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Exame diagnostica que consegue identificar qual a bactria que est causando a infeco no ser, e
identifica qual o antibitico mais indicar para banir a bactria para assim tratar com o antibitico
capaz de eliminar essas bactrias, algumas infeces nem sempre causam o adoecimento.
TSA o teste de sensibilidade com antibitico, MIC a concentrao inibitria mnima Poe teste
Eteste quantitativo em fita com antibiticos de doses diferentes.
O PROCEDIMENTO DO ANTIBIOGRAMA?
Consiste em coletar amostras, ter o incuo, obter cultura, repicar, obter cultura pura, material
biolgico coletado do nosso corpo. Encaminha amostras para o laboratrio de micro para analisas o
material, por meio de laminas via microscopia, cultivos de bactrias com o fim de buscar
diagnsticas, o meio para esse exame tem liquido e slido este usa gar para ficar slido, meios de
cultura solido com a infuso do disco impregnado de antibitico.
FORMAS DE FAZER O ANTIBIOGRAMA?
DIFUSO EM GAR Coloca-se pequenos discos de papel filtro com diferentes antibiticos
conhecidos suas concentraes, em placa a cultura j pura, horas depois obs. se teve crescimento
bacteriano em volta do disco, na ausncia de crescimento no ter halo de crescimento.
BASEADO EM DILUIO
O recipientes, vrios tubos, em todas as doses diferentes de antibitico diludos, coloca a bactria
nesse meio e analisa se ir turvar, deve ter um tubo teste som bactria, um deles combate a bactria.
O QUE ANTIBIOGRAMA?
o teste para descobrir a sensibilidade das bactrias frente aos antibiticos.
Toda final de uma cultura se encerra com o antibiograma, diagnstico microbiolgico est incluso, a
no ser que seja uma bactria de sensibilidades conhecida. O Streptococcus pyogenes a penicilina
til. Este serve para avaliar a interao da droga e a bactria, descobrindo seu MIC. Fao o
MPI para saber qual a dose ideal para no usar irracional o antibitico, a dose certa, evitando a
resistncia da bactria frente ao antibitico.
INFORMATIZAR PADRONIZAR.
Pois cada observador pode achar diagnstico diferente, no olho nada se ver, tem padres que se
segue, por isso o mtodo infelizmente quantitativo menos usado o Eteste, usa mais o qualitativo
com disco impregnado.
EM QUE CONSISTE A TCNICA QUALITATIVA?
Tcnica difuso em disco e gar, meio slido como o Miller Hinton, requer um excelente meio de
cultura, (ao fazer o semeio, incuba por 18 a 24 hrs, na estufa em tem de 35 a 36) impregna o disco
no antibitico, este pode ser bactericida ou bacteriosttico, inibindo ou no a bactria.
TCNICA QUANTITATIVA.
Posso fazer em caldo ou em gar slido, caldo difuso em macrodiluico e microdiluio que so
plaquetinhas parecido o de Elisa, A CNICA CONSISTE EM diluir o caldo nutritivo, incuo da
bactria pura e o antibitico diludo sucessivamente cada dose padronizada em todas as
quantidades para casa local, padronizado. Diluo o antibitico no caldo, pe a bactria nas
quantidades iguais em todos os furos, se turvar em alguns so eles que tm bactria e o antibitico
no o combateu. E alguns no cresceram como no furo com 250 mg de azitromicina, mas talvez o
MIC seria um pouco menos ou mais que isso, ento pode ser um antes deste, ou um depois, pois
posso achar no estar turvo e me enganar, ento devo fazer um gram do antes, do que achei, e do
aps, essa uma prova para certificar, e para o gram devo ter um cultura no mesmo. Tudo isso
padronizado as quantidades de tudo nesse teste (antibitico, caldo, quantidade de bactrias). Se
forem 10 tubos tudo igual p tds. Estou a procura do CIM.
COMO FAZER O ETEK.
