
En la grfica 4 se observa la variacin en la concentracin de colesterol g/mL (Y) conforme
avanzan los das de administracin (X), se toman los valores obtenidos del lote de ratas blanca
para poder trazar un lmite inferior el cual es de 43 g/mL y un lmite inferior de 77 g/mL, con
estos ndices de referencia podemos observar que los valores que se obtuvieron de las ratas
tratadas no tienen mucha relacin con los datos de referencia, se observa que el lote de
paracetamol no tiene ningn punto dentro de los lmites, siempre se encuentra sobre estos, el
da 28 el lote de paracetamol marca un aumento de forma drstica, el lote tratado con
glutamina sale del lmite superior el da 18, pero a diferencia de los lotes tratados con glutamina
y paracetamol este alcanza una concentracin mxima de 130 g/mL, el lote de glutamina sale
del lmite superior el da 21, al igual que el lote de paracetamol aumenta de manera drstica.
El hgado es el rgano responsable de la regulacin de colesterol ya que es el que se encarga
de la produccin de este y otra porcin se adquiere mediante la dieta, las ratas se alimentaron
a base de nutricubos por lo cual los niveles altos de colesterol no se pueden atribuir al
consumo de lpidos de forma elevada, otra de las razones por las que el colesterol puede estar
elevado en sangre es el dao heptico, el cual sugerimos en el anlisis de nuestros resultados
que no fue logrado por lo que esta no puede ser la razn de que el colesterol se encuentre en
dosis elevadas.
Bilirrubinas

Necropsia
Al realizar la necropsia se selecciono como una rata mnimo de cada lote, esto para poder
observar los cambios fsicos en el hgado y compararlos, en la tabla 7 se muestra el peso en
gramos de los hgados de cada rata, sin embargo este dato no nos demuestra un cambio, por
que se realiz un porcentaje al que equivale el peso del hgado a lo que peso la rata el da 23
de octubre. Los pesos en gramo entran dentro de los rangos consultados de diferentes
artculos que es de 12-14 g en ratas Wistar jvenes-adultas, por lo que todos los lotes se
encuentran dentro del rango. La siguiente tabla nos muestra imgenes obtenidas de dos lotes

31

Podemos observar que no existe ningn cambio apreciable en cuanto a color, tamao,
aumento de tamao e inflamacin o presencia de manchas blancas, que nos indicara un dao
celular. Es muy difcil observar necrosis ya que la dosis inducida de hepatotxico no fue
significativa. Lo que ocurre al existir un dao significativo es la hepatitis medicamentosa, los
analgsicos y los antipirticos que contienen paracetamol (acetaminofen) son una causa
frecuente de inflamacin del hgado. El dao que producen los frmacos puede ir desde una
lesin leve que afecta tanto a la clula del hgado como a los conductos biliares con elevacin
de las enzimas del hgado (transaminasas, fosfatasa alcalina y gama glutamil trasferasa). Sin
embargo el dao puede ser tan severo como un cuadro de hepatitis fulminante o hasta
desarrollar una enfermedad crnica (hepatitis crnica) y llegar a la cirrosis heptica.

CONCLUSIONES
Se determin que el paracetamol y la glutamina influyen en el metabolismo que se lleva a cabo
en las clulas del hgado (hepatocito).
Mediante diferentes pruebas bioqumicas se demostr que el paracetamol en dosis altas llega a
la va del citocromo P-450 y forma al NAPBQI el cual genera un efecto hepatotxico en el
hgado, modificando las sntesis de productos que realiza el hgado, tales como las protenas
plasmticas, la albmina y las bilirrubinas. Se observ que la glutamina, al ser precursor del
glutatin, es capaz de contrarrestar los efectos del paracetamol, logrando que los niveles de los
metabolitos estudiados se mantengan dentro de un rango normal en relacin al lote control en
cada prueba.
Si bien, el paracetamol no logr un dao heptico notable en el hgado de las ratas Wistar
debido a la duracin del proyecto y la dosis administrada pues al realizar la necropsia no hubo
muestras de necrosis o algn cambio cualitativo del hgado de las ratas; pero s hubieron
resultados que permitan relacionar los valores obtenidos con alteraciones en las rutas
metablicas que se llevan a cabo en la clula.
Las dosis administradas de glutamina y de paracetamol no fueron las adecuadas por lo que no
se pudo observar el verdadero efecto que esta tiene como hepatoprotector y como
hepatotxico respectivamente, a pesar de esto disminuy los efectos del paracetamol, lo que
significa que la hiptesis inicial es correcta, el glutatin sintetizado conjuga al NAPBQI en el
citocromo P-450. Aunque no se cumpli al 100% la hiptesis, debido a que en las pruebas
bioqumicas realizadas, el lote control daba resultados distintos al lote glutamina/paracetamol.
Sin embargo, estas variaciones pueden deberse a errores experimentales cometidos en el
laboratorio.
Mejorar en la metodologa, proponer una dosis de paracetamol y de glutamina adecuados y
tener las precauciones adecuadas para evitar errores en los procesos de cuantificacin que se
llevaron a cabo en el laboratorio podra generar valores ms precisos.

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