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UNIVERSIDAD GALILEO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


LICENCIATURA EN QUMICA BIOLGICA
CURSO DE BIOQUMICA
PRACTICA NO. 3
RELACIN ENTRE ESTRUCTURA Y FUNCIN EN UNA PROTENA
Introduccin
La relacin entre la estructura de una protena y la funcin que ejerce es directa.
Cualquier alteracin que una protena tenga en su estructura se traduce en
una alteracin en su funcin. Algunas alteraciones son bastante evidentes, y otras
ms sutiles, pero siempre se da. En la presente prctica se pretende ilustrar el
efecto de la prdida de estructura (mediante desnaturalizacin) en la actividad de
dos enzimas bien conocidas.
Objetivos
Que el estudiante:
1. Conozca la relacin directa que existe entre la estructura y la funcin de una
protena.
2. Observe el grado de cambio en la funcin de una protena que se induce por
diferentes medios de desnaturalizacin.
Alcance
Que el estudiante:
1. Conozca la accin de dos enzimas comunes: la catalasa y la amilasa.
2. Explique la importancia de la accin de la catalasa como defensa, y de la
amilasa para la alimentacin humana.
3. Observe y evale la accin enzimtica
Antecedentes
Las protenas son molculas altamente complejas y difciles de visualizar incluso
en sus versiones ms simples. Se ha utilizado esquemas que resalten ciertas
caractersticas para poder comprender mejor la funcin de cada protena. Una de las
funciones ms importantes de las protenas en el organismo es el de catalizar
reacciones que mantienen el delicado equilibrio de la vida. Como es el caso de todas
las protenas, un cambio en su estructura a cualquier nivel puede significar
una alteracin significativa en la funcin que lleva a cabo dentro del organismo.
En el caso especfico de las enzimas, un cambio en cualquier nivel de la estructura
significa la incapacidad de catalizar una reaccin, haciendo que la misma no se lleve
a cabo a la velocidad requerida.
Las enzimas son polmeros biolgicos que catalizan mltiples procesos,
haciendo posible la vida que conocemos. Tienen una importante participacin en la
salud y la enfermedad, ya que determinan la velocidad a la que se lleva a cabo las
reacciones en el organismo y, por ende, los procesos fsiolgicos.
Pre Laboratorio
1. Investigue la forma cmo acta la catalasa y la amilasa.
2. Indique claramente en qu tejidos humanos se encuentran y qu funcin
cumplen dentro del tejido mencionado.
3. Qu medios fsicos pueden alterar la funcin y la estructura de una protena?
4. Dibuje el cambio de la estructura de una protena integra a una protena
desnaturalizada.
Materiales
a. Reactivos
a) HCl grado reactivo
b) Solucin de NaOH 40%
c) Solucin saturada de sal de mesa
d) Solucin de Almidn al 0.5%
e) Solucin de Lugol
f) Perxido de hidrgeno, 10 volmenes (proporcionado por el estudiante)

UNIVERSIDAD GALILEO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
LICENCIATURA EN QUMICA BIOLGICA
CURSO DE BIOQUMICA
g) Trozos de hgado (proporcionado por el estudiante)
h) Saliva (proporcionada por el estudiantes)

b. Cristalera
a) Pipetas pasteur
b) Beakers de 250 mL
c) Tubos de ensayo
c. Instrumentacin
a) Gradilla para tubos de ensayo
b) Bao de Mara con gradilla y a 37 C
Procedimiento
I. Funcin de la catalasa
a) Numere en su gradilla tubos de ensayo de 1 al 8, y coloque en ellos las
siguientes muestras:
Tubo de
ensayo
1

Muestra
Agua destilada

Trozo de hgado fresco

Trozo de hgado congelado

Trozo de hgado congelado y descongelado

Trozo de hgado fresco con 20 gotas de agua y


calentado en Bao Mara (5 min)

Trozo de hgado fresco con 20 gotas de HCl

Trozo de hgado fresco con 20 gotas de NaOH al 40%

Trozo de hgado fresco con 20 gotas de NaCl saturada

b)Agregue a cada tubo alrededor de un mililitro de perxido de hidrgeno (o


agua oxigenada). Asegrese de agregar el perxido tubo por tubo,
observando uno a uno el resultado. Importante: Si lo agrega a todos a la
vez, no podr observar todos los resultados.
II. Funcin de la amilasa
a) Numere en su gradilla tubos de ensayo de 1 a 7, y coloque en ellos las
siguientes muestras (Consejo: piense en un limn al momento de obtener
su muestra):

Tubo
de
Ensa
yo
1

Mues
tra
Agua destilada

Muestra de saliva

Muestra de saliva calentada en Bao Mara


durante cinco minutos

Muestra de saliva con 20 gotas de HCl

Muestra de saliva con 20 gotas de NaOH al 40%

Muestra de saliva con 20 gotas de NaCl saturada

Agua destilada con 20 gotas de NaOH al 40%

a) Agregue a cada tubo alrededor de un mililitro de solucin de almidn al 0.5%


e incube durante cinco minutos a 37C.
b) Agregue una gota de Lugol a cada tubo.
Observaciones importantes
Explique en su reporte los resultados que observ, incluyendo el significado de
las pruebas cualitativas del agua oxigenada y del Lugol.
Anexo
1. Explique la funcin que tiene en nuestro organismo la catalasa y la amilasa.
2. Explique detalladamente las reacciones que catalizan y su importancia
para nosotros
3. CRDITO EXTRA (5 puntos): Explique el resultado que obtuvo en los tubos 5 y
7 de amilasa.
Bibliografa
1. McKee, T., McKee, J. R.

2003. Bioqumica. La Base Molecular de la Vida.


3 Edicin, traducida de la 3 Edicin en ingls.

2. Murray, R., Mayes, P., Granner, D., Rodwell, V. 2001. Bioqumica de


Harper.
15 Edicin en espaol, traducida de la 25 Edicin en ingls