U.A.J.M.S.

FACULTAD DE CIENCIAS Y TECNOLOGIA

INFORME
DE LABORATORIO
Practica n8
DETERMINACION DE
protena total en una
muestra
NOMBRE:
BELEN NINA LILIAN BANEZ

MATERIA:
QUIMICA ORGANICA II

CARRERA:
ING. QUIMICA

DOCENTE:
ING. HUGO FRANCO SANCHEZ

FECHA DE PRESENTACIN:
29 DE FEBRERO DE 2016

I.

OBJETIVOS:

Determinar la cantidad de protenas totales en una muestra.

Conocer el mtodo que se aplica para esta determinacin.

II.

FUNDAMENTO TEORICO:

El contenido protenico de los alimentos puede determinarse por medio de diversos mtodos. La forma ms habitual
es su cuantificacin de forma indirecta y aproximada, bien a partir del contenido en nitrgeno de la muestra, o bien
deduciendo su cantidad a partir del contenido de uno o dos aminocidos particulares que conforman la protena,
fciles de identificar y de cuantificar por su reactividad qumica especifica. Este segundo procedimiento conlleva una
mayor inexactitud. Desde hace ms de 100 aos se est utilizando el mtodo Kjeldahl para la determinacin del
nitrgeno en una amplia gama de muestras (alimentos y bebidas, piensos, forrajes, fertilizantes) para el clculo del
contenido en protena.
La convencin general, sobreentendida, es que la totalidad del nitrgeno de la muestra est en forma proteica, aun
cuando la realidad es que, segn la naturaleza del producto, una fraccin considerable del nitrgeno procede de otros
compuestos nitrogenados (bases puricas y pirimidinicas, creatina y creatinina, urea, amoniaco, etc.), por ello se
denomina protena bruta o protena total a la obtenida por este mtodo. Con este anlisis, sin embargo, no se
determina el nitrgeno ntrico, el cianhdrico, el de la hidracina, el de grupos azo y el nitrgeno de un ncleo cclico.
Principio del Mtodo.
El mtodo Kjeldahl se basa en tres etapas para determinar el contenido de protena de un alimento en funcin de la
cantidad de Nitrgeno presente en el mismo. Las etapas son:
Digestin cida. El nitrgeno orgnico, presente en la muestra se convierte en sulfato de amonio (NH4)2SO4
por digestin con cido sulfrico concentrado en presencia de un catalizador, que en este caso es el sulfato de
cobre y el sulfato de potasio Cu SO4 K2SO4 en una relacin (1:10), con el fin de aumentar el punto de
ebullicin del cido sulfrico para acelerar la digestin.
Destilacin bsica. Esta etapa se da en el equipo de destilacin donde el sulfato de amonio es tratado con
NaOH al 45%, formando hidrxido de amonio (NH 4OH) del cual se libera el amoniaco en presencia de calor
y se lo recibe en una solucin de cido brico al 4% que contiene el indicador Tashir, formndose el borato
de amonio al finalizar la destilacin.
Titulacin cida. El contenido de nitrgeno en forma de borato de amonio, se determina valorando con una
solucin normalizada de cido clorhdrico 0,25 N.
Las reacciones que se dan en cada etapa en este mtodo son:

III.

MATERIALES UTILIZADOS:

Unidad de digestin.
Unidad de destilacin.
REACTIVOS UTILIZADOS
H2SO4
K2SO4: CuSO4 (10:1:0,1 en peso).
H2O2.
HCl.

