APLICACIONES DE LAS ENZIMAS INDUSTRIALES

INTRODUCTION
La industria de las enzimas como la conocemos hoy en da es el resultado de un
rpido progreso obtenido principalmente durante las ltimas cuatro dcadas
gracias a la evolucin de la biotecnologa moderna. Enzimas que se encuentran
en la naturaleza se han utilizado desde la antigedad en la produccin de
productos alimenticios, tales como queso, masa fermentada, la cerveza, el vino y
el vinagre, y en la fabricacin de productos como el cuero, el ail y el lino.
Todos estos procesos se basaban en cualquiera de las enzimas producidas por
microorganismos o enzimas presentes en las preparaciones adicionales, tales
como rumen de terneros o fruta de papaya espontneamente en crecimiento. Las
enzimas fueron, en consecuencia, no utilizar en cualquier forma pura o bien
caracterizada. El desarrollo de los procesos de fermentacin durante la ltima
parte del siglo pasado, dirigida especficamente a la produccin de enzimas
mediante el uso de cepas de produccin seleccionados, hizo posible la fabricacin
de enzimas como purificada, as preparados caracterizados incluso a gran escala.
Este desarrollo permiti la introduccin de las enzimas en verdaderos productos y
procesos industriales, por ejemplo, dentro de las industrias de detergentes, textiles
y de almidn. El uso de la tecnologa de genes recombinantes ha mejorado an
ms los procesos de fabricacin y ha permitido la comercializacin de las enzimas
que podran no ser producidos anteriormente. Por otra parte, los ltimos avances
en la biotecnologa moderna, la introduccin de la ingeniera de protenas y la
evolucin dirigida, han revolucionado an ms el desarrollo de las enzimas
industriales (Figura 1). Estos avances han hecho posible proporcionar enzimas a
medida que exhiben nuevas actividades y adaptado a las nuevas condiciones del
proceso, lo que permite una mayor expansin de su uso industrial. Como se ilustra
en la Tabla 1, el resultado es una industria altamente diversificada que sigue
creciendo tanto en trminos de tamao y complejidad. La mayora de las enzimas
industriales que se utilizan actualmente son hidroltica en accin, que se utiliza
para la degradacin de varias sustancias naturales.

Las proteasas siguen siendo el tipo de enzima dominante, debido a su amplio uso
en las industrias de detergentes y productos lcteos. Diversos hidratos de
carbono, principalmente amilasas y celulasas, utilizados en industrias como las
industrias de almidn, textiles, detergentes y coccin, representan el segundo
grupo ms grande [1]. Como se ilustra en la Figura 2, las industrias tcnicas,
dominados por las industrias de detergentes, almidn, textiles y de alcohol
combustible, representan la mayor consumo de enzimas industriales. En general,
el valor estimado de la utilizacin mundial de enzimas industriales ha crecido de $
1 billn [1] en 1995 a $ 1.5 mil millones en 2000 [2].
Este crecimiento, sin embargo, se ha estancado en algunas de las principales
industrias tcnicas, primero de todo la industria de detergentes [2]. el crecimiento
ms rpido en la ltima dcada se ha visto en las industrias de panadera y
alimentos para animales , pero el crecimiento tambin est siendo generada a
partir de aplicaciones establecidas en una gran cantidad de otras industrias que
van desde la sntesis orgnica de papel y pulpa y el cuidado personal. Este se
revisar, segmento por segmento, discutiendo los desarrollos recientes ms
importantes en el uso tcnico de las enzimas y tendr en cuenta los ms recientes

avances tecnolgicos que han facilitado estos acontecimientos.

Nuevas tecnologas para el descubrimiento de la enzima

microorganismos naturales han sido en los ltimos aos una gran fuente de
diversidad enzima. Los avances en la bioinformtica y la disponibilidad de datos
de secuencias han aumentado enormemente la eficiencia de aislar un gen
interesante de la naturaleza. La ingeniera de protena racional y la posibilidad de
introducir pequeos cambios en las protenas, sobre la base de su estructura y las
propiedades

