UNIVERSIDADE FEDERAL DO MARANHO

CENTRO DE CINCIAS BIOLGICAS E DA SADE

DEPARTAMENTO DE FARMCIA
DISCIPLINA: RADIOISTOPOS

CONTROLE DE QUALIDADE DE RADIOFRMACOS

TALA SOUZA
JOO BATISTA
NAYANA SUSAN

SO LUS
2014

1- INTRODUO
Radiofrmacos so estruturas moleculares ou celulares que apresentam em sua
composio um radionucldeo e so utilizados no diagnstico ou tratamento de doenas
em seres humanos. Uma vez que os mesmos so administrados em humanos
importante e necessrio que os mesmos passem por rigoroso controle de qualidade.
2- CONTROLES DE QUALIDADE
O controle de qualidade adequado de radiofrmacos envolve anlises em nvel
fsico e fsico-qumico, qumico, biolgico e de estabilidade.
2.1- Controle de qualidade fsico e fsico-qumico
Em relao aos controles fsico e fsico-qumico so considerados, o aspecto
fsico que envolve anlises organolpticas tais como cor, limpidez ou turbidez da
soluo e ausncia ou presena de partculas em suspenso para solues ou em
disperses

coloidais

respectivamente,

determinao

do tamanho

das

partculas (filtrao atravs de membranas, filtrao em gel, espalhamento da radiao

laser ou microscopia eletrnica), sendo necessria apenas para radiofrmacos coloidais
(99mTc-SC-enxfre coloidal, 99mTC-MAA-macroagregado de albumina e 99mTcSb2S3-sulfeto de antimnio) em estudos de perfuso pulmonar, obteno de imagem do
fgado e linfocintilografia.
A determinao do tamanho das partculas pode ser efetuada por filtrao atravs
de membranas e filtrao em gel, espalhamento da radiao laser ou microscopia
eletrnica, o pH do radiofrmaco que deve ser o mais prximo possvel do pH
fisiolgico (pH=7) e pode ser medido em pH metro ou em papel, a isotonicidade (para
injetveis considerada a isotonicidade em relao ao soro sanguneo) e a fora inica
(determinada por condutimetria). Desvios podem ser corrigidos por adio de cidos,
bases ou eletrlitos em geral, a calibrao da atividade que a determinao da
atividade presente em uma preparao radiofarmacutica, realizada com um
equipamento apropriado para mensurar o tipo e a energia da radiao emitida. Como o
radiofrmaco administrado em seres humanos, este item de fundamental importncia
a fim de se evitar erros na administrao de doses. Dose a atividade do radiofrmaco
a ser administrada em um paciente, podendo esta ser expressa em KBq (Ci) ou MBq
(mCi). A atividade dos radiofrmacos emissores de radiao gama so medidas em
cmaras de ionizao calibradas com padres adequados, de atividades conhecidas e

geometrias definidas tais como Co-60 e Co-57. A concentrao da atividade a

atividade contida por unidade de volume, sendo expressa em KBq/ml (Ci/ml) ou
MBq/ml (mCi/ml), sendo 1mCi = 37 MBq.
A atividade especfica a atividade por unidade de massa do elemento ou da
forma qumica presente, sendo expressa em (MBq/mg). importante a determinao
das

impurezas

radionucdicas

que

originam-se

do processo

de

produo do

radionucldeo, tais como impurezas isotpicas do material alvo, purificao ineficiente

na separao de um produto de fisso em reatores, assim como da quebra da coluna em
geradores ou de subprodutos originados por decaimento radioativo. A determinao da
pureza radionucldica realizada com a determinao da meia vida fsica (T1/2) e da
radiao caracterstica (g ou b). A primeira pode ser medida em um cintilador slido e
a radiao b pode ser medida em um cintilador lquido ou em um b espectrmetro. As
impurezas radionucldicas causam exposio do paciente a radiaes indesejadas,
eventual toxidez e prejuzo da imagem cintilogrfica.
2.2- Controle de qualidade qumico
Em relao ao controle qumico so realizadas as determinaes de pureza
qumica e radioqumica. A pureza qumica pode ser definida como a frao do material
na forma qumica desejada. As impurezas qumicas originam-se de reagentes impuros
ou que tenham sofrido decomposio, ou ainda de impurezas introduzidas atravs do
prprio processo de purificao, como os adsorventes utilizados em cromatografia, tal
como a presena de Al+3 no eluato de 99mTc, ou impurezas geradas pelo material
utilizado na embalagem do produto final. A presena dessas impurezas antes da
radiomarcao pode resultar em marcao indesejada de molculas que podem ou no
alterar o comportamento fsico-qumico e/ou biolgico da preparao, interferir no
diagnstico ou causar algum efeito txico. A Identificao dessas impurezas tambm
pode ser realizada por mtodos colorimtricos e espectrofotomtricos e as mesmas
podem ser extradas por tcnicas de fracionamento (precipitao, extrao por solventes,
troca inica, destilao e outros).
A pureza radioqumica a frao do radionucldeo presente na forma qumica
determinada do radiofrmaco. As impurezas ocorrem devido a decomposio por ao
do solvente, mudanas na temperatura, pH, luz, presena de agentes redutores,
oxidantes e radilise da gua por absoro da energia emitida, gerando a formao de
perxido de hidrognio e radicais livres, que geram, por sua vez, a decomposio de

