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MICROBIOLOGA VETERINARIA
GUAS DE LABORATORIO
PRACTICA 8: MASTITIS BOVINA
ACTIVIDADES:
1. Realizar la prueba de mastitis california de acuerdo a las siguientes instrucciones:
a. Toma de muestra: Las muestras de leche deben tomarse aspticamente, para lo cual es
necesario usar guantes.
Es importante que antes de iniciar el muestreo, descarte 3 o 4 chorros de leche de cada
uno de los cuartos que van a muestrearse, para evitar que haya contaminacin de las
muestras con bacterias que se encuentren en pezn.
Sumerja cada pezn durante 20 a 30 segundos en una solucin desinfectante
(hipoclorito de sodio al 4% o isodine al 0,5%).
Seque rigurosamente cada pezn para remover el desinfectante, usando una toalla
descartable por vaca.
Despus de verificar que la ubre y los pezones estn limpios y secos, utilice un algodn
o gaza humedecidas con etanol o alcohol isoproplico para limpiar el orificio del pezn.
Use un algodn para cada uno de los cuartos de inters, incluso si estos pertenecen al
mismo animal. Para evitar contaminacin cruzada, empiece limpiando el pezn ms
lejano y deje para el final, aqul que est ms cerca de Usted.
Abra el tubo estril donde va a dispensar la muestra, cuidando de mantener en su mano
la tapa del frasco con la cara hacia arriba (evite dejar la tapa en el suelo mientras ejecuta
el procedimiento) y proceda a la recoleccin, cuidando de no introducir o tocar con el
pezn la superficie del recipiente colector. Si se va a ejecutar la prueba de mastitis
california en campo, la leche de cada cuarto se dispensa en uno de los cuatro
compartimientos de una paleta de muestreo (previamente identificada) y se procede
con el test.
b. Ejecucin del test mastitis California:
c. Se escurren 3 4 chorros de leche de cada pezn en los compartimentos de la paleta.
d. Se inclina la bandeja en un ngulo de 60 para igualar la cantidad de leche en cada uno
(aproximadamente deben quedar entre 2 y 4 ml de leche).
e. Se agrega una cantidad igual de reactivo (Alquilauril sulfonato de sodio (2ml a 4ml) y se
inicia un proceso suave de agitacin por rotacin durante 15 a 20 segundos.
f. Leer e interpretar la prueba, de acuerdo a la tabla que se muestra a continuacin:
Conteo de clulas somticas (CCS): Se realiza la tincin correspondiente para la deteccin de este
tipo de clulas de la siguiente manera:
Homogenizar la muestra
Realizar la coloracin con Azul metileno al 1%, dejndolo actuar por 1 minuto sobre la
muestra.
El promedio del nmero de clulas por campo, se multiplica por el Factor microscpico. El
valor obtenido corresponder al nmero de clulas/ml.
Para saber el factor microscpico se tuvo en cuenta que el microscopio tuviese un campo de 0.140
mm de dimetro en aumento 100X. Su factor microscpico es de 600.000; o uno con dimetro de
0.180 mm de dimetro cuyo Factor microscpico es de 400.000
Recuento de Mesfilos: Es una medida de la condicin de higiene de los establecimientos, esta
prueba brinda informacin sobre el nmero total de bacterias presentes en la leche al recolectarla.
Las Placas Petrifilm para Recuento de Aerobios mesfilos, son un medio de cultivo listo para ser
empleado, que contiene nutrientes del Agar Standard Methods, un agente gelificante soluble en
agua fra, y un tinte indicador de color rojo que facilita el recuento de las colonias.
(guia_petrifilm_aerobios.pdf)
IDENTIFICACION DEL AGENTE ETIOLOGICO
Con las muestras positivas en la prueba CMT y recuento de mesfilos superior a 400.000 /ml se
realizan los cultivos microbiolgicos
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7. Ruegg, P. L., & Reinemann, D. J. (2002). Milk quality and mastitis tests.Bovine
practitioner, 36(1), 41-55.