bioqumicas

biofsicas

relacionadas,

present

una

nueva

herramienta valiosa para la enzima de optimizacin en la dcada de 1980. La

evolucin dirigida es la ltima adicin a la caja de herramientas (para una revisin
reciente vista [3]). La introduccin ms o menos aleatoria de mutaciones genera
bibliotecas de variantes que posteriormente se exponen a un procedimiento de
deteccin o seleccin. Lo aislado, variantes mejoradas de una ronda de seleccin
se utilizan como material de partida en las siguientes rondas de recombinacin y /
o una nueva generacin de diversidad (Figura 1). Recientemente, varios intentos
de comprender los parmetros importantes en la evolucin dirigida han surgido y
ejemplos exitosos de la combinacin de la ingeniera racional con la evolucin
dirigida se han reportado [4,5 ].
Por lo general, la tecnologa nueva y emocionante se prev que deja fuera de
competencia las tecnologas existentes, pero esperamos que el tiempo demostrar
cmo el uso combinado de diseo racional, evolucin dirigida y la diversidad de la
naturaleza ser muy superior a cualquier tecnologa de pie en solitario.
La industria de los detergentes
Su uso como aditivos detergentes todava representa la mayor aplicacin de
enzimas industriales, tanto en trminos de volumen y valor. El componente
principal es proteasas, pero otros y muy diferentes hidrolasas se introducen para
proporcionar varios beneficios, tales como la eliminacin eficaz de manchas
especficas (Tabla 1). Constantemente nuevas y mejoradas

versiones

modificadas de las enzimas de detergentes tradicionales, proteasas y amilasas,

son desarrolladas Estas nuevas enzimas de segunda y tercera generacin estn
optimizadas para cumplir con los requisitos para el desempeo de los detergentes,
la composicin de los cuales est tambin en desarrollo constante. En particular,

la compatibilidad de enzimas con componentes detergentes (es decir, propiedades

tpicamente de estabilidad) se dirige, pero su capacidad de funcionar a
temperaturas ms bajas tambin ha estado entre las mejoras recientemente
reportadas. Para ahorrar energa, la temperatura utilizada en el lavado domstico
y los lavavajillas automticos se ha reducido en los ltimos aos. Esto a menudo
resulta en problemas con la limpieza eficiente y eliminacin de manchas que la
tecnologa de la enzima puede ayudar a superar. Ejemplos recientes de enzimas
detergentes segunda generacin incluyen el desarrollo de nuevas amilasas que
han mejorado la actividad a temperaturas ms bajas y pH alcalino, mientras
manteniendo la estabilidad necesaria

bajo condiciones del detergente. Estas

enzimas fueron desarrollados por el uso combinado de la deteccin microbiana e

ingeniera racional de protenas [6]. Las proteasas que muestran actividad a
temperaturas bajas se han aislado de la naturaleza, pero tambin se han
desarrollado en el laboratorio mediante un enfoque de evolucin dirigida [7]. Por
otra parte, a partir de un material de partida de 26 proteasas subtilisina Ness y
compaeros de trabajo [8 ] utilizado una ronda de barajado de ADN para aislar
nuevas proteasas con diversas propiedades mejoradas. Las mejoras incluyen
caractersticas muy relevante para proteasas de detergente (es decir, actividad y
estabilidad mejorada a pH alcalino). La ms reciente introduccin de una nueva
clase de la enzima en un detergente ha sido la adicin de una mananasa - el
resultado de un desarrollo conjunto entre Procter and Gamble y Novozymes [9 ].
Esta enzima ayuda a eliminar diversas manchas de comida que contienen goma
guar, un agente estabilizador y espesante de uso general en productos
alimenticios.
Las enzimas para la conversin de almidn
La conversin enzimtica del almidn en jarabe de maz de alta fructosa es un
proceso bien establecido y ofrece un hermoso ejemplo de un proceso
biotecnolgico en el que es necesario el uso consecutivo de varias enzimas. Las
enzimas utilizadas en la industria del almidn tambin son objeto de mejoras
constantes.