outras molculas marcadas. Como impurezas radioqumicas podem ser citados o

Na99mTcO4 e o 99mTcO2 em complexos marcados com 99mTc. As impurezas
radioqumicas tambm causam baixa qualidade da imagem. A fim de evitar a
degradao dos radiofrmacos e para manter a sua estabilidade so utilizados
conservantes (cido ascrbico, sulfito de sdio e outros). O radiofrmaco tambm deve
ser mantido ao abrigo da luz e sob refrigerao. As impurezas radioqumicas podem ser
determinadas por diferentes mtodos analticos. A precipitao para determinao
de 51Cr+3em solues de Na251CrO4 (radiofrmaco utilizado na marcao de
hemcias para determinao de sua taxa de sobrevida), o cromato precipitado como
PbCrO4 e a radioatividade da soluo sobrenadante contada em cintilador A
determinao de 51Cr+3 importante pois o mesmo no se complexa com as protenas
celulares. A cromatografia de papel e cromatografia de camada fina que so tcnicas de
separao nas quais os componentes do radiofrmaco migram mais ou menos em funo
de sua maior afinidade com o eluente (fase mvel) ou com a fase estacionria
respectivamente. Nos radiofrmacos marcados com o 99mTc, alm do prprio
radiofrmaco, podem ser identificados e quantificados o Na99mTcO4 livre e
o 99mTcO2. A cromatografia gel (sephadex) que uma tcnica que se utiliza da
diferena de tamanho das molculas na separao de componentes de uma amostra, as
molculas maiores sendo eludas primeiro e as menores ficando retidas nos poros da
resina.
A radioatividade medida nas fraes recolhidas, sendo expressa como um
percentual da radioatividade total. A eletroforese em papel ou gel de poliacrilamida,
tcnica de separao onde as diferentes espcies movimentam-se em funo de seu
tamanho, sua carga, PH, viscosidade, intensidade de corrente e voltagem aplicada. A
distribuio

da

atividade

determinada

em

um

contador

ou

scanner

radiocromatogrfico. A tcnica de purificao por resina de troca inica, envolve a troca

de ions entre a soluo a ser analisada e a resina, com reteno dos primeiros nos poros
da resina . Esta tcnica pode ser utilizada para a separao de albumina marcada
com 99mTc das suas impurezas radioqumicas, sendo o 99mTcO4- livre adsorvido pela
resina aninica, enquanto que o radiofrmaco e o hidrolizado de 99mTc so eludos com
salina.
A extrao por solvente baseia-se na distribuio do soluto em dois solventes
imiscveis, geralmente gua e um solvente orgnico. A razo das solubilidades de um
determinado componente nas duas fases denominada coeficiente de distribuio.

Dessa forma a separao de 99MoO4-2 presente como impureza em eluatos de

Na99mTcO4 pode ser realizada por extrao lquido/lquido com metil etil cetona e
gua, sendo o primeiro extrado na fase orgnica. A cromatografia lquida alta presso
(CLAE) promove a separao de substncias por sua distribuio entre a fase
estacionria (adsorvente) e a fase mvel (eluente), possuindo uma alta resoluo e
rapidez de separao. A destilao possibilita a separao de compostos com diferentes
presses de vapor. O composto com maior presso de vapor destilar primeiro. Em
reagentes para iodetao de substncias, o iodeto excedente, pode ser oxidado a iodo e
separado por destilao.
2.3- Controle de qualidade biolgico
O controle biolgico envolve quatro determinaes. A esterilidade, condio
fundamental para toda preparao de uso parenteral, pode ser obtida com autoclavagem
da preparao radiofarmacutica (vapor a 121 C a 18 psi / 15 20 min), sendo vlida
apenas para solues aquosas e estveis ao calor (99mTcO4-1, 67Ga-citrato de glio
e 111InCl). As preparaes lipoflicas e radiofrmacos termolbeis, tais como as
protenas iodetadas, no podem ser autoclavadas. A autoclavagem tambm no
utilizada para radionucldeos de vida curta, tais como18F, porque este mtodo muito
demorado. Para radionucldeos de vida curta e radiofrmacos termolbeis so utilizados
a filtrao por membrana milipore (0,22 m) e a irradiao gama.
Pirgenos (polissacardeos ou protenas produzidas pelo metabolismo de
microorganismos) devem estar ausentes em preparaes injetveis com volumes de
administrao maiores que 20 ml ou em volumes menores administrados por via
intratecal. Essas substncias so em sua maioria endotoxinas de 0,05 1 m de
tamanho e em geral so solveis e estveis ao calor. Quando administrados os pirgenos
produzem sintomas de febre, leucopenia, dor de cabea, dilatao de pupilas que podem
se desenvolver em pacientes de 30 min at 2 h aps a administrao. Existem dois
mtodos para sua determinao. O mtodo USP e o teste LAL. O primeiro baseia-se na
resposta febril de coelhos, por administrao intravenosa dos radiofrmacos a serem
testados. Nesse teste no podem ser utilizadas substncias que interferem na resposta
farmacolgica dos coelhos, assim como certos hormnios, drogas e radiofrmacos de
altos nveis de atividade. O teste LAL (Lisado de Amebcitos de Limulus) utiliza-se das
protenas obtidas atravs da lise de amebcitos de limulus (um tipo de caranguejo) que
reagem com as endotoxinas, formando um gel. Esta reao enzimtica depende da

