TRABAJO DE LABORATORIO N 1

SENSIBILIDAD DE LAS REACCIONES. ESCALAS Y TECNICAS ANALITICAS.

Introduccin.
Una Reaccion Analitica apta para el anlisis cualitativo debe ser:
Observable: que el ojo humano pueda observar los cambios que se producen, (color, olor,
precipitacin, etc.).
Sensible: que permita detectar una pequea cantidad de analito.
Selectiva: indica que ninguna otra especie interfiera una reaccin de identificacin.
Especfica: que sea caracterstica solo de la sustancia que se trata de identificar.
Otros requisitos que debe tener es que sea reproducible y segura (fiabilidad).
En la prctica, el analito a investigar puede estar acompaado de sustancias que perturben
en su determinacin, estas son consideradas interferencias del procedimiento analtico y
constituyen fuentes de error sistemtico en el resultado. En consecuencia, se deben
eliminar existiendo diversos procedimientos para lograrlo
Las interferencias se clasifican en:
Interferencia Positiva: la sustancia extraa, produce una reaccin cuyos resultados son
similares a los de la sustancia de inters.
Interferencia Negativa: la reaccin es retardada o inhibida por el interferente.
La sensibilidad de una reaccin puede medirse mediante el lmite de identificacin (LI)
definida como la cantidad mnima de analito (expresada en ug) capaz de ser detectada por
esa reaccin y la concentracin lmite expresada en g/ml
Se estudiar experimentalmente la reaccin de Ni (II) con dimetilglioxima (DMG) y se
determinar la sensibilidad de dicha reaccin. Del mismo modo se determinara la
sensibilidad de la reaccin del Fe (III) con SCN- .
A) Determinacin del Lmite de Identificacin y Concentracin Lmite
Procedimiento.
Preparar una solucin que contenga 5 mg Ni(II)/ml a partir de NiSO 4 6H2O (Solucin
madre).
1.- Preparacin de soluciones sucesivamente diluidas 1: 10
Lave y seque 5 tubos de ensayo. Numrelos.
Coloque 1 ml de la solucin original en el primer tubo y agregue 9 ml de agua
destilada y homogenece.
Tome 1 ml de esta solucin y psela al tubo 2. Agregue 9 ml de agua destilada y
homogenece.
Repita lo indicado en el punto anterior, tomando 1 ml de solucin del tubo 2 y
trasvasando al 3; agregue 9 ml de agua y homogenece; contine de esta manera
hasta la quinta dilucin en el tubo 5.
Calcule la concentracin de Ni(II) en cada tubo de ensayo.
2.- Preparacin de los Anillos de Yagoda
Tome un trozo de papel de filtro embebido en parafina. Apyelo sobre papel de filtro
a usar en el anlisis.

Caliente suavemente la boca de un tubo de hemlisis y apoye firmemente el

extremo caliente sobre el papel parafinado y sobre el papel no parafinado se
obtendr el anillo.
Repetir el procedimiento hasta obtener los anillos suficientes. Reservar para el
ensayo.

3.- Sensibilidad de la reaccin de Ni(II) con DMG. Operacin en semimicroescala.

Coloque en 5 tubos de hemlisis numerados, 1 ml de cada solucin preparada en 1.
Agregue a cada uno de ellos, 5 gotas de solucin alcohlica al 1% de DMG;
alcalinice con NH3 diluido (1 M) hasta pH = 8 y observe detenidamente cada tubo.
Caliente los tubos en bao mara durante 1 minuto, y compare con lo observado
anteriormente.
Tabule los resultados obtenidos (ver tabla)
Calcule L.I. y C.L.
Finalizado el ensayo, agregue cido diluido hasta pH a 2 aproximadamente y
observe y justifique los resultados a pH 2 y 8.
4.- Sensibilidad de la reaccin de Ni(II) con DMG. Operacin en microescala.
Coloque una gota de cada una de las soluciones preparadas en 1 en el centro de
los anillos preparados en 2. Deje secar al aire.
Coloque una gota de solucin alcohlica de DMG sobre las gotas anteriores.
Exponga el papel de filtro a los vapores de amonaco.
Observe y tabule los resultados (ver tabla)
Calcule la sensibilidad. Compare los resultados con los obtenidos en 3.
Construya una tabla como la siguiente y complete.
Solucin
N

Dilucin

Concentr.
in (mg/l)

Volumen
(ml)

Masa Ni
(ug)

Seal

B) Determinacin de la Sensibilidad de la reaccin de SCN- con Fe3+ .

Reactivos a emplear: NH4SCN 0.5 mol/L. Solucin madre de Fe3+ 5 mg/ml. Solucin de
Co2+, HCl 2 M, cido ascrbico o Clorhidrato de hidroxilamina.
Procedimiento.
Operacin en Semimicroescala.
Preparar una solucin de concentracin 5mg/ml en Fe(III) y a partir de ella, preparar 5
soluciones practicando diluciones 1:10. (Ver A1). Rotular los tubos de ensayo y
calcular las concentraciones y la masa de Fe(III) en cada una de ellos.
Trasladar 1 ml de cada una de las soluciones preparadas a sendos microtubos de
ensayos.
Adicionar a cada uno de ellos, una gota de HCl 2 M y 3 gotas de solucin de SCN-.
Registrar los cambios, y anotar el tubo de ensayo en el que la reaccin es an positiva.
A partir de aquellos datos, calcule el L.I. y la L.C.

