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volume 2 nmero 2 p 55-66

Factores condicionantes da reproduo em Daphnia magna


Daphnia magna (pulga-da-gua) um animal aqutico (consumidor primrio) cuja
estratgia reprodutiva pode alternar entre assexuada (partenognese) e sexuada. Na

Ana Paula Incio


Diogo Martins
Lus Silva

partenognese ocorre o crescimento e desenvolvimento de um embrio sem fertilizao,


levando ao aumento rpido da populao. Na fase sexuada originam-se ovos de
resistncia (ephippium) que so capazes de sobreviver s condies desfavorveis,
prosseguindo o seu desenvolvimento quando esta situao se altera. Ao longo do ano

Rafael Cardoso

Vanessa Fonseca

lectivo (2009/2010) desenvolveu-se um projecto, no mbito da rea curricular no


disciplinar de rea de Projecto do 12 ano, com o objectivo de compreender e divulgar as
estratgias de reproduo de Daphnia magna e os factores condicionantes. Assim, foram

Colgio de S. Gonalo, Murtas Madalena,

testados dois factores passveis de condicionar a reproduo: temperatura e densidade

Amarante.

populacional. Na actividade experimental desenvolvida verificou-se a ocorrncia de


reproduo por partenognese e o crescimento rpido em larga escala s condies
ambientais (temperatura de 20-25 C, 15 indivduos em 400 mL de ASTM). Observou-se
que a temperaturas mais altas os organismos no sobreviviam mais de 24 horas. J a
temperaturas muito baixas, o desenvolvimento foi de tal modo lento que ao fim de 21 dias
os animais permaneciam de tamanho reduzido e sem sinais de reproduo. Em
condies de elevada densidade populacional constatou-se mais uma vez o crescimento
lento da populao. No entanto, foi possvel observar reproduo, com o nascimento de
machos na primeira ninhada. Tal significa que a varivel em estudo um factor
condicionante capaz de provocar uma alterao na estratgia reprodutiva, iniciando uma
fase sexuada. Por fim, em condies de baixa densidade populacional observou-se
novamente um crescimento reduzido nos organismos, hipoteticamente causado pela
acumulao de alimento no filtrado.
Palavras-chave
Daphnia magna
dfnia
partenognese
factores condicionantes
reproduo

heterogamicfleas@hotmail.com

ISSN 1647-323X

educao ambiental e ensino experimental das cincias

INTRODUO
Daphnia magna um organismo aqutico largamente utilizado como modelo em testes laboratoriais. Esta
funo tem-lhe sido atribuda por vrias razes. Por um lado um organismo muito sensvel a variaes
ambientais diversas, quer naturais (tais como variaes de temperatura, de concentrao em sais do meio,
de densidade populacional, de presso predatria), quer resultantes da actividade humana (tais como
contaminao dos sistemas aquticos com qumicos de origem diversa) (e.g. Castro et al. 2009, Lopes et al.
2009, Pereira e Gonalves 2009). Por outro lado, os dafndeos ocupam uma posio ecolgica importante
nas teias trficas aquticas, pelo que as alteraes que ocorrerem nas suas populaes podem ter
consequncias importantes ao nvel de todo o ecossistema aqutico. So animais que vivem na coluna de
gua (pertencendo ao grupo do zooplncton), alimentando-se por filtrao de microalgas (produtores
primrios), e por sua vez constituem uma fonte de alimento relevante para a comunidade de peixes (Castro
et al. 2009). Mais ainda, trata-se de um organismo relativamente fcil de cultivar em ambiente no natural
(laboratrio) e de manusear ao longo de procedimentos experimentais variados (Pereira 2008).
Os dafndeos so seres vivos cuja estratgia reprodutiva alterna entre assexuada (partenognese) e
sexuada. Na partenognese ocorre ciclicamente a deposio de ovos (numa cmara marsupial posicionada
dorsalmente no corpo das fmeas) que se desenvolvem formando um embrio sem que ocorra fertilizao.
A manuteno desta estratgia ao longo de algum tempo leva a que a populao seja maioritariamente
constituda por fmeas todas geneticamente idnticas (mecanismo natural de clonagem).
O mecanismo de reproduo dos dafndeos depende de factores ambientais. Em condies desvantajosas
as dfnias so estimuladas pelo meio para produzir machos que posteriormente fecundam as fmeas
(reproduo sexuada). O objectivo originar ovos de resistncia (ephippium) que so capazes de
sobreviver s condies desfavorveis, em estado latente, apenas eclodindo quando as circunstncias
voltarem a ser benficas, possibilitando, consequentemente, a conservao da populao (Pereira 2008).
No caso de existirem as condies ideais para a continuidade da populao reproduzem-se
assexuadamente, expandindo substancialmente e rapidamente o nmero de indivduos.
Este projecto, desenvolvido (no mbito da rea curricular no disciplinar de rea de Projecto) teve como
objectivo compreender e divulgar comunidade escolar quais os mecanismos de reproduo e os
respectivos factores condicionantes que conduzem alterao de estratgia reprodutiva (investimento na
reproduo sexuada) por parte desta espcie. Foram desenvolvidas adaptaes a protocolos de teste
padronizados (tendo em conta a disponibilidade de material e logstica da escola) e testou-se a influncia da
temperatura e da densidade populacional na reproduo de Daphnia magna. Sendo Daphnia magna
susceptvel a alteraes do ambiente poder funcionar como um guia para a preservao do meio aqutico
na medida em que se trata de um indicador da qualidade da gua.