Pego uma placa pela tcnica de esgotamento espalho a bactria, pego uma fita vendida no comercio,
essa tem vrios antibiticos em doses diferentes, ela pode ou no crescer, se eu achar que o MIC
250 mg eu fao um caldo com essa dose, se turvar no era essa dose, ,e ao achar que a dose que
no turve, eu fao um gram.
MICRODILUIAO DO ANTIBIOGRAMA?
A microdiluio em caldo corresponde miniatura da tcnica de diluio. Ao contrrio da anterior,
a microdiluio em caldo utiliza placas de Elisa estreis, com 96 poos, com o fundo em formato de
U, para permitir a melhor visualizao do crescimento bacteriano.
A vantagem deste mtodo, em relao ao da diluio em tubo, que em uma placa podemos testar
uma bactria utilizando um nmero varivel de antimicrobianos, em torno de 12 drogas, com
distintas concentraes (4 a 8 diluies logartmicas).
As placas de microdiluio podem conter o antimicrobiano liofilizado ou congelado e so
inoculadas com o auxlio de um dispositivo plstico, para obter uma concentrao bacteriana final
de aproximadamente 5 x 104 a 105 UFC/mL em cada poo da placa de microdiluio.
Nome do exame: ANTIBIOGRAMA QUANTITATIVO (MIC)
Sinonmia: Concentrao inibitria mnima. MIC, concentrao bactericida mnima (MBC).
Material: Cultura positiva ou germe isolado. Especificar a(s) droga(s) a ser (em) testada(s).
Colheita, conservao:
Preparo do paciente:
Mtodo: Diluio do antibitico em meio lquido ou em placa (meio slido).
Interferentes:
Interpretao: O teste til no acompanhamento da teraputica de infeces bacterianas, como nas
endocardites, septicemias, meningites, osteomielite e outras infeces, pois fornece a menor
concentrao de antibitico que inibe (MIC) ou mata (MBC) o microrganismo (99,9% do inoculo).
Exames relacionados: Poder bactericida do soro.
DEFINIO - Antibiogramas so provas in vitro para a determinao da sensibilidade dos agentes
microbianos aos antibiticos, ou seja, a medida da concentrao (ou mdia de concentrao) que
capaz de provocar alguma inibio no crescimento do microrganismo em prova.
MTODOS - Os mtodos mais utilizados podem-se esquematizar:
Mtodos de diluio
Lquido
Slido
Em diferentes tubos de ensaio (p.ex. 8) lana-se a mesma quantidade de caldo nutritivo j sujeito a
incubao (portanto iguais nmeros de bactrias) e quantidades crescentes de antibitico, excepto
no primeiro - TUBO TESTEMUNHA.
Aps 24 horas de incubao a 37C observa-se.
- Nota-se que a cultura se desenvolveu no tubo testemunha, e em tubos sucessivos, at que num
deles j no se observa desenvolvimento cultural. A concentrao desse tubo ser a
CONCENTRAO MNIMA INIBIDORA [C.M.I.] (tambm conhecida como taxa inibidora ou
taxa de sensibilidade a espcie estudada).
Se as solues de antibitico se juntar Agar, obtm-se o mtodo de diluio slido.
Estes mtodos no so prticos em clnica, pois, para um determinado agente isolado, e necessrio
fazerem-se tantos ensaios quantos os antibiticos a utilizar, o que resulta moroso e onoroso.
Mtodos de difuso em Agar - Estes mtodos consistem em dispor, superfcie de gelose contida
numa caixa de Petri, diferentes tipos de antibiticos, que se vo difundindo, determinando
concentraes inversamente proporcionais distncia.
A deposio dos antibiticos pode ser feita segundo diferentes tcnicas:
a) Mtodo da placa escavada - so feitas pequenas escavaes na placa contendo o meio, onde se
colocam as agentes antimicrobianas.
c) Mtodo das ranhuras radiadas - praticam-se ranhuras a partir do centro da placa, onde se
depositam os antibiticos.
d) Mtodo dos discos - este mtodo, hoje em dia o mais utilizado, e baseia-se no depsito de
discos de papel de filtro impregnados de antibitico que se depositam superfcie das placas de
Petri.
