UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA

CARRERA BIOQUMICA Y FARMACIA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

DOCTOR: DRA. CARMELA TAPIA RIOS

TEMA: ESTERILIZACION
INTEGRANTES:
VILLALBA LEON JAVIER
SOSA JAVIER
NUEZ BASILE CECILIA M.
VIDAURRE BRAVO MOSELY
GRUPO B
GESTIN: 2016

ESTERILIZACION
OBJETIVO
Demostrar la diferencia de penetrabilidad del calor seco y del calor
hmedo, usando como indicador la viabilidad de una bacteria.
Demostrar los diferentes tipos de esterilizacin
Demostrar los mtodos para reconocer una esterilizacin exitosa
INTRODUCCIN
Existen diversos mtodos fsicos de esterilizacin y de inhibicin
del crecimiento microbiano, como pueden ser el calor, la filtracin y la
radiacin, pero el ms ampliamente usado es el calor, ya sea hmedo
seco, los cuales tienen diferente penetrabilidad.
Conforme aumenta la temperatura por encima de la temperatura
mxima de crecimiento, se producen efectos letales en los
microorganismos.
La muerte de las bacterias por el calor es consecuencia de la
desnaturalizacin de sus protenas.
Los enlaces intracelulares e intermoleculares (puentes de
Hidrgeno), de las protenas de los cuales depende su funcionalidad son
ms lbiles cuando las protenas estn hidratadas que cuando no lo
estn, de tal manera que el calor hmedo es ms efectivo en la
desnaturalizacin de enzimas y otros componentes proteicos
importantes para la clula que el calor seco. Es por eso que se dice
que el calor hmedo tiene mayor penetrabilidad que el calor seco.
El calor, de cualquier forma, es utilizado extensamente como un
agente letal bacteriano y se puede aplicar a numerosos instrumentos,
materiales y substancias, con el propsito de matar a las bacterias que
ellos contengan. Este proceso se flama Esterilizacin y al material,
cultivo medio de cultivo sometido a ste, se le denomina entonces
Estril, es decir, desprovisto de toda forma viviente.
En ambos casos hay numerosos factores que condicionan la
efectividad del proceso: Cantidad de agua, temperatura, presin, tiempo

de contacto, superficie de esterilizacin, pH, edad de las bacterias, la

presencia o no de esporas, composicin del medio de suspensin, etc.
Las clulas vegetativas y las endosporas bacterianas de un mismo
organismo varan considerablemente en cuanto a su resistencia al calor.
La muerte de los microorganismos es ms rpida a pH cido.
METODO FISICO
Esterilizacin por calor hmedo y seco
CALOR SECO:
El calor seco produce desecacin de la clula, esto es txico por
niveles elevados de electrolitos y fusin de membranas, residuos que
quedan adheridos al objeto estril. Estos efectos se deben a la
transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que
estn en contacto con stos.
La accin destructiva del calor sobre protenas y lpidos
componentes o nutrientes de los microorganismos, requiere mayor
temperatura cuando el material est seco o la actividad de agua del
medio es baja.
VENTAJAS DEL CALOR SECO:

No es corrosivo para metales e instrumentos.

Permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas, y de

sustancias viscosas no voltiles.

DESVENTAJAS:
*Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo,
debido a la baja penetracin del calor.
CALOR HMEDO:
El calor hmedo produce desnaturalizacin y coagulacin de
protenas.
Estos efectos se deben principalmente a dos razones:

El agua es una especie qumica muy reactiva y muchas

estructuras biolgicas son producidas por reacciones que eliminan agua.

El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor

mucho ms elevado que el aire.

