FISIOLOGA I TM2015

Transporte I
Quedamos entonces en que cuando uno piensa
en cmo se mueven las molculas en solucin,
dijimos que el flujo es, bsicamente, la
velocidad en un rea conocida, esto es igual al
gradiente que est impulsando las molculas y
un coeficiente que es propio de cada molcula.
Ahora cuando uno piensa, cmo ocurre esto en
el tiempo, indistinguiblemente decimos cmo
es la cintica de estos procesos, bsicamente
hay que pensar que uno parte con una
diferencia de concentracin y con el tiempo las
molculas se van a mover a favor del gradiente
de potencial qumico, pero a medida que las
molculas se vayan moviendo, que va a pasar?
Si uno mide la velocidad a la cual se estn moviendo las molculas, cmo va a ser eso en el
tiempo? Al principio debera ser rpido, pero al final en un tiempo suficientemente grande, va a
llegar al equilibrio, por lo tanto no va a haber un flujo unidireccional, sino que el flujo ser en
ambos sentidos y es esto lo que muestra exactamente el primer grfico (imagen1), uno grfica
la concentracin de solutos vs el tiempo, esto comenzar a aumentar rpidamente, luego se
har ms lento hasta que finalmente la concentracin de soluto bsicamente no va a cambiar,
porque ya estar todo homogneamente distribuido.
Ahora cuando uno parte en que vamos a medir el flujo, obviamente en compartimientos iguales
con un medio de igual viscosidad para poder comparar, vamos a medir en C1, C2, C3, C4 y as
aumentando la concentracin. El flujo de C1 respecto del de C2 debera ser menor porque
bsicamente el C es mayor en C2, entonces el flujo de C1 es menor al de C2, el de C2 es menor
al de C3 y as sucesivamente y cuando uno grafica esto efectivamente eso es cierto, el flujo en
C1 tiene un valor, el flujo en C2 tiene otro valor, el flujo en C3 otro y el mayor de todos el C4,
bsicamente porque aqu el X es igual para todos y lo que ha ido cambiando es el C,
suponiendo que estamos hablando de la misma molcula, sino no podramos hacer ninguna
variacin y entonces al final de stos procesos vamos a llegar al equilibrio, lo que significa
bsicamente que la concentracin va a estar igual en todas partes.

Ahora de la manera en que las molculas,

iones, etc. Se mueven en solucin bsicamente
tiene que ver con las propiedades que tenga
cada una de esas molculas, bsicamente la
forma y el tamao, tambin depende de la
viscosidad del medio y si ustedes suben la
temperatura aumenta la rapidez de estas
molculas.
Entonces aqu se muestras distintos tipos de
molculas y si esto se cumple, a medida que la
molcula sea ms grande el coeficiente de
difusin (D) debera ser ms pequeo, y vemos
por ejemplo los coeficiente de difusin de la
tabla adjunta (agua, ATP, Insulina).
Despus de mirar esto en solucin, se hizo lo siguiente: pusimos en esa solucin una bicapa y
despus observamos que es lo que pasa cuando la molcula est en solucin se mueve dentro
de la bicapa y despus sale al otro lado, bsicamente lo que hacamos era medir como se mueve
el soluto en una membrana o puede ser una vescula hecha solo de lpidos, y cuando se hacan o
se metan estos flujos de este sujeto de este y se obtiene una recta que pasa por el origen (0,0),
ya que a cero concentracin, habr cero flujo y entonces, en funcin de la concentracin del
soluto midiendo el flujo, tenemos una lnea
recta, que significa que mientras ms
grande es la concentracin de la que
partimos, el flujo va a ser ms grande.
Y de este tipo de grfico se puede obtener
la permeabilidad (P), entonces si uno mide
flujo vs la concentracin y obtiene esta
recta, la pendiente ser la permeabilidad
(P).
La permeabilidad bsicamente es funcin
de ste parmetro, del coeficiente de
particin () y el coeficiente de particin es
la razn que existe entre una molcula que
se disuelve en un solvente orgnico y agua
o una fase acuosa.
Pero fjense que esto, en el fondo les permite predecir si una molcula va a ser capaz de ser
moverse en una solucin, entrar a una fase lipdica, acomodarse, pasar por entremedio de las
colas y pasar para el otro lado, osea, bsicamente sta sustancia tiene que ser ms bien de tipo
lipdica para que pueda meterse entremedio de las colas o puede ser muy chiquitita.
Ahora, este proceso dijimos que estaba regido por la energa libre y para que ste proceso ocurra
est dada por sta ecuacin, cuando es una molcula que tiene bsicamente una diferencia de
potencial qumico.
En resumen de lo que hemos visto:

*Si no hay disolucin la molcula no

va a entrar a la bicapa, por ejemplo
una mancha de aceite no se puede
sacar con agua, tiene que ser con
una solucin por lo menos lipdica.
* Los iones, solutos polares mayores
y molculas con carga neta son
impermeables
y
esto
es
un
problema, ya que tendrn que pasar
por una fase proteica.

Esta imagen la van a encontrar en todos los libros, donde bsicamente, la bicapa es permeable
desde luego a los gases: oxigeno, CO2, nitrgeno, al etanol (alcohol) cuando ustedes se hacen
un trago con alcohol y se les ocurre tomar con el estmago vaco, el efecto del alcohol es mucho
ms rpido, la razn por la que se puede juntar agua con el etanol es por la presencia del OH en
el etanol, pero el CH3 y CH2 le da
caracterstica de hidrofbica, este tipo
de molculas que puedes interactuar
con distintos medios recibe el nombre
de anfifilica o anfipticas. Entonces el
etanol, el CH2 y CH3 le da cierta
caracterstica de permeabilidad y
atraviesa la bicapa, entonces cuando
ustedes toman y no tienen el estmago
muy lleno, el etanol va a travesar todas
las membranas y va a pasar
rpidamente y luego se empezaran a
sentir contentos (jaja).
La Urea que es una molcula
pequeita, que es sper bueno que sea
bien difusible.
Entonces todas estas molculas que son pequeas y que aunque sean polares, si son pequeas
y no tienen carga van a atravesar la membrana, osea la membrana va a ser permeable a esas
molculas, sin embargo cuando uno empieza a mirar otro tipo de molculas, por ejemplo los
azucares: glucosa y fructosa, que son molculas polares; los iones y molculas cargadas, que
son molculas polares y adems cargadas y fjense que son por ejemplo: aminocidos, cidos
nucleicos, protenas, etc. y son un problema, si uno piensa que nuestro organismo o el organismo
de cualquier ser vivo necesita incorporar azucares, cidos nucleicos y aminocidos para vivir y

resulta que la bicapa es impermeable a estas sustancias, Cmo lo soluciona la evolucin? Si no

