SERVIO PBLICO FEDERAL

MINISTRIO DA EDUCAO
UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DO SEMI-RIDO
DEPARTAMENTO DE AGROTECNOLOGIA E CINCIAS SOCIAIS
DISCIPLINA: BIOQUMICA EXPERIMENTAL
CURSO: BIOTECNOLOGIA
TURMA: 2015.2
DOCENTE: EMMANUEL DE SOUSA JEREISSATI

AULA PRTICA III: PREPARO DE SOLUO TAMPO

DISCENTES: DANIELA RAYANE DA SILVA MORAIS

GABRIELA PEREIRA DE OLIVEIRA LIRA
GIZELE LANNAY FURTUNA DOS SANTOS
PEDRO VICTOR MORAIS BATISTA

MOSSOR
2016

SUMRIO

1. Assunto .......................................................................................................... 3
2. Introduo ...................................................................................................... 3
3. Objetivos ........................................................................................................ 4
3.1 Objetivos gerais........................................................................................ 4
3.2 Objetivos especficos ............................................................................... 4
4. Procedimento experimental ........................................................................... 4
5. Resultados e discusses ................................................................................. 5
6. Concluso ....................................................................................................... 7
7. Referncias ..................................................................................................... 8

1. Assunto
Preparo de Soluo Tampo
2. Introduo
Ao se trabalhar com sistemas biolgicos, os bioqumicos se deparam com
problemas como a alterao do pH da soluo, o que pode ocasionar danos no
procedimento experimental, como exemplo temos algumas enzimas que so altamente
sensveis a alteraes bruscas de pH. Alm disso, tambm temos em qumica analtica e
industrial, que o controle do pH pode ser fundamental para determinar as extenses de
uma reao de precipitao e de eletroposio de metais, na separao qumica e nas
snteses qumicas em geral (PERUZZO, 1998).
Para isso, utilizados solues que regulam esse pH, estas solues so chamadas
de Tampo. Um soluo tampo consiste na juno de um cido fraco com uma base
conjugada, ou uma base fraca com um cido conjugado, eles resistem as variaes do pH,
mantendo o sistema constante por mais tempo.
O primeiro conceito de soluo tamponante surgiu de estudos bioqumicos onde
se fazia necessrio o controle do pH em diversos aspectos biolgicos, neste contexto, em
1900, Fernbach e Hubert ao estudar a enzima amilase, descobriram que uma soluo de
cido fosfrico com uma baixa neutralizao agia como proteo contra as variaes
abruptas do pH. Desde ento essas solues tem sido aplicadas nas diversas reas da
qumica e da bioqumica.
Existem sistemas tampes naturais, e um muito importante o sangue, ele permite
a manuteno das trocas gasosas e das protenas. Isso ocorre devido o pH do sangue de
7,4 onde o sistema em equilbrio o cido carbnico e o on associado de bicarbonato. O
sistema pode evitar variaes de at 0,3 unidades de pH, que poderiam acarretar vrios
problemas ao organismo. Outro importante sistema tampo a saliva, ela tem como
principal funo neutralizar os cidos presentes na boca, evitando assim o
desenvolvimento de bactrias que possam formar a placa bacteriana.

3. Objetivos
3.1 Objetivos Gerais
Preparar e testar uma Soluo Tampo.
3.2 Objetivos especficos

Aprender a desenvolver uma soluo tampo;

Entender suas aplicaes laboratoriais;

Averiguar sua capacidade tamponante.

4. Procedimento Experimental
O procedimento experimental foi dividido em duas etapas, a primeira foi realizado
o preparo da soluo tampo e a segunda etapa foi testar a eficincia da soluo tampo.
Para o incio da primeira etapa do procedimento foram calculadas e pesadas s
quantidades necessrias de fosfato de potssio monobsico (KH2PO4) para o
procedimento. Em seguida o KH2PO4 foi dissolvido em gua destilada com o auxlio de
um balo volumtrico de 50ML, obtendo assim uma soluo de 0,2mol/L. Concomitante
a isso o mesmo procedimento foi repetido com o fosfato dibsico (K2HPO4H20) obtendo
tambm uma soluo de 0,2mol/L. Em seguida ao preparo das solues e com o auxlio
da proveta, a soluo 1 de potssio monobsico foi misturada com a soluo 2 de potssio
dibsico. Misturada as solues, e utilizando o pHmetro foi possvel determinar o pH.
J na segunda etapa em que consistia em testar a eficincia da soluo foram
utilizados quatro tubos de ensaios, em que dois deles foram colocadas 5mL de gua
destilada e nos outros dois tubos foram colocadas 5Ml da soluo tampo. Aps medir o
pH das solues com o papel indicador, foram adicionadas 5 gotas de HCl a um tubo de
ensaio contendo agua destilada, e em outro tubo contendo gua destilada com NaOH,
foram adicionadas tambm 5 gotas de HCl, agitando em seguida. Esse procedimento foi
repetido com os tubos de ensaio contendo a soluo tampo testando assim a eficincia
da mesma.