El primer paso en el proceso es la conversin de almidn a oligo maltodextrina

por la accin de -amilasa. La inyeccin simultnea de vapor pone demandas
extremas en la termoestabilidad de la enzima. El uso de -amilasas tradicionales,
el pH tiene que ajustarse a un alto nivel no deseable y calcio debe ser aadido
para estabilizar la enzima. Nuevos a-amilasas con propiedades optimizadas, tales
como una mayor estabilidad trmica, tolerancia a los cidos, y la capacidad de
funcionar sin la adicin de calcio, se han desarrollado recientemente [6,10,11 ]
ofrece beneficios obvios para la industria. Tambin se han emprendido esfuerzos
de ingeniera para desarrollar versiones mejoradas de las enzimas utilizadas ms
adelante en el proceso (es decir, la glucoamilasa y la glucosa isomerasa [12,13]).
la produccin de alcohol carburante
En la industria del alcohol, el uso de enzimas para la produccin de azcares
fermentables a partir de almidn tambin est bien establecido. Durante la ltima
dcada, ha habido un creciente inters en alcohol carburante como resultado del
aumento de la preocupacin ambiental, los precios del crudo y, con ms
intensidad, por la prohibicin en ciertas regiones del aditivo para gasolina metil
terc-butil ter (MTBE), que se pueden intercambiar directamente con etanol [1416].
Por lo tanto, se estn realizando actualmente esfuerzos intensos para desarrollar
mejores enzimas que pueden permitir la utilizacin de los sustratos ms baratos y
utilizados parcialmente como lignocelulosa, para hacer bioetanol ms competitiva
con los combustibles fsiles [17,18]. El coste de las enzimas necesarias para
convertir lignocelulosa en una materia prima de fermentacin adecuada es un
problema importante, y el trabajo actual se centra tanto en el desarrollo de
enzimas con mayor actividad y estabilidad, as como en su produccin eficiente.
Programas gubernamentales enormes han puesto en marcha en los Estados
Unidos por el Departamento de Energa para apoyar estos desarrollos,
estimulados por el nfasis en la reduccin de la contaminacin en general y la
necesidad de tomar medidas para cumplir el protocolo de Kyoto.

aplicaciones textiles
En la industria textil se ha introducido recientemente una nueva actividad
enzimtica. Esta industria est bajo una considerable presin ambiental debido a
su gran energa y el consumo de agua y la contaminacin ambiental posterior. Uno
de los principales

pasos

de mas consumo de energa y agua

en el

procesamiento de algodn es la etapa de desengrasado, la eliminacin de los

diversos componentes de la pared celular restante en las fibras de celulosa
realizado a alta temperatura y en condiciones alcalinas fuertes.
Una alternativa , el Proceso a base de enzimas lleva a cabo a temperaturas
mucho ms bajas y el uso de menos agua ahora se ha desarrollado sobre la base
de una pectato liasa [19 ]. El impacto ambiental positivo del nuevo proceso fue
reconocido por una concesin del Premio Desafo Estados Unidos Presidential
Green Chemistry en 2001. Tras la introduccin de este paso, las enzimas ahora se
han introducido en la mayora de los pasos principales en la fabricacin de textiles
de algodn (vase la Figura 3). El uso de estas enzimas ha beneficiado tanto a la
industria textil y el medio ambiente.
Enzimas para la industria de alimentacin
El uso de enzimas como aditivos para alimentos tambin est bien establecida.
Por ejemplo, xilanasas y -glucanasas se han utilizado a lo largo de la ltima
dcada en los alimentos a base de cereales para los animales monogstricos,
que, contrariamente a los rumiantes, son incapaces de degradar totalmente y
utilizar los alimentos de origen vegetal que contienen altas cantidades de celulosa
y hemicelulosa. Durante los ltimos aos se ha centrado en la utilizacin del
fsforo natural con destino en cido ftico en los alimentos a base de cereales para
los animales monogstricos. La Mejor utilizacin del fsforo total de la planta, de
los cuales el 85-90% se une en cido ftico, solamente se obtiene mediante la
adicin de la enzima fitasa al alimento.
La atencin en esta enzima se ha incrementado dramticamente en los ltimos
aos debido a la encefalopata espongiforme bovina (EEB) prohibicin de harinas