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MATERIAIS E MTODOS
Obteno e cultura de organismos
Numa fase inicial, Daphnia magna foi cedida pela Universidade
de Trs-os-Montes e Alto Douro. Foi necessrio recorrer a esta
fonte depois de uma tentativa falhada de recolher o material
biolgico num ambiente natural, o Rio Tmega, no concelho de
Amarante. Na captura foram utilizadas redes (feitas com meias
de licra fina, arame e um recipiente). O local parecia completar
todos os requisitos necessrios para o desenvolvimento desta
espcie, mas aps uma longa procura (Figura 1) no se obteve
nenhum indivduo. Deve notar-se que a espcie Daphnia magna
no ocorre naturalmente nos sistemas aquticos portugueses;

FIGURA 1: Captura de Daphnia magna

se a captura tivesse sido bem sucedida, o trabalho teria provavelmente sido desenvolvido utilizando uma
outra espcie de Daphnia - Daphnia longispina. ainda importante referir que os dafndeos habitam
preferencialmente ecossistemas lnticos, ou seja, ecossistemas de gua parada (e.g., charcos permanentes
ou temporrios, lagos, lagoas, albufeiras); como os
dafndeos

so

capacidade

organismos

natatria

activa,

que

no

possuem

facilmente

seriam

arrastados pela corrente, ainda que esta fosse fraca.


Para conservar os indivduos usou-se um aqurio (20 L
de

capacidade)

com

gua

do

rio

(contendo

fitoplncton) . Ocasionalmente, adicionou-se levedura


(fermento de padeiro liofilizado), alimento adequado
segundo a pesquisa previamente efectuada (Ivone
Pinto, comunicao pessoal). Relativamente a outras
condies para a manuteno dos seres vivos, tal como
a temperatura, o laboratrio demonstrava possuir um
ambiente propcio proliferao da cultura (temperatura
entre os 20 e os 25C; fotoperodo natural de
L

aproximadamente 14h :10h ). Com o material biolgico


adquirido comearam a aplicar-se os conhecimentos
obtidos na fase de recolha de informaes, tais como,
observao e posterior anlise da morfologia de
Daphnia magna (Figura 2), assim como, posteriormente,

FIGURA 2: Fotografia de Daphnia magna (fmea).


(at) antenas; (ol) olho; (td) tubo digestivo; (ov) ovos
partenognicos; (ci) cmara de incubao; (et)
espinho terminal.

H vrias alternativas que podem funcionar como meio de cultura de dafndeos em laboratrio, usando apenas
levedura como aditivo alimentar. Se se usar gua de um rio importante assegurar que o rio est em boa condio
ecolgica (sem indcios de zonas de descarga poluentes ou de outras fontes de poluio difusa, como campos agrcolas
ou produo de gado nas redondezas) e que feita uma renovao frequente (de dois em dois dias) da gua das
culturas (os rios so em geral pobres em fitoplncton dado que a corrente arrasta continuamente as microalgas que
possam estar suspensas na coluna de gua). A gua de um lago/lagoa em boas condies ecolgicas pode constituir
melhor alternativa por ser mais rica em fitoplncton ainda assim, a frequncia da renovao da gua nas culturas deve
ser mantida elevada (dois em dois ou trs em trs dias. Eventualmente, a gua de um poo de rega, estando
assegurada a ausncia de contaminantes, pode tambm funcionar como meio de cultura de dafndeos.
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a distino entre macho e fmea (Figura 3). Para tal recorreu-se a vrios instrumentos que facilmente so
encontrados em laboratrio, como lupas binoculares (ampliao: 2 a 4x), pipetas de Pasteur e vidros de
relgio.
(A)

