INTRODUCCIN

DETERMINACIN DE HEMOGLOBINA POR EL MTODO

CIANOMETAHEMOGLOBINA
El funcionamiento de las clulas de un individuo depende en gran medida de un
adecuado aporte de oxgeno. Estas funciones vitales de transporte de gases
dependen de la hemoglobina (Hb), heteroprotena predominante en los eritrocitos(1).
Los mtodos para la medicin de hemoglobina se desarrollaron hace
aproximadamente un siglo, y su cuantificacin est entre las pruebas diagnsticas
disponibles desde el inicio de la ciencia del laboratorio clnico. Hoy en da es una de
las pruebas ms solicitadas al laboratorio, y es ejecutada empleando tecnologa
diversa, que va desde la determinacin manual hasta la sofisticada metodologa
automatizada.
El mtodo recomendado internacionalmente para su determinacin es el de
cianometahemoglobina(2), cuyo principio consiste en diluir sangre total en reactivo de
Drabkin, el cual es una solucin que contiene ferricianuro de potasio (K 3Fe(CN)6), y
cianuro de potasio (KCN). La cianometahemoglobina es un producto coloreado muy
estable, de all que se pueda emplear como estndar.
En todas las determinaciones cuantitativas del laboratorio clnico, es necesario calibrar
y controlar la metodologa para garantizar la calidad de los resultados emitidos.
Asimismo es conveniente que junto al programa de calibracin y control, se realice
peridicamente una evaluacin o control de calidad instrumental a los equipos que se
emplean para la deteccin y cuantificacin de analitos, ya que aunque los aparatos de
medicin que existen en el mercado son sometidos a controles de calidad por sus
fabricantes, el intenso uso y el desgaste afectan su rendimiento dando lugar a errores
analticos.
DETERMINACIN DE HEMATOCRITO
El hematocrito es un examen de sangre que mide la fraccin que comprende a los
glbulos rojos (masa globular), respecto al volumen total de la muestra de sangre
venosa o capilar. Esta medicin depende del nmero de glbulos rojos y de su
tamao. El resultado se expresa en porcentaje, aunque tambin puede expresarse
como valor decimal. El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo
sanguneo completo(hemograma o hematimetra).Para la realizacin de esta prueba,
con el macro mtodo, la sangre se extrae tpicamente de una vena, por lo general de
la parte interior del codo o del dorso de la mano. Cuando se inserta la aguja para
extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras
slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura. Posteriormente, puede haber algo
de sensacin pulstil. Un volumen de sangre se deposita en un tubo de Wintrobe,
por medio de una pipeta, hasta la marca del 10 y se centrifuga. Al terminar la prueba,
deben de quedar separados el plasma de la sangre y las clulas, depositndose en el
fondo y presentando un color rojo intenso. Para la realizacin del micromtodo, se
utilizan unos tubos de un calibre muy delgado, llamados capilares, y pueden ser
llenados con la misma sangre venosa o de capilar. Este ltimo es el ms usado, por
ser ms rpido y menos riesgoso. Para su lectura se usa una escala estandarizada.

