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INSTITUTO
POLITCNICO
NACIONAL
Escuela Nacional de Ciencias
Biolgicas
German Gaspar Jennifer L.,
Miguel ngel
3FV1
Seccin: 2

Pascualli Lpez

CINTICA ENZIMTICA I
CURVA TIPO DE AZCARES REDUCTORES
INTRODUCCIN
Las enzimas son protenas especializadas en
la catlisis de las reacciones biolgicas. Se
encuentran entre las mas notables de las
biomolculas
conocidas
debido
a
su
extraordinaria especificidad y a su poder
cataltico que es mucho mayor que la de los
catalizadores hechos por el hombre.
La actividad de las enzimas puede verde
modificada por diferentes factores, tales
como el pH, concentracin de la enzima y del
sustrato, etc.
Al estudio de la velocidad de las reacciones
catalizadas por enzimas y las condiciones
que las modifican, as como los mecanimos
de reaccin se le conoce como cintica
enzimtica.
Las reacciones qumicas pueden clasificarse
tambin sobre una base cintica por el orden
de reaccin; segn como resulte influida la
velocidad de la reaccin por la concentracin
de los reaccionantes bajo un conjunto de
condiciones determinado se tienen:
- Reacciones de orden cero.
- Reacciones de primer orden.
- Reacciones de segundo orden.
- Reacciones de tercer orden.
OBJETIVOS
Analizar algunos factores que modifican la
velocidad de la reaccin catalizada por la
invertasa y caracterizar de esta manera a
dicha enzima.

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0.01 M Az . Reductor 1000 mL

[ X ] 0.1 mL Tubo 1

moles de Az .
mol de Az .
6
X =1 x 10 . 1 .
2.0 mL
2.0 mL
Nota: El valor de X cambiara dependiendo de
los mL. de Azucar Reductor que se aadieron
a los tubos, todos los valores se encuentran
registrados en la tabla de resultados.
REACCIN QUMICA
C6H12O6

(D-glucosa)

92.8 C /5 min

nitro,5-amino
salicilato

3,5-DNS

C6H11O7 (D-gluconato) + 3salicilato

3-amino,5-nitro

92.8 C /5 min

RESULTADOS
TABLA NO 1
Curva tipo azucares reductores
Blanco

Problemas

0.1

0.2

0.4

0.5

1.2

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

Regulador de acetatos
0.05M, pH 4.7 (mL)

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

0.5

Agua (mL)

1.9

1.8

1.6

1.2

0.8

3,5 DNS (mL)

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

1.0

Desarrollo de color

5 minutos a 92C 8en bao mara)

Dilucin

Colocar en bao con hielo y diluir con 4mL de

agua destilada

Tubo No.
Glucosa 0.0005 M
Fructosa 0.005M (mL)

Sacarosa
(mL)

CLCULOS

Glucosa 0.005 M + Fructosa 0.005 M =0.01 M [ Az . Reductor ]

0.35M

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Leer en espectrofotmetro a 540 nm.

Absorbencia

.110

.
138

.
416

.
808

.887

Azcar reductor
(moles)/3.5mL

10

Con la (Tabla No.1) se obtiene la (Grfica No. 1)

que es la curva de calibracin obtenida de acuerdo
con los datos tomados durante la prctica.

Curva de Calibracin
1

Absorbancia 0.5
0

0.02 0.04 0.06 0.08

0.1

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tubo testigo, el cual contiene agua
destilada), transformndolas en micromoles
de
azcar
reductor
(Los azcares
reductores son aquellos azcares que poseen
su grupo carbonilo/ grupo funcional, intacto,
y que a travs del mismo pueden reaccionar
como reductores con otras molculas);
tambin sirve para medir las velocidades de
la enzima a tratar y observar la aparicin de
azucares reductores en funcin del tiempo (5
min.), los productos formados son la glucosa
y fructosa, identificando su aparicin con la
ayuda del 3,5DNS, el cual nos sirve para
cuantificar azcares reductores, que son los
azcares que se liberan en la reaccin
enzimtica, este genera una coloracin
amarilla, la cual es ms intensa dependiendo
de la concentracin de azcar reductor, esto
se pudo ver en nuestros resultados al
calcular las concentraciones de azcar
reductor, ya que esta fue directamente
proporcional a la absorbencia obtenida.

Concentracin de azucar [M]

CONCLUSION

Curva de Calibracin

1
0.8
0.6

Absorbancia 0.4
0.2
0

10

12

Concentracin de azucar [M]

Las curva tipo son curvas con

concentraciones
conocidas
para
determinar el valor de absorbancia
Un azcar reductor contiene un grupo
carbonilo libre y el cual reduce a otro
compuesto
La fructosa en medio alcalino se
convierte en glucosa por equilibrio
cetoenolico
El
3,5-DNS
sirve
para
reducir
compuestos

BIBLIOGRAFA

DISCUSIN
La curva tipo nos sirve para conocer la
actividad enzimtica en este caso de la
invertasa, mediante la toma de lecturas de
absorbencias en el espectrofotmetro (se
calibro antes de tomar las lecturas con un

Lidia
Cardella
Rosales.
(2007).
Bioqumica Humana. La Habana:
Ciencias Mdicas. Pp. 40
http://recursostic.educacion.es/ciencia
s/biosfera/web/profesor/practicas/Activ
idad_enzimatica.pdf