Com o decorrer do tempo colocaram-se questes quanto


quantidade de alimento que seria adequada. Com vista a
responder a estas questes comearam a realizar-se alguns
testes nos quais se sujeitaram as dfnias a diferentes

quantidades de levedura liofilizada. Em contactos e pesquisa


efectuados posteriormente descobriu-se que a utilizao de

levedura como fonte alimentar nica no era o mais


correcto, devendo funcionar normalmente apenas como um

(B)

suplemento.
Ensaios
A fase de ensaios iniciou-se com uma experincia preliminar
onde se sujeitou Daphnia magna a diferentes temperaturas.

1
2

Colocou-se um gobel (400 m de ASTM) com dez indivduos


no frigorfico (a 4C) e a mesma quantidade na estufa
(32C). Sujeitaram-se ainda alguns indivduos a condies
bastante adversas: durante 15 dias colocaram-se cerca de
20 neonatos num gobel (400 mL) juntamente com resduos
metablicos (acumulados anteriormente no fundo do mesmo
gobel e sem qualquer tipo de alimento.)
Com o decorrer do tempo aprofundaram-se os conhe-

FIGURA 3: Daphnia magna fmea (A) e macho


(B). (1) primeira antena; (2) bordas da carapaa.
Fonte: Olmstead e Gerald, 2007.

cimentos. Contactos e visitas ao Departamento de Biologia da Universidade de Aveiro forneceram


informaes abundantes sobre o tema, incluindo detalhes sobre a manipulao correcta dos seres vivos no
ambiente laboratorial e aconselhamento quanto ao desenvolvimento da experincia em preparao. Houve
fornecimento de alguns indivduos de um clone de Daphnia magna (que permitiu renovar as culturas na
escola, que j no se encontravam nas melhores condies) e de suspenses concentradas da microalga
verde unicelular Pseudokircheneriella subcapitata, que passou a constituir o alimento das culturas. Passou
3

a ser utilizada uma micropipeta para uma maior correco cientfica na proviso de alimento s culturas .
Tambm o meio de cultura foi alterado tornando as condies de cultura e de teste mais constantes:
comeou a utilizar-se o meio de cultura sinttico ASTM hardwater (ASTM 1980). Este meio de cultura tem
-

por base gua destilada, qual so adicionados alguns sais, cumprindo concentraes definidas: 192 mg L
1

-1

-1

-1

de NaHCO3, 120 mg L de CaSO4.2H2O, 120 mg L de MgSO4, e 8 mg L de KCl. Primeiramente este

possvel distinguir os machos das fmeas atravs da primeira antena, que mais alongada nos machos. Outra
diferena reside nas bordas da carapaa, sendo estas simtricas no caso das fmeas e assimtricas nos machos (Borst
et al. 2001; Olmstead e Gerald 2007).
3
Daphnia magna pode ser mantida em laboratrio em condies aceitveis com um fornecimento de uma rao diria
5
-1
de 3x10 clulas mL . A contagem microscpica de clulas algais antes de alimentar culturas seria um procedimento
muito demorado e por isso dificilmente compatvel com a rotina diria de um laboratrio. Para evitar a necessidade de
contagem feita uma relao entre o nmero de clulas de microalga que necessrio fornecer e o volume de
suspenso concentrada de microalgas que deve ser adicionado ao meio de cultura. Alguns detalhes adicionais sobre
este procedimento podem ser consultados em Castro et al. 2009.
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meio foi fornecido, porm, mais tarde, foi elaborado pelo grupo de trabalho (Figura 4). Aconselharam o uso
de neonatos no lugar de dfnias adultas nos ensaios, dado que desta forma seria mais simples garantir que
a populao que iniciaria cada ensaio era composta por indivduos com a mesma idade (a idade dos
indivduos pode constituir um factor de variabilidade dos resultados experimentais - a sensibilidade das
dfnias a diferentes agentes de stress varia bastante de acordo com a sua idade). Assim, foi necessrio
treinar a contagem de indivduos mais pequenos antes de iniciarem novas experincias.
No dia 15 de Abril de 2010 por volta das 14 horas e 30 minutos, Iniciou-se a experincia com sucesso, a
qual foi terminada no dia 6 de Maio de 2010 s 14
horas. Utilizaram-se 5 gobels com 400 mL de meio
ASTM. No grupo controlo colocaram-se 15 indivduos
(neonatos com aproximadamente 24 horas). No
grupo experimental A (Densidade