Pasteur en 1876, Koch y Wolffhugel en 1881 dan los fundamentos de la
esterilizacin por calor seco y calor hmedo: 30 minutos a 110 - 120 C
de exposicin al vapor eran equivalentes a una hora de calor seco a
130 - 150 C.
AUTOCLAVE
Se realiza la esterilizacin por el vapor de agua a presin. El
modelo ms usado es el de Chamberland. Esteriliza a 120 a una
atmsfera de presin (estas condiciones pueden variar) y se deja el
material durante 20 a 30 minutos. Este proceso de esterilizacin es el
que mejor resultados d en microbiologa. El vapor de agua a fuerte
presin acta a mayores temperaturas.

TCNICA
1.

Rotular uno de los tubos conteniendo un aplicador

contaminado con la palabra Horno y el otro con la palabra Autoclave,

anotando adems el nombre del alumno o nmero de equipo, para su
identificacin.
2. Esterilizar los cultivos por el mtodo correspondiente, segn el
rtulo, en ambos casos a una temperatura de 121 C y un tiempo de 15
minutos.
3. Despus de este perodo, sacar los tubos y aadirles, en
condiciones aspticas, caldo nutritivo estril.
4. Incubar a 37 C, por 24-48 horas.

5.

Despus de este perodo observar si hubo o no desarrollo en

los tubos, el cual se manifiesta mediante turbidez del medio.

6. Anotar los resultados y sacar conclusiones en cuanto al poder
de penetrabilidad del calor seco y del calor hmedo.
OBSERVACIONES
El material debe de estar en optimas
condiciones y asi obtener buenos resultados

Preparacion del caldo nutritivo para comenzar

la practica

Una vez preparado el caldo se procede a

etiquetarlos para un
facil manejo

Despues de

equiquetados los

tubos de ensayo se

procede a llevarlo a la

estufa de secado al

vacio

RESULTADOS
Tubo de control
En este tubo, se muestra el contaminante agregado, y podemos
observar el crecimiento microbiano

Tubo esterilizacion en auto clave

en este tubo esterilizado no presenta contaminacion como se muestra
en el tuvo de control

Tubo esterilizado en la estufa

en este tubo podemos observar que tampoco hubo contaminacion
pero lo q si se puede observar es que hubo una disminucion en el
volumen del caldo
METODO QUIMICO
XIDO DE ETILENO
El xido de etileno se encuadra dentro de los agentes
esterilizantes de origen
qumico, su elevada toxicidad celular, lo convierten en un agente eficaz,
sin embargo
como cualquier otro agente txico para los microorganismos tambin lo
es sobre las
personas. En la actualidad el O.E. esta considerado como sustancia
sospechosa de
ser cancergena. Su accin se produce como consecuencia de su poder
alquilante
sobre los cidos nucleicos de las clulas.
Ventajas del O.E.
Permite la esterilizacin de materiales termo sensibles, que no
soportan las altas
temperaturas del vapor.
Inconvenientes
Es txico, es caro, ciclos largos, que posteriormente necesitan de
aireacin, es

contaminante con el medio ambiente.

Incompatibilidades
El material estar perfectamente limpio y seco, ya que el contacto
del xido de
etileno con el agua, puede producir un compuesto denominado
politenglicol, que al
contacto con los tejidos puede resultar altamente txico. En los
instrumentos tubulares se extraer el agua mediante una pistola de aire
comprimido.
No debe esterilizarse con oxido de etileno material de P.V.C.
previamente
esterilizado con rayos gammas, dado que pueden formarse derivados
txicos difciles
de eliminar. Tambin hay que tener presente la naturaleza del material a
esterilizar ya
que puede ser incompatible con algunos plsticos.
ESTERILIZACIN POR GAS-PLASMA DE PERXIDO DE HIDRGENO
Proceso de esterilizacin a baja temperatura que consiste en la
difusin de
perxido de hidrgeno en fase plasma (estado entre lquido y gas), que
ejerce la
accin biocida. El perxido de hidrgeno no deja ningn residuo txico.
Se convierte
en agua y oxgeno al final del proceso. El material no precisa aireacin.
El ciclo de
esterilizacin dura entre 54 y 75 minutos.
Limitaciones
No se pueden esterilizar objetos que contengan celulosa, algodn,
lquidos,