ERITROSEDIMENTACIN O VELOCIDAD DE SEDIMENTACIN GLOBULAR

La medicin de la velocidad de sedimentacin globular (VSG) es una prueba para
evaluar la respuesta inflamatoria durante la fase aguda de diversos padecimientos
infecciosos y no infecciosos. Su historia se remonta a la observacin de Fahraeus en
1918, de una rpida sedimentacin de los eritrocitos en el plasma de una mujer
gestante que no ocurra en otra mujer no embarazada.1 Sin embargo, fue hasta 1941
cuando MacLeod describi la VSG como reactante de fase aguda.2 El fenmeno se
debe a la tendencia de los eritrocitos de agregarse en forma de columnas de monedas
(fenmeno de Rouleaux) como resultado de un proceso electroqumico reversible. En
la sangre normal, los eritrocitos tienen una carga negativa (potencial zeta) en su
superficie, que hace que se repelan entre s, lo cual da por resultado una velocidad
de sedimentacin de menos de 10 milmetros (mm) por hora. Por el contrario, todas
las condiciones asociadas con procesos inflamatorios que cambian el potencial zeta
favorecen el fenmeno de Rouleaux e incrementan la VSG.1 La VSG se incrementa
en infecciones agudas y crnicas, necrosis tisular, lesiones malignas, enfermedades
de la colgena y reumticas, niveles sricos anormales de protenas y embarazo, as
como en pacientes con falla renal crnica en hemodilisis y pacientes con insuficiencia
cardiaca congestiva, entre otras.3 Para medir la VSG hay diversos procedimientos; en
1974, Wintrobe1 describi el mtodo que es an la regla de oro y requiere 1 ml de
sangre venosa anticoagulada con EDTA. La sangre se coloca en el tubo de Wintrobe
(tubo de vidrio con un dimetro de 3 mm y graduado en mm en una escala de 0 a 10
cm) y se deja reposar a temperatura ambiente durante una hora en un soporte para
mantener la posicin vertical; al trmino, se cuantifica la sedimentacin en milmetros
desde el borde superior del plasma hasta la base de las clulas.1 Otra tcnica es la de
Westergreen, validada y aceptada por el Comit Internacional de Estandarizacin en
Hematologa y descrita en 1988.4 sta consiste en extraer sangre venosa y mezclarla
con citrato trisdico al 3.8% como anticoagulante. Luego se vierte en un tubo de cristal
de 300 1.5 mm de longitud y 2.55 0.15 mm de dimetro, con una escala graduada
en mm de 0 a 200, y se coloca en posicin vertical durante 24 horas. Las lecturas en
milmetros (a partir del borde superior del plasma y hasta las clulas) se realizan
despus de una, dos y 24 horas. La tcnica en capilares llamada velocidad de
microeritrosedimentacin se utiliza de manera emprica desde la dcada de 1930
hasta nuestros das, como un procedimiento sencillo y til para apoyar el diagnstico
de sepsis.5 Consiste en tomar una pequea muestra sangunea por puncin venosa o
en el taln y colectada en un capilar heparinizado para microhematocrito de 75 mm de
largo y 1.1 mm de dimetro interno; posteriormente, se coloca en posicin vertical
durante una hora. La lectura se realiza de la misma manera que las dos tcnicas
anteriores y el resultado se reporta en mm/hora.6,7 Aunque los mtodos de Wintrobe y
Westergreen estn validados y tienen un alto grado de confiabilidad, en ocasiones
presentan algunas desventajas: 1) requieren la toma de un poco ms de un mililitro de
sangre del paciente, lo cual es un problema en algunos recin nacidos pretrmino; 2)
se requieren tubos diseados especficamente para tal propsito (se carece de ellos
en muchos pases en vas de desarrollo) y el resultado con frecuencia demora varias
horas; y 3) es una prueba no disponible las 24 horas del da en muchos hospitales de
pases en vas de desarrollo. La determinacin de la VSG mediante capilares con
heparina es un mtodo simple, econmico y rpido que puede realizarse en la
cabecera del paciente peditrico a cualquier hora. Sin embargo, se necesita la puncin
del paciente slo para ese propsito, se utiliza un anticoagulante distinto (heparina) al
de la tcnica de Wintrobe (EDTA) y an no se valida.8, 9,10 Hasta donde sabemos, la
VSG no ha sido evaluada por microtcnica con capilares sin anticoagulante a partir de
la misma muestra que se emplea tanto para la biometra hemtica, como para la
tcnica estndar de Wintrobe (ambas con EDTA). El objetivo del presente estudio fue
comparar de manera simultnea la VSG, tanto con el uso de un capilar no
heparinizado como con la tcnica estndar de Wintrobe.

Bibliografa
1. Amilachwari M, Barra V, Soriano G, Barra M, Regalado ME. Theoretical and
practical aspects of globular sedimentation velocity. Biol Med Hosp Infant Mex 1990;
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2. Jaye DL, Waites KB. Clinical applications of C-reactive protein in pediatrics. Pediatr
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3. Happe MR, Battafarano DF, Dooley DP et al. Validation of the Diesse Mini-Ves
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4. Thomas RD, Westengard JC, Hay KL, Bull BS. Calibration and validation for
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