Populacional

Elevada) 80 neonatos e no grupo B (Densidade


Populacional Baixa) 5 neonatos, sendo, portanto, o
nmero de indivduos por gobel a varivel em teste.
Estes

primeiros

grupos

permaneceram

temperatura ambiente com fotoperodo natural


durante o perodo de teste.

FIGURA 4: Grupo de trabalho

Numa segunda experincia, o grupo I (Temperatura Elevada) e no grupo II (Temperatura Baixa) foram
colocados 15 neonatos (tal como no grupo controlo). Nos grupos I e II a temperatura foi mantida nos 4045C e 2-5C, respectivamente. Para certificar tal alterao o grupo I foi colocado numa estufa com
temperatura regulada, sendo o fotoperodo assegurado por uma lanterna posicionada no interior da estufa.
L

O grupo II foi colocado numa estufa de germinao onde tanto a temperatura como o fotoperodo (16h : 8
E

h ) puderam ser regulados. As populaes foram alimentadas 3 vezes por semana com 1,85 mL de
suspenso de Pseudokircheneriella subcapitata, medidos pela micropipeta. Durante o perodo de teste foi
feita observao e registo numrico dirios relativamente a todos os tratamentos experimentais. A mudana
de meio foi feita de 3 em 3 dias.
Actividades de divulgao
Com base na experincia adquirida ao longo do ano lectivo na cultura e procedimentos de teste com
Daphnia magna, o grupo de trabalho desenvolveu uma srie de actividades experimentais direccionadas
para o 6 ano do Ensino Bsico e no mbito do Dia Mundial da gua. Estas experincias foram
desenvolvidas a partir de actividades descritas na bibliografia (Marques et al. 2007) e pretenderam
demonstrar a influncia da poluio em animais aquticos como Daphnia magna. Foram realizados testes
de curta durao (48 h) para avaliar o efeito de um detergente e de um analgsico na sobrevivncia das
dfnias. Para o efeito colocaram-se 5 dfnias em diferentes gobels (400 mL de ASTM). Num dos gobels
foi adicionado detergente (5 gramas), noutro foi adicionado um analgsico (5 gramas) e um terceiro
funcionou como controlo (no lhe foi adicionada nenhuma substncia contaminante). Posteriormente foram
discutidos os resultados com os alunos de forma a sensibiliz-los sobre a influncia de diferentes poluentes
nos ecossistemas aquticos.

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RESULTADOS
Na fase de ensaios preliminares constatou-se que os indivduos que se encontravam a temperaturas
elevadas (32-36C) estavam mais agitados, movimentando-se rapidamente e de forma constante. Os que
estavam no frigorfico caracterizavam-se por apresentarem movimentos lentos, estando quase estticos. Os
indivduos sujeitos s condies consideradas pelo grupo de trabalho como extremamente adversas (15
dias sem adio de alimento num local repleto de resduos metablicos) reproduziram-se em larga escala
tendo sido contados cerca de 140 indivduos.
A actividade experimental definitiva decorreu entre 15 de Abril e 6 de Maio de 2010. Foram feitas
observaes e registos dirios. Nas figuras 3 a 7 situam-se os registos numricos das populaes de

N de indivduos

N de indivduos

Daphnia magna durante o estudo.

200
180
160
140
120
100
80
60
40
20
0
Dia
15

Dia
16

Dia
15

Dia
16

Dia
17

Dia
18

Dia
19

Dia
20

Dia
21

Dia
22

Dia
23

Dia
24

Dia
25

Dia
26

Dia
27

Dia
28

Dia
29

FIGURA 5: Variao populacional no Grupo Controlo.