puede pasar por la fase lipdica, por donde pasar? Pasar por la fase protena, es decir, por las
protenas que estn en la membrana, ahora el mecanismo por el cual estas molculas se pueden
mover, a travs de las protenas es muy variado, bsicamente ustedes van a encontrar distintos
tipo de mecanismos de transporte, ustedes vern algunos tipos de mecanismos que se utilizarn
en neurociencia y en fisiologa II.
Entonces vamos a comenzar con algo simple, con la glucosa. Para qu sirve la glucosa en
nuestras clulas? Cuando la glucosa entra a nuestras clulas, entra a la va glicolitica y en esta
va se est oxidando de alguna manera y al final de sta va glicolitica obtenemos piruvato y
ste se dirige a la mitocondria entrando al
ciclo de Krebs, luego el FADH2 y NADH que
se generan all, se van a la cadena
respiratoria y finalmente todo eso nos lleva
a bsicamente dos cosas: Utilizar oxgeno,
liberar agua y sintetizar ATP, Bsicamente
esto lo est realizando todas las clulas y
eso es el metabolismo celular.
Por lo tanto no es menor el problema, en
que la glucosa no pueda ingresar por la
bicapa si no fuera por las protenas,
entonces vamos a hacer el siguiente
experimento: entonces 10ml de glbulos
rojos, los lava, los centrifuga y los deposita
en un tubo de ensayo en una solucin
conocida de glucosa y bsicamente vamos a tener una concentracin de glucosa afuera (de los
glbulos rojos) ms concentrada que la de adentro, bsicamente la glucosa entra
espontneamente, es decir < 0, ahora vamos a sacar muestras a distintos tiempos, es decir,
voy a ver cmo cambia la concentracin en el tiempo, sta curva recibe el nombre de curva de
progreso. Entonces voy a ver en el tiempo como va cambiando la concentracin interna de la
glucosa que se est moviendo desde el exterior del glbulo rojo hacia su interior.
Afuera le vamos a poner una concentracin 5mM, y vamos sacando muestras a distintos
tiempos, y con esos datos vamos graficando para ver cmo cambia la concentracin interna,
Cmo debiera ser la curva? En un tiempo prolongado va a llegar al equilibrio, la curva es como
la que se muestra en la imagen. Esto significa bsicamente que, a medida que pasa el tiempo,
primero la glucosa entra rpidamente hasta que finalmente la concentracin no vara, cmo
sern las concentraciones adentro y afuera del glbulo rojo? Iguales, entonces, la concentracin
interna 5mM. Se podra pensar que la concentracin externa debiera disminuir, pero esto ocurre
si y slo si los dos volmenes (interno y externo) son equivalentes, por ejemplo, si usted tiene la
siguiente situacin: dos vasos pegados y separados por una membrana en que en uno de ellos
hay 5mM y en el otro hay 0mM, en un tiempo suficientemente grande, la concentracin de
ambos vasos ser de 2,5mM y esto es cierto si esos dos compartimientos sus volmenes son
equivalentes, pero cmo es el volumen interno del glbulo rojo, respecto del volumen externo?
Es tan pequeo, que es considerado despreciable frente al volumen externo.
Bsicamente, cuando ustedes tienen esta asimetra de compartimientos o en otras palabras
hacemos que el compartimiento externo sea tantas veces ms grande que el compartimiento
interno, el compartimiento externo no va a cambiar y el compartimiento interno va a alcanzar la

concentracin exactamente igual a la de fuera (externo), en el equilibro conceptualmente Cmo

debera ser las concentraciones adentro y afuera? Iguales, porque en ese momento, en el
equilibrio = 0.
Ahora si yo les digo que hacemos el mismo experimento con 2,5mM, si bajo la mitad la
concentracin, la curva ser igual, solo que llegar a la mitad respecto a la de 5mM. Y si lo hago
a 7,5mM pasar lo mismo, pero ser ms grande la curva respecto a la de 5mM (grfico de la
imagen).
En el fondo, podemos medir los flujos, a cmo cambia la concentracin interna de una molcula
que se est moviendo hacia el interior debido a un gradiente de concentracin y en todos los
casos, llego al estado del equilibrio y en el equilibrio la velocidad es cero, entonces cuando nos
movemos con sta curva Dnde la velocidad es mayor? Al principio, en la tangente. Entonces
en esta curva de progreso en donde mido como cambia la concentracin interna en funcin del
tiempo, puedo sacar la velocidad (moles que se han movido en el tiempo, es velocidad) y la
mayor velocidad es a tiempos cercanos a cero (por all el gradiente es mayor) y a medida que
pasa el tiempo la velocidad va a ir
disminuyendo.
Entonces qu es lo que me interesa de
ste grfico: es saber calcular el valor de
la velocidad de entrada al eritrocito
cuando es mximo, entonces esta
tangente a la curva roja, le vamos a
llamar velocidad inicial al proceso de
2,5mM. Lo mismo ocurre para la curva
azul y verde. Se obtienen valores que se
van a graficar en funcin de la
concentracin (grafico pequeo). Ojo por
ambas curvas tienen la misma pinta, son
parecidas, ya que va a llegar un momento
en que se hacen asintticas a un valor,
pero la primera (concentracin vs tiempo) es una curva de progreso y la otra (velocidad vs
concentracin) es una curva de saturacin y conceptualmente son distintas. En la curva de
progreso puedo calcular cuando llega al equilibrio y la mxima velocidad del proceso, en cambio
en la curva de saturacin se determina otras cosas, y unas de esas cosas es va a llegar un
momento una concentracin, aunque siga aumentando su concentracin, tendrn la misma
velocidad (no va a cambiar la velocidad del proceso).
Ahora lo que voy a hacer es dividir la velocidad inicial en el rea y obtengo esto que es una
curva de saturacin, es decir, que desde un cierto valor de concentracin no va a cambiar el
flujo, es decir que puedo seguir aumentando la cantidad de sustratos y bsicamente ese flujo va
a ser mximo. Por qu ser esto? Qu hay detrs del proceso de saturacin? El glbulo rojo es
finito, esto significa que tiene cierta superficie, por lo tanto tiene una cierta cantidad de
membrana y esa membrana tiene una cantidad finita de protenas y si seguimos aumentando la
concentracin del soluto, en este caso glucosa, va a haber un momento en que estarn todas
sus protenas ocupadas.