de huesos -relacionado en muchos pases, lo que ha eliminado efectivamente la

principal fuente tradicional para el fsforo inorgnico. Adems, varios pases
occidentales con la produccin animal intensiva han adoptado normas para la
liberacin de fsforo en el medio ambiente. A medida que la adicin de fitasa para
alimentos como resultado una reduccin significativa de la toma de fsforo de los
monogstricos, la fitasa han crecido hasta convertirse en el segmento ms grande
de la enzima en la industria alimentaria. Adems de los efectos directos sobre la
absorcin de fsforo y secrecin, tambin estn siendo reconocidos efectos
indirectos sobre la absorcin de otros nutrientes [20 , 21].
Los avances ms recientes en enzimas para alimentacin animal se han dirigido a
la mejora de la aplicabilidad y el rendimiento de las fitasas [22]. Nuevas fitasas
fngicas se han identificado con 4-50 veces las actividades especficas ms altas
de lo que se inform [23 ].
Los enfoques alternativos para el desarrollo de las enzimas ms eficaces han sido
el aumento de la actividad cataltica de las fitasas fngicas por mutagnesis
dirigida al sitio; por ejemplo, sobre la base de estudios estructurales
tridimensionales, la actividad especfica de la fitasa de Aspergillus fumigatus fue
aumentado cuatro veces [24]. Para que las enzimas sean aplicable para uso en
productos de alimentos granulado, tienen que sobrevivir altas temperaturas (por
encima de 80 C) durante la granulacin por perodos cortos de tiempo. Un nuevo
mtodo utilizado para lograr la estabilizacin trmica ha sido la construccin de un
"consenso fitasa 'basado en homologas entre las diversas fitasa. Esta enzima
exhibe un aumento en la estabilidad trmica a alrededor de 80 C [25 ].
An as, la utilizacin de fsforo no es el nico motivo de preocupacin para la
industria de la alimentacin animal; esfuerzo continuo se pone en la obtencin de
un mayor valor nutricional de diversas fuentes de alimentacin, por ejemplo,
mediante el aumento de la digestibilidad de la protena en la harina de soja. Es
probable que en el futuro veremos nuevas y diferentes enzimas hidrolticas
aplicados en la industria de la alimentacin para aumentar el valor de la materia

prima de alimentacin, reduciendo as el consumo de energa y la contaminacin

por accin en vivo en beneficio del medio ambiente.
Enzimas para la industria alimentaria
Como se indica en la Tabla 1, las aplicaciones de las enzimas en la industria
alimentaria son muchas y diversas, que van desde la texturizacin para dar sabor.
Comunes a ms o menos todas las aplicaciones de alimentos, las enzimas se
aplican a productos alimenticios procesados como agentes de procesamiento
corriente arriba desde el producto final. Varias se han hecho avances en la
optimizacin de enzimas para aplicaciones existentes y en el uso de la produccin
de protena recombinante para proporcionar enzimas mono-componente eficientes
que no tienen potenciales efectos secundarios perjudiciales.
Recientemente, mucho trabajo se ha llevado a cabo sobre la aplicacin de la
transglutaminasa como agente de textura en el tratamiento de, por ejemplo,
salchichas, fideos y yogur, en el entrecruzamiento de protenas proporciona
mejores propiedades viscoelsticas de los productos [26] . Un obstculo, lo que
puede impedir el uso an ms amplio, es la disponibilidad actualmente limitada de
la enzima en escala industrial. Actualmente, slo la transglutaminasa de
Streptoverticillium sp. est disponible comercialmente en una escala razonable, y
el trabajo est en curso para aumentar la disponibilidad de la enzima por la
produccin recombinante en Escherichia coli [27]
Dentro de la industria de la panificacin existe un creciente inters en las enzimas
lipolticas [28,29]. Los resultados recientes sugieren que (fosfo) lipasas se pueden
utilizar para sustituir o complementar emulsionantes tradicionales, ya que las
enzimas degradan los lpidos polares de trigo para producir lpidos emulsionantes
in situ. Adems, los esfuerzos se dedican actualmente hacia una mayor
comprensin de envejecimiento del pan y de los mecanismos detrs de la
prevencin enzimtica de estancamiento utilizando las a-amilasas y xilanasas [30].
Los estudios han confirmado los resultados anteriores que muestran que la
capacidad de retencin de agua y la retencin en el almidn y hemicelulosa