Crticas aos Antibiogramas Estas provas so muito relativas, pois esto dependentes de muitos
fatores:
a) O fato de determinada estripe ser sensvel a um antibitico "in vitro", no significa que "in vivo"
o mesmo se passe;
b) A concentrao de antibitico no sangue pode no atingir a C.M.I.
c) O germe isolado pode no ser o responsvel pela infeco;
d) Na observao "in vitro", o PH; a qualidade do papel; a quantidade de antibitico realmente
difundido, a espessura da camada de Agar, o meio de cultura, a concentrao da sementeira, a
rapidez do desenvolvimento, a velocidade de difuso, a estabilidade do antibitico, a durao da
incubao, etc, so fatores que influem nas observaes;
e) "in vitro", a resposta imunolgica do hospedeiro, a natureza e localizao da leso, a extenso e
grau da reao inflamatria, o nmero de micro-organismos na leso, a quantidade de tecido fibroso
e de granulao existentes; a capacidade do antibitico de penetrar e de se difundir no foco
infeccioso, so fatores capazes de alterar a capacidade bactericida (ou bacteriosttica) do
antibitico.
1 - ANTIBITICOS DE BOA DIFUSO PULMONAR
ANTIBITICOS
DE
BOA PENETRAO
INTRACELULAR
4 - ANTIBITICOS NO ABSORVIDOS PELA
MUCOSA INTESTINAL NEM DESTRUIDOS PELOS
SUCOS GSTRICOS
5 - ANTIBITICOS ELIMINADOS SOB FORMA
ACTIVA NAS URINAS
Ampicilina;
Eritromicina;
Pristinamicina;
IDENTIFICAO DO AGENTE
a) Por ISOLAMENTO
b) Por deduo
ESCOLHA DO AGENTE ANTI-MICROBIANO
a) Por Antibiograma
b) Por tabelas de sensibilidade
PARA
DETERMINAO
DE
CIM
DE
ANTIBITICOS
SEU
USO
Etest uma tcnica quantitativa para determinao de sensibilidade antimicrobiana tanto de
bactrias no exigentes Gram negativas e Gram positivas aerbias (como Enterobacteriaceae,
Pseudomonas, Staphylococcus e Enterococcus) como bactrias exigentes (Pneumococos e
No colocar muitas fitas em cada placa; no mximo 4-5 fitas / placa de 150 mm, e 1-2 fitas/ placa
de 90 mm.
Utilizar meio padronizado e tcnicas adequadas para preparo do incuo.
Ler as referncias de Etest antes de utiliz-lo pela primeira vez.
PROCEDIMENTO
MEIO
Deve ser utilizada placa com Agar de 4.0 0.5mm de profundidade. O meio e os suplementos
dependem da espcie bacteriana a ser testada. O meio mais utilizado o meio de Mueller-Hinton
para as bactrias de crescimento rpido. O mesmo meio suplementado com sangue utilizado para
bactrias exigentes como estreptococos.
Como em todos os testes de sensibilidade, a escolha do meio pode afetar as CIMs. Os meios
recomendados pelo NCCLS permitem um bom crescimento bacteriano e geralmente um ponto de
interseco distinto. Meios com alto nvel de substncias antagonistas como timidina e timina
afetam resultados com sulfonamidas e trimetoprim. Variaes significativas na osmolaridade e no
nvel de ction influenciam valores de CIM de beta-lactmicos, aminoglicosdeos e tetraciclinas,
enquanto mudanas de PH podem afetar a atividade de lincosamidas, streptograminas, macrolideos,
aminoglicosdeos e quinolonas. Alteraes de PH podem ocorrer como resultado de:
.Variao da capacidade tampo de diferentes marcas e lotes de Agar.
.Incubao em CO2 diminui o PH do meio. Para drogas sensveis ao PH, os valores de CIM sob
incubao
em
CO2
pode
diferir
daqueles
em
condies
normais.
Use sempre um meio bem definido e padronizado para o teste de sensibilidade para obter valores de
CIMs precisos e reprodutveis.