Operacin en microescala.
Mediante una varilla de vidrio fina, pasar una gota de las soluciones de diferentes
concentraciones de Fe(III)/ml a diferentes posiciones de una placa de toque. Enumere.
Agregar una gota del cido y una gota del reactivo. Registrar lo observado.
Calcular el LI y el LC.
Estudio de interferentes.

En un tubo de ensayo, colocar 0,5 ml de la solucin de Co(II) y adicionar el volumen de

reactivo (SCN-) empleado mas arriba. Observar y registrar.
Tomar 1 ml de alguna de las soluciones preparadas mediante diluciones. Adicionar 0,5
ml de cobalto (II). Agregar el reactivo. Observar y registrar.
Tomar 1 ml de la misma solucin anterior y adicionar una pizca de cido ascrbico y el
reactivo. Observar y registrar.
C) ANALISIS DE CALIDAD DEL AGUA

Las determinaciones siguientes han sido extradas de la Farmacopea USP 25

pH: debe estar entre 5 y 7. Se determina potenciomtricamente en una solucin preparada
por adicin de 0.3 ml de solucin saturada de KCl a 100ml de agua.
Cloruros:
Testigo: adicionar a 5,0 mL de solucin de NaCl 9,5 ppm, 2 gotas de cido ntrico 2 mol/L y
1,0 mL de AgNO3 0,2 mol/L. Observar y registrar.
Muestra: adicionar a 5,0 mL de muestra 2 gotas de cido ntrico 2 mol/L y 1,0 ml de AgNO 3
0,2 mol/L. Observar y registrar. No debe producirse opalescencia.
Sulfatos:
Testigo: adicionar a 5,0 mL de solucin de Na2SO4 338,0 ppm, 0,1 ml de BaCl2 12 g%
(p/v). El anin SO42- con el catin Ba2+ forman el precipitado BaSO4 de color blanco.
Muestra: adicionar a 5,0 mL de muestra 0,1 mL de BaCl 2 12 g% (p/v). No debe producirse
turbidez.
Amonio
Testigo: adicionar a 5,0 mL de solucin de NH 4Cl 6,0 ppm, 1,0 mL de reactivo de Nessler.
El amonaco liberado produce con el reactivo una coloracin amarilla, amarilla naranja,
amarilla parda o un precipitado de color amarillo naranja o rojo pardo, segn la cantidad de
amonaco. En este caso se observar una coloracin amarilla intensa.
Muestra: adicionar a 5,0 mL de agua 1,0 mL de reactivo de Nessler. El color amarillo que
se produzca en forma inmediata no debe ser ms oscuro que el del control que se realiz
con el testigo.
Calcio:
Testigo: adicionar a 5,0 mL de CaCl2 835,4 ppm, 2,0 mL de NH4C2O4 3,5 g% (p/v). El anin
C2O42- con el catin Ca2+ forman el precipitado CaC2O4 de color blanco.

Muestra: adicionar a 5,0 mL de muestra 2,0 mL de NH4C2O4 3,5 g% (p/v). La solucin debe
permanecer clara
CO2: adicionar a 10,0 mL de muestra 2,5 mL de Ca(OH)2 0,3 g% (p/v). La mezcla debe
permanecer clara.
Metales pesados: ajustar el pH de la muestra de agua a 3 4 con cido actico 1eq/L y
adicionar 10 mL de H2S recin preparado. Dejar reposar 10 minutos. El color del lquido
cuando se observa sobre una superficie blanca no debe ser ms oscuro que el de la
mezcla formada por 50 mL de la misma agua con la misma cantidad de cido actico 1
eq/L.
Sustancias oxidables:
Testigo: adicionar a 5,0 mL de Na2C2O4 673.0 ppm, 0,5 mL de H 2SO4 4 eq/L y calentar.
Agregar 1 gota de KMnO4 0,05 eq/L y mantener en calentamiento suave de 5 a 10 minutos.
El C2O42- reduce al KMnO4 decolorando la solucin rosada en medio sulfrico y en caliente.
Muestra: adicionar a 5,0 mL de muestra, 0,5 mL de H2SO4 4 eq/L y calentar. Agregar 1
gota de KMnO4 0,05 eq/L y mantener en calentamiento suave de 5 a 10 minutos. El color
rosado no debe desaparecer completamente.
Slidos totales: por evaporacin cuidadosa en una cpsula de un volumen determinado
de agua (ej. 100,00 mL) y secado en estufa a 105C.
CUESTIONARIO PROBLEMAS
1. En los trabajos realizados, indique: a) ecuaciones completas, b) pH en el que trabaja y
justifique.
2. En que escala se realiz el trabajo.
3. Indique los reactivos generales y especiales utilizados. Algunos de ellos, puede
considerarse especifico?
4. Como pueden clasificarse las reacciones analticas de acuerdo a su sensibilidad?.
5. Explique lo observado en las diversas situaciones de las reacciones del Fe 3+ con
NH4SCN.
6. Elabore una conclusin de las experiencias.
7. El pLC para una reaccin de identificacin de Cl- es 7. Si se tiene una solucin de HCl
de densidad = 1,11 g/ml y que es 22,33 % p/p, calcular cuantas diluciones 1:100 se
debern realizar para obtener la primera reaccin negativa para Cl-.
8. Para determinar la sensibilidad de la reaccin de identificacin de Ag + con cromato, se
prepar una solucin de Ag+ al 0,1% p/v. Se observ que la ltima reaccin positiva se
obtiene diluyendo 1+1 tres veces. Calcular el LC en g/L y el LI en microgramos para
una tcnica que requiere 0,02 mL de solucin.