Dia Dia 1 Dia 2 Dia 3 Dia 4 Dia 5 Dia 6


30

100
80
60
40
20
0
Dia
17

Dia
18

Dia
19

Dia
20

Dia
21

Dia
22

Dia
23

Dia
24

Dia
25

Dia
26

Dia
27

Dia
28

Dia
29

Dia Dia 1 Dia 2 Dia 3 Dia 4 Dia 5 Dia 6


30

N de indivduos

FIGURA 6: Variao populacional no Grupo A (elevada densidade populacional).

20
18
16
14
12
10
8
6
4
2
0
Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia Dia 1 Dia 2 Dia 3 Dia 4 Dia 5 Dia 6
15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

FIGURA 7: Variao populacional no Grupo B (baixa densidade populacional).

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N de indivduos

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20
15
10
5
0
Dia
15

Dia
16

Dia
17

Dia
18

Dia
19

Dia
20

Dia
21

Dia
22

Dia
23

Dia
24

Dia
25

Dia
26

Dia
27

Dia
28

Dia
29

Dia Dia 1 Dia 2 Dia 3 Dia 4 Dia 5 Dia 6


30

N de indivduos

FIGURA 8: Variao populacional no Grupo I (temperatura elevada).

20
15
10
5
0
Dia
15

Dia
16

Dia
17

Dia
18

Dia
19

Dia
20

Dia
21

Dia
22

Dia
23

Dia
24

Dia
25

Dia
26

Dia
27

Dia
28

Dia
29

Dia Dia 1 Dia 2 Dia 3 Dia 4 Dia 5 Dia 6


30

FIGURA 9: Variao populacional no Grupo II (temperatura baixa).

No grupo Controlo observou-se um crescimento em larga escala. No dia 20 de Abril (sexto dia de teste) a
maioria das dfnias tinham o marspio cheio de ovos, tendo a sua primeira ninhada no dia 23. A segunda
ninhada surgiu no dia 25. Apenas se registaram mortes (em pequeno nmero) nos ltimos dias da
experincia. A temperatura ambiente variou entre os 20-25C durante o perodo experimental. No grupo A
(elevada densidade populacional) verificou-se a existncia de dificuldades no desenvolvimento dos
neonatos, que cresceram lentamente. Registou-se o nascimento de 2 machos no dia 5 de Maio. No grupo B
o nmero de indivduos tendeu a descer ligeiramente. O alimento e os resduos acumularam-se no fundo do
recipiente. O desenvolvimento foi igualmente lento. No houve qualquer tipo de reproduo durante os 21
dias de teste.
No grupo I todas as dfnias morreram no dia 16 de Abril, no suportaram 24 horas a temperaturas de tal
modo elevadas. No grupo II registou-se um desenvolvimento particularmente lento, os organismos
movimentavam-se vagarosamente. A populao apresentava uma tonalidade bastante clara. No se
registaram mortes nem qualquer tipo de reproduo durante os 21 dias.

DISCUSSO
Ao longo deste ano lectivo, houve a oportunidade e o privilgio de contactar com Daphnia magna. Esta
habita em meios aquticos (gua doce), como charcos, lagos/lagoas e albufeiras (zonas de gua parada de
rios). Alimenta-se essencialmente de plncton (o fitoplncton alimento preferencial das espcies de
Daphnia) podendo ingerir microrganismos, tais como protistas e bactrias, mas tambm matria orgnica
particulada e dissolvida.

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No meio ambiente, a dfnia compete pelo alimento com outros seres pertencentes ao mesmo grupo de
animais em que esta se insere zooplncton (conjunto de organismos aquticos que no tm capacidade
fotossinttica, ou seja, heterotrficos, e que vivem dispersos na coluna de gua, apresentando pouca
capacidade de locomoo). Exemplos destes animais invertebrados so outros crustceos como os
coppodes, bem os rotferos ou larvas de insectos.
Na cultura laboratorial no se registou a presena de outros animais que competissem pelo alimento com a
pulga-da-gua, dado esse no ser o objectivo do estudo desenvolvido. Deve lembrar-se que se pretendeu
estudar os factores que podiam condicionar a partenognese nesta espcie; para a obteno de resultados
fiveis era fundamental o isolamento da espcie, para que no ocorresse interferncia de outros factores
que no fossem aqueles que foram induzidos e controlados pelo grupo.
O primeiro contacto com dfnias serviu para a realizao de alguns testes preliminares e para
compreendermos o seu comportamento e hbitos de vida, permitindo desenvolver uma cultura, a qual
serviria para a realizao da actividade experimental que permitiria tirar concluses relativas aos factores
que influenciam a partenognese nesta espcie.
Mais tarde, aquando da iniciao da actividade com a Daphnia magna deparmo-nos com o primeiro
grande obstculo a morte repentina de mais de setenta por cento dos organismos, incluindo os que
haviam j sido seleccionados para a actividade experimental e a maioria dos que permaneciam na reserva.
Em grupo, discutiram-se possveis explicaes para o sucedido, mas a nica justificao plausvel parecia
residir no alimento (as microalgas com que foram alimentadas nesses dias poderiam no estar nas perfeitas
condies). Sensivelmente at ao momento em que se verificou este problema, a cultura de dfnias tinha
sido alimentada exclusivamente com o fermento de padeiro (levedura liofilizada); s a partir daquela
circunstncia foram introduzidas as microalgas como rao alimentar, em substituio do fermento.
Possivelmente ter sido a conjugao destes dois factores a provocar tal mortalidade na cultura existente:
por um lado, a levedura no constitui por si s alimento de qualidade
(sendo que as dfnias poderiam estar a sofrer de deficincia
nutricional j h algum tempo; por outro lado, as algas poderiam no
se encontrar nas melhores condies quando foram adicionadas
cultura dado que tinham sido congeladas para conservao a longo
prazo no Departamento de Biologia da Universidade de Aveiro (o
que, s por si, pode deteriorar a qualidade da suspenso) e tinham
sido transportadas desde a cidade de Aveiro at Amarante (Colgio
de So Gonalo) sem apoio de refrigerao.
Mesmo depois deste contratempo, as preocupaes no cessaram
devido ao aparecimento de uma nova espcie nas nossas culturas
(um coppode da Ordem Cyclopoida) (Figura 10). Para compreender
o aparecimento desta espcie no se encontrou uma explicao
concreta, apenas a possibilidade de a gua do rio possuir ovos ou
FIGURA 10: Fotografia original de
coppode (Ordem Cyclopoida)

Incio et al. 2010 CAPTAR 2(2): 55-66

formas larvares destes organismos (os nuplios) que s germinaram


mais tarde, j nas culturas.