fracciones

del

pan,

siendo

los

substratos

de

a-amilasas

xilanasas,

respectivamente, para ser crtico para mantener la suavidad y elasticidad. El

recientemente determinada estructura tridimensional de la amilasa ampliamente
aplicado para antistaling (Novamyl) proporcionar ms informacin sobre el
mecanismo de accin de la enzima. Esta amilasa es probablemente capaz de
degradar amilopectina a un decreto que impide la recristalizacin despus de la
gelatinizacin, sin degradar completamente la red de amilopectina que
proporciona el pan con elasticidad.
Adems de los avances mencionados anteriormente, deben mencionarse algunos
totalmente nuevas aplicaciones dentro de la industria alimentaria, aunque poco, en
su caso, la literatura est disponible pblicamente. El uso de lacasa para la
clarificacin de jugo (lacasa cataliz la reticulacin de polifenoles, lo que resulta en
una fcil extraccin de polifenoles por filtracin) y para realzar el sabor de la
cerveza se establecieron recientemente aplicaciones dentro de la industria de las
bebidas. Es probable que la comprensin funcional de diferentes clases de
enzimas proporcionar nuevas aplicaciones dentro de la industria de la
alimentacin en el futuro.
Procesamiento de grasas y aceites
En las industrias de grasas y aceites, se han introducido recientemente varios
nuevos procesos basados en enzimas. A pesar de que la utilizacin de lipasas
inmovilizadas en la interesterificacin de triglicridos fue descrito por primera vez
en la dcada de 1980, el proceso no ha sido suficientemente rentable para ser
introducido en verdaderas aplicaciones a gran escala, por ejemplo, en la
produccin de margarina. Aunque la produccin de la enzima se ha vuelto mucho
ms eficiente, el coste de inmovilizacin se ha mantenido un obstculo.
Los acontecimientos recientes n, sin embargo, ha cambiado esta imagen. Un
nuevo proceso de lipasas inmovilizadas sobre la base de la granulacin de la slice
ha reducido drsticamente los costes del proceso y procedimientos basados en
este nuevo material se estn aplicando para la produccin de grasas y aceites de

materias primas sin contenido de cidos grasos trans [32]. Otro procedimiento
recientemente introducido es la eliminacin de los fosfolpidos de aceites
vegetales ('desgomado'), usando una fosfolipasa microbiana altamente selectiva
[33 ]. Este es otro ejemplo en el que la introduccin de un paso a base de
enzimas ha permitido que tanto el ahorro de energa y agua para el beneficio tanto
de la industria y el medio ambiente.
Enzimas para sntesis orgnica
Las enzimas para la sntesis de la sntesis qumica orgnica es un rea donde el
uso de la catlisis enzimtica ha sido visto como teniendo una gran promesa. A
pesar de ello, la industria qumica ha sido lento para implementar procesos
basados en enzimas y el uso de enzimas en la industria qumica sigue siendo bajo
en comparacin con otras industrias. En la actualidad, sin embargo, estamos
viendo un crecimiento muy significativo en esta rea y procesos basados en
enzimas estn ahora, por fin, est ampliamente establecida para la produccin de
una diversidad de diferentes productos qumicos; Un ejemplo clave se encuentra
en la produccin de productos intermedios de un solo enantimero utilizados en la
fabricacin de medicamentos y productos agroqumicos [34].
Este mercado se caracteriza por un muy alto grado de fragmentacin, ya que muy
pocas enzimas tienen aplicabilidad en una amplia gama de diferentes procesos.
procesos basados en enzimas recientemente introducidos incluyen el uso de
lipasas para la produccin de alcoholes y amidas, enantiopuros nitrilases para la
produccin de cidos carboxlicos enantiopuros, y acilasas para la produccin de
nuevas penicilinas semisintticas [34].
Ya que muchas empresas se encuentran actualmente en una fase temprana de la
explotacin de la catlisis a base de enzimas, se espera que muchos de los
nuevos desarrollos en esta rea durante los prximos aos.
Conclusiones y perspectivas

Como se ha indicado anteriormente, las enzimas se utilizan actualmente en varios

productos y procesos industriales diferentes y nuevas reas de aplicacin que
estn siendo aadidos constantemente. Gracias a los avances en la biotecnologa
moderna, las enzimas se puede desarrollar hoy para procesos en los que nadie
hubiera esperado una enzima que sea aplicable hace slo una dcada. Comn a
la mayora de las aplicaciones, la introduccin de enzimas como catalizadores
efectivos que trabajan en condiciones suaves resultados en un ahorro significativo
en los recursos como la energa y el agua para el beneficio tanto de la industria de
que se trate y el medio ambiente. En un mundo con una poblacin en rpido
crecimiento y se aproxime el agotamiento de muchos recursos naturales, la
tecnologa de enzimas ofrece un gran potencial para muchas industrias para
ayudar a satisfacer los desafos que enfrentarn en los prximos aos.