Pregunta, si yo superpusiera el grafico de difusin

simple, Cmo sera? Lineal y esa va a ser la gran
diferencia, en cambio en el grfico de saturacin llega
un momento en que las molculas encargadas de
mover la glucosa estn ocupadas, estn saturadas, es
un fenmeno saturable, en cambio en la difusin
simple no es un fenmeno saturable.

Esto es lo que antes se llamaba difusin facilitada, nosotros le llamaremos Transporte mediado
pasivo y esto es a favor del gradiente de potencial qumico, es decir no necesita energa, la
energa la tiene la molcula con el C que est sintiendo.
Entonces sta es una protena integral de membrana que recibe el nombre genrico de
transportador, ste va a exponer un sitio de unin que es de alta afinidad que est expuesto
hacia el exterior. El de este proceso es menor que cero.
La glucosa reconoce y se une al sitio de unin del transportador y al unirse, la unin del soluto
promueve un cambio conformacional del transportador y ahora si se dan cuenta, sta molcula
tiene expuesto el sitio de unin hacia el otro lado, el cambio conformacional cambia la afinidad
del transportador por la glucosa, y entonces, la glucosa difunde al interior de la clula.

Afortunadamente por los aos 80 se empez a desarrollar la biologa celular y efectivamente

transportadores como stos que en el caso de glucosa reciben el nombre de GLUT, ahora estn
secuenciados, que uno conozca la secuencia primara no significa que sepamos cmo est
ocurriendo el fenmeno. Pueden ver que los GLUT van del 1 al 14 y tienen distribuciones
distintas en distintos tejidos.

El GLUT-1 est en todas las

clulas porque tiene que
ver con la entrada basal de
glucosa a la clula, pero hay
otros, por ejemplo, el GLUT3 est solamente en el
cerebro, el GLUT-2 est en
varias partes, pero interesa
que est en el intestino.
Todos

estos

GLUT

son

transportadores de glucosa, por medio del transporte mediado pasivo o la antigua difusin
facilitada.
Esto es difcil hacerlo en membrana de mamferos, por lo general la gente que hace rayos X lo
hace por lo general con bacterias, ya que las pueden hacer crecer, pueden tener hartas
protenas, etc. Y sta es una protena que est en bacteria, pero que tiene una alta homologa
con el GLUT-4, esta protena transporta Xilosa que tambin es un azcar. Los que se realiz,
despus de los rayos X, pudieron determinar cmo se acomoda el soluto al interior del
transportador, se puede apreciar en la imagen que existe un sitio donde se aloja perfectamente
bien el soluto.

Cuando uno quiere saber exactamente cul es

el punto en donde el transportador tiene la
afinidad al soluto, fue que mutaron los
aminocidos del sitio donde debera estar el
punto de unin y efectivamente a medida que
se iba mutando, se iba disminuyendo la
capacidad de transporte y con eso ellos
pudieron mapear, es decir, hacer un mapa del
sitio de afinidad por el soluto.

Finalmente, esto es una combinacin de

distintos papper de distintos autores, pero de
misma familia de transportadores, donde
ustedes pueden ver que el transportador
est mirando hacia afuera, lo une y luego de
unin y luego del cambio conformacional y
ahora ese cambio conformacional est
exponiendo el sitio hacia afuera y finalmente
tambin hay una conformacin donde est
mirando para el otro lado, vaco.

la

la

El modelo se puede correlacionar con otros

modelos de transporte de glucosa, hacindose entonces esta idea de cmo funciona.

Bsicamente todos los GLUT funcionan

de la misma manera, siempre es un
proceso a favor del gradiente de
potencial qumico y es espontaneo, es
decir, estando el transportador presente
la glucosa se va a mover desde donde
est ms concentrada hasta donde est
menos concentrada.