humedad, madera o instrumental con lmenes largos y estrechos. Es el

mtodo de
esterilizacin ms caro de entre los descritos.
ESTERILIZACIN POR FORMALDEHDO
Es un sistema que utiliza formaldehdo al 2% con vapor a baja
temperatura en
vaco. Es ms txico que el xido de Etileno y no est claramente
demostrada su
eficacia, por lo que es el sistema de esterilizacin menos usado.
MTODOS COMPROBATORIOS DE LA ESTERILIZACIN
Existen diferentes mtodos para la comprobacin de la
esterilizacin; siendo estos una garanta para que los equipos funcionan
correctamente y cumplan con su cometido: esterilizar. En otras palabras
tienen el objetivo o permiten realizar el control de la calidad del proceso
de esterilizacin. Para realizar este control existen indicadores o
controles fsicos, qumicos y biolgicos.
1. Indicadores o controles fsicos. El control de la esterilizacin
mediante indicadores fsicos se lleva a cabo mediante su colocacin en
el interior del paquete a fin de comprobar la temperatura, el tiempo de
esterilizacin y la presin en un equipo determinado y para lo cual estos
indicadores son calibrados a fin de detectar cualquier fallo, mediante la
incorporacin de termmetros, manmetros, sensores de carga, etc., los
cuales son de gran utilidad pero no constituyen un medio eficaz para
comprobar la esterilizacin y para lo cual se hace necesario usar como
complemento controles biolgicos y dems mtodos de control.
2. Indicadores o controles qumicos. Son productos comerciales
consistentes en sustancias qumicas que cambian de color (indicadores
colorimtricos) si se cumple un elemento clave del proceso de
esterilizacin, como por ejemplo la temperatura necesaria.
* Algunos indicadores requieren ms de un parmetro, como cierto
tiempo de exposicin y humedad, para cambiar de color. Pueden ser

fabricados con papel especial, cintas autoadhesivas, o pueden ser tubos

de vidrio con lquidos especiales. Un ejemplo muy utilizado en nuestro
medio son las cintas autoadhesivas (cinta testigo) que sirve o se usa
para atestiguar que un paquete o envase ha pasado por un ciclo o
proceso de esterilizacin y que la esterilizacin se realiz con la calidad
requerida.
* Por lo que tienen como nico fin, distinguir si la calidad de la
esterilizacin es ptima y adems permite identificar los paquetes
procesados, de los que an no han sido procesados.
* Desventaja de los indicadores qumicos: pueden reaccionar
cambiando de color aun cuando no se han dado los parmetros
necesarios para obtener la esterilizacin. Siendo los indicadores
qumicos diferentes de acuerdo con el proceso de esterilizacin utilizado
(calor seco, hmedo o gas).
3. Indicadores o controles microbiolgicos o biolgicos: Es el
mejor mtodo para determinar la eficiencia de un proceso de
esterilizacin. Estn diseados para confirmar la presencia o ausencia de
microorganismos viables despus de la esterilizacin.
* Son dispositivos inoculados con esporas de microorganismos
especialmente resistentes a los distintos agentes de esterilizacin, son
de presentacin variada ya que pueden presentarse en forma de tubos,
tiras o mpulas como medios de cultivos incorporados. Una vez que han
sido utilizados, se incuban a temperatura de 55 C en los laboratorios de
Microbiologa.
* Siendo su periodicidad de uso semanal, por lo que en cada bulto para
esterilizacin deber colocarse un indicador, para poder validar el
proceso. Segn el resultado de este indicador se considerar si la
esterilizacin es exitosa o no. En caso de que no lo sea, toda la carga
deber ser esterilizada nuevamente.

Bibliografia
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Colectivo de Autores. Manual de Bioseguridad Estomatolgica. Editorial Ciencias
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