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Apesar de todos estes inconvenientes, obtiveram-se resultados fiveis numa segunda tentativa. Verificou-se
que Daphnia magna se reproduz partenogenicamente, quando sujeita a condies favorveis, no entanto,
quando influenciada por condies ambientais adversas (como a elevada densidade populacional),
modifica a sua estratgia reprodutiva para reproduo sexuada.
Analisando os resultados obtidos, pode concluir-se que, no grupo controlo, o crescimento foi rpido e a
reproduo em larga escala, o que se deveu claramente a condies ambientais favorveis (temperatura de
20-25 C) que so propcias a um metabolismo eficaz. O aumento da populao durante este perodo no
foi proporcional ao volume de gua onde se encontrava, sendo que isto provocou o acrscimo de produtos
de excreo acumulados, bem como a uma diminuio da taxa alimentar fornecida a de cada indivduo
(mais indivduos alimentados com a mesma quantidade de algas leva a que haja uma diminuio da
quantidade de alimento disponvel para cada indivduo). Esta conjugao de factores ser a explicao para
as mortes observadas no grupo controlo.
No grupo A (elevada densidade populacional) o desenvolvimento foi demorado tendo ocorrido a morte de
parte dos indivduos. As ninhadas foram produzidas espaadamente (4 a 5 dias) e apenas com 1 ou 2 ovos.
As ms condies provocadas pela acumulao de resduos metablicos (fundamentalmente produtos de
excreo) desta populao abundante tero prejudicado o seu crescimento uma vez que tal acumulao
implicar naturalmente degradao da qualidade do meio. Confirmou-se na experincia que a densidade
populacional elevada um factor prejudicial para a espcie, que inclusivamente estimula o incio de uma
fase sexuada. Os machos obtidos no dia 5 demonstram esse facto; caso sobrevivessem iriam fecundar as
fmeas originando a formao de ovos de resistncia (ephippium). Durante o perodo experimental
verificou-se que, de uma forma geral, os organismos desta populao se reproduziam, mas apresentavam
apenas um a dois ovos no marspio. De facto, uma populao de Daphnia com elevada densidade requer
uma maior quantidade de recursos alimentares disponveis. Uma vez que a rao no foi alterada neste
grupo experimental, a baixa disponibilidade de recursos ter prejudicado a reproduo, o que se ter
expressado na diminuio de ovos produzidos. Em condies favorveis, os dafndeos seguem uma
estratgia reprodutiva que maximize o nmero de descendentes produzidos; quando as condies
alimentares se deterioram (quer porque diminui a qualidade quer a quantidade relativa de alimento, como foi
o caso do grupo A) estes organismos ajustam esta estratgia, investindo na produo de menos ovos com
mais reservas (que resultam em menos neonatos, mas os quais tm maior capacidade para sobreviver num
cenrio de escassez de recursos alimentares) (Pereira 2008). Os machos observados podem indicar um
eventual papel da densidade populacional na produo de uma enzima, methyl famesoate (MF) pelo orgo
mandibular, que interfere na determinao sexual dos crustceos (Borst et al. 2001; Olmstead e Gerald
2007). Estudos anteriores indicam que a concentrao desta enzima poder ser regulada por factores
ambientais, bem como que o aumento de temperatura da gua induz uma maior concentrao de MF com
consequente aumento da produo de machos e da incidncia de anomalias sexuais em populaes de
Daphnia magna (Olmstead e Gerald 2007). Deve reconhecer-se que esta explicao , nesta altura, um
pouco especulativa, uma vez que no foi ajustada a quantidade de alimento fornecida ao grupo A; mesmo
que tenham ocorrido variaes na produo da enzima MF, a baixa disponibilidade de alimento ser sempre
um factor condicionante muito importante nesta experincia (menos energia disponvel implica menor
produo de descendncia, seja ela constituda por ninhadas de fmeas, de machos ou mistas). S com

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ajustes na metodologia ser possvel perceber se um aumento de densidade populacional em condies


alimentares favorveis capaz, por si s, de induzir a produo de machos.
No grupo B os resultados no estiveram de acordo com o que se esperava. Supunha-se que se mantivesse
uma taxa elevada de reproduo partenognica e um crescimento significativo da populao. No houve
qualquer tipo de reproduo e o crescimento foi bastante lento. A justificao encontrada o facto de o
escasso nmero de indivduos no ter sido capaz de filtrar todo o alimento, o que resultou numa acentuada
sedimentao de detritos alimentares, o que foi facilmente constatado pela cor esverdeada no fundo do
gobel. Em suma, apesar de em teoria a disponibilidade alimentar neste grupo ser superior do grupo A, na
prtica, as condies em ambos os grupos acabam por ser semelhantes, uma vez que os dafndeos no
so capazes de utilizar o alimento sedimentado mas apenas de filtrar o alimento que se encontra suspenso
na coluna de gua.
No grupo I, devido s altas temperaturas, no se deu qualquer tipo de desenvolvimento. A elevao da
temperatura face s condies ambientais ideais causou danos irreversveis em Daphnia magna. Uma
explicao possvel para o sucedido a desnaturao das enzimas dos indivduos colocando em risco o
metabolismo celular e a prpria estabilidade da membrana celular. Assim, deu-se uma morte prematura da
populao, o que no permitiu um crescimento dos seres at idade reprodutiva para que se pudesse
concluir acerca dos efeitos destas temperaturas na reproduo de Daphnia magna. No grupo II verificou-se
que o nmero de organismos se manteve constante e o desenvolvimento foi quase nulo. Mantiveram-se de
pequenas dimenses (1 a 2mm) durante o perodo experimental. Observou-se ainda que os seres sujeitos a
temperaturas elevadas estavam em constante agitao, movendo-se muito rapidamente, enquanto os
sujeitos a temperaturas baixas se encontravam praticamente estticos, apresentando movimentos muito
lentos. Daphnia um organismo poiquilotrmico, que no capaz de manter uma temperatura corporal
diferente da do meio onde est inserido, ou seja, a sua temperatura corporal definida pela temperatura do
meio. Tendo em conta que a actividade enzimtica, e consequentemente a actividade metablica e celular,
dependente da temperatura (geralmente as enzimas tm a sua actividade reduzida a baixas temperaturas
e aumentada a temperaturas mais altas), nestes organismos a temperatura do meio influencia
decisivamente todos os processos fisiolgicos. Como Daphnia no possui mecanismos de regulao da
temperatura corporal (ao contrrio por exemplo dos mamferos, como o Homem, que, independentemente
da temperatura ambiental consegue regular a sua temperatura corporal mantendo-a nos 36-37C), a
actividade metablica varia de acordo com a temperatura do meio. Assim, a actividade enzimtica das
dfnias que se encontravam a 4C seria extremamente reduzida, o que explica a reduo da frequncia de
movimentos efectuados na coluna de gua, a reduo no crescimento corporal e a inexistncia de
reproduo. O contrrio ocorre quando Daphnia sujeita a temperaturas elevadas. O movimento acelerado
resulta da acelerao da actividade enzimtica e consequente aumento da actividade metablica no geral
Quando o organismo poiquilotrmico no suporta estas condies de temperatura muito elevada,
geralmente porque se ultrapassam as temperaturas a partir das quais ocorre desnaturao enzimtica,
morre, o que ter sucedido com as dfnias do grupo I.
Atravs da realizao da actividade com Daphnia magna e do seu manuseamento durante este ano lectivo,
pode-se concluir que se trata de uma espcie muito influenciada pelas condies ambientais, sendo
tambm uma espcie muito sensvel poluio da gua. Esta percepo foi dada atravs de uma

