ESCUELA SUPERIOR POLITCNICA DE

CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS
MICROBIOLOGA INDUSTRIAL-TERCER
SEMESTRE
INFORME DE LABORATORIO
Integrantes:

Selia Coronel
Amable Guambo
Jomaira Jami
Johnny Garca

Tema: Recoleccin de muestras y aislamiento microbiano

Introduccin
La naturaleza es la principal fuente de microorganismos
potencialmente aprovechables en un proceso de microbiologa
industrial.
El suelo y el agua representan la base para el establecimiento de
cualquier proyecto tanto agropecuario as como microbiolgico. Los
cientficos han reconocido cada vez ms que los microorganismos
ocupan una posicin clave en el flujo ordenado de materiales y
energa a travs del ecosistema global, en virtud de su dotacin
gentica y sus capacidades metablicas para transformar las
sustancias orgnicas en inorgnicas. Los microorganismos han sido
cruciales para resolver nuestros acuciantes problemas ambientales y
econmicos; nos han ayudado a eliminar residuos lquidos y slidos, a
controlar biolgicamente plagas, a producir alimentos, combustibles,
etc.
Estas y muchas otras interacciones hacen del ecosistema una
alternativa como fuente material biolgico de inters industrial.
En la naturaleza, los organismos se encuentran formando poblaciones
mixtas con otros tipos de microorganismos, por ello los estudios se
realizan con cepas aisladas, cultivadas en los laboratorios en cultivos
puros. Por lo tanto el primer factor al estudiar una bacteria es el
aislamiento del resto de microorganismos presentes, una vez aislado
es posible obtener las bacterias de inters en cultivo puro.

Aislamiento.- Es la separacin de un determinado microorganismo del

resto de microorganismos que le acompaan. El mtodo ms usual es
la siembra por estra sobre un medio de cultivo slido adecuado
dispuesto en una placa de Petri.

Objetivo general
Aislar del ambiente microorganismos con caractersticas
particulares aprovechables en microbiologa industrial.

Objetivos especficos
Aislar los microorganismos del agua del medio.
Identificar las colonias de bacterias por tincin de Gram

Materiales, equipos y reactivos

Materiales:

Caja Petri
Asa de
cultivo
Pinzas
Mechero de
alcohol
Porta objetos
Varilla de
vidrio
Bandeja de
plstico
Piseta

Equipos:

Microscopio
Cmara de
video
Laptop

Reactivos:

Cristal
violeta
Lugol
Alcohol
Safrani

Procedimiento
Fase 1. Recoleccin de la muestra
Recoger el agua aspticamente en un recipiente estril.
Fase 2. Siembra en placas
Hacer diluciones (10-3) sucesivas usando material estril.
Realizar la siembra aerobia con medio enriquecido y
selectivo.
Dejar encubar por 48 horas a 35C.
Fase 3. Cosecha
Con ayuda del asa de cultivo y mediante un raspado
superficial cosechar de la muestra las posibles colonias
de bacterias.
Colocar en el porta objetos una gota de agua destilada, y
proceder a poner con la asa de cultivo la cosecha
tomada.
Con ayuda de una pinza flamear el porta objetos sobre el
mechero.
Poner en la bandeja entre las varillas el porta objetos
para inmediatamente poner tres gotas de cristal violeta y
dejar reposar por un minuto, luego lavar con ayuda de la
piseta.
Volver a colocar entre las varillas y poner tres gotas de
lugol, dejar reposar por un minuto, y volver a lavar.
Colocar entre las varillas el porta objetos y poner tres
gotas de alcohol acetona, dejar reposar por 40 segundos,
y volver a lavar.
Secar con papel absorbente.
Instalar en la platina del microscopio y depositar una gota
de aceite de inmersin directo en la muestra.
Observar las colonias de bacterias.

Grficos:

Bacilus

cocos

Observaciones:
Conclusiones
Recomendaciones:

Es de imprescindible importancia que los parmetros de cultivo sean los

correctos (temperatura, medio de reproducciones etc.).

Se recomienda que al momento de toma de muestra de la caja Petri, se lo haga
de una manera delicada y superficial de forma que podamos obtener solo la
cantidad necesaria para la observacin. Si se lo hace de manera brusca o muy
profunda, a ms de tomar el cultivo se tomar en medio donde se reprodujeron

(bacterias, hongos, etc.).

Se debe respetar el orden y tiempo de aplicaron de los reactivos implicados en la

tincin de Gram (Violeta de genciana, lugol, alcohol cetona y rojo safranina).

Al momento de la observacin en el microscopio, se lo debe hacer lentamente
hasta poder distinguir la imagen del portaobjetos (muestra), seguidamente se
puede acoplar la cmara de video para una mejor observacin en la pantalla del

ordenador.
Es importante tener un conocimiento bsico de microbiologa para distinguir por
su morfologa los microorganismos presentes en dicha muestra.

Bibliografa

lamicrobiologiaumd. (22 de 04 de 2015). Obtenido de lamicrobiologiaumd:

https://lamicrobiologiaumd.wikispaces.com/Microorganismos+que+pr
oducen+antibi%C3%B2ticos
Mateos, D. P. (22 de 04 de 2015). Departamento de Microbiologa y
Gentica. Facultad de Farmacia, universidad de Salamaca. Obtenido
de Departamento de Microbiologa y Gentica. Facultad de Farmacia,
universidad de Salamaca:
http://webcd.usal.es/Web/educativo/micro2/tema11.html

Anexos
Cuestionario:
1.- Consultar microorganismos productores de antibiticos que se
aislaron del suelo.
Los microorganismos productores de antibiticos que han sido
aislados del suelo son:
Bacillus subtilis (B).- produce bacitracina, es bacteria Gram
positiva.
Bacillus polymyxa (B).- produce polomixina B, es bacteria Gram
positiva.
Streptomyces nodosus (B).- anfotericina B, es un hongo.
Streptomyces erythreus (B).- produce eritromicina, es bacteria
Gram positiva.
Streptomyces fradiae (B).- produce neomicina, es bacteria Gram
positiva y negativa.
Streptomyces griseus (B).- produce streptomycin, es bacteria
Gram negativa.
Streptomyces rimosus (B).- produce tetraciclina, es bacteria
Gram positiva y negativa.
Streptomyces orientalis (B).- produce vancomicina, es bacteria
Gram positiva.
Micromonospora purpurea (B).- produce gentamicina, es
bacteria Gram positiva y negativa.
Streptomyces mediterranei (B).- produce rafampicina, es una
bacteria inmune ala tincin de Gram. (lamicrobiologiaumd,
2015)
2.- Defina que es un microorganismo auttrofo.
Los microorganismos auttrofos son aquellos que obtienen su carbono
a partir del co2, se da en dos fases bioqumicas distintas la sntesis de

metabolitos precursores y la sntesis de ATP y paridn nucletidos

reducidos. (Mateos, 2015)

ANEXOS: