Uma boa preparao histolgica depende da fixao completa e correta do

tecido que se pretede estudar, de modo que deve ser realizada com ateno a alguns
critrios. Deve-se estar atento ao intervalo mnimo entre a coleta a e sua fixao, para
que no haja comprometimento da qualidade da amostra, e o volume do fixador tem de
ser no mnimo 10 vezes maior que o volume da amostra. Desta forma, sempre que
possvel, a fixao deve ocorrer na prpria sala de cirurgia, sala de autpsia, ou onde
quer que o material seja colhido, respeitando-se as propores de volume. (SILVEIRA)
Os fixadores qumicos tm por funo bsica manter a integridade dos tecidos
aps a morte, momento em que h interrupo da corrente sangunea, evitando
qualquer alterao da estrutura celular. Portanto, para atingir essa finalidade deve parar
ou inibir a autlise, impedir a proliferao bacteriana, preservar e endurecer os tecidos,
com o intuito de favorecer as etapas seguintes da tcnica histolgica, coagular e tornar
difusveis substncias insolveis, alm de facilitar o processo de
colorao
(SILVEIRA).
O processo corre da periferia para o centro, ou seja, as regies mais superficiais
so fixadas mais cedo que as centrais. O tempo de fixao ir depender do fixador e da
temperatura a que submetido, podendo variar de 4 a 72 h. Logo, a escolha do tipo de
fixador exercer influencia na tcnica a ser aplicada. A seleo, portanto, deve se basear
em alguns aspectos, como a velocidade de penetrao nos tecidos, a finalidade do
exame, o custo-benefcio, e o no prejuizo sade (SILVEIRA).
Dentro da gama de agentes fixadores disponveis h o cido pcrico,
normalmente empregado associado ao formol e cido actico. Muito embora tenha uma
rpida ao fixadora, apresenta pequena penetrao quando isolado e leve efeito
descalcificante, podendo inclusive ser utilizado como agente descalcificante de ossos de
crescimento primrio, alm de provocar edema das fibras colgenas. Apresenta uma
peculiar ao sobre as protenas: um fixador coagulante, formando picratos de
protena, o que provoca sua precipitao (SILVEIRA).
Trata-se de um dos produtos qumicos mais perigosos, havendo um alto risco de
exploso, caso se encontre num local seco. Deve-se manter umedecido a qualquer custo,
de preferncia com um teor de gua acima de 10%. tambm, inflamvel, incompatvel
com oxidantes fortes, bases, com a maioria dos metais comuns, amnia e agentes
redutores fortes, sendo sensvel a choques, atrito e calor. Deve-se manejar com um
cuidado extra, pois tambm se verificam danos ao ser humano, podendo causar
irritaes na pele, olhos e vias respiratrias, erupes, nuseas, vomito, diarreia, e a sua
inalao pode causar danos aos pulmes, uma exposio crnica pode causar danos
hepticos ou renais, podendo levar morte (OLIVEIRA).

Na fixao por soluo de Bouin, utiliza-se um preparado base de soluo

saturada de cido pcrico, formalina 30-40% e e cido actico glacial. Por tratar-se de
uma mistura, suas propriedades derivam das caractersticas de seus componentes. O
cido pcrico quando decomposto precipita e aglutina as protenas formando picratos de
protenas. Por outro lado, o cido actico precipita protenas nucleares, mas no as

citoplasmticas e o formaldedo altera a estrutura das protenas.( ABRAHO et al,

2004)
O processo de fixao com essa soluo leva em torno de 4 a 12h (OLIVEIRA),
podendo chegar a 24 e 48 horas, a depender do volume da pea (ARENAS,2010). um
fixador muito penetrante, que permite boa colorao (CARAMASCHI, 1987). Aps a
fixao, os tecidos devem ser lavados em alcool a 70% durante seis horas, no mnimo,
at que o alcool no apresente mais colorao amarelada (MAIA,1979), uma vez que
cido pcrico residual pode interferir na etapa de colorao. considerado um
excelente fixador para estudos histolgicos gerais ( CARVALHO; RECCOPIMENTEL, 2013), sendo indicado na fxao de cromossomos, rim e fgado
(SILVEIRA). tambm muito utilizado para o processamento de amostras de medula
ssea (SCORSATO; TELLES, 2011), alm de trato gastrointestinal e glndulas
endcrinas e at mesmo de testculos (FEIJ; BRAGA;PITREZ, 2010), uma vez que
soluo de Bouin permite boa fixao desse tecido para avaliao histolgica da
espermatognese (REIS,2012). Vale destacar tambm que o Bouin usado para estudo
do glicognio (SILVEIRA)

Solues:
A) Soluo aquosa, saturada, de cido pcrico:
cido pcrico.....................................................1,2 g
gua destilada.................................................100 mL

B) Soluo fixadora de Bouin:

Soluo aquosa, saturada, de cido pcrico ...750 mL
Formalina (37-40%)..........................................250 mL
cido actico, glacial...........................................50 mL

(Caputo; Gitirana; Manso, 2010)

REFERNCIA

Abraho, D. S. et al. Estudo comparativo com diversos fixadores para aplicao em

microscopia eletrnica de transmisso. Rev. Inst. Adolfo Lutz, 63(2):248-54, 2004

ARENAS, Csar Eduardo Montalvo. Tcnica histolgica. 2010. Disponvel em :<

http://histologiaunam.mx/descargas/ensenanza/portal_recursos_linea/apuntes/3_tecnica
_histologica.pdf> Acesso em: 20 fev 2016

CAPUTO, L. F. G.; GITIRANA, L.B.; MANSO, P. P. A. Tcnicas histolgicas. In:

MOLINARO, E.; CAPUTO, L. F. G.; AMENDOIEIRA, R. Conceitos e Mtodos para
a Formao de Profissionais em Laboratrios de Sade. 2. ed. Rio de Janeiro:
Fiocuz, 2010. v. 2, Cap. 3, p. 90-188.

CARAMASCHI, Ulisses. Manual de tcnicas para a preparao de colees

zoolgicas. Sociedade Brasileira de Zoologia. 1987.12p.

CARVALHO, Hernandes F.; RECCO-PIMENTEL, Shirlei M. A clula. 2. ed. Barueri,

SP: Manole, 2013. 590 p.

Feij A.G.S., Braga L.M.G.M. & Pitrez P.M.C. 2010. Animais na Pesquisa e no
Ensino: aspectos ticos e tcnicos. EDIPUCRS, Porto Alegre. 421p.

MAIA, Vitorino. Tcnica histolgica- 2. Ed. So Paulo: Atheneu, 1979.246 p.

OLIVEIRA , Jos Pedro Moreiro Cerca Monteiro de. cido Pcrico Mtodos e
Tcnicas em Citologia e Fisiologia. Disponivel em.:< http://docslide.com.br/
documents/acido-picrico-trabalho-final.html> Acesso em.: 19 fev 2016

REIS,A. Estudo comparativo entre diferentes processamentos histolgicos na

interpretao de biopsias testiculares. 2012. 93 p. Tese (Doutorado em Medicina) Faculdade de Medicina, Universidade Federal de Minas Gerais, Minas Gerais. 2012
Scorsato, A.P., Telles, J.E.Q. Fatores que interferem na qualidade do DNA extrado
de amostras biolgicas armazenadas em blocos de parafina. J. Bras. Patol. Med.
Lab. 2011

SILVEIRA, Sergio Oliveira.Orientao para prticas de laboratrio. Disponvel

em:< http://w3.ufsm.br/labhisto/trabalhos/t%DAcnica%20de%20histologia.pdf> Acesso
em: 17 fev 2016

UNIVERSIDADE TIRADENTES
BIOMEDICINA

AFONSO CELSO SILVA DREA

FABRCIA SANTOS DE SOUZA
HEVELIN SANTOS PIRES
KRISLAINY SILVA SANTOS
LAVNIA DE ARAGO PRADO LIMA

FIXADOR DE BOUIN

Aracaju

2016
AFONSO CELSO SILVA DREA
FABRCIA SANTOS DE SOUZA
HEVELIN SANTOS PIRES
KRISLAINY SILVA SANTOS
LAVNIA DE ARAGO PRADO LIMA

FIXADOR DE BOUIN

Trabalho apresentado como requisito

parcial de avaliao da disciplina de
Anatomia Patolgica, ministrada pelo
Prof. Dcio Fragata, no 1 Semestre de
2016

Aracaju
Fevereiro 2016