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actividade realizada com os alunos do sexto ano do Ensino Bsico, onde se verificou que estas no
resistiam a guas contaminadas com detergentes ou analgsicos (exemplos de produtos que contm
qumicos que so despejados nos rios, atravs, por exemplo, dos esgotos). Foram realizados inquritos que
demonstraram o agrado dos alunos relativamente iniciativa, assim como, a compreenso da mesma,
comprovada pela participao activa e respostas correctas s questes colocadas durante o evento.

APLICAES E PERSPECTIVAS FUTURAS


Com os dados recolhidos foi possvel concluir que o ciclo de vida de Daphnia magna influenciado por
vrios factores ambientais, como por exemplo: temperatura, densidade populacional e alimentao.
Daphnia magna um animal que habita ambientes aquticos (como albufeiras e lagos); nesses ambientes
ocorrem alteraes ao longo do ano que vo estimular este ser a alterar a sua estratgia reprodutiva tendo
sempre como objectivo ltimo a manuteno da populao. possvel depreender as potencialidades do
estudo da interaco de Daphnia magna com o meio, tais como, a compreenso do efeito concreto das
modificaes a maior escala no ecossistema tendo por base as respostas particulares desta espcie a
diferentes condies ambientais. A existncia de dafndeos fundamental para o ecossistema aqutico uma
vez que mantm um papel importante na rede trfica, logo, o conhecimento sobre as suas respostas a
diferentes estmulos ambientais naturais ou de origem humana poder ajudar a prever desequilbrios na
dinmica do ecossistema.
Ainda existem dvidas e incertezas quanto ao condicionamento ambiental sofrido pelo ser estudado; certos
acontecimentos demonstram que factores primeira vista desconhecidos influenciaram, tanto de forma
negativa (levando morte) como positiva (havendo sobrevivncia em condies altamente desfavorveis).
Aps o projecto experimental efectuado surge a necessidade de despertar novas problemticas e colocar
novas questes, nomeadamente:
Porque razo as dfnias sobreviveram 15 dias num local sem adio de alimento?
Formularam-se algumas hipteses para as questes previamente apresentadas, designadamente:
As dfnias so seres filtradores, ou seja, capazes de se alimentar de partculas dissolvidas na gua; como
a gua na qual se encontravam provinha de um rio e no se sabia ao certo a sua composio, esta poderia
conter elevadas quantidades de alimento no visveis a olho nu que podem ter sido suficientes para a
populao subsistir.

agradecimentos Agradecemos Professora Ivone Pinto que nos acompanhou desde o inicio do projecto e ajudou no
desenvolvimento do mesmo e Doutora Joana Pereira que teve um papel fundamental na sua realizao.

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