5. Resultados e Discusses
O clculo do pH de uma soluo tampo realizado a partir da equao de
Henderson-Hasselbach. Esta equao uma relao matemtica entre o pH, o pKa de um
cido fraco e as concentraes do cido fraco (A-) e sua base conjugada (HA).

Primeiro, atravs do clculo da concentrao molar foi obtido o valor da massa de

fosfato de potssio monobsico (KH2PO4) e o dibsico (K2HPO4):

0,2 =

()
. ()

()
136,09 0,05

0,2 =

= 1,361 (KH2PO4)

()
. ()
()
174,18 0,05

= 1,7418 (K2HPO4)

Foi pesado o fosfato de potssio monobsico (KH2PO4) e o dibsico (K2HPO4),

em seguida foram diludos em 50 mL de gua destilada para obter 0,2 mol/L e misturados
em um bquer. Com auxlio do pHmetro foi medido o pH da soluo e obteve o valor em
torno de 6,86. Utilizando a equao de Henderson-Hasselbach:
= log

[]
[ ]

6,86 = 6,86 log

[]
[ ]

log

[]
=0
[ ]

[]
= 0 = 1
[]

Esse valor obtido indica a variao do pH da soluo de fosfato utilizada quando h

adio de H+ ou de OH, que pode ir de 6,86 at 7,86. O pKa de um cido fraco igual
ao pH da soluo no ponto mdio da sua titulao, onde nesse ponto [HA]=[A] e pH=
pKa + log 1,0= pKa + 0 = pKa.

Em bqueres separados foram colocados 5 mL de gua destilada (pH em torno de

7) e a soluo tampo. Ao adicionar 5 gotas de cido clordrico (HCl) e em seguida, em
outros bqueres, adicionados 5 gotas de hidrxido de sdio (NaOH) as solues foi
possvel perceber que houve uma grande variao no pH da gua, diminudo e aumento
o valor do seu pH, respectivamente, em relao a pequena variao da soluo tampo.
Na reao do HCl com a soluo tampo ocorreu uma elevao da concentrao
dos ons H+ no meio, de acordo com o princpio de Le Chatelier essa elevao ser
neutralizada pela base conjugada do tampo, restabelecendo o estado de equilbrio e o pH
da soluo ir variar pouco:

J na reao do NaOH com a soluo tampo ocorre aumento na concentrao de

ons OH- no meio, essa elevao causar distrbio no equilbrio, de acordo com Le
Chatelier esse distrbio ser neutralizado pelo cido fraco reestabelecendo o equilbrio
no meio:

A gua, por no ter essa capacidade tamponante, tem o pH variado drasticamente.

Diminui em contato com o cido clordrico (HCl) diludo, que possui alta concentrao
de ons H+ e aumenta em contato com hidrxido de sdio (NaOH), uma base, em virtude
do aumento de ons OH-.

6. Concluso
A prtica realizada teve seu objetivo alcanado, onde a soluo tampo foi
produzida de forma eficiente. Foram realizados testes que demonstraram sua capacidade
tamponante esperada, deixando o pH da soluo estvel, mesmo com a adio de um
cido e em seguida uma base ao sistema. O experimento possibilitou tambm relembrar
a prtica do uso do pHmetro para avaliar a eficincia da soluo tampo produzida em
laboratrio.

7. Referncias
BERNADES, C. F. Caracterizao de Sistemas Tampes. FACULDADE DE
MEDICINA PUC-Campinas, disciplina de bioqumica B aula prtica 8. Disponvel
em:

< http://ftp-acd.puc-

campinas.edu.br/pub/professores/ceatec/celene.bioquimica/medicina%202%C2%BA%2
0periodo%20cardio/AULA-PRATICA-8-BIOQUIMICA-B-3-de-maio-2012.pdf>.
Acesso em: 18 de maro 2016.
PERUZZO, Francisco Miragaia (Tito); CANTO, Eduardo Leite; Qumica na Abordagem
do Cotidiano, Ed. Moderna, vol.1, So Paulo/SP- 1998.
PILLING, S. Prtica 8 Determinao da capacidade tamponante de solues tampes.
Fsico-Qumica Experimental II- Bacharelado em Qumica - Engenharia Qumica,
UNIVAP-

Universidade

Vale

do

Paraba.

Disponvel

em:

<

http://www1.univap.br/spilling/FQE2/FQE2_EXP8_Tampao.pdf>. Acesso em: 18 de

maro 2016.
LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L. e COX, M.M. Princpios de bioqumica. 2 ed. Trad.
A.A. Simes e W.R.N. Lodi. So Paulo: Sarvier, 1995. p. 71-72.
MARCONATO, J. C., FRANCHETTI, S. M. M.; PEDRO, R. J. Soluo-Tampo: Uma
proposta experimental utilizando materiais de baixo custo. Qumica Nova na Escola, N
20, novembro 2004.