IV. PROCEDIMIENTO:
El procedimiento a seguir es diferente en funcin de si en la etapa de destilacin el nitrgeno liberado es recogido
sobre una disolucin de cido brico o sobre un exceso conocido de cido clorhdrico o sulfrico patrn. Ello
condicionara la forma de realizar la siguiente etapa de valoracin, as como los reactivos empleados.
Etapa de digestin: Se introducen de 1 a 5 g de muestra un tubo de mineralizacin y se ponen 3 g de catalizador
que suele estar constituido por una mezcla de sales de cobre, oxido de titanio o/y oxido de selenio. De forma habitual
se utiliza como catalizador una mezcla de K 2SO4: CuSO4: Se (10:1:0,1 en peso). Despus se adicionan 10 mL de
H2SO4 concentrado y 5 mL de H 2O2. Posteriormente se digiere a 420 oC durante un tiempo que depende de la
cantidad y tipo de muestra. Se sabe que la digestin ha terminado porque la disolucin adquiere un color verde
esmeralda caracterstico.
En esta etapa, el nitrgeno proteico es transformado en sulfato de amonio por accin del cido sulfrico en caliente.
En la actualidad, para llevar a cabo este proceso se utilizan digestores automticos que son capaces de digerir un
nmero determinado de muestras al mismo tiempo
Etapa de destilacin: Despus de enfriar se adicionan al tubo de digestin 50 mL de
Agua destilada, se pone en el soporte del destilador y se adiciona una cantidad suficiente de hidrxido sdico 10 N,
en cantidad suficiente (50 mL aprox.) para alcalinizar fuertemente el medio y as desplazar el amoniaco de las sales
amnicas. El amoniaco liberado es arrastrado por el vapor de agua inyectado en el contenido del tubo durante la
destilacin, y se recoge sobre una disolucin de cido brico.
Etapa de valoracin.- La cuantificacin del nitrgeno amoniacal se realiza por medio de una volumetra acido-base
del ion borato formato, empleando cido clorhdrico o sulfrico y como indicador una disolucin alcohlica de una
mezcla de rojo de metilo y azul de metileno. Los equivalentes de cido consumidos corresponden a los equivalentes
de amoniaco destilados

V.

CALCULOS Y RESULTADOS:

DETERMINACION DE PROTEINA TOTAL EN LECHE EN POLVO:

DATOS:
MUESTRA A:

PESO DE LA MUESTRA
FACTOR DE CORRECCION
DE HCl
CONCENTRACION DE HCl
VOLUMEN GASTADO DE
HCl
FACTOR PARA HALLAR
PROTEINAS EN LECHE EN
POLVO

N eq . gacido =N eq . g base

m gN H 3
=N HCl f V HCl
PE NH

1.0489 g
1.05480
0.25 N
11.95 ml
6.38

m N H =N HCl f V HCl PE N H
3

mN H =0.25 eq g /1.0548011.9510 < 17 g/ eq g

3

mN =0.0536 g NH 3

mN H =0. 0536 g
3

14 gN
m =0.0441 g
NH 3 N

mPROTEINAS =6.38 0.0441 m PROTEINAS =0.2814 g

%de proteinas=

0.2814 g
100
1.0489 g

%de proteinas=26.83

MUESTRA B:

PESO DE LA MUESTRA
FACTOR DE CORRECCION
DE HCl
CONCENTRACION DE HCl
VOLUMEN GASTADO DE
HCl
FACTOR PARA HALLAR
PROTEINAS EN LECHE EN
POLVO

N eq . gacido =N eq . g base

m gN H 3
=N HCl f V HCl
PE NH

1.0072 g
1.05480
0.25 N
11.91 ml
6.38

mN H =N HCl f V HCl PE N H
3

mN H =0.25 eq g /1.0548011.91103 < 17 g / eq g

3

mN H =0. 0534 g
3

mN =0.0534 g NH 3

14 gN
m =0.0440 g
NH 3 N

mPROTEINAS =6.38 0.0440

%de proteinas=

mPROTEINAS =0.2807 g

0.2807 g
100
1.0072 g

%de proteinas=27.87

VI.
CONCLUCIONES Y RECOMENDACIONES:
En conclusin la prctica de la cual fuimos parte fue muy importante ms all de que solo pudimos observar el
arranque, nos ayud a comprender cun importante son las protenas que ayudan a un ser humano las protenas que
componen cada alimento el control de protenas y la identificacin de cantidad de ellas que estn presentes en
cualquier alimento.
La recomendacin seria que al manipula los instrumentos realizarlos con mucho cuidado, manipular las sustancias
con precaucin y siempre tener una indumentaria adecuada.
En la visita a CEANIT se ha descrito el mtodo Kjeldahl para la determinacin de protenas de un alimento a partir
de la cuantificacin del nitrgeno. Adems se han expuesto los clculos necesarios para obtener el porcentaje de
protena a partir del contenido en nitrgeno de la muestra.

VII. BIBLIOGRAFIA:
https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/16338/Determinaci%C3%B3n%20de
%20proteinas.pdf?sequence=1
Gua de laboratorio proporcionada por el Ingeniero en CEANIT
http://www.fbioyf.unr.edu.ar/evirtual/pluginfile.php/124179/mod_resource/content/1/QA
-2015-PROTEINAS-METODOS.pdf