temperatura, PH e concentrao das endotoxinas, podendo demorar de 15 60 min,

dependendo da concentrao de pirgenos. As endotoxinas podem ser assim
determinadas

quantitativamente

por

colorimetria

ou

turbidimetria,

com

boa

sensibilidade, rapidez, e praticidade, tornando possvel a determinao de pirgenos em

materiais hipo ou hipertermizantes, ou mesmo produtos radioativos de curto tempo de
vida. Esta reao no pode ser utilizada em presena de inibidores enzimticos ou
agentes desnaturantes de protenas.
A biodistribuio utilizada para avaliao do comportamento in vivo de um
radiofrmaco, antes da sua administrao a um paciente. Est relacionada a pureza
radioqumica, pois impurezas radioqumicas podem induzir alteraes na rota de
distribuio. Essa biodistribuiao pode ser efetuada por tcnicas no invasivas
(realizao de imagens) ou tcnicas invasivas, envolvendo o sacrifcio de animais e
medida da radioatividade concentrada nos rgos e tecidos dissecados. Os resultados
podem ser expressos como % ATI ou %ATI/g. a toxicidade dos radiofrmacos antes de
sua administrao em humanos tambm deve ser determinada e sua dose de segurana
tem que ser estabelecida. Esses testes para toxicidade so realizados em vrios animais
durante 2-6 semanas. Os animais so sacrificados a vrios intervalos de tempo e uma
autopsia detalhada dos diferentes rgos realizada para observar mudanas
patolgicas. LD50/30 a dose requerida para produzir 50% de mortalidade em 30 dias
aps a administrao do radiofrmaco, enquanto que LD50/60 - dose requerida para
produzir 50% de mortalidade em 60 dias aps a administrao do radiofrmaco. Por
motivos de segurana, a quantidade administrada ao homem deve ser 100 a 500 vezes
menor que a utilizada nos animais.
A estabilidade do radiofrmaco tambm deve ser determinada, pois devido a
grande variedade estrutural de substncias utilizadas como radiofrmacos podem
ocorrer diferentes tipos de reaes de decomposio do tipo hidrlise, oxi-reduo e
autoradilise. Os processos de hidrlise so alterados principalmente por temperatura e
pH, enquanto que a oxireduao afetada pela concentrao de oxignio, presena de
agentes oxidantes, ons metlicos e fatores ambientais tais como a luz. A oxidao
ocorre igualmente em solues aquosas e no aquosas, e em alguma extenso mesmo no
estado slido. Para evitar a oxidao recomenda-se o acondicionamento dos produtos
em frascos escuros e ao abrigo da luz. Na decomposio por autoradilise, a ao das
radiaes emitidas pelos radionucldeos pode promover a gerao de radicais livres que
podem reagir com o radiofrmaco ou outras molculas do meio, reduzindo assim a

estabilidade dos radiofrmacos. Por esse motivo, podem ser utilizados agentes
estabilizantes (cido ascrbico, ascorbato de sdio). Na medicina nuclear a estabilidade
dos jogos de reativos, utilizados para marcao instantnea e in situ de radiofrmacos,
dependente da composio de seu precursor no marcado, que deve ser uma substncia
resistente a degradao fsica e qumica. Cada componente da preparao do
radiofrmaco e fatores ambientais tais como luz, temperatura, O2, CO2 e umidade
podem influenciar na estabilidade. Nesses jogos a conservao da propriedade redutora
do SnCl2 um fator determinante da estabilidade, sendo mantida por uma atmosfera de
N2.
3- CONCLUSO
A execuo dos controles de qualidade dos radiofrmacos adequadamente ir
permitir minimizar ou mesmo abolir a possibilidade de que efeitos indesejveis sejam
observados nos procedimentos clnicos de medicina nuclear. Mais ainda, ajuda a
consolidar os procedimentos de radiofarmcia, imprescindveis para a elevada
inocuidade dos exames em medicina nuclear.

BIBLIOGRAFIA
Early PJ & Sodee BD. Principles and pratice of nuclear medicine. 2 ed Mosby Year
Book, Inc, London, 1995.
Owunwanne A, Patel M and Sadek S. The Handbook of Radiopharmaceuticals.
Chapman and Hall Medical, Madras, 1995.
Saha GB. Fundamentals of Nuclear Pharmacy. 3rd New York: Springer-Verlag,
1998.